| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
c-Met (IC50 = 4 nM)
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| 体外研究 (In Vitro) |
盐酸替泊替尼抑制 IRAK4、TrkA、Axl、IRAK1、Mer 和 TrkA，IC50 分别为 615、1017、1566、2037、2272 和 5716 nM[1]。盐酸替泊替尼抑制 A549 细胞中 HGF 诱导的 c-Met 磷酸化，平均 IC50 为 6 nM[1]。盐酸替泊替尼 (0.01 nM-30 μM) 可在体外抑制肿瘤细胞增殖和迁移[1]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
盐酸替泊替尼在异种移植模型中诱导肿瘤消退，并在体内抑制 c-Met 磷酸化 [1]。
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| 酶活实验 |
EMD 1214063和EMD 1204831选择性地抑制c-Met受体酪氨酸激酶活性。与它们对242种人类激酶的作用相比，它们的抑制活性是有效的[分别为抑制50%浓度（IC50）、3 nmol/L和9 nmol/L]和高度选择性的。EMD 1214063和EMD 1204831均以剂量依赖的方式抑制c-Met磷酸化和下游信号传导，但其抑制活性的持续时间不同。[1]
c-Met体外激酶测定[1] 使用242种不同的激酶在体外评估EMD 1214063或EMD 1204831（1和10μmol/L）对激酶的抑制作用。用闪板法测定生物化学活性。将His6标记的重组人c-Met激酶结构域（Aa 974–end；20 ng）和生物素化的聚Ala-Glu-Lys-Tyr（6:2:5:1；500 ng）在室温下与测试化合物一起或不与测试化合物在100μL缓冲液中孵育90分钟，该缓冲液含有0.3μCi 33P-ATP、2.5μg聚乙二醇20.000和1%二甲基亚砜（DMSO），如前所述。用TopCount微孔板闪烁和发光计数器测量放射性。使用RS/1软件程序通过非线性回归分析计算抑制50%浓度值（IC50）。[1] 磷酸化c-Met捕获ELISA[1] 在Nunc Immuno MicroWell 96孔固体板中通过c-Met捕获ELISA评估总的c-Met磷酸化。A549人癌症细胞在治疗前2天接种，血清饥饿20小时，并在第3天用不同浓度的EMD 1214063或EMD 1204831或0.2%DMSO在37°C、5%CO2下治疗45分钟。在用100 ng/mL HGF刺激5分钟后，用补充有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的70μL/孔冰冷裂解缓冲液[20 nmol/L HEPES，pH 7,4；10%（V/V）甘油；150 nmol/L NaCl；1%（V/V的）Triton-X-100；2 nmol/L EDTA]裂解细胞。在冲洗实验中，A549用EMD 1214063或EMD 1204831处理45分钟，洗涤，并在无血清培养基中孵育14小时，然后用HGF（100ng/mL）刺激。 在ELISA中，捕获抗体对c-Met细胞外结构域是特异性的，而抗磷脂-生物素标记的抗体用于检测。使用链霉亲和素-过氧化物酶缀合物和化学发光读数揭示酪氨酸磷酸化。 生化分析[1] 在EBC-1细胞中通过蛋白质印迹分析分析c-Met、Gab-1、Akt和Erk1/2的磷酸化。简言之，细胞以每孔3×106个细胞的密度接种，血清饥饿20小时，并在与EMD 1214063孵育后的第3天裂解。通过SDS-PAGE分离蛋白质并将其吸附在硝化纤维素膜上。用Tris缓冲盐水封闭膜，并在4°C的一级抗体溶液（抗pMet、抗pAkt、抗pERK1/2、抗Gab1）中孵育过夜。用装有Quantity One 1-D分析软件的VersaDoc MP 5000成像系统通过化学发光检测蛋白质。 |
| 细胞实验 |
Tepotinib (EMD-1214063) 是一种有效且具有选择性的 c-Met 抑制剂。它的 IC50 为 4 nM，对 c-Met 的选择性比 IRAK4、TrkA、Axl、IRAK1 和 Mer 的选择性高 200 倍以上。
伤口愈合试验和增殖试验[1] 伤口愈合试验如前所述进行。简言之，用无菌移液管尖端在单层NCI-H441癌症细胞上产生划痕。在存在或不存在100ng/mL HGF的情况下，在24小时内监测EMD 1210463和EMD 1204831对细胞间隙闭合的影响。所有增殖和集落形成测定在4个重复中进行，并包括4个DMSO载体对照。IC50值通过GraphPad Prism v5中的4PL拟合确定。 离体肿瘤样品的药效学标志物[1] 通过对冷冻离体肿瘤样品的蛋白质印迹分析来研究c-Met自磷酸化。根据制造商的说明，使用Precellys 24均质器或Precellys陶瓷裂解管（PEQLab Ltd）对肿瘤组织进行机械均质、裂解。裂解物的进一步制备和通过SDS-PAGE的蛋白质分离如已经对EBC-1细胞描述的那样进行。 在福尔马林固定的石蜡包埋切片上，通过免疫组织化学（IHC）分析组蛋白H3磷酸化和细胞周期停滞和凋亡的生物标志物（细胞周期蛋白D1、p27和裂解的活化的capase-3）。根据制造商的说明，使用Discovery染色仪器和OmniMap试剂盒进行IHC。切片用苏木精复染。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：携带人癌细胞系KP-4或EBC-1[1]的CD-1或BALB/C裸鼠
剂量：携带非小细胞肺癌EBC-1的小鼠剂量为6和15 mg/kg；携带胰腺癌细胞系KP-4的小鼠剂量为25、50和200 mg/kg。 给药途径：每日注射，持续14-18天。 实验结果：每日向携带EBC-1肿瘤的小鼠注射5或15 mg/kg，分别可有效抑制或完全消退肿瘤。在携带人胰腺癌KP-4肿瘤的小鼠中，可诱导剂量依赖性的肿瘤生长抑制。 在小鼠异种移植模型中研究了EMD 1214063或EMD 1204831的抗肿瘤疗效。将人癌细胞系KP-4、U87MG（10 × 10⁶ 个细胞/100 μL）、Hs746T、EBC-1（5 × 10⁶ 个细胞/100 μL）皮下注射到CD-1或BALB/C裸鼠体内。待肿瘤达到线性生长期（70–150 mm³）后，将荷瘤小鼠（每组10只）每日注射指定剂量的EMD 1214063或EMD 1204831，或注射载体。每周两次测量小鼠体重和肿瘤大小[长度(L)和宽度(W)]。肿瘤体积采用公式L × W²/2计算。统计学显著性采用单因素方差分析(ANOVA)进行检验。 P ≤ 0.05 被认为具有统计学意义。 药代动力学和药效学研究[1] 采用高效液相色谱 (HPLC) 和质谱 (MS) 法测定血浆和肿瘤药物浓度。简而言之，血浆样品在甲醇中进行蛋白质沉淀，肿瘤样品在乙醇/水 (80:20, v/v) 混合溶液中，使用 Precellys 24 均质器进行均质。HPLC/串联质谱 (MS-MS) 系统由安捷伦 1100 系列 HPLC 系统、CTC HTC PAL 自动进样器和 Applied Biosystems API4000 质谱仪组成。HPLC 分离在反相色谱柱 (Chromolith SpeedROD RP-18e, 50–3 mm) 上进行，采用梯度洗脱（流动相 A：0.1% 甲酸；流动相 B：乙腈）。采用多反应监测 (MRM) 进行 MS/MS 检测，以实现化合物的选择性。体内药效学研究中的所有动物实验均按照当地动物福利机构批准的标准程序进行。将 5 × 10⁶ 个 Hs746T 细胞 (100 μL) 皮下注射到小鼠体内。待肿瘤体积达到 600 至 1000 mm³ 后，将小鼠随机分为不同的实验组，分别单次口服 3、10、30 和 100 mg/kg 的 EMD 1214063、EMD 1204831 或载体。分别于给药后 3、6、12、24、48、72 和 96 小时采集肿瘤和血浆样本。每个剂量和时间点每个实验组包含 4 只小鼠。将肿瘤组织样本进行速冻，用于药代动力学和生物标志物分析；或用福尔马林固定，用于免疫组织化学分析。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
吸收
口服替泊替尼的绝对生物利用度约为72%。推荐剂量为每日一次450mg，中位达峰时间（Tmax）为8小时，平均稳态血药浓度峰值（Cmax）和24小时药时曲线下面积（AUC0-24h）分别为1291 ng/mL和27438 ng·h/mL。与高脂肪、高热量食物同服可使替泊替尼的AUC和Cmax分别增加约1.6倍和2倍。 消除途径 口服后，约85%的给药剂量经粪便排出，其余部分经尿液排出。未经修饰的原药约占粪便排泄剂量的一半，其余部分包括去甲基化的M478代谢物、一种葡萄糖醛酸苷代谢物、外消旋的M506代谢物以及一些少量的氧化代谢物。未经修饰的原药也约占尿液排泄剂量的一半，其余部分包括一种葡萄糖醛酸苷代谢物和一对N-氧化物非对映异构体代谢物。 分布容积 平均表观分布容积为1038升。 清除率 替泊替尼的表观清除率为23.8升/小时。 代谢/代谢物 替泊替尼主要由CYP3A4和CYP2C8代谢，部分未明确的UGT酶也有贡献。代谢物 M506 是主要的循环代谢物，约占血浆中观察到的药物总量的 40.4%，而葡萄糖醛酸代谢物 M668 在血浆中的含量则低得多（约占口服剂量的 4%）。服用替泊替尼后共检测到 10 种 I 期和 II 期代谢物，其中大部分经粪便排泄。 生物半衰期 口服后，替泊替尼的半衰期约为 32 小时。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
肝毒性
在替泊替尼（tepotinib）上市前针对携带MET突变的实体瘤患者的临床试验中，肝功能异常较为常见，但通常为自限性且程度较轻。44%的替泊替尼治疗患者出现不同程度的ALT升高，其中4%的患者ALT升高超过正常值上限（ULN）的5倍。在这些纳入255例患者的试验中，3%的患者因ALT或AST升高而中断治疗，但永久停药的患者不足1%。肝功能异常的中位发病时间为治疗开始后30天。虽然血清转氨酶偶尔升高至较高水平（正常值上限的5至20倍），但未伴有血清胆红素升高，且无患者出现伴有黄疸的临床明显肝损伤。替泊替尼的产品标签建议在开始治疗前、治疗的前3个月每2周进行一次常规肝功能检查，之后根据临床需要每月进行一次。 可能性评分：E（未经证实但怀疑是临床上明显的肝损伤的罕见原因）。 妊娠和哺乳期影响 ◉哺乳期用药概述 目前尚无关于替泊替尼在哺乳期临床应用的信息。由于替泊替尼与血浆蛋白的结合率高达98%，因此其在乳汁中的含量可能很低。然而，考虑到其对母乳喂养婴儿的潜在毒性以及其32小时的半衰期，生产商建议在替泊替尼治疗期间以及末次给药后1周内停止母乳喂养。 ◉对母乳喂养婴儿的影响 截至修订日期，未找到相关的已发表信息。 ◉ 对哺乳和母乳的影响 截至修订日期，未找到相关的已发表信息。 蛋白结合率 替泊替尼在血浆中的蛋白结合率约为 98%，主要与血清白蛋白和 α1-酸性糖蛋白结合。在临床相关暴露量下，血浆蛋白结合率与药物浓度无关。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
另请参阅：盐酸替泊替尼（注释已移至）。
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| 分子式 |
C29H28N6O2.XHCL
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|---|---|
| 分子量 |
492.57 (free base)
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| 精确质量 |
528.204
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| CAS号 |
1103508-80-0
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| 相关CAS号 |
1100598-32-0;1946826-82-9
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| PubChem CID |
25171647
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| tPSA |
94.7
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
7
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| 重原子数目 |
38
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| 分子复杂度/Complexity |
880
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C(C1C=CC=C(C2=NC=C(OCC3CCN(C)CC3)C=N2)C=1)N1C(C=CC(C2C=CC=C(C#N)C=2)=N1)=O.Cl
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| InChi Key |
YHHHGHDGBUUWIS-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C29H28N6O2.ClH/c1-34-12-10-21(11-13-34)20-37-26-17-31-29(32-18-26)25-7-3-5-23(15-25)19-35-28(36)9-8-27(33-35)24-6-2-4-22(14-24)16-30;/h2-9,14-15,17-18,21H,10-13,19-20H2,1H3;1H
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| 化学名 |
3-[1-[[3-[5-[(1-methylpiperidin-4-yl)methoxy]pyrimidin-2-yl]phenyl]methyl]-6-oxopyridazin-3-yl]benzonitrile;hydrochloride
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| 别名 |
EMD-1214063 hydrochloride; 8B73AZL5XP; 1103508-80-0; Tepotinib hydrochloride anhydrous; UNII-8B73AZL5XP; Benzonitrile, 3-(1,6-dihydro-1-((3-(5-((1-methyl-4-piperidinyl)methoxy)-2-pyrimidinyl)phenyl)methyl)-6-oxo-3-pyridazinyl)-, hydrochloride (1:1); SCHEMBL1295616; YHHHGHDGBUUWIS-UHFFFAOYSA-N; 3-(1-{3-[5-(1-methyl-piperidin-4-ylmethoxy)-pyrimidin-2-yl]-benzyl}-6-oxo-1,6-dihydro-pyridazin-3-yl)-benzonitrile hydrochloride;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT03940703 | Active Recruiting |
Drug: Tepotinib Drug: Osimertinib |
Non-small Cell Lung Cancer | EMD Serono Research & Development Institute, Inc. |
September 19, 2019 | Phase 2 |
| NCT02864992 | Active Recruiting |
Drug: Tepotinib | Lung Adenocarcinoma Stage IIIB/IV Amplification |
EMD Serono Research & Development Institute, Inc. |
September 13, 2016 | Phase 2 |
| NCT05120960 | Recruiting | Drug: tepotinib plus osimertinib Drug: tepotinib |
Brain Tumor | M.D. Anderson Cancer Center | February 27, 2023 | Phase 1 |
| NCT04647838 | Recruiting | Drug: Tepotinib | Solid Tumor MET Amplification |
Chungbuk National University Hospital |
January 16, 2020 | Phase 2 |
| NCT05782361 | Recruiting | Drug: Tepotinib Drug: Pembrolizumab |
Non Small Cell Lung Cancer Advanced Cancer |
Institute of Cancer Research, United Kingdom |
May 3, 2023 | Phase 1 |
Tepotinib hydrochloride monohydrate
BKN-1
NEO214
MJO445
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