| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
ATR kinase; Chk1
ART0380 is a potent and selective inhibitor of the ataxia telangiectasia and Rad3-related protein (ATR) kinase. It targets the ATR-ATRIP complex with an IC50 of 51.7 ± 14.2 nmol/L in biochemical assays. It demonstrates high selectivity over other PIKK family members, such as mTOR, with an EC50 for pRPS6 inhibition >3 μmol/L in cellular assays [1]. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在HT-29结直肠腺癌细胞中，ART0380能强效抑制ATR依赖的Chk1在丝氨酸345位点的磷酸化（pChk1ser345），平均EC50为0.015 μmol/L。相反，它几乎不影响mTOR活性（通过检测核糖体蛋白S6的磷酸化pRPS6衡量），其EC50 >3 μmol/L，表明具有良好的细胞选择性 [1]。
在一组细胞系中，ART0380对ATM功能缺失的NCI-H23（肺癌）和Granta-519（套细胞淋巴瘤）细胞系，以及对复制应激较高的LoVo（结直肠癌）细胞系表现出强烈的生长抑制作用，而对正常结肠成纤维细胞CCD-18Co作用微弱 [1]。 使用ATM敲除的同源细胞系（NCI-H460, Calu-6, PC-3），ART0380对敲除细胞显示出更高的敏感性，与亲本ATM野生型细胞相比，生长抑制更强。处理后48小时，ATM敲除细胞中凋亡增加（通过Annexin V/PI染色证实）[1]。 细胞周期分析显示，连续（48小时）ART0380处理导致ATM功能正常细胞积累在G1期，但在ATM缺失细胞中此效应减弱。而间歇给药方案（给药24小时/停药24小时）则在ATM敲除细胞中特异性地引起S期阻滞、G2期积累以及γH2AX foci（DNA损伤标志物）增加，表明DNA复制受损和DNA损伤增强 [1]。 Alnodesertib是一种具有口服生物利用度的共济失调毛细血管扩张症和Rad3相关激酶（ATR）抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
口服给药后，Alnodesertib 能够选择性靶向并抑制 ATR 活性，阻断下游丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶检查点激酶 1 (CHK1) 的磷酸化。这一作用可阻止 ATR 介导的信号传导，从而抑制 DNA 损伤检查点的激活、破坏 DNA 损伤修复过程，并诱导肿瘤细胞凋亡。ATR 作为一种在多种癌细胞类型中上调表达的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，在 DNA 修复、细胞周期进程和细胞存活中起着关键作用。该激酶通常在 DNA 复制相关应激引发的 DNA 损伤时被激活。
ART0380 在一系列具有不同程度 ATM 功能缺失 (LOF) 的临床前癌症模型中表现出强效且选择性的抗肿瘤活性。一项泛癌症分析在 8,587 例患者肿瘤中鉴定出 10,609 种 ATM 变异。研究发现，在癌症谱系之间存在以下特异性差异：有害变异（Tier 1）与未知/良性变异（Tier 2）的流行率、杂合性缺失的选择压力，以及有害变异与 ATM 蛋白缺失 (LOP) 的一致性。一种综合考虑变异分类、与 ATM LOP 的关系以及组织特异性外显率的新型 ATM LOF 生物标志物方法，显著富集了对铂类化疗或 ATR 抑制剂治疗获益的患者人群[1]。
在携带LoVo（结直肠癌）异种移植瘤的CD-1裸鼠中，口服ART0380（10, 30, 50, 100 mg/kg，每日一次）在整个研究期间产生剂量依赖性的肿瘤生长抑制。30 mg/kg剂量的效果与临床基准药物AZD6738相当；50 mg/kg时肿瘤生长抑制率达到84%；100 mg/kg时达到96%（P < 0.0001）。治疗耐受性良好 [1]。 在NSG小鼠的Granta-519（套细胞淋巴瘤，ATM功能缺失）异种移植模型中，ART0380 30或50 mg/kg每日一次治疗显著抑制了肿瘤生长 [1]。 在一个携带有害ATM变异（p.E473）且ATM蛋白几乎完全缺失的肺腺癌患者来源异种移植模型中，ART0380 100 mg/kg每日一次或采用间歇方案（如给药24小时/停药24小时）诱导了肿瘤消退 [1]。 在一组具有不同ATM变异状态和蛋白表达水平的结直肠癌PDX模型中，ART0380治疗显示出异质性的抗肿瘤疗效：在ATM蛋白缺失的模型（PDX1, PDX2）以及携带错义/移码变异但部分保留蛋白表达的模型（PDX3, PDX4）中观察到显著的肿瘤生长抑制；而在ATM野生型且蛋白保留的PDX5中效果最弱 [1]。 |
| 酶活实验 |
使用基于Caliper的激酶活性测定法评估ART0380对ATR-ATRIP复合物的抑制活性。全长FLAG-TEV-ATR和His6-ATRIP在HEK293细胞中共表达。裂解细胞后，通过抗FLAG树脂亲和层析纯化复合物。酶促反应在1×激酶反应缓冲液（含HEPES pH 8, Brij-35, MnCl2和DTT）中进行，以FAM标记的RAD17肽为底物，并加入ATP。将测试化合物（60 nL溶于100% DMSO）与酶预孵育30分钟（28°C），然后通过加入肽/ATP混合物启动反应。孵育后终止反应，利用Caliper读数器分离并定量磷酸化与非磷酸化肽段。根据剂量反应曲线计算IC50值 [1]。
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| 细胞实验 |
通过pChk1 (Ser345) AlphaScreen实验检测ART0380对细胞中ATR活性的抑制。HT-29细胞接种于384孔板，用化合物处理90分钟，然后加入4-硝基喹啉-N-氧化物（终浓度12 μmol/L）诱导DNA损伤，再孵育120分钟。裂解细胞后，将裂解液转移至384孔ProxiPlate。依次加入受体微珠（Protein A）和生物素化的抗pChk1抗体进行孵育，然后加入供体微珠（链霉亲和素）。测量AlphaScreen信号，计算EC50值 [1]。
通过In-Cell Western实验评估对mTOR的选择性，检测pRPS6 (Ser235/236)。HT-29细胞接种于384孔板，用化合物处理2小时，然后固定、透化，与p-RPS6抗体孵育，随后加入IRDye 800CW二抗和CellTag 700用于归一化。使用Odison成像仪定量信号，计算EC50值 [1]。 使用CellTiter-Glo实验评估抗增殖效应。将细胞（NCI-H23, Granta-519, LoVo, CCD-18Co, NCI-H460亲本/ATM敲除, Calu-6亲本/ATM敲除, PC-3亲本/ATM敲除）接种于384孔（或96孔）板。24小时后，用系列稀释的ART0380处理，并孵育7-10天。通过加入CellTiter-Glo试剂并读取发光值来检测细胞活力。根据剂量反应曲线计算EC50值 [1]。 使用Annexin V/碘化丙啶染色分析细胞凋亡。将NCI-H460亲本和ATM敲除细胞接种于6孔板，用ART0380处理24或48小时，然后用Annexin V凋亡试剂盒处理，并通过流式细胞术分析 [1]。 通过免疫荧光和基于图像的定量细胞术评估细胞周期分布和γH2AX foci。细胞接种于96孔板，用ART0380处理（连续48小时或给药24小时/停药24小时），最后30分钟加入EdU标记，然后固定、透化，并用抗γH2AX和抗Geminin抗体染色，随后加二抗和DAPI。使用Operetta CLS成像系统采集图像，并使用Harmony软件分析，以量化细胞周期各时相细胞比例及geminin阳性细胞中的γH2AX foci数量 [1]。 |
| 动物实验 |
目的：ATM基因突变在多种癌症中很常见，但针对ATM异常癌症的治疗临床研究结果却不尽相同。因此，迫切需要进一步完善ATM功能丧失（LOF）作为疗效预测生物标志物的功能。实验设计：我们首次公开并介绍了新型选择性ATR抑制剂ART0380的临床前开发，并在多种临床前癌症模型中测试了其抗肿瘤活性。为了完善ATM LOF作为预测生物标志物的功能，我们对患者肿瘤中的ATM变异体进行了全面的泛癌分析，并评估了ATM变异体与蛋白质之间的关系。最后，我们利用回顾性临床数据集，评估了一种新型ATM LOF生物标志物方法，这些数据集来自接受铂类化疗或ATR抑制剂治疗的患者。
在LoVo异种移植研究中，将1×10⁶个悬浮于PBS/Matrigel（1:1）中的LoVo细胞皮下注射到6-12周龄的雌性CD-1裸鼠体内。当肿瘤体积达到 150–250 mm³ 时，将小鼠随机分组（载体组或 ART0380 组，剂量分别为 10、30、50 和 100 mg/kg），并在整个研究期间每日口服一次 (QD) 进行治疗。每周使用游标卡尺测量两次肿瘤体积，并监测体重以评估耐受性。肿瘤生长抑制率 (TGI) 计算为治疗组和对照组最终肿瘤体积中位数的百分比差异 [1]。 对于 Granta-519 异种移植瘤，将 1×10⁶ 个 Granta-519 细胞悬浮于 PBS/Matrigel (1:1) 中，皮下接种于雌性 NSG 小鼠。当肿瘤体积达到 150–250 mm³ 时，将小鼠随机分组，分别接受载体或 ART0380 治疗（30 或 50 mg/kg，口服，每日一次）。肿瘤生长监测方法如上所述[1]。 对于结直肠癌PDX研究，将来自患者来源的异种移植瘤（根据IRB批准的方案建立）的肿瘤碎片皮下移植到NSG小鼠体内。当肿瘤体积达到150–250 mm³时，将小鼠随机分组，并接受ART0380治疗（给药方案未具体说明，但疗效数据见图2D）。肿瘤反应通过TGI进行评估[1]。 对于肺腺癌PDX（携带ATM p.E473），小鼠接受ART0380治疗，剂量为100 mg/kg，每日一次口服，或采用间歇给药方案（例如，24小时用药/24小时停药）。评估肿瘤消退情况[1]。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
吸收：口服后，Alnodesertib 可迅速吸收。
消除：血浆浓度达到峰值后，迅速下降至较低水平，随后平均消除半衰期延长至 8.3 小时。 线性：Alnodesertib 的暴露量与剂量呈正比关系。在 100 mg 至 1200 mg 的剂量范围内，最大血浆浓度 (Cmax) 和稳态下 0 至 24 小时曲线下面积 (AUC0-24ss) 均与剂量成正比增加。 给药方案兼容性：Alnodesertib 的药代动力学特征使其适用于间歇给药（例如，用药 3 天，停药 4 天）和每日一次 (QD) 给药方案。根据药代动力学和药效学数据确定的 II 期推荐剂量为：间歇给药方案 600 mg，每日给药方案 200 mg。 给药途径：本品为口服（生物利用度高）小分子药物。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
ART0380（也称为ART-0380）是一种新型、高效、选择性强且口服生物利用度高的ATR激酶抑制剂。该化合物通过先导化合物优化发现，并因其优异的理化性质、药代动力学特性和显著的临床前疗效而被选中进行临床开发。目前，ART0380正在一项针对晚期或转移性实体瘤患者的I期临床试验（NCT04657068）中进行评估。该化合物与ATR的ATP结合口袋竞争性结合，通过吗啉氧原子与铰链区结合，并通过亚砜亚胺基团填充核糖结合口袋。临床前研究表明，ART0380对ATM功能缺失的癌细胞具有合成致死性，其抗肿瘤活性受ATM变体类型、组织谱系和蛋白表达状态的影响。这项工作强调了完善 ATM LOF 作为 ATR 抑制剂治疗中患者选择的预测性生物标志物的重要性 [1]。
这些数据有助于更好地定义不同肿瘤类型中的 ATM LOF，从而优化患者选择并改进针对 ATM LOF 癌症患者的分子靶向治疗方法。 |
| 分子式 |
C18H24N6O2S
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|---|---|
| 分子量 |
388.49
|
| 精确质量 |
388.1681
|
| 元素分析 |
C, 55.65; H, 6.23; N, 21.63; O, 8.24; S, 8.25
|
| CAS号 |
2267316-76-5
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| 相关CAS号 |
2267316-75-4 [(R,R)-ART0380]
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| PubChem CID |
145766632
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| 外观&性状 |
White to off-white solid at room temperature
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| LogP |
1.9
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| tPSA |
115 Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
27
|
| 分子复杂度/Complexity |
635
|
| 定义原子立体中心数目 |
2
|
| SMILES |
C[C@@H]1COCCN1C2=NC(=NC(=C2)N=[S@](=O)(C)C3CC3)C4=CC(=NC=C4)N
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| InChi Key |
JHPDHYAMSPMBIF-MUDIAHQHSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C18H24N6O2S/c1-12-11-26-8-7-24(12)17-10-16(23-27(2,25)14-3-4-14)21-18(22-17)13-5-6-20-15(19)9-13/h5-6,9-10,12,14H,3-4,7-8,11H2,1-2H3,(H2,19,20)/t12-,27+/m1/s1
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| 化学名 |
4-[4-[(cyclopropyl-methyl-oxo-lambda6-sulfanylidene)amino]-6-[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]pyrimidin-2-yl]pyridin-2-amine
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| 别名 |
ART0380; Alnodesertib; ART-0380; alnodesertib [INN]; W7X77IH95R;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5741 mL | 12.8703 mL | 25.7407 mL | |
| 5 mM | 0.5148 mL | 2.5741 mL | 5.1481 mL | |
| 10 mM | 0.2574 mL | 1.2870 mL | 2.5741 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
ATR kinase substrate peptide
XRD-0394
ATR-IN-30
Elimusertib hydrochloride
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463611831
