| 规格 | 价格 | |
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| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
p2x1 Receptor (IC50 = 68 nM); P2X2 Receptor (IC50 = 214 nM)
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| 体外研究 (In Vitro) |
NAADP已被证明在从植物到哺乳动物细胞的广泛系统中充当第二信使。尽管它一直被认为是一种典型的第二信使，但最近的研究表明，它在细胞外应用时也是活跃的。也有人认为，NAADP可能对P2受体有直接作用，这是基于药理学试剂PPADS对细胞外NAADP响应的Ca2+信号的作用。因此，我们研究了PPADS是否可以直接作用于特征明确的海胆卵匀浆系统中NAADP诱导的细胞内Ca2+释放系统。事实上，PPADS及其结构类似物PPNDS能够与[32P]NAADP竞争结合位点，结合曲线显示，这两种化合物在低微摩尔范围内都显示出亲和力。与NAADP相比，PPADS的结合是可逆的。在荧光Ca2+释放实验中，PPADS能够竞争性拮抗NAADP诱导的Ca2+释放，IC50为20微M，而不影响其他Ca2+释放通道。这是海胆NAADP受体可逆竞争性拮抗剂的首次报道。此外，PPADS可能是研究NAADP信号传导的宝贵工具，也是合成强效和特异性拮抗剂的先导化合物[1]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
外周损伤引起的神经性疼痛与局部炎症以及局部募集的巨噬细胞、雪旺氏细胞和神经胶质细胞中一氧化氮合酶（NOS）和炎性细胞因子的过表达有关。我们在坐骨神经慢性压迫损伤诱导的单神经病小鼠模型中研究了一氧化氮合酶（NOS）和细胞因子在中枢（脊髓和丘脑）和周围神经系统（神经和背根神经节）中的时间过程和定位。ATP被认为是内源性疼痛介质。因此，我们还评估了嘌呤能信号传导在疼痛超敏反应中的作用，使用P2受体拮抗剂磷酸吡哆醛-6-偶氮苯基-2'，4'-二磺酸（PPADS）对疼痛行为、NOS和细胞因子进行了评估。从损伤后第3天开始每天服用PPADS，剂量和时间依赖性地降低了触觉异常性疼痛和热痛觉过敏。PPADS（25mg/kg）完全逆转了伤害性超敏反应，同时降低了参与疼痛信号传导的外周（受伤的坐骨神经和L4-L6同侧背根神经节）和神经系统中枢台阶（L4-L6脊髓和丘脑）中NO/NOS系统和IL-1β的增加。IL-6仅在外周神经系统中过表达，PPADS延长给药可降低其在坐骨神经中的表达。总之，我们假设NO/NOS和IL-1β在这种神经病变模型中具有促痛感作用，嘌呤能拮抗剂通过抑制其过度活动来减轻疼痛超敏反应[3]。
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| 酶活实验 |
电生理学[2]
在电压钳条件下，使用双电极放大器记录了cRNA注射卵母细胞的核苷酸诱发膜电流。当填充KCl（3M）时，细胞内微电极的电阻为1-2MΩ。用含有（mM）NaCl 110、KCl 2.5、HEPES 5、BaCl2 1.8、pH 7.4-7.5的细胞外溶液持续灌注卵母细胞（5 ml min-1）。所有记录均在室温（18°C）下在-60至-90 mV的保持电位下进行。电生理数据最初以3 kHz的频率进行滤波，以20 Hz的频率在连接到MP100WSW接口的计算机上捕获，并使用商业软件显示。 酶联免疫吸附试验（ELISA）评价脊髓背侧IL-1β含量[3] 通过使用酶联免疫吸附试验对假手术、CCI和PPADS治疗的CCI动物的脊髓进行IL-1β蛋白的定量测定。如上所述，采集L4-L6脊髓切片，快速冷冻并储存在-80°C下。将样品在0.25ml含有蛋白酶抑制剂混合物的冰冷磷酸盐缓冲盐水中均质化并离心。上清液用于测量IL-1β水平。采用Lowry法测定颗粒中的总蛋白含量。 对于IL-1β的测量，使用小鼠IL-1β的CytoSet Elisa试剂盒。捕获抗体和二次生物素化抗体的浓度分别为1.25和0.125μg/ml。重组蛋白产生的标准曲线范围为15-1000pg/ml。 链霉抗生物素蛋白过氧化物酶和四甲基联苯胺用于显色。用2N H2SO4停止显色反应，并在450nm处读取光密度。 |
| 细胞实验 |
卵母细胞制备和P2X受体表达[2]
用Tricaine（0.2%，wt/vol）麻醉非洲爪蟾，并通过断头处死（根据机构规定）。卵巢的解剖和切除，以及去卵爪蟾卵母细胞的制备，在其他地方已有详细描述[King等人，1997]。去卵泡卵母细胞不具有天然的P1或P2受体，否则可能会使激动剂活性的分析复杂化[King等人，1996a，b]。此外，去卵泡卵母细胞在很大程度上缺乏胞外ATP酶活性，从而避免了P2受体拮抗剂抑制胞外酶的复杂问题[Ziganshin等人，1995]。用编码大鼠P2X1或大鼠P2X3受体亚基的封端核糖核酸（cRNA，1mg/ml）在细胞质中注射（40nl）成熟卵母细胞（V期和VI期）。将注射的卵母细胞在18°C下在含有（mM）NaCl 110、KCl 1、NaHCO3 2.4、Tris-HCl 7.5、Ca（NO3）2 0.33、CaCl2 0.41、MgSO4 0.82的沐浴液（pH 7.5）中孵育48小时，并补充50μg/l的硫酸庆大霉素，以使受体完全表达，然后在4°C下储存长达12天。 |
| 动物实验 |
药物治疗[3]
吡哆醛磷酸-6-偶氮苯基-2′,4′-二磺酸四钠盐（PPADS）溶于生理盐水，剂量分别为6.25、12.5和25 mg/kg（0.1 ml/10 g）。剂量选择参考了Gourine等人（2005）的研究，旨在减轻脂多糖诱导的大鼠发热和细胞因子反应。从术后第三天开始，每天一次腹腔注射PPADS或生理盐水，连续11天，分别给予神经病变小鼠和假手术小鼠。在损伤后第3天和第14天评估了最高剂量（25 mg/kg）急性给予PPADS的效果：分别在给药后1小时和24小时进行行为学评估。对接受生理盐水治疗10天的小鼠（即坐骨神经结扎术后14天）应用了相同的实验方案。 热痛觉过敏和机械性异常性疼痛[3] 在手术前以及手术后3、7和14天（最后一次给予PPADS或生理盐水后24小时）测量小鼠对热刺激和机械刺激的反应。所有小鼠的同侧和对侧后爪均由不知晓治疗情况的研究人员进行测量。热痛觉过敏的测试采用Hargreaves方法（Hargreaves等，1988），并根据我们对小鼠的测试方法进行了略微修改，使用足底测试仪。简而言之，将小鼠放入较小的透明有机玻璃隔间中，使其适应环境。将恒定强度的辐射热源（光束直径 0.5 厘米，强度 20 IR）照射到后爪足底中部。记录从热源激活到爪子缩回的时间（以秒为单位）。使用动态足底感觉计评估机械性痛觉过敏。将动物置于底部为金属丝网的测试笼中，将冯·弗雷丝（von Frey）纤维的刚性尖端（点状刺激）施加于后爪足底中部的皮肤上。纤维施加的力逐渐增加，在 20 秒内达到 5 克，初始力低于检测阈值，直至动物缩回爪子。缩爪阈值以克为单位表示。同侧和对侧爪的缩爪阈值测量四次，取四次评估的平均值。 生化评估[3] 生化评估在接受最高剂量PPADS（25mg/kg）的动物中进行，所有评估均由对治疗不知情的研究人员完成。在术后第3、7和14天，以及最后一次注射生理盐水或PPADS后24小时，记录伤害性阈值和机械阈值。行为学评估结束后，立即用戊巴比妥钠（60mg/kg，腹腔注射，0.1ml/10g）麻醉小鼠。在解剖显微镜下，取出同侧坐骨神经（位于三叉分支近端，约1cm处，CCI组小鼠在三处结扎前）、同侧L4、L5和L6背根神经节（DRG）、L4-L6节段的腰椎背侧脊髓以及同侧和对侧丘脑，立即置于液氮中冷冻，并保存于-80℃冰箱中，直至进行NOS含量和细胞因子表达检测。在一些实验中，取CCI组小鼠坐骨神经（位于三叉分支近端，CCI组小鼠在三处结扎前）和L4-L6节段的腰椎背侧脊髓的一小部分，用于制备核提取物，并保存于-80℃冰箱中，直至进行转录因子NF-κB的检测。在其他实验中，将CCI动物结扎线与三叉神经之间的一小段坐骨神经组织保存在−80°C，直至进行髓鞘蛋白测定。鉴于NO测定的技术难度，需要精确控制采样时间并在采样后立即进行测定（因为NO和亚硝酸盐不稳定），我们评估了NOS（诱导型和神经元型）的水平来代表NO的变化，正如Salake等人（2000）和Wang等人（2004）先前报道的那样。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
5'-磷酸吡哆醛-6-偶氮苯-2,4-二磺酸是一种芳烃磺酸，是吡哆醛5'-磷酸酯在6位上连接一个额外的2,4-二磺基苯基偶氮取代基。它是一种嘌呤能受体P2X拮抗剂。它属于芳烃磺酸、偶氮苯类化合物、甲基吡啶类化合物、单羟基吡啶类化合物、吡啶甲醛类化合物和有机磷酸酯类化合物。其功能与吡哆醛5'-磷酸酯类似。它是5'-磷酸吡哆醛-6-偶氮苯-2,4-二磺酸盐的共轭酸。
血小板聚集抑制剂：拮抗或抑制任何导致血小板聚集的机制的药物或制剂，无论是在激活和形状改变阶段，还是在致密颗粒释放反应和前列腺素-血栓素系统刺激之后。 在非洲爪蟾卵母细胞中表达的I组P2X受体上，研究了七种PPADS（吡哆醛-5'-磷酸6-偶氮苯基2',4'-二磺酸盐）类似物。所有七种类似物均能有效抑制P2X1（IC50范围：5-32 nM）和P2X3（IC50范围：22-345 nM），即I组P2X受体的两个亚型。当PPADS的吡哆醛部分含有5'-膦酸酯基团而非5'-磷酸基团时，类似物表现出更强的抑制活性。此外，当偶氮苯基部分上的二磺酸基团被去除或取代时，类似物的效力也更高。活性最强的类似物是MRS 2257（吡哆醛-5'-膦酸酯 6-偶氮苯基 3',5'-双亚甲基膦酸酯），其对P2X1（IC50为5 nM）和P2X3（IC50为22 nM）受体的抑制活性分别是PPADS本身的14倍和10倍。MRS 2257在不同ATP浓度下均表现出不可逆转的抑制作用，但洗脱20分钟后，抑制作用可逆转约85%。 TNP-ATP 和 Ip5I 与 MRS 2257 对 P2X1 受体的效力相当，而 TNP-ATP 对 P2X3 受体的效力是 MRS 2257 的 64 倍。总之，PPADS 模板的吡哆醛和苯基部分可以进行修饰，从而产生 P2X1 和 P2X3 受体拮抗剂，这些拮抗剂在这些 I 类 P2X 受体上表现出比母体化合物更高的效力和更大的可逆性。[2] |
| 分子式 |
C14H14N3O12PS2
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|---|---|
| 分子量 |
511.38
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| 精确质量 |
598.903
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| 元素分析 |
C, 28.06; H, 1.68; N, 7.01; Na, 15.34; O, 32.04; P, 5.17; S, 10.70
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| CAS号 |
149017-66-3
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| 相关CAS号 |
207572-67-6; 192575-19-2; 149017-66-3
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| PubChem CID |
4881
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| 密度 |
1.94g/cm3
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| 折射率 |
1.729
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| LogP |
3.779
|
| tPSA |
288.3
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
5
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| 氢键受体(HBA)数目 |
15
|
| 可旋转键数目(RBC) |
8
|
| 重原子数目 |
32
|
| 分子复杂度/Complexity |
956
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CC1=C(C(=C(C(=N1)N=NC2=C(C=C(C=C2)S(=O)(=O)O)S(=O)(=O)O)COP(=O)(O)O)C=O)O
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| InChi Key |
PNFZSRRRZNXSMF-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C14H14N3O12PS2/c1-7-13(19)9(5-18)10(6-29-30(20,21)22)14(15-7)17-16-11-3-2-8(31(23,24)25)4-12(11)32(26,27)28/h2-5,19H,6H2,1H3,(H2,20,21,22)(H,23,24,25)(H,26,27,28)
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| 化学名 |
4-[[4-formyl-5-hydroxy-6-methyl-3-(phosphonooxymethyl)pyridin-2-yl]diazenyl]benzene-1,3-disulfonic acid
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| 别名 |
ppads; 149017-66-3; Pyridoxal phosphate-6-azophenyl-2',4'-disulfonic acid; CHEBI:34941; L6K2LJ9BJK; CHEMBL69234; 4-((4-Formyl-5-hydroxy-6-methyl-3-((phosphonooxy)methyl)-2-pyridinyl)azo)-1,3-benzenedisulfonic acid; 4-[[4-formyl-5-hydroxy-6-methyl-3-(phosphonooxymethyl)pyridin-2-yl]diazenyl]benzene-1,3-disulfonic acid;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9555 mL | 9.7775 mL | 19.5549 mL | |
| 5 mM | 0.3911 mL | 1.9555 mL | 3.9110 mL | |
| 10 mM | 0.1955 mL | 0.9777 mL | 1.9555 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
HW091077
UB-MBX-46
P2X3 antagonist 39
HEI3090
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