| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Butyryl Coenzyme A serves as a substrate for Butyryl-CoA:acetate-CoA transferase (But, EC 2.8.3.8). This enzyme catalyzes the transfer of the CoA group from butyryl-CoA to acetate. [1]
Butyryl Coenzyme A serves as a substrate for Butyryl-CoA:acetate CoA transferase (BCoAT, EC 2.8.3.8). This enzyme catalyzes the conversion of butyryl-CoA to butyrate.[2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
- 文献中通过柠檬酸合酶偶联法测定了丁酰辅酶A:乙酸辅酶A转移酶（But）的活性。该酶以丁酰辅酶A和乙酸为底物，生成的乙酰辅酶A与草酰乙酸缩合，释放游离辅酶A，后者与5,5'-二硫代双-(2-硝基苯甲酸)反应生成黄色的硫酚阴离子，通过在412 nm波长下监测吸光度的变化来计算反应速率。[1]
- 在来自猪肠道丁酸生产菌株的12个推定but基因中，有8个基因编码的蛋白表现出强烈的But酶活性，比活性范围从7,004 μM·min⁻¹·mg⁻¹（菌株27-5-10）到27,819 μM·min⁻¹·mg⁻¹（菌株831b）。当使用丙酰辅酶A作为底物时，这些高活性基因也表现出相似的活性。[1] - 具有高活性的But蛋白在氨基酸序列中含有一个保守基序LQLGIGG。该基序中的甘氨酸（Gly）在所有高活性序列中均保守，而低活性蛋白在该基序中至少有一个氨基酸替换。[1] - 来源于Clostridium tyrobutyricum BEY8的纯化BCoAT酶对丁酰辅酶A具有特异性活性，比活性为 26.2 ± 0.09 U/mg蛋白，但该酶对己酰辅酶A（capryl-CoA）无任何可检测的活性。[2] - 来源于Ruminococcaceae bacterium CPB6的纯化CoAT酶（CPB6-CoAT）对丁酰辅酶A也表现出活性，比活性为 10.8 ± 0.02 U/mg蛋白，但其对己酰辅酶A的活性（27.6 ± 0.15 U/mg蛋白）是对丁酰辅酶A活性的约2.6倍，表明CPB6-CoAT更偏好己酰辅酶A作为底物。[2] - 酶动力学研究表明，BEY8-BCoAT对丁酰辅酶A的米氏常数（Km）为 370 ± 4.1 μM，催化常数（kcat）为 13.9 ± 0.7 min⁻¹，催化效率（kcat/Km）为 37.7 ± 0.2 mM⁻¹·min⁻¹。[2] - CPB6-CoAT对丁酰辅酶A的Km值为 537 ± 10 μM，kcat为 5.81 ± 1.5 min⁻¹，催化效率为 10.8 ± 0.2 mM⁻¹·min⁻¹；对己酰辅酶A的Km值为 359 ± 5.3 μM，kcat为 14.7 ± 0.9 min⁻¹，催化效率为 41.1 ± 0.2 mM⁻¹·min⁻¹。CPB6-CoAT对己酰辅酶A的催化效率是对丁酰辅酶A的 3.8倍。[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
- 在猪近端结肠内容物中，基于RNA的but基因文库检测到的OTUs多样性高于基于DNA的文库（Shannon多样性指数配对Wilcoxon检验，P < 0.03；Shannon均匀度配对Wilcoxon检验，P < 0.03），表明活跃转录but基因的微生物群落与丰度最高的微生物群落不同。[1]
- 从6头猪的结肠内容物中，基于DNA和RNA共检测到92个独特的but基因OTUs（97%相似度）。其中14个OTUs在所有猪的RNA文库中均被检测到，4个OTUs在所有DNA文库中均被检测到，3个OTUs（OTU4、OTU14、OTU23）在所有核酸类型的文库中均被检测到。[1] - 柠檬酸合酶偶联法检测CoAT活性：反应在25°C下、总体积1 mL的体系中进行。反应混合物包含：100 mM磷酸钾缓冲液（pH 7.0）、200 mM乙酸钠、1 mM 5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)（DTNB）、1 mM草酰乙酸、8.4 nk柠檬酸合酶，以及0.5 mM的辅酶A衍生物（丁酰辅酶A或己酰辅酶A）。反应通过加入酶（终浓度不超过20 ng/mL）启动。酶促反应释放的辅酶A（与生成的乙酰辅酶A等摩尔量）与DTNB反应生成黄色的硫酚阴离子，通过监测412 nm波长处吸光度的变化来测定反应速率。一个活性单位（U）定义为在该条件下每分钟催化生成1 μmol乙酰辅酶A所需的酶量。[2] - 酶动力学参数测定：采用与上述相同的偶联分光光度法测定动力学参数。丁酰辅酶A或己酰辅酶A的浓度在0.5至5 mM范围内变化。通过Lineweaver-Burk双倒数作图法对Michaelis-Menten方程进行转换，计算Km和Vmax值。催化常数（kcat）定义为每个酶分子每秒转化的底物分子数。所有测量均进行三次生物重复。[2] |
| 酶活实验 |
- 柠檬酸合酶偶联法检测丁酰辅酶A转移酶活性：反应体系包含底物丁酰辅酶A和乙酸。丁酰辅酶A:乙酸辅酶A转移酶催化生成的乙酰辅酶A在柠檬酸合酶的作用下与草酰乙酸缩合生成柠檬酸并释放游离辅酶A。释放的辅酶A与5,5'-二硫代双-(2-硝基苯甲酸)反应生成黄色的硫酚阴离子。反应速率通过在39°C下监测412 nm波长的吸光度变化来测定。使用粗细胞裂解液进行检测，必要时用无菌水稀释以使反应速率处于线性范围内。在没有乙酸存在的情况下重复反应，以确认测得的速率不是由于辅酶A水解酶活性所致。[1]
|
| 细胞实验 |
- 基因克隆与蛋白表达：候选but基因被克隆到pET-TOPO-101载体中，转化入TOP10大肠杆菌化学感受态细胞，筛选阳性克隆并测序确认。随后将克隆DNA转化入BL21 Star大肠杆菌感受态细胞进行蛋白表达。培养物在含50 μg/mL羧苄青霉素的LB培养基中生长12小时，加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）至终浓度1 mM诱导表达，继续培养6小时后收集菌体，用无菌磷酸盐缓冲液洗涤并重悬，通过French压碎仪裂解细胞，离心去除未裂解细胞后获得裂解液上清用于活性检测。[1]
|
| 动物实验 |
- 样品采集与处理：从猪的近端结肠（距盲肠10 cm远端）采集内容物，立即置于RNAlater中并快速匀浆以保持核酸完整性。样品在-80°C下冷冻保存直至提取（1个月内）。使用DNA和RNA提取试剂盒从6头饲喂标准日粮的猪的近端结肠内容物中提取DNA和RNA。使用iScript Select试剂盒以随机六聚体引物从RNA反转录生成cDNA。[1]
|
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
- 背景：丁酸对维持结肠稳态至关重要，是结肠上皮细胞的首选能量来源。丁酸通过降低局部氧浓度造成上皮缺氧，从而限制兼性需氧病原体（如沙门氏菌）的生长。此外，丁酸还能改变宿主基因表达，促进对结肠微生物群的免疫耐受，增强结肠上皮的屏障功能。[1]
- 丁酸合成途径：在结肠环境中，丁酸生产最普遍的途径涉及两分子乙酰辅酶A缩合，然后还原为丁酰辅酶A。在生成丁酰辅酶A后，有两种不同的酶负责最终转化为丁酸：丁酸激酶（Buk）和丁酰辅酶A:乙酸辅酶A转移酶（But），其中But蛋白在结肠环境中最为常见。[1] - 系统发育分析：功能验证的But蛋白编码基因在系统发育树上与潜在的同源基因分离，但这一分离并不绝对。大部分通过funbut引物检测到的OTUs（99.4%）与编码高活性酶的but序列聚类在一起，而仅有0.6%的序列位于主要功能进化枝之外。[1] - 背景与作用机制：在逆向β-氧化途径中，丁酸的产生通常由两分子乙酰辅酶A缩合开始，生成乙酰乙酰辅酶A，然后转化为丁酰辅酶A。最后，丁酰辅酶A与外源乙酸通过丁酰辅酶A:乙酸辅酶A转移酶（BCoAT）发生辅酶A交换，生成乙酰辅酶A和丁酸。该酶被认为是鉴定丁酸生产菌的生物标志物。[2] - 底物特异性差异：来自丁酸生产菌Clostridium tyrobutyricum的BCoAT只对丁酰辅酶A有活性，而对己酰辅酶A无活性，表明该酶仅参与C2-C4的链延长，而不参与C4到C6或C8的延长。相比之下，来自己酸生产菌Ruminococcaceae bacterium CPB6的CoAT对己酰辅酶A具有更高的亲和力和催化效率，证实了特异性己酰辅酶A:乙酸辅酶A转移酶（CCoAT）的存在。[2] - 保守基序与定点突变：通过多序列比对，在CoATs中发现了一个高度保守的基序GGQXDFXXGAXX（CPB6-CoAT中为GGQLDFVLGAYL，位于第342-353位氨基酸）。定点突变实验显示，将保守基序中的Asp³⁴⁶替换为His导致BCoAT活性丧失约76%、CCoAT活性丧失约72%；将Ala³⁵¹替换为Pro导致BCoAT活性丧失约50%、CCoAT活性丧失约55%。这表明该保守基序是CPB6-CoAT的活性中心，其中Asp³⁴⁶和Ala³⁵¹残基对酶活性有显著影响。[2] |
| 分子式 |
C25H44LI2N7O19P3S
|
|---|---|
| 分子量 |
885.52
|
| CAS号 |
1107039-35-9
|
| 相关CAS号 |
102282-28-0
|
| 外观&性状 |
Solid Powder
|
| SMILES |
[Li+].[Li+].CCCC(=O)SCCNC(=O)CCNC(=O)[C@@H](C(C)(C)COP(=O)([O-])OP(=O)([O-])OC[C@@H]1[C@H]([C@H]([C@@H](O1)N2C=NC3=C(N=CN=C32)N)O)OP(=O)(O)O)O.O.O
|
| 别名 |
Butyryl-Coenzyme A (lithium hydrate); 1107039-35-9; Butyryl CoA lithium hydrate
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 请将本产品存放在密封保护的环境中，避免受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~50 mg/mL (~56.46 mM; with heating and sonication)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.1293 mL | 5.6464 mL | 11.2928 mL | |
| 5 mM | 0.2259 mL | 1.1293 mL | 2.2586 mL | |
| 10 mM | 0.1129 mL | 0.5646 mL | 1.1293 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
4-(4-(4-(((3R,5R)-5-((1H-1,2,4-Triazol-1-yl)methyl)-5-(2,4-difluorophenyl)tetrahydrofuran-3-yl)methoxy)phenyl)piperazin-1-yl)phenyl)-2-((2S,3R)-2-hydroxypentan-3-yl)-2,4-dihydro-3H-1,2,4-triazol-3-one
布罗曼坦
促肾上腺皮质激素释放激素
Trivehexin
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
