Butyryl-Coenzyme A trilithium

别名: RefChem:571907; Butyryl coenzyme A lithium salt hydrate; 634-407-5; Butyryl Coenzyme A lithium salt; Butyryl CoA trilithium
目录号: V119726
丁酰辅酶A(丁酰CoA)三锂是一种短链酰基辅酶A,可以合成丁酸。
Butyryl-Coenzyme A trilithium CAS号: 102282-28-0
产品类别: Drug Intermediate
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格
500mg
1g
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产品描述
丁酰辅酶A(丁酰CoA)三锂是一种短链酰基辅酶A,可以合成丁酸。Butyryl Coenzyme A 是肠道微生物产生丁酸过程中的关键代谢中间体。在主要的丁酸合成途径中,丁酰辅酶A通过丁酰辅酶A:乙酸辅酶A转移酶(But)的作用,将其辅酶A基团转移给乙酸,从而生成乙酰辅酶A和丁酸。这一过程在结肠生态系统中尤为重要,因为高浓度的乙酸允许丁酸生产者利用其他微生物的代谢废物。[1]
生物活性&实验参考方法
靶点
Butyryl Coenzyme A serves as a substrate for Butyryl-CoA:acetate-CoA transferase (But, EC 2.8.3.8). This enzyme catalyzes the transfer of the CoA group from butyryl-CoA to acetate. [1]
体外研究 (In Vitro)
- 文献中通过柠檬酸合酶偶联法测定了丁酰辅酶A:乙酸辅酶A转移酶(But)的活性。该酶以丁酰辅酶A和乙酸为底物,生成的乙酰辅酶A与草酰乙酸缩合,释放游离辅酶A,后者与5,5'-二硫代双-(2-硝基苯甲酸)反应生成黄色的硫酚阴离子,通过在412 nm波长下监测吸光度的变化来计算反应速率。[1]
- 在来自猪肠道丁酸生产菌株的12个推定but基因中,有8个基因编码的蛋白表现出强烈的But酶活性,比活性范围从7,004 μM·min⁻¹·mg⁻¹(菌株27-5-10)到27,819 μM·min⁻¹·mg⁻¹(菌株831b)。当使用丙酰辅酶A作为底物时,这些高活性基因也表现出相似的活性。[1]
- 具有高活性的But蛋白在氨基酸序列中含有一个保守基序LQLGIGG。该基序中的甘氨酸(Gly)在所有高活性序列中均保守,而低活性蛋白在该基序中至少有一个氨基酸替换。[1]
体内研究 (In Vivo)
- 在猪近端结肠内容物中,基于RNA的but基因文库检测到的OTUs多样性高于基于DNA的文库(Shannon多样性指数配对Wilcoxon检验,P < 0.03;Shannon均匀度配对Wilcoxon检验,P < 0.03),表明活跃转录but基因的微生物群落与丰度最高的微生物群落不同。[1]
- 从6头猪的结肠内容物中,基于DNA和RNA共检测到92个独特的but基因OTUs(97%相似度)。其中14个OTUs在所有猪的RNA文库中均被检测到,4个OTUs在所有DNA文库中均被检测到,3个OTUs(OTU4、OTU14、OTU23)在所有核酸类型的文库中均被检测到。[1]
酶活实验
- 柠檬酸合酶偶联法检测丁酰辅酶A转移酶活性:反应体系包含底物丁酰辅酶A和乙酸。丁酰辅酶A:乙酸辅酶A转移酶催化生成的乙酰辅酶A在柠檬酸合酶的作用下与草酰乙酸缩合生成柠檬酸并释放游离辅酶A。释放的辅酶A与5,5'-二硫代双-(2-硝基苯甲酸)反应生成黄色的硫酚阴离子。反应速率通过在39°C下监测412 nm波长的吸光度变化来测定。使用粗细胞裂解液进行检测,必要时用无菌水稀释以使反应速率处于线性范围内。在没有乙酸存在的情况下重复反应,以确认测得的速率不是由于辅酶A水解酶活性所致。[1]
细胞实验
- 基因克隆与蛋白表达:候选but基因被克隆到pET-TOPO-101载体中,转化入TOP10大肠杆菌化学感受态细胞,筛选阳性克隆并测序确认。随后将克隆DNA转化入BL21 Star大肠杆菌感受态细胞进行蛋白表达。培养物在含50 μg/mL羧苄青霉素的LB培养基中生长12小时,加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)至终浓度1 mM诱导表达,继续培养6小时后收集菌体,用无菌磷酸盐缓冲液洗涤并重悬,通过French压碎仪裂解细胞,离心去除未裂解细胞后获得裂解液上清用于活性检测。[1]
动物实验
- 样品采集与处理:从猪的近端结肠(距盲肠10 cm远端)采集内容物,立即置于RNAlater中并快速匀浆以保持核酸完整性。样品在-80°C下冷冻保存直至提取(1个月内)。使用DNA和RNA提取试剂盒从6头饲喂标准日粮的猪的近端结肠内容物中提取DNA和RNA。使用iScript Select试剂盒以随机六聚体引物从RNA反转录生成cDNA。[1]
参考文献

[1]. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27613689/

其他信息
- 背景:丁酸对维持结肠稳态至关重要,是结肠上皮细胞的首选能量来源。丁酸通过降低局部氧浓度造成上皮缺氧,从而限制兼性需氧病原体(如沙门氏菌)的生长。此外,丁酸还能改变宿主基因表达,促进对结肠微生物群的免疫耐受,增强结肠上皮的屏障功能。[1]
- 丁酸合成途径:在结肠环境中,丁酸生产最普遍的途径涉及两分子乙酰辅酶A缩合,然后还原为丁酰辅酶A。在生成丁酰辅酶A后,有两种不同的酶负责最终转化为丁酸:丁酸激酶(Buk)和丁酰辅酶A:乙酸辅酶A转移酶(But),其中But蛋白在结肠环境中最为常见。[1]
- 系统发育分析:功能验证的But蛋白编码基因在系统发育树上与潜在的同源基因分离,但这一分离并不绝对。大部分通过funbut引物检测到的OTUs(99.4%)与编码高活性酶的but序列聚类在一起,而仅有0.6%的序列位于主要功能进化枝之外。[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C25H39LI3N7O17P3S
分子量
855.423147439957
精确质量
855.181610
CAS号
102282-28-0
相关CAS号
Butyryl-Coenzyme A lithium hydrate; Butyryl-Coenzyme A trisodium; Butyryl-Coenzyme A triammonium
外观&性状
Typically exists as solids at room temperature
SMILES
S(C(CCC)=O)CCNC(CCNC([C@@H](C(C)(C)COP(=O)([O-])OP(=O)(O)OC[C@@H]1[C@H]([C@H]([C@H](N2C=NC3C(N)=NC=NC2=3)O1)O)OP(=O)([O-])[O-])O)=O)=O.[Li+].[Li+].[Li+]
别名
RefChem:571907; Butyryl coenzyme A lithium salt hydrate; 634-407-5; Butyryl Coenzyme A lithium salt; Butyryl CoA trilithium
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.1690 mL 5.8451 mL 11.6902 mL
5 mM 0.2338 mL 1.1690 mL 2.3380 mL
10 mM 0.1169 mL 0.5845 mL 1.1690 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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