| 规格 | 价格 | |
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| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
Butyryl Coenzyme A serves as a substrate for Butyryl-CoA:acetate-CoA transferase (But, EC 2.8.3.8). This enzyme catalyzes the transfer of the CoA group from butyryl-CoA to acetate. [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
- 文献中通过柠檬酸合酶偶联法测定了丁酰辅酶A:乙酸辅酶A转移酶(But)的活性。该酶以丁酰辅酶A和乙酸为底物,生成的乙酰辅酶A与草酰乙酸缩合,释放游离辅酶A,后者与5,5'-二硫代双-(2-硝基苯甲酸)反应生成黄色的硫酚阴离子,通过在412 nm波长下监测吸光度的变化来计算反应速率。[1]
- 在来自猪肠道丁酸生产菌株的12个推定but基因中,有8个基因编码的蛋白表现出强烈的But酶活性,比活性范围从7,004 μM·min⁻¹·mg⁻¹(菌株27-5-10)到27,819 μM·min⁻¹·mg⁻¹(菌株831b)。当使用丙酰辅酶A作为底物时,这些高活性基因也表现出相似的活性。[1] - 具有高活性的But蛋白在氨基酸序列中含有一个保守基序LQLGIGG。该基序中的甘氨酸(Gly)在所有高活性序列中均保守,而低活性蛋白在该基序中至少有一个氨基酸替换。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
- 在猪近端结肠内容物中,基于RNA的but基因文库检测到的OTUs多样性高于基于DNA的文库(Shannon多样性指数配对Wilcoxon检验,P < 0.03;Shannon均匀度配对Wilcoxon检验,P < 0.03),表明活跃转录but基因的微生物群落与丰度最高的微生物群落不同。[1]
- 从6头猪的结肠内容物中,基于DNA和RNA共检测到92个独特的but基因OTUs(97%相似度)。其中14个OTUs在所有猪的RNA文库中均被检测到,4个OTUs在所有DNA文库中均被检测到,3个OTUs(OTU4、OTU14、OTU23)在所有核酸类型的文库中均被检测到。[1] |
| 酶活实验 |
- 柠檬酸合酶偶联法检测丁酰辅酶A转移酶活性:反应体系包含底物丁酰辅酶A和乙酸。丁酰辅酶A:乙酸辅酶A转移酶催化生成的乙酰辅酶A在柠檬酸合酶的作用下与草酰乙酸缩合生成柠檬酸并释放游离辅酶A。释放的辅酶A与5,5'-二硫代双-(2-硝基苯甲酸)反应生成黄色的硫酚阴离子。反应速率通过在39°C下监测412 nm波长的吸光度变化来测定。使用粗细胞裂解液进行检测,必要时用无菌水稀释以使反应速率处于线性范围内。在没有乙酸存在的情况下重复反应,以确认测得的速率不是由于辅酶A水解酶活性所致。[1]
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| 细胞实验 |
- 基因克隆与蛋白表达:候选but基因被克隆到pET-TOPO-101载体中,转化入TOP10大肠杆菌化学感受态细胞,筛选阳性克隆并测序确认。随后将克隆DNA转化入BL21 Star大肠杆菌感受态细胞进行蛋白表达。培养物在含50 μg/mL羧苄青霉素的LB培养基中生长12小时,加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)至终浓度1 mM诱导表达,继续培养6小时后收集菌体,用无菌磷酸盐缓冲液洗涤并重悬,通过French压碎仪裂解细胞,离心去除未裂解细胞后获得裂解液上清用于活性检测。[1]
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| 动物实验 |
- 样品采集与处理:从猪的近端结肠(距盲肠10 cm远端)采集内容物,立即置于RNAlater中并快速匀浆以保持核酸完整性。样品在-80°C下冷冻保存直至提取(1个月内)。使用DNA和RNA提取试剂盒从6头饲喂标准日粮的猪的近端结肠内容物中提取DNA和RNA。使用iScript Select试剂盒以随机六聚体引物从RNA反转录生成cDNA。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
- 背景:丁酸对维持结肠稳态至关重要,是结肠上皮细胞的首选能量来源。丁酸通过降低局部氧浓度造成上皮缺氧,从而限制兼性需氧病原体(如沙门氏菌)的生长。此外,丁酸还能改变宿主基因表达,促进对结肠微生物群的免疫耐受,增强结肠上皮的屏障功能。[1]
- 丁酸合成途径:在结肠环境中,丁酸生产最普遍的途径涉及两分子乙酰辅酶A缩合,然后还原为丁酰辅酶A。在生成丁酰辅酶A后,有两种不同的酶负责最终转化为丁酸:丁酸激酶(Buk)和丁酰辅酶A:乙酸辅酶A转移酶(But),其中But蛋白在结肠环境中最为常见。[1] - 系统发育分析:功能验证的But蛋白编码基因在系统发育树上与潜在的同源基因分离,但这一分离并不绝对。大部分通过funbut引物检测到的OTUs(99.4%)与编码高活性酶的but序列聚类在一起,而仅有0.6%的序列位于主要功能进化枝之外。[1] |
| 分子式 |
C25H39LI3N7O17P3S
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|---|---|
| 分子量 |
855.423147439957
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| 精确质量 |
855.181610
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| CAS号 |
102282-28-0
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| 相关CAS号 |
Butyryl-Coenzyme A lithium hydrate; Butyryl-Coenzyme A trisodium; Butyryl-Coenzyme A triammonium
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| 外观&性状 |
Typically exists as solids at room temperature
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| SMILES |
S(C(CCC)=O)CCNC(CCNC([C@@H](C(C)(C)COP(=O)([O-])OP(=O)(O)OC[C@@H]1[C@H]([C@H]([C@H](N2C=NC3C(N)=NC=NC2=3)O1)O)OP(=O)([O-])[O-])O)=O)=O.[Li+].[Li+].[Li+]
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| 别名 |
RefChem:571907; Butyryl coenzyme A lithium salt hydrate; 634-407-5; Butyryl Coenzyme A lithium salt; Butyryl CoA trilithium
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.1690 mL | 5.8451 mL | 11.6902 mL | |
| 5 mM | 0.2338 mL | 1.1690 mL | 2.3380 mL | |
| 10 mM | 0.1169 mL | 0.5845 mL | 1.1690 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。