RS 100329 HCl   中文名称: RS 100329盐酸盐

α1A-adrenoceptor (pKi = 9.6); α1D-adrenoceptor (pKi = 7.9); (α1B-adrenoceptor (pKi = 7.5)

人类下尿路 (LUT) 组织，特别是 RS100329 盐酸盐，以浓度依赖性且可克服的方式抑制去甲肾上腺素收缩 [2]。

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在Ro 70-0004的竞争研究中，RS100329盐酸盐、prazosin和tamsulosin在[3H]-prazosin结合上的竞争程度相同：计算出的亲和力估计（pKi）如表1所示。Prazosin和tamsulosin表现出有限的α1-AR亚型选择性（<10倍），而Ro 70-0004（分别为60倍和50倍）和RS100329盐酸（分别为126倍和50倍）对α1B-和α1D-AR亚型具有显著的选择性。[2]
普拉唑嗪对α1B-和α1D-AR亚型的选择性高于α1A-AR亚型，而坦索罗辛对α1A-AR亚型的选择性约为α1B-的10倍，但对α1D-AR亚型没有选择性。Ro 70-0004（图2a）对α 1a亚型的选择性分别为α1B-和α 1d亚型的30倍和80倍，RS100329盐酸（图2b）也显示出显著的α 1a -肾上腺素受体选择性（分别为60倍和50倍）。[2]
在人LUT组织中，Ro 70-0004、RS100329盐酸和prazosin以一种可克服且浓度依赖的方式拮抗NA的收缩，它们具有相似的亲和力（pA2 ~ 9）。[2]
相比之下，Ro 70-0004和RS100329盐酸对NA在人肾动脉中的收缩反应的拮抗作用弱约100倍。prazosin和tamsulosin的亲和力与在人类LUT组织中观察到的结果没有差异（表2）。在使用大鼠主动脉环的研究中，Ro 70-0004、RS100329盐酸和tamsulosin拮抗NA的收缩反应，其亲和力与在人肾动脉中观察到的相似。然而，与人肾动脉相比，哌唑嗪在大鼠主动脉中的效力约为10倍。[2]

静脉注射RS100329盐酸盐（0.01-0.1 mg/kg）的Sprague Dawley大鼠具有较低的基线尿道压力和较少的反射性尿道收缩[1]。

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α1-肾上腺素受体拮抗剂多沙唑嗪（0.1 - 2mg kg−1）、RS100329盐酸盐 (α1A；0.01 - 1 mg kg−1),RS-513815 (Ro 151-3815, α1B；0.3 - 3mg kg - 1)和BMY 7378 (α1D；以尿氨麻醉雄性大鼠为研究对象，研究了5-HT1A受体激动剂8-OH-DPAT （0.03 - 0.3 mg kg -1）和拮抗剂WAY-100635 （0.03 - 0.3 mg kg -1）对其“排尿反射”的影响。[1]
反射性尿道收缩对RS100329盐酸盐 >的抑制作用最敏感，其次是多沙唑嗪、bmy7378和WAY-100635，最后是RS-513815。在0.3、0.5、0.3、0.3和3mg kg−1剂量下，最大抑制率分别为66.3%、63%、554%、46%和22%。 [1]
BMY 7378和8-OH-DPAT降低，WAY-100635升高，引起膀胱收缩的压力阈值升高。WAY-100635 （0.01 mg kg -1）阻断BMY 7378 （1 mg kg -1）对膀胱压力和容积阈值的影响。 [1]
Doxazosin, RS100329盐酸盐和BMY 7378在诱导动脉血压下降方面具有相似的作用，而WAY-100635仅在最高剂量时引起血压下降。 [1]
因此，反射性引起的尿道收缩涉及α1A/ 1d肾上腺素受体的激活，因为BMY 7378和RS100329盐酸盐在减弱这一作用方面同样有效。WAY-100635抑制这种收缩的能力可能表明5-HT1A受体也参与其中。然而，由于这种抑制作用发生在最高剂量的WAY-100635，这也导致了动脉血压的下降；这种作用被认为是由于α1-肾上腺素受体而不是5-HT1A受体的阻断。然而，“排尿反射”的启动涉及5-HT1A受体的激活。

放射性配体结合研究[2]
使用稳定表达人克隆α1A-、α1B-和α 1d肾上腺素受体的完整CHO-K1细胞，通过竞争曲线（使用10种浓度的替代剂）进行亲和估计（pKi）。按照上述方法培养细胞，并用含有EDTA （30 μM）的Dulbecco磷酸盐缓冲盐水（PBS）在37°C下孵育10分钟，收获细胞。收集的细胞在Ham's培养基中离心和重悬两次，最后在Ham's培养基中重悬，浓度约为0.2×106 cells ml - 1。 [2]
[3H]-Prazosin (0.3-0.4 nM；特异性结合用10 μM酚妥拉明确定。实验管中含有100 μl竞争化合物、100 μl [3H]-吡唑嗪和300 μl细胞悬液。在37°C的Ham培养基（pH 7.4）中进行30分钟的平衡，并通过玻璃纤维过滤器进行真空过滤。结合放射性用液体闪烁光谱测定。使用非线性迭代曲线拟合方法 计算产生特定[3H]-prazosin结合（IC50）降低50%的竞争剂浓度，并根据Cheng & Prusoff（1973）估计亲和估计（pKi）。用10-12浓度的[3H]-prazosin （1 pM-3 nM）进行饱和度分析，估计pKD。

体外组织浴研究[2]
组织浴研究进行了37°C在10毫升器官浴和使用柠檬酸缓冲(143.5 mM: Na +, K + 6.0, Ca2 + 2.5, Mg2 + 1.2, Cl 126−HCO3−25日H2PO4−1.2,SO42−1.2),pH值7.4,加油95% O2, 5%的二氧化碳,并与可卡因(30μM)补充,皮质甾酮(30μM),普萘洛尔(1μM), idazoxan(0.3μM),抗坏血酸盐(100μM)和nitrendipine(1μM:大鼠主动脉,看到蓝色et al ., 1995),以确保平衡条件和α1-adrenoceptor孤立。[2]
人类下尿路组织（LUT）是由接受经尿道前列腺切除术（TURP）的患者获得的。样品保存在冷的克雷布斯溶液中，直到用于功能研究，这些研究在当天晚些时候或第二天早些时候进行。从移植供体库获得人肾动脉切片（3 mm×6 mm），通常在切除后24-36小时内接受。兔膀胱颈条（2 mm×6 mm）取自雄性新西兰大白兔（2.5 ~ 3.5 kg），大鼠主动脉环（2 mm宽）取自雄性Sprague-Dawley大鼠（350 ~ 500 g），均采用二氧化碳安乐死。研究前血管组织内皮脱落。[2]
将组织置于0.5 g（人LUT，肾动脉）或1.0 g（兔膀胱颈，大鼠主动脉）静息张力下，并使其平衡至少1小时。在不同浓度的拮抗剂不存在和存在（经过1小时的平衡）的情况下，构建NA的累积浓度-反应曲线。反应被测量为等距张力的变化。采用迭代曲线拟合的方法确定各拮抗剂不同浓度存在和不存在情况下的EC50值。柴尔德图（Arunlakshana & Schild, 1959）是为了估计拮抗剂亲和力而构建的。

Animal/Disease Models: Sprague Dawley rat (300-390 g) [1]
Doses: 0.01-0.1 mg/kg
Route of Administration: intravenous (iv) (iv)injection
Experimental Results: Caused a decrease in baseline urethral pressure up to 23%.

[1]. The role of alpha(1)-adrenoceptors and 5-HT(1A) receptors in the control of the micturition reflex in male anaesthetized rats. Br J Pharmacol. 2001 May;133(1):61-72.

[2]. In vitro alpha1-adrenoceptor pharmacology of Ro 70-0004 and RS-100329, novel alpha1A-adrenoceptor selective antagonists. Br J Pharmacol. 1999;127(1):252-258.

It has been hypothesized that in patients with benign prostatic hyperplasia, selective antagonism of the alpha1A-adrenoceptor-mediated contraction of lower urinary tract tissues may, via a selective relief of outlet obstruction, lead to an improvement in symptoms. The present study describes the alpha1-adrenoceptor (alpha1-AR) subtype selectivities of two novel alpha1-AR antagonists, Ro 70-0004 (aka RS-100975) and a structurally-related compound RS-100329, and compares them with those of prazosin and tamsulosin. Radioligand binding and second-messenger studies in intact CHO-K1 cells expressing human cloned alpha1A-, alpha1B- and alpha1D-AR showed nanomolar affinity and significant alpha1A-AR subtype selectivity for both Ro 70-0004 (pKi 8.9: 60 and 50 fold selectivity) and RS-100329 (pKi 9.6: 126 and 50 fold selectivity) over the alpha1B- and alpha1D-AR subtypes respectively. In contrast, prazosin and tamsulosin showed little subtype selectivity. Noradrenaline-induced contractions of human lower urinary tract (LUT) tissues or rabbit bladder neck were competitively antagonized by Ro 70-0004 (pA2 8.8 and 8.9), RS-100329 (pA2 9.2 and 9.2), tamsulosin (pA2 10.4 and 9.8) and prazosin (pA2 8.7 and 8.3 respectively). Affinity estimates for tamsulosin and prazosin in antagonizing alpha1-AR-mediated contractions of human renal artery (HRA) and rat aorta (RA) were similar to those observed in LUT tissues, whereas Ro 70-0004 and RS-100329 were approximately 100 fold less potent (pA2 values of 6.8/6.8 and 7.3/7.9 in HRA/RA respectively). The alpha1A-AR subtype selectivity of Ro 70-0004 and RS-100329, demonstrated in both cloned and native systems, should allow for an evaluation of the clinical utility of a 'uroselective' agent for the treatment of symptoms associated with benign prostatic hyperplasia.[2]

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The fact that both RS-100329 and BMY 7378 have a similar potency in lowering arterial pressure suggests that the maintenance of α1-adrenoceptor-mediated sympathetic vasoconstrictor tone is mediated by both α1A- and α1D-adrenoceptors and a comparison of the potency differences between the antagonists at these receptors (see above) suggests that α1D-adrenoceptors are predominant in this effect. In this respect α1D-adrenoceptors have been shown to be involved in the contraction of rat aorta, mesenteric and pulmonary artery (Hussain & Marshall, 1997; Williams et al., 1999), while α1A-adrenoceptors have been shown to mediate contraction of the rat caudal artery (Lachnit et al., 1997). However, the failure of RS-513815 to affect arterial pressure indicates that α1B-adrenoceptors, at least in the present model of urethane anaesthetized rats, play no role in the maintenance of baseline arterial blood pressure. Interestingly, at high doses, RS-100329 caused a profound fall in arterial blood pressure and this is greater than that observed for high doses of doxazosin, implying that RS-100329 is interfering with a mechanism other than α1-adrenoceptors that is also important in the maintenance of arterial blood pressure. In addition, and somewhat surprisingly, 8-OH-DPAT failed to cause a fall in arterial blood pressure in this model. However, in the rat, activation of central 5-HT1A receptors can evoke both sympathoinhibition (Gradin et al., 1985; Fozard et al., 1987) and excitation (Anderson et al., 1995; 1996). [1]

C20H26CLF3N4O3

462.9

462.164

C, 51.89; H, 5.66; Cl, 7.66; F, 12.31; N, 12.10; O, 10.37

1215654-26-4

11340200

White to off-white solid powder

65.1

2

8

7

31

648

0

Cl.FC(COC1C=CC=CC=1N1CCN(CCCN2C(NC=C(C)C2=O)=O)CC1)(F)F

CWVABCXVOAVUJL-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C20H25F3N4O3.ClH/c1-15-13-24-19(29)27(18(15)28)8-4-7-25-9-11-26(12-10-25)16-5-2-3-6-17(16)30-14-20(21,22)23;/h2-3,5-6,13H,4,7-12,14H2,1H3,(H,24,29);1H

5-methyl-3-[3-[4-[2-(2,2,2-trifluoroethoxy)phenyl]piperazin-1-yl]propyl]-1H-pyrimidine-2,4-dione;hydrochloride

RS100329; RS 100329; RS 100329 hydrochloride; 1215654-26-4; 232953-52-5; RS 100329 HCl; RS100329 (hydrochloride); 5-METHYL-3-[3-[3-[4-[2-(2,2,2-TRIFLUOROETHOXY)PHENYL]-1-PIPERAZINYL]PROPYL]-2,4-(1H,3H)-PYRIMIDINEDIONE] HYDROCHLORIDE; 5-methyl-3-[3-[4-[2-(2,2,2-trifluoroethoxy)phenyl]piperazin-1-yl]propyl]-1H-pyrimidine-2,4-dione;hydrochloride; 5-Methyl-3-[3-[3-[4-[2-(2,2,2,-trifluroethoxy)phenyl]-1-piperazinyl]propyl]-2,4-(1H,3H)-pyrimidinedionehydrochloride; RS-100329

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~31.25 mg/mL (~67.51 mM)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。