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Sabinene

别名: SABINENE; 3387-41-5; Sabinen; 4(10)-Thujene; 4-methylidene-1-(propan-2-yl)bicyclo[3.1.0]hexane; 1-Isopropyl-4-methylenebicyclo[3.1.0]hexane; Bicyclo[3.1.0]hexane, 4-methylene-1-(1-methylethyl)-; CHEBI:50027; 桧烯;桧萜;[香]檜烯;1-異丙-4-亞甲雙環[3.1.0]己烷;1-异丙基-4-亚甲基双环[3.1.0]己烷;桧萜(RG)
目录号: V8739 纯度: ≥75%
COA 产品数据 产品说明书 SDS
Sabinene 是一种天然双环单萜化合物，用作香料、风味添加剂、精细化学品和高级生物燃料。
Sabinene CAS号: 3387-41-5
产品类别: New1
产品仅用于科学研究，不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
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250mg
500mg
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InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
产品描述
桧烯是一种天然双环单萜化合物，可用作香料、调味剂、精细化学品和先进生物燃料。桧烯也是一种口服生物活性化合物，可减少骨骼肌萎缩并调节ROS介导的MAPK/MuRF-1通路。
生物活性&实验参考方法
靶点
Flavoring, perfume additives
体外研究 (In Vitro)
在饥饿条件下，桧烯（10-300 μM；18 小时）可显著恢复肌管直径的缩小[2]。在饥饿的肌管中，桧烯（300 μM；18 小时）可切割细胞外连接酶，降低升高的 E3 泛素连接酶环指蛋白-1 (MuRF-1) 的表达，并使信号调节开关 1/2 (ERK1/2) 磷酸化[2]。桧烯（300 μM，180 小时）在 10 至 300 μM 的浓度范围内，不影响分化的 L6 肌管的活力。然而，在 1000 和 2000 μM 的较高浓度下，桧烯会抑制肌管的活力。 [2]
- 在饥饿诱导的肌萎缩模型（L6肌管在无血清DMEM培养基中培养18小时）中，10-300 µM的桧烯处理以剂量依赖的方式抑制肌管直径的减小。在300 µM浓度下观察到最大抑制作用，此时肌管直径约为未接受桧烯处理的饥饿肌管的两倍。[2]
- 在饥饿的L6肌管中，用300 µM桧烯处理18小时可降低E3泛素连接酶MuRF-1的蛋白表达水平。[2]
- 在饥饿的L6肌管中，用300 µM桧烯处理18小时可减弱p38 MAPK和ERK1/2的磷酸化水平。 [2]
- 用桧烯（300 µM）处理饥饿的 L6 肌管 18 小时，可抑制细胞内活性氧（ROS）水平的上调，这已通过荧光显微镜和荧光分析得到证实。[2]
体内研究 (In Vivo)
通过调节饥饿肌管中ROS介导的MAPK/MuRF-1激活，桧烯（6.4 mg/kg；口服；每日一次；禁食两天）可降低最终肌肉萎缩的可能性，甚至可能逆转截肢的减少。
北菊精油（CBMEO）具有多种生物活性，包括皮肤再生作用。然而，其在肌肉萎缩中的作用尚不清楚。本研究利用体外和体内肌肉萎缩模型，探讨了CBMEO及其活性成分对骨骼肌萎缩的影响。CBMEO逆转了饥饿条件下L6成肌细胞的体积缩小。在CBMEO的八种对L6细胞无细胞毒性的单萜化合物中，桧烯主要诱导了饥饿条件下肌管直径缩小的恢复。桧烯降低了饥饿肌管中升高的E3泛素连接酶肌肉环指蛋白-1 (MuRF-1) 的表达以及p38丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK) 和细胞外信号调节激酶1/2 (ERK1/2) 的磷酸化水平。此外，桧烯还降低了饥饿肌管中升高的活性氧 (ROS) 水平。这种ROS抑制剂拮抗了饥饿肌管中升高的MuRF-1表达和MAPK磷酸化。此外，给予桧烯后，禁食大鼠腓肠肌中的肌纤维萎缩程度和MuRF-1表达水平均有所降低。这些研究结果表明，CBMEO中的生物活性成分桧烯可能通过调节饥饿肌管中ROS介导的MAPK/MuRF-1通路激活机制来减轻骨骼肌萎缩，这可能导致禁食大鼠肌肉纤维尺寸减小的逆转。[2]
在禁食诱导的肌肉萎缩大鼠模型（8周龄雄性SD大鼠禁食2天）中，口服桧烯（6.4 mg/kg体重，每日一次，连续2天）逆转了禁食引起的腓肠肌纤维横截面积减小。[2]
- 在禁食大鼠中给予相同剂量的桧烯（6.4 mg/kg体重，每日一次，连续2天）导致腓肠肌重量增加，而禁食动物的腓肠肌重量则有所下降（文中未显示数据，但已提及）。 [2]
- 给予禁食大鼠沙比烯（6.4 mg/kg 体重，每日一次，连续 2 天）可降低腓肠肌中升高的 MuRF-1 表达水平。[2]
细胞实验
细胞毒性试验[2]
细胞类型：IL-6成肌细胞
测试浓度：300 μM
孵育时间：18 和 48 小时
实验结果：在饥饿条件下，IL-6未能影响肌管中活性氧（ROS）水平的升高[2]。IL-6成肌细胞培养48小时后，其活力恢复了18小时后饥饿诱导的成肌细胞萎缩的50%以上。
蛋白质印迹分析[2]
细胞类型：IL-6成肌细胞
测试浓度：300 μM
孵育时间：18 小时
实验结果：饥饿的肌管中肌肉萎缩相关信号蛋白的磷酸化水平降低。
细胞活力检测：将L6成肌细胞接种于96孔板中。为进行肌管活力分析，将L6成肌细胞分化7天。然后将分化的肌管在37°C下与桧烯孵育48小时。使用XTT法检测细胞活力。加入XTT溶液，孵育2小时以生成甲臜染料后，在450 nm处测量吸光度。 [2]
- 细胞萎缩模型及形态学分析：L6成肌细胞在7天内分化为肌管。为诱导萎缩，将肌管在含或不含桧烯（10-300 µM）的无血清低糖DMEM培养基中培养18小时。固定、封闭肌管后，依次与抗MYH-2一抗、Alexa Fluor 488标记的二抗孵育，并用DAPI染色。使用荧光显微镜采集图像。使用ImageJ软件测量每根肌管长度方向上五个点的直径。计算平均直径，并以相对于对照组的百分比表示。[2]
- Western Blot分析：将L6肌管在含或不含桧烯（300 µM）的无血清DMEM培养基中饥饿18小时。细胞裂解后，蛋白质经SDS-PAGE分离，然后转移至膜上。膜封闭后，与针对MuRF-1、p-p38 MAPK、p38 MAPK、p-ERK1/2、ERK1/2和β-actin的一抗于4℃孵育过夜。与HRP标记的二抗孵育后，采用化学发光法显色，并使用ImageJ软件进行定量分析。[2]
- 活性氧（ROS）测定：将分化于24孔或96孔板中的L6肌管细胞置于含或不含桧烯（300 µM）的无血清DMEM培养基中饥饿培养18小时。然后用H2DCFDA染色30分钟。使用倒置荧光显微镜观察荧光图像进行分析，并使用微孔板读数仪在 488/519 nm 的激发/发射波长下进行荧光定量分析。[2]
动物实验
动物/疾病模型： 大鼠禁食动物模型 [2]
剂量： 6.4 mg/kg
给药途径： 灌胃（po）；禁食纤维大小 [2]。每日一次；禁食 2 天。
实验结果： 禁食大鼠腓肠肌纤维萎缩程度和 MuRF-1 表达降低。
禁食诱导肌肉萎缩模型及给药：** 使用雄性 Sprague-Dawley 大鼠（8 周龄，250-300 g）。将动物分为三组（每组 n=10）。桧烯治疗组每日一次灌胃给予桧烯（6.4 mg/kg 体重），连续 2 天。对照组（禁食组和非禁食组）经口给予含1% Tween-80的生理盐水。禁食组（包括桧烯处理组和载体对照组）在为期2天的禁食期间，笼内食物颗粒被移除。[2]
- **组织采集和处理：** 2天后，大鼠经腹腔注射佐来替尔（40 mg/kg体重）和罗普宁（10 mg/kg体重）进行麻醉。通过足底捏掐反射消失来确认麻醉效果。解剖并分离腓肠肌。分离的肌肉用冰冷的PBS缓冲液洗涤，用4%多聚甲醛固定，切节，并包埋于石蜡中。 [2]
禁食诱导肌肉萎缩模型及药物给药：采用雄性Sprague-Dawley大鼠（8周龄，250-300 g）。将动物分为三组（每组n=10）。桧烯处理组每日口服一次桧烯（6.4 mg/kg体重），连续2天。溶剂对照组（禁食组和非禁食组）口服含1% Tween-80的生理盐水。禁食期间（包括桧烯处理组和溶剂对照组），移除笼内食物颗粒，禁食2天。[2]
- 组织采集和处理：2天后，对大鼠进行腹腔注射佐来替尔（40 mg/kg体重）和罗普宁（10 mg/kg体重）麻醉。通过足部捏压反射消失来确认麻醉效果良好。解剖并分离腓肠肌。将分离的肌肉用冰冷的PBS缓冲液冲洗，用4%多聚甲醛固定，切段，并包埋于石蜡中。[2]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
体外细胞毒性：浓度为 300 µM 的桧烯对 L6 成肌细胞的活力没有影响。在分化的 L6 肌管中，浓度为 10、30、100 和 300 µM 的桧烯均未影响其活力。在浓度为 1000 和 2000 µM 的较高浓度下，观察到肌管细胞毒性。[2]
参考文献

[1]. Biosynthesis and production of sabinene: current state and perspectives. Appl Microbiol Biotechnol. 2018 Feb;102(4):1535-1544.

[2]. Sabinene Prevents Skeletal Muscle Atrophy by Inhibiting the MAPK-MuRF-1 Pathway in Rats. Int J Mol Sci. 2019 Oct 8;20(19):4955.
其他信息
桧烯是一种侧柏烯型双环单萜，可从多种植物的精油中分离得到，是一种植物代谢产物。据报道，啤酒花（Humulus lupulus）、塞尔维亚茴香（Pimpinella serbica）以及其他具有相关数据的生物体中均含有桧烯。另见：黑胡椒（注：已移至此处）；胡萝卜籽油（注：已移至此处）；肉豆蔻（注：已移至此处）……桧烯是一种重要的天然双环单萜，可用作调味剂、香料添加剂、精细化学品和先进生物燃料。目前，由于缺乏合适的生产工艺，这种有价值的萜烯尚未实现商业化。微生物合成可能是桧烯生产的一种有前景的途径。本文综述了桧烯生物合成的代谢途径和关键酶，并重点介绍了近年来利用微生物发酵生产桧烯的最新进展。在这些研究中，研究人员已经确定了从简单的中间代谢物合成桧烯的通用途径。来自不同来源的桧烯合酶已被克隆和鉴定。此外，还构建了模式微生物大肠杆菌和酿酒酵母的异源系统来生产桧烯。本综述还提出了新的方向和尝试，以期深入了解桧烯的工业化生产。将传统分子生物学与新的基因组学和蛋白质组学分析工具相结合，将有助于更好地理解桧烯的生物合成，并提高微生物生产的潜力。[1]
来源：桧烯是一种单萜化合物，被鉴定为北美菊花精油（CBMEO）的生物活性成分。[2]
- 背景 生物活性：越来越多的证据表明，桧烯具有多种生物活性，包括抗真菌、抗炎和抗氧化活性，因此在治疗多种疾病方面具有潜在的应用价值。研究表明，桧烯具有清除DPPH自由基的活性。 [2]
- 本研究提出的机制：研究表明，桧烯通过调节ROS介导的MAPK/MuRF-1通路来减轻骨骼肌萎缩。它抑制ROS的生成，进而降低p38 MAPK和ERK1/2的磷酸化水平，导致E3泛素连接酶MuRF-1的表达降低，最终阻止肌纤维尺寸的缩小。[2]
- 潜在的治疗应用：研究结果表明，桧烯和CBMEO可能是有前景的治疗药物，具有治疗或预防与骨骼肌萎缩相关的疾病的潜力，例如由恶病质、营养不良、神经支配丧失、褥疮和衰老引起的疾病。[2]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C10H16
分子量
136.23
精确质量
136.125
元素分析
C, 88.16; H, 11.84
CAS号
3387-41-5
PubChem CID
18818
外观&性状
Colorless to light yellow liquid
密度
0.9±0.1 g/cm3
沸点
164.0±0.0 °C at 760 mmHg
闪点
36.7±0.0 °C
蒸汽压
2.6±0.1 mmHg at 25°C
折射率
1.484
LogP
4.13
tPSA
0
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
0
可旋转键数目(RBC)
1
重原子数目
10
分子复杂度/Complexity
179
定义原子立体中心数目
0
SMILES
CC(C12CCC(C1C2)=C)C
InChi Key
NDVASEGYNIMXJL-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C10H16/c1-7(2)10-5-4-8(3)9(10)6-10/h7,9H,3-6H2,1-2H3
化学名
4-methylidene-1-propan-2-ylbicyclo[3.1.0]hexane
别名
SABINENE; 3387-41-5; Sabinen; 4(10)-Thujene; 4-methylidene-1-(propan-2-yl)bicyclo[3.1.0]hexane; 1-Isopropyl-4-methylenebicyclo[3.1.0]hexane; Bicyclo[3.1.0]hexane, 4-methylene-1-(1-methylethyl)-; CHEBI:50027;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~33.33 mg/mL (~244.66 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 7.3405 mL 36.7026 mL 73.4053 mL
5 mM 1.4681 mL 7.3405 mL 14.6811 mL
10 mM 0.7341 mL 3.6703 mL 7.3405 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器
计算 重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？
  • 在分子量（MW）框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。
计算 重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：
  • 在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
  • 在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中
g/mol
计算 重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：
  • 分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
  • 摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。
/
计算 重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。
+
+
+
计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

临床试验信息
NCT Number Recruitment interventions Conditions Sponsor/Collaborators Start Date Phases
NCT01836393 COMPLETED Drug: Plavina cream Knee Osteoarthritis Khon Kaen University 2013-01 Phase 3
NCT05803031 COMPLETED Drug: Melaleuca Alternifolia Oil
Procedure: Non-surgical periodontal debridement		 Periodontal Pocket Ain Shams University 2022-11-01 Not Applicable
生物数据图片

  • Effect of sabinene on atrophy of starved myotubes. (A) Effect of sabinene on myotube viability. L6 myotubes were incubated in the presence or absence of sabinene (10–2000 μM) for 48 h, and cell viability was measured using an XTT assay. Cell response in the quiescent state was considered as 100% (n = 16). * p < 0.05 vs. untreated cells. (B,C) Effect of sabinene on starvation-induced atrophy of L6 myotubes. L6 myotubes were incubated with serum-free DMEM in the absence or presence of sabinene (10–300 μM) for 18 h and immunostained with anti-myosin heavy-chain (MYH)-2 and anti-DAPI antibodies. Diameters of myotubes were measured as described in Materials and Methods. Green and blue indicate MYH-2-positive myotubes and DAPI-positive nucleus, respectively. Scale bar: 100 μm. (B) Representative images. (C) Statistical graph obtained from panel (B). Myotube size in the quiescent state was considered as 100% (n = 12). * p < 0.05 vs. starved myotubes without sabinene treatment. # p < 0.05 vs. the quiescent state.[2]. Ryu Y, et al. Sabinene Prevents Skeletal Muscle Atrophy by Inhibiting the MAPK-MuRF-1 Pathway in Rats. Int J Mol Sci. 2019 Oct 8;20(19):4955.

  • Effects of sabinene on muscle atrophy-related signaling proteins in starved myotubes. (A) Effects of sabinene on muscle atrophy-related signaling proteins. L6 myotubes were incubated with serum-free DMEM in the absence or presence of sabinene (300 μM) for 18 h. Myotube lysates were immunoblotted with indicated antibodies. (B–D) Statistical graphs obtained from panel (A). Expression of each protein in the quiescent state was considered as 100% (n = 10 for each protein). * p < 0.05 vs. starved myotubes in the absence of sabinene. # p < 0.05 vs. the quiescent state. p-ERK1/2, phosphorylated ERK1/2; p-p38 MAPK, phosphorylated p38 MAPK.[2]. Ryu Y, et al. Sabinene Prevents Skeletal Muscle Atrophy by Inhibiting the MAPK-MuRF-1 Pathway in Rats. Int J Mol Sci. 2019 Oct 8;20(19):4955.

  • Effect of sabinene on the expression of reactive oxygen species in starved myotubes. (A,B) Effect of sabinene on the level of reactive oxygen species (ROS) in starved myotubes. L6 myotubes were incubated with serum-free DMEM in the absence or presence of sabinene (300 μM) for 18 h. Myotubes were loaded with fluorescent probe 2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diacetate (H2DCFDA). The level of intercellular ROS was determined using a fluorescence microscope (A) and a microplate reader (B). (A) Representative images obtained by a fluorescence microscope. Green color indicates ROS positive response. N = 3, Scale bar: 100 μm. (B) Statistical graph of results measured by a microplate reader. The cell response in the quiescent state is expressed as 100% (n = 16). * p < 0.05 vs. starved myotubes in the absence of sabinene. # p < 0.05 vs. the quiescent state. (C–F) Effects of ROS inhibition on expression levels of MuRF-1 and MAPKs in starved myotubes. L6 myotubes were incubated in serum-free DMEM in the absence or presence of NAC (1 mM) for 18 h. These myotubes were immunoblotted with indicated antibodies. Panel (C) consists of representative images showing the altered expression of MuRF-1 and phosphorylation of MAPKs after treatment with N-acetyl-l-cysteine (NAC). The other panels (D–F) are statistical graphs obtained from panel (C). Expression of each protein in a NAC-untreated state is expressed as 100% (n = 4). * p < 0.05 vs. starved myotubes in the absence of NAC.[2]. Ryu Y, et al. Sabinene Prevents Skeletal Muscle Atrophy by Inhibiting the MAPK-MuRF-1 Pathway in Rats. Int J Mol Sci. 2019 Oct 8;20(19):4955.
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