| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 100mg |
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| 500mg |
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| 靶点 |
α4-nicotinic acetylcholine receptor (α4-nAChR) [2]
- α7-nicotinic acetylcholine receptor (α7-nAChR) [2] - Acetylcholinesterase (AChE) [2] - Toll-like receptor 4 (TLR4) [3] - NF-κB pathway components (IRAK1, TAK1, I-κBα, p65) [3] - MAPK pathway components (ERK, JNK, p38) [3] - Th17 cell differentiation [3] - Treg cell differentiation [3] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在HeLa细胞中，沙参皂苷元（20–80 μM）通过依赖于caspase的线粒体途径诱导细胞凋亡。沙参皂苷元也通过caspase依赖的线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡。沙参皂苷元（60 μM）产生的活性氧（ROS）会导致线粒体功能障碍和内质网应激[1]。沙参皂苷元显著降低LPS刺激的巨噬细胞中NF-κB和MAPK的激活，以及IRAK1、TAK1和IκBα的磷酸化水平。此外，菝葜皂苷元可阻止M2巨噬细胞向M1巨噬细胞极化，并抑制LPS与巨噬细胞Toll样受体4的结合。[3] 在LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞中，菝葜皂苷元（2和5 μM）可抑制NF-κB活化，降低促炎细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的水平，并抑制COX-2和iNOS的表达。其抑制作用强于替莫皂苷AIII。菝葜皂苷元对肽聚糖诱导的巨噬细胞中的NF-κB活化或iNOS/COX-2表达无影响。 [3]
- 免疫印迹结果显示，2 μM 和 5 μM 的沙参皂苷元抑制了 LPS 刺激的腹腔巨噬细胞中 IRAK1、TAK1、I-κBα 和 p65 的磷酸化。[3] - 共聚焦显微镜检测结果显示，2 μM 和 5 μM 的沙参皂苷元抑制了 LPS 诱导的腹腔巨噬细胞中 NF-κB p65 亚基的核转位。[3] - 2 μM 和 5 μM 的沙参皂苷元抑制了 LPS 诱导的腹腔巨噬细胞中 ERK、JNK 和 p38 MAPK 的磷酸化。 [3] - 通过流式细胞术和共聚焦显微镜检测发现，2 μM 和 5 μM 的沙参皂苷元以剂量依赖的方式抑制 Alexa Fluor 488 标记的 LPS 与腹腔巨噬细胞上 TLR4 的结合。[3] - 在 Th17 极化条件下（抗 CD3、抗 CD28、IL-6、TGF-β）刺激脾细胞 CD4+ T 细胞后，2 μM 和 5 μM 的沙参皂苷元显著抑制了 IL-17+ T 细胞的比例（从 37.1% 降至更低），表明其抑制了 Th17 细胞的分化。 [3] - 在OB大鼠模型中，沙参皂苷元（20和40 mg/kg）治疗可增加海马α4-nAChR和α7-nAChR蛋白表达，并降低AChE活性和表达，免疫组织化学和蛋白质印迹结果均证实了这一点。[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
菝葜皂苷元（20 和 40 mg/kg）可增强运动活性，并显著纠正嗅球切除术（OB）引起的蔗糖偏好缺陷。与 OB 组相比，菝葜皂苷元组（20 和 40 mg/kg）的静止不动时间显著缩短，乙酰胆碱酯酶（AChE）蛋白表达水平显著升高。此外，与 OB 组大鼠相比，菝葜皂苷元组（20 和 40 mg/kg）的 α7-nAChR 和 α4-nAChR 蛋白表达水平也显著升高[2]。菝葜皂苷元（5 或 10 mg/kg，口服）通过抑制 TNBS 诱导的结肠缩短和髓过氧化物酶活性，降低小鼠体内 NF-κB 活化，并降低白细胞介素 (IL)-1β、肿瘤坏死因子 (TNF)-α 和 IL-6 的水平，同时提高 IL-10 的水平[3]。
在嗅球切除 (OB) 大鼠中，菝葜皂苷元（20 和 40 mg/kg，口服给药 14 天）逆转了抑郁样行为：显著恢复了对蔗糖的偏好（分别为 66.99% 和 80.12% 对比 OB 组的 55.40%，p<0.05 和 p<0.01），并减少了过度活动（行走次数：分别为 21.05 和 18.36 对比 OB 组的 47.10，p<0.05 和 p<0.01；站立次数：3.07）。与OB组相比，对照组大鼠的梳理行为显著增加（分别为2.32和4.87，而OB组为6.48，p<0.01）；强迫游泳试验中，对照组大鼠的静止不动时间显著减少（分别为103.67和82.19秒，而OB组为142.15秒，p<0.01）。[2] 在OB大鼠中，菝葜皂苷元（20和40 mg/kg）显著逆转了OB诱导的海马乙酰胆碱酯酶（AChE）活性（p<0.01）和AChE蛋白表达（p<0.01）的增加，并增加了海马中α4-nAChR和α7-nAChR蛋白的表达（p<0.01）。 [2] 在TNBS诱导的结肠炎小鼠模型中，连续3天口服沙参皂苷元（5和10 mg/kg）可显著抑制结肠缩短，降低结肠炎大体评分，抑制髓过氧化物酶活性（10 mg/kg组较TNBS组抑制52.1%，p<0.05），并改善水肿和上皮细胞损伤。沙参皂苷元还能恢复TNBS抑制的紧密连接蛋白ZO-1、occludin和claudin-1的表达。[3] 在TNBS诱导的结肠炎小鼠模型中，沙参皂苷元（5和10 mg/kg）可降低结肠中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-17的水平，同时增加IL-10的表达。它抑制M1型巨噬细胞标志物（TNF-α、IL-1β、精氨酸酶II）的表达，并诱导M2型巨噬细胞标志物（IL-10、精氨酸酶I）的表达。此外，菝葜皂苷元还能抑制TNBS诱导的结肠组织中COX-2、iNOS的表达以及IRAK1、TAK1、I-κBα和p65的磷酸化。[3] 在TNBS诱导的结肠炎小鼠模型中，流式细胞术分析显示，菝葜皂苷元（5和10 mg/kg）抑制结肠固有层中Th17细胞的分化，并促进Treg细胞的分化。它还能降低IFN-γ和IL-17的表达，并增加Foxp3的表达。[3] |
| 酶活实验 |
乙酰胆碱酯酶（AChE）活性测定：制备大鼠海马组织匀浆。使用商业化的AChE活性测定试剂盒测定AChE活性。在412 nm处测定吸光度，AChE活性以U/mg蛋白表示。菝葜皂苷元（20和40 mg/kg）显著逆转了嗅球（OB）诱导的AChE活性升高（p<0.01）。[2]
- AChE、α4-nAChR、α7-nAChR的免疫印迹分析：将海马组织蛋白提取物进行10% SDS-PAGE电泳分离，然后转移至PVDF膜上。将膜用10%脱脂奶粉封闭，然后在4℃下与兔多克隆抗AChE抗体（1:1000）、小鼠单克隆抗α4-nAChR抗体（1:100）、山羊多克隆抗α7-nAChR抗体（1:100）和小鼠单克隆抗GAPDH抗体（1:500）孵育过夜。洗涤后，将膜与HRP标记的二抗孵育1小时。使用ECL化学发光检测系统进行密度测定。[2] - NF-κB和MAPK磷酸化分析：在有或无菝葜皂苷元（2和5 μM）的情况下，用LPS（100 ng/mL）刺激腹腔巨噬细胞90分钟。裂解细胞，并通过8-10% SDS-PAGE分离蛋白质，然后转移至硝酸纤维素膜。将膜用 5% 脱脂奶粉（溶于 PBST）封闭，然后用针对 p-IRAK1、IRAK1、p-TAK1、TAK1、pI-κBα、I-κBα、p-p65、p65、p-JNK、JNK、p-p38、p38、p-ERK、ERK、p-IKKβ、IKKβ 或 β-actin 的抗体进行探针检测，再与 HRP 标记的二抗孵育。使用 ECL 试剂盒显色。[3] - 流式细胞术 LPS-TLR4 结合分析：将腹腔巨噬细胞在有或无沙瑞皂苷元（2 和 5 μM）的情况下，用 Alexa Fluor 488 标记的 LPS（1 μg/mL）处理 10、20 或 30 分钟。细胞用含3%蔗糖和4%多聚甲醛的PBS固定20分钟，洗涤后，用碘化丙啶（10 μg/mL）孵育10分钟，然后用流式细胞仪进行分析。[3] - 共聚焦显微镜LPS-TLR4结合实验：腹腔巨噬细胞在有或无菝葜皂苷元（2和5 μM）的情况下，用Alexa Fluor 488标记的LPS（1 μg/mL）刺激20分钟。细胞用4%多聚甲醛和3%蔗糖固定20分钟，然后在共聚焦显微镜下观察。[3] |
| 细胞实验 |
腹腔巨噬细胞的分离和培养：小鼠腹腔注射4%硫代乙醇酸钠溶液，4天后处死。用RPMI 1640培养基冲洗腹腔，200×g离心10分钟。使用生物素标记的抗小鼠F4/80抗体和链霉亲和素磁珠分离巨噬细胞。将巨噬细胞（1×10⁶个细胞/孔）接种于12孔板中，在含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基中于37℃培养2天。为检测其抗炎作用，将巨噬细胞与100 ng/mL脂多糖（LPS）或肽聚糖一起孵育，或不与沙尔沙皂苷元（2、5或10 μM）一起孵育。 [3]
- 细胞因子测定的ELISA：将巨噬细胞（0.5×10^6 个细胞）在有或无菝葜皂苷元（2 和 5 μM）的情况下，用LPS（100 μg/mL）刺激20小时。收集上清液，并使用ELISA试剂盒测定细胞因子水平（TNF-α、IL-1β、IL-6）。[3] - COX-2和iNOS的免疫印迹分析：将巨噬细胞按上述方法处理，裂解后，使用针对COX-2、iNOS和β-actin的抗体进行免疫印迹分析。[3] - NF-κB核转位共聚焦显微镜分析：将腹腔巨噬细胞在有或无菝葜皂苷元（2 和 5 μM）的情况下，用LPS（100 ng/mL）刺激90分钟。细胞用4%多聚甲醛固定，用0.2% Triton X-100透化，在4℃下用山羊抗p65多克隆抗体染色2小时，然后与Alexa 488标记的二抗和碘化丙啶（10 μg/mL）孵育1小时。用共聚焦显微镜采集图像。[3] - 体外Th17细胞分化实验：从小鼠中制备脾细胞，在Th17极化条件下（固定化抗CD3（1 μg/mL）和抗CD28（1 μg/mL），以及IL-6（20 ng/mL）和TGF-β（1 ng/mL）），加入sarsasapogenin（2或5 μM）刺激CD4+ T细胞4天。然后对细胞进行表面CD4和胞内IL-17染色，并通过流式细胞术进行分析。 [3] - 细胞毒性试验：在实验条件下，用沙参皂苷元（2、5、10 μM）处理腹腔巨噬细胞，并评估细胞活力。结果表明，沙参皂苷元在这些浓度下未显示出细胞毒性。[3] |
| 动物实验 |
嗅球切除术（OB）抑郁症大鼠模型：雄性Sprague-Dawley大鼠（180-220 g）用10%水合氯醛（3.3 mL/kg，腹腔注射）麻醉。通过正中切口暴露嗅球上方的颅骨，并在前囟前8 mm、中线外侧2 mm处钻两个孔（直径2 mm）。抽吸双侧嗅球。用玻璃离子水门汀填充孔洞，并缝合头皮。假手术组大鼠接受相同的手术操作，但不抽吸嗅球。术后3天，大鼠每天肌注青霉素（0.2 mL/300 g，8×10⁵ U）。恢复14天后，开始药物治疗。分别给予大鼠沙参皂苷元（20 或 40 mg/kg）或阿米替林（10 mg/kg），每日一次，连续14天（第15-28天）。行为学测试后，处死大鼠并评估损伤情况。组织切除量<15%的动物被排除。[2]
- 蔗糖偏好测试：大鼠先给予1% (w/v) 蔗糖溶液24小时，然后自由摄取蔗糖和水48小时。禁食禁水23小时后，大鼠可自由摄取水和1%蔗糖溶液1小时。蔗糖偏好率（%）=（蔗糖摄入量/（蔗糖摄入量+水摄入量））×100。[2] - 旷场测试：将大鼠单独放置于一个100×100×40 cm的金属笼中央，笼底被分隔成16个区域。 5分钟内人工记录穿越线次数和站立频率。[2] - 强迫游泳试验 (FST)：将大鼠强迫游入装有新鲜水（25±1°C）的圆柱体（高40厘米×直径18厘米）中，水深30厘米，持续6分钟。记录最后4分钟的总不动时间。[2] - TNBS诱导的小鼠结肠炎模型：将雄性C57BL/6小鼠（19-22克，7周龄）麻醉后，用细圆头针经直肠注射2.5% (w/v) TNBS溶液（100微升，溶于50%乙醇）。正常对照组仅注射溶剂。TNBS处理后，连续3天，每天口服一次溶于2% Tween 80的菝葜皂苷元（5或10毫克/千克）或柳氮磺胺吡啶（50毫克/千克）。小鼠在末次给药后18小时处死。取出结肠进行宏观评分（0-5分制）、髓过氧化物酶（MPO）活性测定、组织学分析、ELISA检测和免疫印迹分析。[3] - 髓过氧化物酶（MPO）测定：将结肠组织在含0.5%十六烷基三甲基溴化铵的10 mM磷酸钾缓冲液（pH 7.0）中匀浆，于4℃下以20,000×g离心30分钟。取上清液50 μL加入含有1.6 mM四甲基联苯胺和0.1 mM H₂O₂的反应混合物中，于37℃孵育3分钟，并在650 nm处测定吸光度。MPO活性以单位/mg蛋白表示。[3] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在小鼠体内，口服的皂苷前体——菝葜皂苷AIII——会被肠道菌群代谢为菝葜皂苷元。一项研究中，小鼠口服菝葜皂苷AIII（100 mg/kg），12小时后，在结肠液中检测到了菝葜皂苷元，同时菝葜皂苷AIII和菝葜皂苷元均存在，其中菝葜皂苷元是主要成分。将菝葜皂苷AIII与小鼠粪便悬液孵育，也会导致其转化为菝葜皂苷元。这表明菝葜皂苷元是菝葜皂苷AIII的肠道代谢产物。[3] 菝葜皂苷元的疏水性比其母体化合物菝葜皂苷AIII更强，这可能会影响其吸收和药理活性。[3]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外细胞毒性试验：在所用的实验条件下，沙参皂苷元（2、5 和 10 μM）对小鼠腹腔巨噬细胞未显示出细胞毒性作用。[3]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
(25S)-5β-螺甾烷-3β-醇是一种皂苷。据报道，薯蓣皂苷元存在于薯蓣皂苷元、胡芦巴和其他具有相关数据的生物体中。
知母皂苷元是知母（百合科）的主要活性成分，具有抗氧化特性。研究表明，它能促进神经发生，改善认知障碍，并通过增加记忆障碍大鼠模型大脑中乙酰胆碱受体的密度来改善记忆。此外，通过行为绝望测试评估，它还具有抗抑郁样作用。[2] - 在OB大鼠模型中，海马中异常的胆碱能信号传导会导致抑郁症的发生。知母皂苷元通过增加α4-和α7-nAChR的表达以及使AChE活性正常化，逆转抑郁样行为并调节胆碱能系统功能障碍。 [2] - 菝葜皂苷元在体外和体内抑制炎症反应方面比其母体化合物替莫皂苷AIII更有效。其抗炎机制包括抑制脂多糖（LPS）与巨噬细胞上TLR4的结合、阻断NF-κB和MAPK信号通路以及恢复Th17/Treg细胞的平衡。[3] - 口服替莫皂苷AIII经肠道菌群代谢为菝葜皂苷元，这两种化合物均可同时改善结肠炎等炎症性疾病。[3] |
| 分子式 |
C27H44O3
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|---|---|
| 分子量 |
416.6365
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| 精确质量 |
416.329
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| CAS号 |
126-19-2
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| PubChem CID |
92095
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.1±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
516.6±20.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
194°C
|
| 闪点 |
266.2±21.8 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±3.0 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.552
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| LogP |
6.21
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| tPSA |
38.69
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
0
|
| 重原子数目 |
30
|
| 分子复杂度/Complexity |
694
|
| 定义原子立体中心数目 |
12
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| SMILES |
C[C@H]1CC[C@@]2([C@H]([C@H]3[C@@H](O2)C[C@@H]4[C@@]3(CC[C@H]5[C@H]4CC[C@H]6[C@@]5(CC[C@@H](C6)O)C)C)C)OC1
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| InChi Key |
GMBQZIIUCVWOCD-WWASVFFGSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C27H44O3/c1-16-7-12-27(29-15-16)17(2)24-23(30-27)14-22-20-6-5-18-13-19(28)8-10-25(18,3)21(20)9-11-26(22,24)4/h16-24,28H,5-15H2,1-4H3/t16-,17-,18+,19-,20+,21-,22-,23-,24-,25-,26-,27+/m0/s1
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| 化学名 |
(1R,2S,4S,5'S,6R,7S,8R,9S,12S,13S,16S,18R)-5',7,9,13-tetramethylspiro[5-oxapentacyclo[10.8.0.02,9.04,8.013,18]icosane-6,2'-oxane]-16-ol
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~3.57 mg/mL (~8.57 mM)
Ethanol : ~1 mg/mL (~2.40 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4002 mL | 12.0008 mL | 24.0015 mL | |
| 5 mM | 0.4800 mL | 2.4002 mL | 4.8003 mL | |
| 10 mM | 0.2400 mL | 1.2001 mL | 2.4002 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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