HCV RNA replication (indirectly, as an impurity of sofosbuvir). Sofosbuvir impurity C is an epimer and impurity of sofosbuvir. Unlike sofosbuvir, which is an active inhibitor of HCV RNA replication in the HCV replicon assay with potent anti-HCV activity, this impurity exhibits reduced or negligible antiviral activity. It is primarily used as an analytical reference standard for quality control.

索非布韦杂质C的体外研究主要集中于对其作为杂质的特性描述，而非其药理活性。与在HCV复制子检测中表现出强效抗HCV活性的索非布韦不同，该杂质不具有显著的抗病毒活性。它被用作分析化学应用中的参考标准，包括方法开发、方法验证和质量控制。

由于索非布韦杂质C通常用作参考标准和杂质，因此一般不进行其体内研究。体内疗效研究均使用索非布韦进行，该药物已获准用于治疗慢性丙型肝炎病毒感染。药品中杂质C的含量受到严格控制，以确保药品的质量和安全性。

索非布韦杂质C的体外检测主要侧重于分析而非药理学。高效液相色谱（HPLC）和超高效液相色谱（UPLC）方法用于检测和定量索非布韦原料药和制剂中的该杂质。质谱（LC-MS/MS）用于结构确认和鉴定。该化合物在方法开发和验证研究中用作参考标准，并遵循ICH杂质控制指南。

由于索非布韦杂质C不具有显著的抗病毒活性，因此通常不进行体外细胞试验。索非布韦本身会通过HCV复制子试验来评估其抗病毒活性，但杂质C的活性较低。只有当担心该杂质可能产生生物学效应时才会进行细胞试验，而目前该杂质并无此类生物学效应。

由于索非布韦杂质C仅用作参考标准而非药理活性成分，因此通常不进行其体内动物研究。索非布韦用于治疗丙型肝炎病毒（HCV）感染时，会进行体内药代动力学和药效学研究。在生物分析研究中，杂质C可作为药代动力学样品杂质分析的一部分进行监测。

吸收、分布和排泄
索非布韦与人血浆蛋白的结合率约为61-65%，且在1 μg/mL至20 μg/mL的浓度范围内，该结合率与药物浓度无关。GS-331007在人血浆中的蛋白结合率极低。健康受试者单次服用400 mg (14)C-索非布韦后，血液与血浆中(14)C放射性的比值约为0.7。已在健康成人受试者和慢性丙型肝炎患者中评估了索非布韦及其主要循环代谢物GS-331007的药代动力学特性。口服SOVALDI后，无论剂量水平如何，索非布韦均能被吸收，并在给药后约0.5-2小时达到血浆峰浓度。GS-331007的血浆峰浓度出现在给药后2-4小时。基于对接受利巴韦林（联合或不联合聚乙二醇干扰素）治疗的HCV基因1至6型患者的群体药代动力学分析，索非布韦（N=838）和GS-331007（N=1695）的几何平均稳态AUC0-24分别为969 ng·hr/mL和6790 ng·hr/mL。与单独接受索非布韦治疗的健康受试者（N=272）相比，HCV感染患者的索非布韦AUC0-24增加了60%，而GS-331007的AUC0-24降低了39%。在200 mg至1200 mg的剂量范围内，索非布韦和GS-331007的AUC值接近剂量比例关系。单次口服 400 mg (14)C-索非布韦后，平均总回收率超过 92%，其中约 80%、14% 和 2.5% 分别从尿液、粪便和呼出气中回收。尿液中回收的索非布韦主要以 GS-331007 的形式存在 (78%)，而索非布韦本身仅占 3.5%。这些数据表明，肾脏清除是 GS-331007 的主要消除途径。妊娠大鼠研究表明，索非布韦可以穿过胎盘。胎儿血液和脑组织中索非布韦的放射性高于母鼠，但胎儿肝脏和肾脏中索非布韦的放射性低于母鼠相应器官。在产后第2天，幼犬乳汁中也定量检测到了索非布韦衍生的放射性物质，但哺乳期幼犬似乎并未显著暴露于药物衍生的放射性物质。乳汁与血浆的放射性比值在1小时时为0.1，在24小时时为0.8。有关索非布韦的吸收、分布和排泄的更完整数据（共6项），请访问HSDB记录页面。代谢/代谢物：体外人肝微粒体研究表明，索非布韦是组织蛋白酶A (Cat A) 和羧酸酯酶1 (CES1) 的有效底物。未发现尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶 (UGT) 或含黄素单加氧酶 (FMO) 代谢的证据。 Cat A 和 CES1 切割后的后续激活步骤包括组氨酸三联体核苷酸结合蛋白 1 (HINT1) 去除氨基酸，以及尿苷单磷酸-胞苷单磷酸 (UMP-CMP) 激酶和核苷二磷酸 (NDP) 激酶的磷酸化。体外数据表明，Cat A 优先水解索非布韦（S-非对映异构体），而 CES1 不表现出立体选择性。这与使用 GS-9851 的研究结果一致，该研究表明，在含有 A 克隆复制子的肝源性细胞系中，GS-9851 代谢为三磷酸的效率较低，与原代人肝细胞相比，这些细胞系表现出较低的 CES1 活性和较高的 Cat A 活性。 GS-9851 与大鼠、犬、猴和人肝细胞孵育后，在所有物种中均转化为三磷酸 GS-461203，其中在人肝细胞中的转化效率最高。口服索非布韦后，其在犬肝脏中迅速转化为三磷酸，并在所有评估时间点均为主要代谢物，半衰期约为 18 小时。在猴体内未检测到活性代谢物 GS-461203。此外，虽然在大鼠肝脏中检测到了 GS-461203，但在小鼠肝脏中未检测到。索非布韦在肝脏中广泛代谢，生成具有药理活性的核苷类似物三磷酸 GS-461203。其代谢活化途径包括：首先，由人组织蛋白酶 A (CatA) 或羧酸酯酶 1 (CES1) 催化的羧酸酯部分水解；其次，组氨酸三核苷酸结合蛋白1 (HINT1) 可催化磷酸化；最后，嘧啶核苷酸生物合成途径也可用于磷酸化。去磷酸化产生核苷代谢物GS-331007，该代谢物不能被有效重新磷酸化，且体外缺乏抗HCV活性。所有物种均检测到了GS-331007和GS-566500，其中GS-331007是所有物种和所有基质中的主要药物相关物质。在所有接受索非布韦治疗的物种中，血浆、尿液和粪便中检测到的主要代谢物均为GS-331007，占总暴露量的80%以上。此外，在大鼠肝脏和血浆中也检测到了GS-566500。非妊娠、妊娠和产后大鼠乳汁中的代谢物谱总体相似，其中GS-331007及其两种硫酸盐结合物是主要代谢物。犬单次口服20 mg/kg索非布韦后，在血浆中鉴定出三种代谢物：GS-331007、GS-566500和M4（推测为GS-606965的葡萄糖醛酸化产物），分别占总血浆AUC的93.4%、1.6%和0.5%。母体化合物占4.5%。在犬（和大鼠）中，大部分放射性剂量在8至12小时内从尿液中回收。有关索非布韦代谢物/代谢物数据的更完整信息（共7种代谢物），请访问HSDB记录页面。索非布韦和 GS-331007 的中位终末半衰期分别为 0.4 小时和 27 小时。

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鉴于杂质C与索非布韦作为差向异构体的结构相似性，预计其药代动力学性质与索非布韦相似。索非布韦是一种核苷酸类似物前药，代谢后生成活性尿苷类似物三磷酸。该化合物的分子量为529.45，分子式为C22H29FN3O9P。杂质C不用于治疗，通常也不对其进行药代动力学研究。

妊娠期和哺乳期用药
◉ 哺乳期用药概述
虽然有一名婴儿在接受丙型肝炎病毒感染治疗期间母乳喂养了3周而未出现发育异常，但目前关于索非布韦治疗期间哺乳期母亲的研究尚不充分。如果母亲单独使用索非布韦或与雷迪派韦（Harvoni）联合使用，则无需停止母乳喂养。一些资料表明，当索非布韦与利巴韦林联合使用时，应避免母乳喂养。
丙型肝炎病毒不会通过母乳传播，而且母乳已被证明可以灭活丙型肝炎病毒（HCV）。然而，美国疾病控制与预防中心（CDC）建议，如果感染丙型肝炎病毒的母亲出现乳头皲裂或出血，则应考虑母乳喂养。目前尚不清楚此警告是否适用于正在接受丙型肝炎治疗的母亲。感染丙型肝炎病毒 (HCV) 的母亲所生的婴儿应接受 HCV 检测；建议进行核酸检测，因为在婴儿出生后的前 18 个月内，婴儿体内存在母体抗体，而此时婴儿尚未产生免疫反应。◉ 对母乳喂养婴儿的影响：一位母亲在妊娠 31 周时开始服用索非布韦 400 mg 和雷迪帕韦 90 mg，每日一次，持续 12 周，以治疗其慢性丙型肝炎感染。婴儿在产后母乳喂养了 3 周（未说明喂养情况）。该婴儿接受了 1 年的随访，结果显示其生长发育正常。◉ 对哺乳和母乳的影响：截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

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由于索非布韦杂质C仅用作参考标准，因此其毒理学数据尚未得到充分记录。针对索非布韦在丙型肝炎病毒（HCV）感染治疗中的应用，已开展了毒性研究。为确保药品质量和安全，对药品中的杂质C进行管控。处理化学品时，应遵循标准的安全预防措施。

作用机制
索非布韦是一种抗病毒药物（泛基因型聚合酶抑制剂），直接作用于丙型肝炎病毒（HCV）。HCV RNA复制由膜相关多蛋白复制复合物（MAP）介导。HCV聚合酶（NS5B蛋白）是一种RNA依赖性RNA聚合酶（RdRp）。它是该复制复合物的必需起始和催化亚基，对病毒复制周期至关重要。HCV NS5B RdRp在人类中没有同源物。索非布韦是一种单磷酸化嘧啶核苷酸前药，在细胞内代谢生成具有药理活性的尿苷类似物三磷酸（GS-461203）。GS-461203与天然核苷酸竞争，在HCV NS5B介导的病毒基因组复制过程中掺入新生RNA链中。 GS-461203 与内源性嘧啶核苷酸的不同之处在于，其 2' 位点被甲基和氟官能团修饰。GS-461203 掺入新生 RNA 后，会显著降低 RNA 依赖性 RNA 聚合酶 (RdRp) 进一步延伸 RNA 的效率，导致 RNA 合成过早终止。病毒复制的停止导致 HCV 病毒载量迅速下降，最终使 HCV 从体内清除。

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未获准用于临床。

C22H29FN3O9P

529.452530622482

529.162

1496552-28-3

Sofosbuvir;1190307-88-0;PSI-7976;1190308-01-0;Sofosbuvir-d6;1868135-06-1;Sofosbuvir-13C,d3

90055712

White to off-white crystalline solid

1.41±0.1 g/cm3 (20 ºC 760 Torr)

1

153

3

11

11

36

913

6

O=[P@@](N[C@H](C)C(OC(C)C)=O)(OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@](F)(C)[C@H](N2C=CC(NC2=O)=O)O1)OC3=CC=CC=C3

TTZHDVOVKQGIBA-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C22H29FN3O9P/c1-13(2)33-19(29)14(3)25-36(31,35-15-8-6-5-7-9-15)32-12-16-18(28)22(4,23)20(34-16)26-11-10-17(27)24-21(26)30/h5-11,13-14,16,18,20,28H,12H2,1-4H3,(H,25,31)(H,24,27,30)

propan-2-yl 2-[[[5-(2,4-dioxopyrimidin-1-yl)-4-fluoro-3-hydroxy-4-methyloxolan-2-yl]methoxy-phenoxyphosphoryl]amino]propanoate

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。