PSI-7976 is a prodrug that must be metabolized to the active triphosphate form (PSI-7409) to inhibit the HCV NS5B RNA-dependent RNA polymerase (RdRp). The active triphosphate metabolite PSI-7409 has been previously shown to be a potent inhibitor of HCV NS5B RdRp with a Ki value of 0.42 μM. [1]
The primary target of PSI-7976 is the HCV NS5B RNA-dependent RNA polymerase. NS5B is a key enzyme in the HCV life cycle, responsible for the synthesis of viral RNA. PSI-7976 is a prodrug that is metabolized intracellularly to its active triphosphate form. The active triphosphate acts as an alternative substrate for NS5B. When the triphosphate is incorporated into the growing RNA chain by the polymerase, it lacks a 3'-hydroxyl group, which prevents the addition of the next nucleotide, leading to chain termination and the inhibition of viral RNA synthesis. This mechanism of action is known as "non-obligate chain termination" and is a common strategy for nucleoside/nucleotide analogs. The selectivity of PSI-7976 for the viral polymerase over human polymerases is a key feature of its activity. The compound is activated in the liver by a series of enzymatic steps. The first step involves the removal of the phosphoramidate group by cathepsin A (CatA) or carboxylesterase 1 (CES1), followed by a series of phosphorylation steps to generate the active triphosphate. PSI-7976 is a diastereoisomer of sofosbuvir, and its potency and selectivity profile may differ from the approved drug.

PSI-7976抑制A克隆HCV复制子细胞中HCV RNA的复制，其EC50为1.07 ± 0.04 μM，EC90为2.99 ± 0.82 μM。相比之下，PSI-7977（另一种非对映异构体）的EC50为0.092 ± 0.005 μM，EC90为0.29 ± 0.08 μM，而异构体混合物PSI-7851的EC50为0.149 ± 0.001 μM，EC90为0.51 ± 0.16 μM。 [1]
在利用A克隆细胞（表达CatA但不表达CES1）进行的细胞代谢研究中，与PSI-7977相比，用50 μM PSI-7976孵育细胞会导致活性三磷酸PSI-7409的细胞内浓度降低。在原代人肝细胞（同时表达CatA和CES1）中，当细胞与PSI-7976、PSI-7977或PSI-7851孵育时，生成的PSI-7409量相似。[1]

---

将PSI-7976和PSI-7977（两种已知在HCV复制子试验中对HCV RNA复制具有更强抑制作用的非对映异构体）组合，可得到PSI-7851。与PSI-7977相比，PSI-7976更容易被羧酸酯酶1 (CES1)水解。此外，根据动力学数据[1]，PSI-7976 比组织蛋白酶 A (CatA) 更有效地作为 CES1 的底物。体外研究表明，PSI-7976 是 HCV RNA 复制的强效抑制剂。其活性通常使用 HCV 复制子检测法进行测定，该方法是一种基于细胞的系统，可在人肝癌细胞系 (Huh-7) 中复制 HCV RNA。在这些检测中，用不同浓度的 PSI-7976 处理复制子细胞，并通过实时 PCR 或使用与 HCV 复制子连接的报告基因（例如，荧光素酶）来定量 HCV RNA 的水平。PSI-7976 已被证明能抑制 HCV RNA 复制，其 EC50 值为 1.07 μM。该化合物是一种前药，其体外活性取决于细胞将其代谢为活性三磷酸盐的能力。活性三磷酸盐本身已被证明是NS5B聚合酶的强效抑制剂，酶活性测定证实了这一点。PSI-7976也被用于体外研究，以了解其耐药机制。通过在药物存在的情况下筛选耐药复制子克隆，研究人员可以识别NS5B基因中赋予耐药性的突变，从而深入了解药物的结合位点和作用机制。这些体外研究对于表征该化合物的抗病毒活性以及将其与更著名的非对映异构体索非布韦进行比较至关重要。

PSI-7976 的体内活性主要在丙型肝炎病毒 (HCV) 感染的动物模型中进行研究，例如人源化肝脏嵌合小鼠模型。在这些模型中，小鼠被移植人肝细胞，然后感染 HCV。之后，用 PSI-7976 治疗这些动物，并随时间推移测量病毒载量的降低情况。预计该化合物在体内将表现出与索非布韦类似的强效抗 HCV 活性。PSI-7976 的前药特性旨在提高其口服生物利用度，并将活性核苷酸递送至 HCV 复制的主要部位——肝脏。动物药代动力学研究将评估母体药物及其代谢物的血浆浓度，以及肝脏中活性三磷酸盐的水平。这些研究对于了解该化合物的体内疗效和确定合适的给药方案至关重要。然而，由于PSI-7976是一种研究化合物而非候选药物，因此其体内数据不如索非布韦那样广泛。预计其体内行为与其非对映异构体相似。

PSI-7976 组织蛋白酶 A (CatA) 水解：纯化的重组人 CatA 在 25 mM MES 缓冲液（pH 6.0）中，加入 5 mM DTT，于 37°C 下与组织蛋白酶 L (1 μg/ml) 孵育 30 分钟进行活化，随后用 10 μM E-64 灭活 CatL。CatA 活性测定在 100 μl 反应体系中进行，该体系包含活化的 CatA (0.1 μg)、100 μM PSI-7976（溶于 25 mM MES 缓冲液，pH 6.0）、100 mM NaCl、1 mM DTT 和 0.1% Nonidet P-40。在 37°C 孵育 1 小时后，反应混合物经 YM-10 Microcon 过滤器过滤以去除蛋白质，并将滤液用 PARTISIL 10 SAX 色谱柱进行 HPLC 分析，流动相为缓冲液 B（1 M KH2PO4，pH 3.5），梯度从 0% 到 100%，历时 90 分钟。监测了中间体 PSI-352707 随时间变化的生成情况。当 CatA 与 PSI-7976 孵育 150 分钟时，生成的 PSI-352707 比以 PSI-7977 为底物时少约 18 倍。[1]
使用 ¹⁴C 标记化合物测定了 PSI-7976 与 CatA 的稳态动力学参数。反应在 37°C 下进行，反应体系为 100 μl，其中包含不同浓度的 PSI-7976，缓冲液为 50 mM Hepes（pH 7.0）、100 mM NaCl 和 0.1% Nonidet P-40，最终活化的 CatA 蛋白浓度为 0.1 μg/ml。在每个时间点取 10 μl 反应液点样于 DE81 滤纸上，用 1 mM 甲酸铵溶液洗涤 3 次，每次 5 分钟，然后用乙醇洗涤，干燥后用液体闪烁计数器计数。动力学参数为：Km = 880 ± 430 μM，kcat = 0.30 ± 0.07 min⁻¹，kcat/Km = 0.0003 μM⁻¹•min⁻¹。 [1]
羧酸酯酶1 (CES1) 对PSI-7976的水解：在含有100 μM PSI-7976和0.4 μg CES1的50 mM Tris/HCl缓冲液（pH 7.5）中进行CES1活性测定。37°C孵育1小时后，过滤样品并按上述方法进行HPLC分析。PSI-7976与CES1的水解产物生成量随时间增加。PSI-7976与CES1的动力学参数为：Km = 51 ± 1 μM，kcat = 0.27 ± 0.02 min⁻¹，kcat/Km = 0.0053 μM⁻¹•min⁻¹。相比之下，PSI-7977与CES1的动力学较为复杂，无法确定其动力学参数。 [1]

---

PSI-7976 的体外酶活性测定旨在测量其活性三磷酸代谢物对 HCV NS5B 聚合酶的抑制作用。该酶活性测定通常使用纯化的重组 HCV NS5B 聚合酶、模板-引物 RNA 和四种核苷三磷酸 (NTP) 进行，其中一种 NTP 为放射性标记物。将不同浓度的 PSI-7976 活性三磷酸添加到反应体系中。测定放射性标记的 NTP 掺入新合成的 RNA 的情况，并确定聚合酶活性的抑制程度。IC50 值由剂量-反应曲线计算得出。这些测定可以直接测量化合物在分子水平上的效力。为了研究其作用机制，可以检测活性三磷酸是否能够掺入 RNA 链并导致链终止。这可以通过对 RNA 产物进行测序或使用质谱法鉴定掺入的核苷酸来实现。这些体外酶测定对于确认 PSI-7976 的抗病毒活性是由于直接抑制 NS5B 聚合酶所致至关重要。

PSI-7976 HCV复制子检测：将A克隆HCV复制子细胞以1500个细胞/孔的密度接种于96孔板中，并加入2倍系列稀释的药物（总体积100 μl/孔）。将培养板置于37°C、5% CO2培养箱中培养4天。弃去上清液，使用RNeasy 96试剂盒提取总RNA，并按所述方法进行扩增。测定HCV RNA的ΔCt值，并计算EC90。使用“无药物”对照来确定HCV RNA的最大浓度。PSI-7976的EC50为1.07 ± 0.04 μM，EC90为2.99 ± 0.82 μM。 [1]
细胞代谢研究：将A克隆细胞（约5×10⁶个细胞/T75培养瓶）或原代人肝细胞（约5×10⁶个细胞/T75培养瓶）接种于T75培养瓶中，并过夜培养以使其贴壁。然后将细胞置于含50 μM PSI-7976的新鲜培养基中，在37℃、5% CO₂条件下培养至多24小时。在选定的时间点，用胰蛋白酶消化细胞，计数，以1200 rpm离心5分钟，并将细胞沉淀重悬于1 ml冰冷的60%甲醇中，于-20℃过夜培养。将样品以14000 rpm离心5分钟，使用SpeedVac浓缩仪干燥上清液，并储存于-20℃。将残余物悬浮于 100 μl 水中，并使用 SAX 色谱柱进行离子交换高效液相色谱 (HPLC) 分析。流动相 B 为 1 M KH₂PO₄，pH 3.5，梯度洗脱时间为 90 分钟，梯度从 0% 升至 100%，紫外检测波长为 254 nm。细胞内 PSI-7409 浓度通过标准曲线计算，并根据正常人肝实质细胞每 1×10⁶ 个细胞使用 3 μl 溶液的浓度转换为微摩尔浓度。在克隆 A 细胞（缺乏 CES1 表达）中，PSI-7977 产生的 PSI-7409 浓度高于 PSI-7976，而 PSI-7851 的浓度介于两者之间。在原代人肝细胞（同时表达 CatA 和 CES1）中，PSI-7976、PSI-7977 和 PSI-7851 产生的 PSI-7409 浓度相似。 [1]

---

PSI-7976 的体外细胞检测主要采用 HCV 复制子系统。该系统使用人肝癌 Huh-7 细胞，该细胞可稳定复制亚基因组 HCV RNA。复制子 RNA 包含病毒非结构蛋白（包括 NS5B）以及可选择标记或报告基因。将细胞接种于多孔板中，并用不同浓度的 PSI-7976 处理。经过设定的孵育时间（例如 72 小时）后，裂解细胞，并通过实时 RT-PCR 定量 HCV RNA 的水平。或者，如果使用报告基因（例如荧光素酶），则使用发光仪测量信号。根据剂量反应曲线确定抑制 50% HCV RNA 复制的浓度 (EC50)。对于PSI-7976，HCV复制子检测的EC50值为1.07 μM。这些检测方法也用于细胞毒性测试，其中细胞活力通过平行检测（例如MTT法）进行评估。这使得选择性指数（SI = CC50/EC50）的计算成为可能，该指数用于衡量化合物的治疗窗口。HCV复制子检测是评估HCV抑制剂活性的标准体外系统。

PSI-7976 的体内动物实验通常采用人源化肝脏嵌合小鼠模型（例如，uPA-SCID 小鼠或 FRG 小鼠）。在这些模型中，将原代人肝细胞移植到免疫缺陷小鼠体内。待肝脏重新被人肝细胞填充后，小鼠感染 HCV。一旦建立稳定的 HCV 感染，便用 PSI-7976 治疗动物。该化合物通常口服给药，因为它是一种旨在提高口服生物利用度的前药。给药通常每日一次，持续 7-14 天。在不同时间点采集血样，以测量血浆药物浓度并通过定量 RT-PCR 监测病毒载量。研究结束时，取出肝脏以测量活性三磷酸盐的水平并评估 HCV RNA 的减少情况。这些研究对于证明该化合物的体内疗效以及为其抗病毒活性提供概念验证至关重要。然而，由于 PSI-7976 是一种研究化合物，其广泛的体内数据不像其非对映异构体索非布韦那样广泛发表。

PSI-7976 在细胞内经多步代谢途径转化为活性三磷酸盐 PSI-7409。在表达 CatA 和 CES1 的原代人肝细胞中，PSI-7976、PSI-7977 和异构体混合物 PSI-7851 生成的 PSI-7409 量相近。相反，在缺乏 CES1 表达的 A 克隆细胞中，PSI-7976 生成的 PSI-7409 细胞内浓度低于 PSI-7977。[1] PSI-7976 是 CatA 和 CES1 的底物。 PSI-7976 与 CatA 的动力学参数为：Km = 880 ± 430 μM，kcat = 0.30 ± 0.07 min⁻¹，kcat/Km = 0.0003 μM⁻¹•min⁻¹。与 CES1 的动力学参数为：Km = 51 ± 1 μM，kcat = 0.27 ± 0.02 min⁻¹，kcat/Km = 0.0053 μM⁻¹•min⁻¹。[1]

---

PSI-7976 是一种口服生物利用度较高的前药。它在肝脏代谢为活性三磷酸盐形式。预计 PSI-7976 的药代动力学 (PK) 特性与其非对映异构体索非布韦相似。口服后，前药迅速吸收，并在肝脏经历广泛的首过代谢。主要的激活酶是组织蛋白酶A (CatA) 和羧酸酯酶1 (CES1)，它们去除磷酰胺基团释放单磷酸酯。随后，单磷酸酯经细胞激酶的连续磷酸化生成活性三磷酸酯。活性三磷酸酯具有较长的细胞内半衰期，因此可以每日一次给药。原药及其代谢物主要经尿液排泄。PSI-7976的分子量为529.5 g/mol，分子式为C22H29FN3O9P。用于研究时，它通常以固体形式供应，可溶于DMSO。在推荐条件下（通常为-20°C）储存可确保其稳定性。全面的药代动力学(PK)数据对于了解其体内疗效和设计给药方案至关重要。

毒性概述
识别和用途：索非布韦为白色至类白色结晶固体。索非布韦是一种抗病毒药物（泛基因型聚合酶抑制剂），可直接作用于丙型肝炎病毒。它与其他抗病毒药物联合使用，用于治疗成人慢性丙型肝炎病毒（HCV）1、2、3 或 4 型感染，包括等待肝移植的肝细胞癌患者和合并人类免疫缺陷病毒（HIV）感染的患者。索非布韦必须作为多药联合治疗方案的一部分，不应单独用于治疗慢性 HCV 感染。人体暴露和毒性：记录到的最高索非布韦剂量为单次给予 59 名健康受试者 1200 mg 的过量治疗剂量。在此剂量水平下未观察到不良事件，且不良事件的发生频率和严重程度与安慰剂组和索非布韦400 mg治疗组报告的相似。索非布韦未诱导人外周血淋巴细胞染色体畸变。动物研究：在大鼠中进行了GS-9851/PSI-7851（非对映异构体混合物）的单剂量毒性研究。在最高剂量1800 mg/kg下，未观察到死亡、临床症状、体重变化、肉眼病理变化或肝肾器官重量变化。在小鼠中进行了长达13周的重复给药口服毒性研究，在大鼠中进行了长达26周的重复给药口服毒性研究，在犬中进行了长达39周的重复给药口服毒性研究，评估了索非布韦或GS-9851（索非布韦及其立体异构体的1:1非对映异构体混合物）。主要靶器官包括心血管系统、肝胆系统、胃肠道系统和造血（红系）系统。在一项为期7天的GS-9851毒性研究中，大鼠每日接受2000 mg/kg的剂量，犬每日接受1500 mg/kg的剂量。结果显示（但不限于）胃黏液分泌增加、糖原消耗、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）和胆红素水平升高；犬还出现相关的肝脏组织病理学改变。在大鼠（例如，多灶性心肌纤维化）和犬（例如，QT/QTc间期延长）中均观察到心脏不良反应。在GS-9851或索非布韦的长期研究中，未观察到上述肝脏和心脏不良反应。在大鼠（26周）和犬（39周）的慢性毒性研究中，观察到的不良反应包括（但不限于）胃肠道临床症状（例如，稀便和呕吐）以及平均红细胞指数下降（例如，下降约10%），主要见于犬的高剂量组。在大鼠中评估时，索非布韦对胚胎-胎儿活力或生育力无影响。在大鼠和兔的索非布韦发育毒性研究中，未观察到致畸作用。在大鼠的产前和产后发育研究中，索非布韦对后代的行为、生殖或发育无不良影响。在最高测试剂量下，主要循环代谢物GS-331007的暴露量至少是推荐的人类临床暴露量的8倍。从产前（子宫内）到哺乳期第20天，每日暴露于GS-331007（AUC）的大鼠，其后代生育能力正常。GS-331007的每日暴露量约为推荐的人类临床暴露量的12倍。一项为期两年的索非布韦致癌性研究在小鼠和大鼠中进行。雄性小鼠的剂量高达200 mg/kg/天，雌性小鼠高达600 mg/kg/天；雄性和雌性大鼠的剂量均高达750 mg/kg/天。在小鼠和大鼠的最高试验剂量下，未观察到药物相关肿瘤发生率的增加，导致主要循环代谢物GS-331007的AUC暴露量分别约为推荐临床剂量下人类暴露量的7倍（小鼠）和30倍（大鼠），以及13倍和17倍（大鼠）。索非布韦在一系列体外和体内研究中均未显示出遗传毒性，包括细菌致突变性试验和体内小鼠微核试验。药物相互作用：利福平（一种强效的肠道P-gp诱导剂）可能导致索非布韦和GS-331007的血浆浓度降低，从而可能降低索非布韦的疗效。利福平和索非布韦不应同时使用。预计利福布汀会降低索非布韦和GS-331007的血浆浓度，这可能会降低索非布韦的疗效。不建议同时使用利福布汀和索非布韦。当与索非布韦合用时，某些抗癫痫药物（例如卡马西平、奥卡西平、苯巴比妥和苯妥英钠）预计会降低索非布韦和GS-331007的血浆浓度，这可能会降低索非布韦的疗效。不建议将这些抗癫痫药物与索非布韦合用。索非布韦是乳腺癌耐药蛋白（BCRP）的底物；GS-331007不是BCRP的底物。BCRP抑制剂可能会增加索非布韦的血浆浓度，但不会增加GS-331007的血浆浓度。索非布韦和GS-331007都不是BCRP抑制剂；与BCRP底物药物发生药代动力学相互作用的可能性极低。有关索非布韦相互作用的更完整数据（共 13 项），请访问 HSDB 记录页面。

---

由于 PSI-7976 是一种研究性化合物，因此产品说明中通常不提供其详细的毒性数据。然而，其与索非布韦的结构高度相似，这提供了一些参考信息。索非布韦具有良好的安全性，且耐受性通常良好。索非布韦最常见的副作用包括疲劳、头痛和恶心。严重不良事件罕见。然而，作为一种研究性化合物，PSI-7976 的安全性需要通过特定的毒理学研究来确定。作为一种核苷酸类似物，它具有潜在的线粒体毒性，这是某些核苷/核苷酸类似物的类别效应。然而，研究表明索非布韦及其代谢物的线粒体毒性风险较低。 PSI-7976 是一种非对映异构体，可能具有不同的毒性特征。用于研究时，应按照标准实验室安全预防措施操作，并使用适当的个人防护装备 (PPE)。本品不适用于人体。任何体内使用均需事先进行毒理学评估。

[1]. Mechanism of activation of PSI-7851 and its diastereoisomer PSI-7977. J Biol Chem. 2010 Nov 5;285(45):34337-47.

PSI-7976 是 PSI-7851 的 Rp 非对映异构体，而 PSI-7977 是 Sp 非对映异构体。这两个异构体在第一步水解反应的立体选择性不同：CatA 优先水解 PSI-7977，而 CES1 优先水解 PSI-7976。羧酸酯部分水解后，生成活性三磷酸酯 PSI-7409 的后续步骤对于这两个异构体而言是相同的。[1] 在表达 CatA 和 CES1 的原代人肝细胞中，这两个异构体产生的活性三磷酸酯水平相似，这表明在发生 HCV 感染的肝细胞中，它们的活性可能相同。然而，在常用的HCV复制子筛选系统（使用Huh7衍生克隆A细胞，其CES1表达显著低于原代肝细胞）中，磷酰胺类化合物的抗HCV活性可能与其体内活性不直接相关。[1]

---

治疗用途
索非布韦（Sovaldi）是一种丙型肝炎病毒（HCV）核苷酸类似物NS5B聚合酶抑制剂，适用于治疗慢性丙型肝炎（CHC）感染，作为联合抗病毒治疗方案的一部分。/美国产品标签包含/
开始使用索非布韦治疗时应考虑以下事项：不建议使用索非布韦单药治疗慢性丙型肝炎（CHC）。治疗方案和疗程取决于病毒基因型和患者人群。治疗反应因宿主和病毒基线因素而异。

---

药物警告：美国食品药品监督管理局 (FDA) 警告，当抗心律失常药物胺碘酮与丙型肝炎药物 Harvoni（雷迪派韦/索非布韦）或 Sovaldi（索非布韦）以及另一种用于治疗丙型肝炎感染的直接抗病毒药物联合使用时，可能会发生严重心动过缓。美国食品药品监督管理局 (FDA) 已在 Harvoni 和 Sovaldi 的药品标签中添加了有关严重心动过缓（一种称为症状性心动过缓的疾病）的信息。FDA 建议医疗保健专业人员不要将 Harvoni 或 Sovaldi 与另一种直接抗病毒药物（例如研究性药物达克拉他韦或奥利西奥索（西美普韦））和胺碘酮联合使用。美国食品药品监督管理局 (FDA) 在审查了已提交的上市后不良事件报告后发现，当哈维尼 (Harvoni) 或索非布韦 (Sovaldi) 与另一种直接抗病毒药物和胺碘酮联合使用时，患者可能会出现严重的、危及生命的症状性心动过缓。报告显示，一名患者死于心脏骤停，三名患者需要植入心脏起搏器来调节心律。其他患者在停用丙型肝炎药物或胺碘酮（或两者均停用）后康复。目前，这些事件的原因尚不明确。FDA 将继续监测哈维尼和索非布韦引起严重症状性心动过缓的风险，并进一步调查胺碘酮与这些丙型肝炎药物联合使用导致心脏相关事件的原因。
不建议将索非布韦与强效肠道P-糖蛋白（P-gp）转运系统诱导剂（例如利福平和圣约翰草）联合使用，因为这可能会显著降低索非布韦的血浆浓度，并可能降低其疗效。
据报道，接受索非布韦联合利巴韦林或联合聚乙二醇干扰素α和利巴韦林治疗的患者出现贫血。在临床试验中，接受索非布韦、聚乙二醇干扰素α和利巴韦林治疗12周的患者中有21%报告出现贫血，而未接受索非布韦治疗的接受聚乙二醇干扰素α和利巴韦林治疗24周的患者中，贫血发生率为12%。此外，在接受索非布韦、聚乙二醇干扰素α和利巴韦林治疗12周的患者中，23%的患者报告血红蛋白浓度低于10 g/dL，而接受聚乙二醇干扰素α和利巴韦林治疗24周（不含索非布韦）的患者中，这一比例为14%。在接受索非布韦联合利巴韦林和聚乙二醇干扰素α治疗的患者中，超过20%报告的不良反应包括疲劳、头痛、恶心、失眠和贫血。有关索非布韦警告（共13条）的更完整数据，请访问HSDB记录页面。

---

PSI-7976是一种研究性化合物，尚未获准用于任何临床用途。它是索非布韦（PSI-7977）的非对映异构体，索非布韦是一种革命性的药物，已获得FDA批准用于治疗慢性丙型肝炎。索非布韦与其他抗病毒药物联合使用，对丙型肝炎病毒（HCV）感染的治愈率超过95%。PSI-7976被用作研究工具，用于研究核苷酸类似物抑制剂的药理学和耐药性的发展。通过比较PSI-7976与索非布韦的活性和选择性，研究人员可以深入了解高效选择性抑制HCV NS5B聚合酶的结构要求。该化合物的作用机制与索非布韦相同：它是一种前药，代谢后生成活性三磷酸盐，作为病毒RNA聚合酶的链终止剂。这使得PSI-7976成为研究核苷酸掺入和链终止分子细节的宝贵工具。它还可用于研究耐药突变，因为在体外筛选对PSI-7976具有耐药性的菌株可以识别出可能也赋予索非布韦耐药性的突变。总而言之，PSI-7976是一种重要的研究化合物，有助于理解一类重要的抗病毒药物的作用机制。

C22H29FN3O9P

529.45

529.163

C, 49.91; H, 5.52; F, 3.59; N, 7.94; O, 27.20; P, 5.85

1190308-01-0

Sofosbuvir;1190307-88-0;Sofosbuvir impurity C;1496552-28-3;Sofosbuvir impurity A;1496552-16-9;Sofosbuvir-d6;1868135-06-1;Sofosbuvir-13C,d3

45375809

White to off-white solid powder

2.047

167.99

3

11

11

36

913

6

C[C@@H](C(=O)OC(C)C)NP(=O)(OC[C@@H]1[C@H]([C@@]([C@@H](O1)N2C=CC(=O)NC2=O)(C)F)O)OC3=CC=CC=C3

TTZHDVOVKQGIBA-IAAJYNJHSA-N

InChI=1S/C22H29FN3O9P/c1-13(2)33-19(29)14(3)25-36(31,35-15-8-6-5-7-9-15)32-12-16-18(28)22(4,23)20(34-16)26-11-10-17(27)24-21(26)30/h5-11,13-14,16,18,20,28H,12H2,1-4H3,(H,25,31)(H,24,27,30)/t14-,16+,18+,20+,22+,36?/m0/s1

propan-2-yl (2S)-2-[[[(2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-dioxopyrimidin-1-yl)-4-fluoro-3-hydroxy-4-methyloxolan-2-yl]methoxy-phenoxyphosphoryl]amino]propanoate

psi-7976; psi7976; psi 7976

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

---

注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

View More

注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

---

口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

View More

口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

---

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。