| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
COX-1 and COX-2 (IC50 for COX-1: 116.3 ± 0.03 μM; IC50 for COX-2: 94.7 ± 0.02 μM) [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
蒲公英醇乙酸酯（10-150 μM；24 或 48 小时）在 24 小时和 48 小时的 IC50 值分别为 34.2 μM 和 28.4 μM，对 U87 细胞表现出剂量和时间依赖性的细胞毒性 [2]。在用蒲公英醇乙酸酯（10、50 和 150 μM）处理 24 小时后，凋亡细胞的比例从对照组的 7.3% 增加到 16.1%、44.1% 等。此外，施用蒲公英醇乙酸酯后，观察到亚 G1 期细胞周期阻滞和 S 期细胞数量的相应减少 [2]。蒲公英醇乙酸酯以剂量和时间依赖的方式对 U87 人胶质母细胞瘤细胞表现出显著的抗增殖作用。 MTT 法测定，半数抑制浓度 (IC50) 在 24 小时为 34.2 μM，在 48 小时为 28.4 μM [2]。
相差显微镜下观察到的形态学变化：未经处理的 U87 细胞呈紧密排列的多层结构，而经 10、50 或 150 μM 乙酸蒲公英酯处理的细胞则出现圆形、萎缩、分离或漂浮等现象 [2]。 吖啶橙/溴化乙锭双染显示，活的对照细胞具有较大的绿色细胞核，而经 10、50 或 150 μM 乙酸蒲公英酯处理后，具有完整细胞核的细胞数量显著减少，并且在 150 μM 浓度下诱导了细胞核浓缩和凋亡小体的形成 [2]。 Annexin V-FITC/PI 流式细胞术分析显示： 醋酸蒲公英以剂量依赖的方式诱导早期和晚期细胞凋亡。经48小时处理后，凋亡细胞的百分比从对照组的7.3%分别增加至16.1%（10 μM）、44.1%（50 μM）和76.7%（150 μM）[2]。 流式细胞术细胞周期分析显示，醋酸蒲公英处理（10、50、150 μM，处理48小时）使亚G1期细胞比例从2.4%（对照组）分别增加至18.6%、33.21%和48.6%，同时使S期细胞比例从33.15%（对照组）分别降低至27.21%、16.21%和12.9%[2]。 醋酸蒲公英处理后，琼脂糖凝胶电泳显示，U87细胞中DNA片段化呈剂量依赖性（凋亡的标志）。用 10、50 或 150 μM 的浓度处理 48 小时 [2]。 Western blot 分析显示，醋酸蒲公英 以剂量依赖的方式增加 CDK 抑制剂 p21 的蛋白表达，并与对照组相比降低细胞周期蛋白 B、细胞周期蛋白 D、CDK2、CDK4 和 CDK6 的表达 [2]。 醋酸蒲公英 以剂量依赖的方式（0、10、50、150 μM）和时间依赖的方式（3、6、12、24 小时）诱导 U87 细胞自噬，表现为 LC3B-II 蛋白表达的增加 [2]。 伤口愈合实验表明，醋酸蒲公英（50 和 150 μM，处理 48 小时）以剂量依赖的方式显著减少迁移到划痕区域的 U87 细胞数量。 [2]. |
| 体内研究 (In Vivo) |
在携带 U87 人类胶质母细胞瘤细胞的雌性 BALB/c 裸鼠异种移植模型中，腹腔注射 0.25 和 0.75 μg/g 的Taraxerol acetate，一次口服（如方案中所述，尽管注射途径为腹腔注射），显著降低了肿瘤重量，从 PBS 处理的对照组的 1.2 g 分别降至 0.81 g 和 0.42 g，并在 24 天后显著降低了肿瘤体积，从对照组的 1.3 cm³ 分别降至 0.67 cm³ 和 0.25 cm³ [2]。
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| 酶活实验 |
COX抑制试验采用Tris缓冲液（50 mM，pH 7.5）溶解COX-1和COX-2酶，辅因子肾上腺素（5 mM）和血红素（1 μM）。血红素首先溶解于NaOH溶液中。将反应混合物加入96孔板，每孔终体积为190 μL。将不同浓度的醋酸蒲公英用Tris缓冲液稀释后加入96孔板，然后加入辅因子和酶（10 U/mL；180 μL）。将反应板于37℃孵育30分钟，然后加入10 μL 1 M HCl终止反应，最后加入10 μL 1 M NaOH调节pH至7.5。采用放射免疫分析法测定 PGE₂（PGH₂ 的代谢产物）的生成量，以确定酶活性以及不同浓度的Taraxerol acetate的抑制作用。数据以对照组 PGE₂ 生成量的百分比表示。所有实验均重复三次，IC₅₀ 值采用 EZFit 酶动力学程序计算。结果以平均值 ± 标准误 (SEM) 表示 [1]。
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| 细胞实验 |
采用 MTT 法检测细胞增殖：将 U87 细胞（1×10⁵ 个细胞/孔）接种于 96 孔板中，于 37°C 孵育 5-7 小时使其贴壁。用不同浓度的 Taraxerol 乙酸酯（0、5、10、25、50、100、150 μM）处理 48 小时后，加入 10 μL MTT 溶液（5 mg/mL，溶于 PBS），于 37°C 孵育 4 小时。用 150 μL DMSO 溶解生成的甲臜晶体，并使用酶标仪在 490 nm 波长处测定吸光度。细胞活力抑制率（%）计算公式为[OD₄₉₀(对照组) - OD₄₉₀(处理组)] / OD₄₉₀(对照组) × 100 [2].
相差显微镜和荧光显微镜：将U87细胞（1×10⁵个细胞/mL）接种于6孔板中培养24小时，然后用醋酸蒲公英（0、10、50、150 μM）处理48小时。在相差显微镜下观察细胞并拍摄图像。对于荧光染色，细胞用PBS洗涤两次，然后加入AO/EB溶液（10 μg/mL），在37°C下孵育30分钟，并使用荧光显微镜采集图像[2]。 Annexin V-FITC/PI凋亡检测：用Taraxerol acetate（0、10、50、150 μM）处理U87细胞48小时后，根据制造商的说明用PI和Annexin V-FITC染色。使用 CellQuest 软件 [2] 通过流式细胞术分析活细胞、凋亡细胞和坏死细胞的百分比。 细胞周期分析：将 U87 细胞 (1×10⁵) 用 Taraxerol acetate (0, 10, 50, 150 μM) 处理 48 小时后收集，用冰冷的 PBS 洗涤两次，用 70% 乙醇在 4°C 下固定 12 小时，在 37°C 下用 PI 和 3% RNase A 染色 20 分钟，然后进行流式细胞术分析。使用 ModFit LT 软件 [2] 确定每个细胞周期阶段的细胞百分比。 DNA 片段化分析：将 U87 细胞接种于 100 mm 培养皿中，用 Taraxerol acetate (0, 10, 50, 150 μM) 处理 48 小时。收集细胞，用 DNA 裂解缓冲液（2% NP-40、20 mM EDTA、40 mM Tris-HCl）裂解 30 分钟，以 6,600 × g 离心 5 分钟。将上清液与等体积的 1.5% SDS 混合，在 60°C 下与 2.5 mg/mL RNase A 孵育 2 小时，然后在 20°C 下与 2.5 mg/mL 蛋白酶 K 孵育 2 小时。加入0.5倍体积的10 M乙酸铵后，用冷乙醇沉淀DNA，以6,600 × g离心20分钟收集，溶解于凝胶上样缓冲液中，在1.5%琼脂糖凝胶上进行电泳分离（100 V，1小时），溴化乙锭染色后在紫外光下观察[2]。 伤口愈合（细胞迁移）实验：将U87细胞（1×10⁵个细胞/mL）接种于6孔板中，并在37°C下培养24小时至95%汇合。饥饿12小时后，用移液器吸头划出一条无细胞的直线伤口。每个孔用PBS洗涤三次以去除碎片，然后用DMEM培养基中的Taraxerol acetate（0、10、50、150 μM）处理。细胞在27°C培养48小时后，用含0.3%结晶紫的5%乙醇固定并染色30分钟。在倒置显微镜下采集图像，并计数迁移到划痕区域的细胞数量；使用ImageJ软件[2]测定伤口长度。 蛋白质印迹分析：从U87细胞中提取总蛋白，并使用BCA蛋白测定试剂盒测定其浓度。将蛋白样品（100 μg）进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（70 V，3小时），然后转移至硝酸纤维素膜。将膜用 5% 牛血清白蛋白在室温下封闭 2 小时，然后在 4°C 下与一抗（抗 p21、抗细胞周期蛋白 B、抗细胞周期蛋白 D、抗 CDK2、抗 CDK4、抗 CDK6、抗 LC3B、抗 α-微管蛋白、抗 GAPDH）孵育过夜，再与相应的二抗在室温下孵育 1 小时。使用 ChemiDoc MP 成像系统 [2] 显影条带。 |
| 动物实验 |
雌性BALB/c裸鼠（8周龄，体重20 g）饲养于无特定病原体（SPF）级环境中，光照/黑暗周期为12小时，自由摄取水和食物。将U87细胞（1×10⁵个细胞/只）皮下注射到每只小鼠的右后侧腹部以诱导肿瘤形成。肿瘤形成后，将小鼠分为三组（n=5），分别经口给予1X PBS（对照组）、0.25 μg/gTaraxerol acetate或0.75 μg/gTaraxerol acetate（腹腔注射），但化合物按原文所述为腹腔注射。24天后，通过颈椎脱臼处死小鼠。切除肿瘤，并测量肿瘤的重量和体积（计算方法为长×宽×0.5倍宽度）[2]。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
据报道，在党参（Codonopsis pilosula）、毛党参（Codonopsis pilosula var. pubescens）以及其他有相关数据的生物体中均发现了乙酸蒲公英。
乙酸蒲公英醇是从罗汉松甲醇提取物的乙酸乙酯馏分中，通过硅胶柱色谱法，以己烷-乙酸乙酯混合物为洗脱剂分离得到的。核磁共振和质谱数据与先前报道的数据[1]进行了比对，证实了其结构。 该化合物具有民族药用价值：在巴基斯坦，罗汉松被用于治疗发热、风湿病、疟疾、痢疾、肝炎和糖尿病。目前的研究支持其通过抑制COX发挥抗炎作用[1]。 使用AutoDock 4.2（采用拉马克遗传算法，以催化口袋为中心，网格点数为60×60×60，网格间距为0.375 Å）对COX-2（PDB ID：3BGP）进行分子对接模拟，结果表明乙酸蒲公英通过疏水相互作用与活性位点相互作用：C-29和C-30上的甲基与Val116和Leu531相互作用；Val349与C环的C-11和C-12相互作用；Leu359与E环相互作用；乙酰基与Trp387、Met522和Leu384的酰胺基存在静电相互作用。氟比洛芬被用作参考药物（结合能RMSD为0.453）[1]。在胶质母细胞瘤研究中，醋酸妥拉西罗诱导细胞凋亡和自噬性细胞死亡，增加亚G1期阻滞，减少S期细胞，上调p21，下调细胞周期蛋白和CDK，并抑制细胞迁移。这些作用表明其具有作为胶质母细胞瘤治疗药物的潜力[2]。 |
| 分子式 |
C32H52O2
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|---|---|
| 分子量 |
468.7541
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| 精确质量 |
468.396
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| 元素分析 |
C, 81.99; H, 11.18; O, 6.83
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| CAS号 |
2189-80-2
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| PubChem CID |
94225
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| 密度 |
1.0±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
505.1±49.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
303-305ºC
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| 闪点 |
256.2±17.4 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.3 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.529
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| LogP |
11.95
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| tPSA |
26.3
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
2
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
34
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| 分子复杂度/Complexity |
897
|
| 定义原子立体中心数目 |
8
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| SMILES |
O(C(C([H])([H])[H])=O)[C@@]1([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]2(C([H])([H])[H])[C@@]([H])(C([H])([H])C([H])([H])[C@@]3(C([H])([H])[H])C4=C([H])C([H])([H])[C@]5(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[C@@]5([H])[C@]4(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[C@]23[H])C1(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H]
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| InChi Key |
YWJGYBXHXATAQY-BOTWUFHUSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C32H52O2/c1-21(33)34-26-13-17-30(7)22(28(26,4)5)11-15-31(8)23-10-14-29(6)19-18-27(2,3)20-25(29)32(23,9)16-12-24(30)31/h10,22,24-26H,11-20H2,1-9H3/t22-,24+,25+,26-,29-,30-,31-,32+/m0/s1
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| 化学名 |
[(3S,4aR,6aR,6aS,8aR,12aR,14aR,14bR)-4,4,6a,6a,8a,11,11,14b-octamethyl-1,2,3,4a,5,6,8,9,10,12,12a,13,14,14a-tetradecahydropicen-3-yl] acetate
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| 别名 |
Taraxerol acetate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1333 mL | 10.6667 mL | 21.3333 mL | |
| 5 mM | 0.4267 mL | 2.1333 mL | 4.2667 mL | |
| 10 mM | 0.2133 mL | 1.0667 mL | 2.1333 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
鲑鱼精DNA
绞股蓝皂苷LI
伪金丝桃素
Trans-4-Cotininecarboxylic acid
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