3-[N-(7'-nitrobenz-2'-oxa-1',3'-diazol-4'-yl)amino]propanic acid 中文名称: 3-[N-（7'-硝基苯-2'-氧杂-1'-，3'-二唑-4'-基）氨基]丙酸

目录号: V2415 纯度: ≥98%

COA 产品数据产品说明书 SDS

3-[N-(7-硝基苯甲-2-氧杂-1,3-二唑-4-基)氨基]丙酸

3-[N-(7'-nitrobenz-2'-oxa-1',3'-diazol-4'-yl)amino]propanic acid CAS号: 149079-60-7
产品类别: Others 6

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Nature 2025, 643(8070):192-200.

Nature 2024 Dec 18.

Nature 2021, 597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022: 8, eabm9427.

Nat Neurosci 2024, 27:1468-1474.

Nat Comput Sci. 2026, 6:704-717

Cell Biomaterials 2026

Nat Comm 2026, 17(1):3410

Science Adv 2025, 11(33):eadr5199.

Nat Metab 2024, 6: 1108-1127.

Cell Stem Cell 2024, 31:106-126.e13.

Nature 597, 119–125 (2021)

Cell Stem Cell 2020,26(6):845-861.e12.

Science Trans Med 2023,15(701):eadd7872.

STTT 2023,8(1):91.

Cell Reports 2023,42(4):112313

Science Trans Med 2023, 15: eadd7872.

Cancer Cell 2021,39(4):529-547.e7.

Cancer Discov 2022,12(4):1106-1127.

Immunity 2023,56(3):620-634.e11.

Immunity 2024,57:2651-2668.e12.

J Am Chem Soc 2022,144:21831-21836.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022:8,eabm9427.

Nature 2021,597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

PNAS Nexus 2022,1(3):pgac063.

ACS Nano 2023,17(10):9110-9125.

Biomaterial 2023 Sep16:302:122333.

产品描述
生物活性&实验参考方法
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产品描述

3-[N-(7'-硝基苯并-2'-氧杂-1',3'-二唑-4'-基)氨基]丙酸
3-[N-(7'-硝基苯并-2'-氧杂-1',3'-二唑-4'-基)氨基]丙酸（CAS# 149079-60-7），又称NBD-β-丙氨酸或3-((7-硝基苯并[c][1,2,5]氧杂二唑-4-基)氨基)丙酸，是一种含有硝基苯并氧杂二唑（NBD）荧光团的荧光化合物。其分子式为C9H8N4O5，分子量为252.19 g/mol。该化合物是β-丙氨酸与NBD荧光团偶联的衍生物。它可用作荧光探针，用于检测和定量各种分析物，包括氨基酸和其他生物分子。NBD荧光团以其高荧光量子产率、对环境极性的敏感性和溶剂变色特性而闻名。该化合物通常以固体形式提供，纯度≥98%。该化合物的预测LogP值约为1。

生物活性&实验参考方法

靶点	The molecular targets of 3-[N-(7'-nitrobenz-2'-oxa-1',3'-diazol-4'-yl)amino]propanoic acid are not biological targets per se, as the compound is a fluorescent probe rather than a therapeutic agent. The NBD fluorophore is used for labeling and detecting biological molecules. The compound can be conjugated to various biomolecules (proteins, peptides, nucleic acids) through its carboxyl group or amino group to create fluorescently labeled probes for biological imaging and analysis. The NBD fluorophore is sensitive to its environment, with fluorescence intensity and wavelength depending on the polarity of the surrounding medium, allowing it to be used for studying protein conformational changes, membrane dynamics, and other biological processes. The β-alanine moiety provides a linker between the fluorophore and the molecule of interest, and it is derived from the amino acid β-alanine. The compound's nitro group may also allow for the detection of reducing conditions or for the formation of conjugates with thiol-containing molecules.
体外研究 (In Vitro)	3-[N-(7'-硝基苯并-2'-氧杂-1',3'-二唑-4'-基)氨基]丙酸的体外活性与其荧光性质相关，而非生物活性。该化合物具有强烈的荧光，激发波长最大值约为460-480 nm，发射波长最大值约为520-550 nm，具体数值取决于溶剂极性。在水溶液中，其荧光通常为黄绿色。该化合物的荧光强度和波长均受pH值影响，这是由于氨基质子化所致。该化合物可用作氨基酸、肽和蛋白质的荧光标记试剂，应用于包括高效液相色谱（HPLC）和毛细管电泳在内的多种分析方法中。在细胞实验中，该化合物可用于标记细胞蛋白或研究β-丙氨酸衍生物通过氨基酸转运蛋白的细胞摄取。该化合物的荧光可通过荧光显微镜、流式细胞术或荧光光谱法检测。该化合物不具有特定的生物活性（例如，针对特定靶点的IC50值）。
体内研究 (In Vivo)	3-[N-(7'-硝基苯并-2'-氧杂-1',3'-二唑-4'-基)氨基]丙酸的体内活性有限，因为该化合物主要用作体外分析工具，而非体内治疗或成像剂。然而，NBD标记的化合物已被用于小型动物体内生物分子的成像和追踪。该化合物体积小、亲脂性适中（LogP~1），可能使其能够穿透细胞并在组织中分布。NBD荧光团的荧光可用于体内检测该化合物，但其短波长（绿黄色荧光）限制了其与近红外荧光团相比的穿透深度。该化合物在生物体液中的稳定性及其潜在的代谢（例如，硝基还原、酰胺键断裂）会影响其体内应用。对于大多数应用而言，该化合物用于离体或体外分析和诊断，而非体内研究。
酶活实验	对于使用 3-[N-(7'-硝基苯并-2'-氧杂-1',3'-二唑-4'-基)氨基]丙酸进行基于荧光的检测，采用以下步骤：将该化合物溶解于合适的溶剂（例如 DMSO、甲醇或水性缓冲液）中，配制成 1-10 mM 的储备液。进行荧光测量时，将该化合物用所需的缓冲液或溶剂稀释至最终浓度为 0.1-10 μM。使用荧光分光光度计记录荧光光谱，激发波长为 460-480 nm，发射波长为 520-550 nm。可以使用荧光素等参考标准（在 0.1 M NaOH 中量子产率为 0.92）测定量子产率和荧光强度。对于 pH 依赖性研究，将该化合物稀释于不同 pH 值（2-12）的缓冲液中，并测量荧光强度。在溶剂变色研究中，将化合物稀释于不同极性的溶剂（水、甲醇、乙醇、乙腈、DMSO 等）中，并记录其最大发射波长和发射强度。在标记反应中，用 EDC/NHS 活化化合物的羧基，使其与含胺分子（例如蛋白质、肽）偶联。标记产物经尺寸排阻色谱或高效液相色谱纯化，并通过紫外-可见光谱和荧光光谱评估标记效率。
细胞实验	对于使用NBD标记探针的细胞检测，通常采用以下方案：将细胞（例如HeLa细胞、HEK293细胞或原代细胞）培养于盖玻片或96孔板中，置于37°C、5% CO₂的培养箱中。将NBD标记探针（与目标蛋白或肽段偶联）以0.1-10 μM的浓度加入培养基中，孵育1-24小时。用PBS洗涤细胞以去除未结合的探针。对于荧光显微镜观察，用4%多聚甲醛固定细胞，并将其封片。使用配备FITC或GFP滤光片组（激发波长460-490 nm，发射波长515-530 nm）的荧光显微镜采集图像。对于流式细胞术分析，用胰蛋白酶消化细胞，重悬于PBS中，并使用配备488 nm激光器和530 nm发射滤光片的流式细胞仪进行分析。为了定量分析细胞摄取，将细胞裂解后，使用微孔板读数仪测量荧光强度。对于活细胞成像，在成像过程中将细胞维持在37°C。对于蛋白质构象变化的研究，将NBD标记的蛋白质暴露于各种条件（例如，不同的pH值、温度或配体），并监测荧光强度或波长的变化。
药代性质 (ADME/PK)	3-[N-(7'-硝基苯并-2'-氧杂-1',3'-二唑-4'-基)氨基]丙酸是一种含有NBD荧光团的荧光探针。其分子式为C9H8N4O5，分子量为252.19 g/mol。它可用作检测氨基酸和其他生物分子的荧光探针。未来的研究方向可以集中于开发具有更高光稳定性和量子产率的新型NBD基荧光探针，探索该化合物在高通量筛选检测中的应用，以及研究其在体内成像应用中的潜力。

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性

化学信息 & 存储运输条件

分子式	C9H8N4O5
分子量	252.183621406555
精确质量	252.049
CAS号	149079-60-7
PubChem CID	43395455
外观&性状	Typically exists as solid at room temperature
密度	1.662±0.06 g/cm3(Predicted)
沸点	554.5±60.0 °C(Predicted)
LogP	1
tPSA	134
氢键供体(HBD)数目	2
氢键受体(HBA)数目	8
可旋转键数目(RBC)	4
重原子数目	18
分子复杂度/Complexity	333
定义原子立体中心数目	0
SMILES	N(C1=CC=C(N(=O)=O)C2=NON=C12)CCC(=O)O
InChi Key	MWTXZSDNHVFODA-UHFFFAOYSA-N
InChi Code	InChI=1S/C9H8N4O5/c14-7(15)3-4-10-5-1-2-6(13(16)17)9-8(5)11-18-12-9/h1-2,10H,3-4H2,(H,14,15)
化学名	3-[(4-nitro-2,1,3-benzoxadiazol-7-yl)amino]propanoic acid
HS Tariff Code	2934.99.9001
存储方式	Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month
运输条件	Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

溶解度数据

溶解度 (体外实验)	May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)	注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。注射用配方 (IP/IV/IM/SC等) 注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline) 生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。注射用配方 2:* DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More 注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。注射用配方 5:* 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline) 注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline) 注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline) 注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil) 注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 口服配方口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More 口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 口服配方 6: 做成粉末与食物混合注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

溶解度 (体外实验)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

溶解度 (体内实验)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)

注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

口服配方

口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

制备储备液		1 mg	5 mg	10 mg
	1 mM	3.9654 mL	19.8271 mL	39.6542 mL
	5 mM	0.7931 mL	3.9654 mL	7.9308 mL
	10 mM	0.3965 mL	1.9827 mL	3.9654 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器

质量

浓度

体积

分子量*

计算重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度

参见示例

使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？

在分子量（MW）框中输入350.26
在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。

浓度 (起始)

体积 (起始)

浓度 (终)

体积 (终)

计算重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：

在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中

分子式

分子量

g/mol

计算重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4 c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：

要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。

分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：

分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。

配液体积

质量

配液浓度

计算重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
单击“计算”按钮
答案显示在体积框中

动物体内实验配方计算器（澄清溶液）

第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）

给药剂量 mg/kg

动物平均体重 g

每只动物给药体积 μL

动物数量

第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。

% DMSO

% Tween 80

% ddH₂O

计算重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH₂O，混匀澄清。

注意： (1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。