| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
EC50: 34 pM (GT1a), 4 pM (GT1b)[1] IC50: 1.62 Μm (SARS-CoV 3CLpro)[3]
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| 体外研究 (In Vitro) |
盐酸雷迪帕韦的内在 EC50 值为 39，对于 GT1a 为 310 fM，对于 GT1b 为 40 fM。 GT1a 的蛋白质调整 EC50 值为 210 pM，GT1b 的蛋白质调整 EC50 值为 27 pM。 GT1a 和 1b EC50 值分别为 31 pM 和 4 pM。复制子实验中使用的人血清和细胞培养基均含有 10% BSA，盐酸雷迪帕韦的蛋白结合水平显着[1]。当用于对抗 JFH/3a-NS5A 复制子时，盐酸雷迪帕韦的 EC50 值为 141 nM [2]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
盐酸雷迪帕韦的独特之处在于其低清除率、良好的生物利用度、在大鼠、狗和猴子中的半衰期长，以及在人类中的低预计清除率以及高复制子效力。在大鼠和狗中评估了盐酸雷迪帕韦的药代动力学。 Ledipasvir 表现出较低的全身清除率 (CL)、中等分布容积 (Vss)（大于全身水量）以及良好的血浆半衰期（大鼠 1.83 小时，狗 2.63 小时）[1]。
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| 酶活实验 |
竞争性蛋白结合试验[1]
将含有10%胎牛血清（CCM）的人血浆和细胞培养基以2μM的终浓度掺入受试化合物。将加标血浆（1 mL）和CCM（1 mL）放入组装好的透析细胞的相对侧，用半透膜隔开。透析细胞在37°C水浴中缓慢旋转达到平衡所需的时间。测量透析后血浆和CCM重量，并用LC/MS/MS测定血浆和CCM中的试验化合物浓度。 代谢稳定性[1] 使用合并的肝微粒体组分（最终蛋白质浓度为0.5mg/mL）在3μM的最终试验化合物浓度下测定体外代谢稳定性。通过加入NADPH再生系统引发反应。在不同时间点将25μL的反应混合物等分转移到含有淬火溶液的板上。反应混合物中的试验化合物浓度用LC/MS/MS测定。肝脏固有清除率如Obach之前所述计算，预测清除率使用搅拌良好的肝脏模型计算，不受蛋白质限制。 还使用氚化测试化合物在冷冻保存的肝细胞中测定了代谢稳定性。孵育混合物含有1×106个肝细胞/mL和1μM氚化试验化合物（2.5μCi）。在37°C的温度下，在95%空气/5%二氧化碳（v/v）的潮湿环境中轻轻摇晃进行孵化。在0、1、3和6小时后取出50μL的等分试样，并将其加入100μL的淬火溶液中。在与HPLC系统耦合的流动闪烁无线电探测器上分析样品。代谢物根据放射性检测器的峰面积进行定量，无细胞对照样品用作参考。通过测量测试化合物的消失率，即形成的放射性标记代谢物和测试化合物的总峰面积的百分比，来确定肝细胞中的代谢稳定性。 |
| 细胞实验 |
GT1a and GT1b Replicons[1]
稳定的基因型1a（GT1a）亚基因组复制子细胞系1a-57C-RlucP（H77菌株）用于测定化合物GT1a的抗病毒活性，并如前所述建立。在稳定的GT1b亚基因组复制子细胞系1b-Luc-2（Con-1菌株）中测定了化合物GT1b的抗病毒活性。为了建立1b-Luc-2，从ReBLikon获得的质粒I389luc-ubineo/NS3-3′/ET中产生了复制子质粒pCon1/SG-hRlucNeo（G+I+T），该质粒编码Con-1菌株的亚基因组复制子。使用Accuprime Super Mix I和引物AscI-hRluc-Fwd和NotI-hRluc Rev通过PCR从pF9 CMV hRluc-Neo Flexi中扩增出hRluc-Neo基因。这两个引物具有以下序列，并携带限制性位点以供后续克隆：AscI-hRuc-Fwd:5′-ACT GAC GGC GCG CCA TGG CTT CCA AGG TGT ACG-3′（AscI位点下划线）和NotI-hMluc Rev:5′-GTC AGT GCG GCT CAG AAG AAC TCG TCA AGA-3′（NotI位点划线）。将hRluc-Neo扩增产物亚克隆到pCR2.1-TOPO中。用AscI和NotI消化所得质粒，用T4 DNA连接酶将切下的片段（hRluc-Neo）连接到用相同酶消化的I389luc-ubi-Neo/NS3-3′/ET中。对所得载体pCon1/SG-hRlucNeo（G+I+T）进行测序，以确认hRluc-Neo融合基因的正确方向和序列。 质粒pCon1/SG-hRlucNeo（G+I+T）用SpeI线性化，并使用PCR纯化试剂盒纯化。按照制造商建议的方案，用T7MEGAScript试剂体外合成复制子RNA。根据制造商的说明，使用RNeasy试剂盒通过柱纯化纯化RNA。通过测量260nm处的吸光度来确定RNA浓度，并通过0.8%琼脂糖凝胶电泳和溴化乙锭染色来验证其完整性。如前所述，将10微克体外转录的pCon1/SG-hRlucNeo（G+I+T）RNA电穿孔到4×106 Huh7-Lunet细胞中。简而言之，将电穿孔细胞铺在100mm细胞培养皿上。镀覆24小时后，用补充了1.0 mg/mL G418的繁殖培养基替换培养基（选择持续约3周）。分离并扩增G418抗性克隆。根据制造商的说明，使用商业化的Renilla萤光素酶测定法对HCV复制进行定量。选择具有最高荧光素酶信号与背景比的克隆在高通量抗病毒敏感性试验中进行验证。用于GT1b抗病毒研究的最终克隆细胞系被命名为1b-Luc-2。 Replicon抗病毒检测[1] 为了确定化合物GT1的抗病毒活性，将1a-57C-RlucP或1b-Luc-2复制子细胞以每孔2000个细胞的速度铺在384孔板上（细胞培养处理）。将化合物在DMSO中连续稀释3倍，并使用自动仪器以0.44%DMSO的终浓度加入细胞中，总体积为90μL。对于每种药物浓度，在384孔板上设置四孔。DMSO用作阴性（溶剂；无抑制）对照，三种HCV抑制剂的组合，包括蛋白酶抑制剂、NS5A抑制剂和核苷抑制剂，以>100×EC50的浓度用作阳性对照（100%抑制）。将板在37°C、5%CO2和85%湿度的环境中孵育3天。用Biotek ELX405洗板机吸出培养基。使用BiotekμFlow Workstation将20微升双Glo萤光素酶缓冲液添加到平板的每个孔中。将平板在室温下孵育10分钟。使用BiotekμFlow Workstation向每个孔中加入20微升含有双Glo Stop&Glo底物和双Glo Stop&Glo缓冲液的1:100混合物的溶液。将平板在室温下孵育10分钟，然后用Envision平板读数器测量发光信号。 |
| 动物实验 |
小鼠：将重组腺病毒Ad-WT-HCVpro-SEAP（每只小鼠10⁹ IFU）经尾静脉注射到五组六周龄SCID小鼠（每组六只）中。每组小鼠分别口服两次特拉匹韦（VX-950），剂量分别为10、25、75、150或300 mg/kg。第一次特拉匹韦给药在腺病毒注射前两小时；第二次给药在注射后十小时。另取十只小鼠单独注射赋形剂。注射后24小时采集血清样本，并将各特拉匹韦给药组的SEAP活性与赋形剂组进行比较。大鼠和犬：使用大鼠和犬评估特拉匹韦（VX-950）的口服和静脉注射药代动力学。对三只体重250-300克的雄性Sprague-Dawley大鼠，静脉注射0.95 mg/kg的特拉匹韦。使用肝素化试管在给药前以及给药后0.083、0.167、0.25、0.5、1、1.5、2、3、4、6和8小时采集系列血样。另对三只体重8-12公斤的雄性比格犬，静脉注射溶于10%乙醇、40%聚乙二醇400和50% 5%葡萄糖溶液中的特拉匹韦。使用肝素化试管在给药前以及给药后0.083、0.167、0.25、0.5、1、1.5、2、4、6、8、12和24小时采集系列血样。特拉匹韦（Telaprevir）以聚乙烯吡咯烷酮（PVP）K-30和2%十二烷基硫酸钠配制而成，采用灌胃法给药，用于大鼠和犬的口服研究。分别给予三只雄性Sprague-Dawley大鼠（250-300 g）40 mg/kg的VX-950口服剂量，以及四只雄性比格犬（10.9-12.0 kg）9.6 mg/kg的VX-950口服剂量。在两项口服研究中，分别于给药前以及给药后0.25、0.5、1、1.5、2、3、4、6、8、12和24小时采集血样。在静脉和口服研究中，均通过离心获得血浆样本，并保存在-70°C直至分析。口服研究的样本采用非手性液相色谱-串联质谱法（LC/MS/MS）进行分析，而静脉研究的样本采用手性液相色谱-串联质谱法（LC/MS/MS）进行分析。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
吸收、分布和排泄
吸收 口服后，雷迪帕韦在约 4 至 4.5 小时内达到血浆峰浓度，峰浓度 (Cmax) 为 323 ng/mL。 排泄途径 单次口服 90 mg [14C]-雷迪帕韦后，粪便和尿液中 [14C]-放射性物质的平均总回收率约为 87%，其中大部分放射性剂量从粪便中回收（约 86%）。粪便中排出的原形雷迪帕韦平均占给药剂量的 70%，氧化代谢物 M19 占给药剂量的 2.2%。这些数据表明，原形雷迪帕韦经胆汁排泄是主要的排泄途径，肾脏排泄是次要途径（约 1%）。 代谢/代谢物 体外实验未检测到人CYP1A2、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4对雷迪帕韦的代谢。已观察到通过未知机制进行的缓慢氧化代谢的证据。单次服用90 mg [14C]-雷迪帕韦后，全身暴露几乎完全为原药（>98%）。粪便中主要存在的是未代谢的雷迪帕韦。 生物半衰期 雷迪帕韦的中位终末半衰期为47小时。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
妊娠期和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概要 尚未对接受丙型肝炎病毒感染治疗的哺乳期妇女进行雷迪帕韦的研究。由于其与母体血浆蛋白的结合率高达99.8%，因此母乳中的含量可能非常低。如果母亲需要单独使用雷迪帕韦或与索非布韦（Harvoni）联合使用，则无需停止母乳喂养。一些资料建议，当雷迪帕韦与利巴韦林联合使用时，应避免母乳喂养。 丙型肝炎不会通过母乳传播，并且母乳已被证明可以灭活丙型肝炎病毒（HCV）。然而，美国疾病控制与预防中心建议，如果感染丙型肝炎病毒的母亲出现乳头皲裂或出血，则应考虑停止母乳喂养。目前尚不清楚此警告是否适用于正在接受丙型肝炎治疗的母亲。 感染丙型肝炎病毒 (HCV) 的母亲所生的婴儿应接受 HCV 检测；由于母体抗体在婴儿出生后的前 18 个月内以及婴儿产生免疫反应之前均存在，因此建议进行核酸检测。◉ 对母乳喂养婴儿的影响 截至修订日期，未找到相关的已发表信息。 ◉ 对哺乳和母乳的影响 截至修订日期，未找到相关的已发表信息。 药物和哺乳数据库 (LactMed) 蛋白结合率 雷迪帕韦与人血浆蛋白的结合率 >99.8%。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
雷迪帕韦是一种直接抗病毒药物（DAA），常与其他药物联合用于治疗慢性丙型肝炎。慢性丙型肝炎是由丙型肝炎病毒（HCV）感染引起的传染性肝病。HCV是一种单链RNA病毒，分为九种不同的基因型，其中1型基因型在美国最为常见，约占所有慢性HCV患者的72%。自2011年以来，随着雷迪帕韦等直接抗病毒药物（DAA）的研发，慢性丙型肝炎的治疗选择取得了显著进展。更具体地说，雷迪帕韦是丙型肝炎病毒（HCV）非结构蛋白5A（NS5A）的抑制剂，NS5A是病毒RNA复制和HCV病毒颗粒组装所必需的。尽管其确切的作用机制尚不清楚，但据推测，它能阻止NS5A的过度磷酸化，而NS5A的过度磷酸化是病毒蛋白合成所必需的。它对HCV的1a、1b、4a和5a基因型有效，对2a和3a基因型的活性较弱。雷迪帕韦和其他直接抗病毒药物是治疗丙型肝炎的有效选择，因为它们具有很高的耐药屏障。与靶向其他病毒酶（例如蛋白酶）的HCV药物相比，这是一个重要的优势，因为后者耐药性的快速产生已被证明是治疗失败的重要原因。美国肝病研究协会 (AASLD) 和美国传染病学会 (IDSA) 于 2016 年联合发布指南，推荐将雷迪帕韦与索非布韦联合作为一线治疗方案，用于治疗丙型肝炎病毒 (HCV) 基因型 1a、1b、4、5 和 6。雷迪帕韦治疗的目标是治愈丙型肝炎病毒感染，或在每日治疗 12 周后达到持续病毒学应答 (SVR)。SVR 和丙型肝炎病毒感染的根除与显著的长期健康获益相关，包括减少肝脏相关损伤、提高生活质量、降低肝细胞癌的发生率以及降低全因死亡率。使用雷迪帕韦等直接抗病毒药物治疗的副作用极少，最常见的副作用是头痛和疲劳。与以往基于干扰素和利巴韦林的治疗方案相比，该方案的显著优势在于副作用少且疗程短。以往的方案受限于输注部位反应、血细胞计数下降和神经精神副作用。自2014年以来，雷迪帕韦与索非布韦（商品名Harvoni）以固定剂量复方制剂的形式上市，用于治疗慢性丙型肝炎。Harvoni于2014年10月获得FDA批准，适用于治疗HCV基因1、4、5和6型感染，可根据肝损伤或肝硬化的程度选择是否联合利巴韦林。研究表明，雷迪帕韦和索非布韦联合使用（Harvoni）治疗12周后，持续病毒学应答率（SVR）可达93%至99%。该复方制剂在治疗合并HIV感染的HCV患者方面也取得了成功。
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| 分子式 |
C49H55CLF2N8O6
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|---|---|
| 分子量 |
925.46
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| 精确质量 |
924.3901
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| CAS号 |
2128695-48-5
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| 相关CAS号 |
Ledipasvir;1256388-51-8;Ledipasvir (acetone);1441674-54-9;Ledipasvir D-tartrate;1502654-87-6;Ledipasvir-d6;2050041-12-6;Ledipasvir (diacetone);1502655-48-2
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| PubChem CID |
164887328
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| tPSA |
175Ų
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| InChi Key |
DDPFJRIMZUVTQU-NDANSHMASA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C49H54F2N8O6.ClH/c1-24(2)39(56-46(62)64-5)44(60)58-23-48(15-16-48)21-38(58)42-52-22-37(55-42)28-9-13-32-31-12-8-26(18-33(31)49(50,51)34(32)19-28)27-10-14-35-36(20-27)54-43(53-35)41-29-7-11-30(17-29)59(41)45(61)40(25(3)4)57-47(63)65-6;/h8-10,12-14,18-20,22,24-25,29-30,38-41H,7,11,15-17,21,23H2,1-6H3,(H,52,55)(H,53,54)(H,56,62)(H,57,63);1H/t29-,30+,38-,39-,40-,41-;/m0./s1
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| 化学名 |
methyl N-[(2S)-1-[(6S)-6-[5-[9,9-difluoro-7-[2-[(1R,3S,4S)-2-[(2S)-2-(methoxycarbonylamino)-3-methylbutanoyl]-2-azabicyclo[2.2.1]heptan-3-yl]-3H-benzimidazol-5-yl]fluoren-2-yl]-1H-imidazol-2-yl]-5-azaspiro[2.4]heptan-5-yl]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]carbamate;hydrochloride
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| 别名 |
Ledipasvir hydrochloride; Ledipasvir (hydrochloride);
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.0805 mL | 5.4027 mL | 10.8054 mL | |
| 5 mM | 0.2161 mL | 1.0805 mL | 2.1611 mL | |
| 10 mM | 0.1081 mL | 0.5403 mL | 1.0805 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
SARS-CoV-2-IN-116
MolPort-010-778-422
SARS-CoV-2-IN-118
RLA-3107
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