| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD)
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| 体外研究 (In Vitro) |
PDD4091是一种新型的G6PD活性选择性抑制剂。
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| 体内研究 (In Vivo) |
为了确定G6PD抑制是否会降低PH，我们首先确定了G6PD抑制剂的最大耐受剂量（PDD4091）。Hx小鼠的最大耐受剂量为15 mg kg - 1 day - 1，超过该剂量PDD4091可抑制左室功能。更重要的是，G6PD抑制剂PDD4091对Hx小鼠的治疗以剂量依赖的方式降低了升高的RVSP和RVEDP（图1，B和C，顶部面板）。PDD4091具有相当宽的治疗窗（0.01-15 mg kg - 1 day - 1）， EC50为0.26±0.10,0.58±0.36 mg kg - 1 day - 1均可降低RVSP和RVEDP。此外，PDD4091 （1.5 mg kg - 1 day - 1）对Hx和Hx + SU小鼠均有效降低了升高的RVSP和RVEDP（图1，B和C，底部面板）。与Nx和Nx + SU组相比，Hx和Hx + SU组富尔顿指数升高。G6PD抑制剂降低Hx和Hx + SU组富尔顿指数升高（表1）。此外，PDD4091 （1.5 mg kg−1天−1）治疗预先存在Hx + SU诱导PH的小鼠（n = 6）降低RVSP(从Hx + SU: 74±5.3降至Hx + SU + PDD4091: 41±3.3 mm Hg；P < 0.05)， RVEDP(从Hx + SU: 13±3到Hx + SU + PDD4091: 7±1 mm Hg；P < 0.05)，富尔顿指数(从Hx + SU: 0.4±0.01到Hx + SU + PDD4091: 0.3±0.01；P < 0.05)。PDD4091 （1.5 mg kg−1 day−1）使G6PD活性降低20%。[1]
G6PD抑制Hx + SU小鼠的PA预收缩，减少PASMC生长，减少PA重塑。[1] PA重塑是严重ph的标志。增生和抗凋亡的PA内皮细胞和pasmc有助于高血压重塑（Morrell等，2009）。之前，我们和其他人提出高血压患者和动物的PA中SMCs从分化表型转变为去分化表型，并有助于PA重塑(Zhou et al., 2009；Chettimada et al., 2015；Sahoo et al., 2016)。去分化的SMCs具有高增殖、迁移和分泌功能（Frismantiene et al., 2018）。既往研究表明，Hx + SU模型PH小鼠的PA重塑比Hx小鼠更严重（Vitali et al., 2014）。因此，我们在离体研究中确定G6PD抑制是否使PA松弛，在细胞培养中抑制暴露于Hx和SU的PASMCs的生长，并减少Hx + SU小鼠中PA的重塑。我们的结果显示PDD4091剂量依赖性松弛PA与KCl预收缩（图2A）。PDD4091 [1 μmol/l， EC50剂量（Hamilton et al., 2012）]作用于缺氧培养的PASMCs 48小时后，细胞数量减少（图2B）， Hx和Hx + SU诱导的细胞生长也减弱（图2C）。PDD4091 （1.5 mg kg - 1 day - 1）治疗Hx + SU小鼠3周后，闭塞性肺血管重构消失（图2D）。 G6PD抑制Hx + SU对小鼠和人PASMCs肺中Cyp1a1和Sufu基因表达的影响。[1] 接下来,我们决定是否抑制G6PD活性降低的Cyp1a1和Sufu的表达,增加在肺高血压小鼠(图3 c)和Hx Hx +苏老鼠和人类PASMCs暴露在Hx +苏。治疗PDD4091(1.5毫克公斤−−1天1)为3周的老鼠和应用PDD4091(1μM)对人类PASMCs 48小时取消Hx + SU-induced Cyp1a1和Sufu表达在肺(图4,A和B)和在人类PASMCs(图4 c)。 |
| 细胞实验 |
人肺动脉平滑肌细胞在添加生长因子（SMGM-2平滑肌单股试剂盒）的平滑肌基础培养基中，于37℃、5% CO2下保存。当细胞达到约70%的汇合时，用0.05%的胰蛋白酶- edta在六孔板中传代培养，每孔约3 × 105个细胞。
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| 动物实验 |
动物模型和实验方案。[1]
雄性和雌性C57BL/6J小鼠（18–32 g）购自杰克逊实验室，并随机分为四组：常氧组（Nx）、常氧+Sugen5416组（Nx+SU）、低氧组（Hx）和低氧+Sugen5416组（Hx+SU）。Nx组小鼠置于常氧（21% O2）环境中，Hx组小鼠置于常压低氧舱（10% O2）中，持续6周（Joshi等，2020）。Nx+SU组和Hx+SU组小鼠在Nx（21% O2）或Hx（10% O2）期间，每周皮下注射一次SU5416（20 mg/kg），持续3周，具体方法如前所述（Vitali等，2014）。药物治疗组的小鼠每日皮下注射一种新型G6PD抑制剂N-[(3β,5α)-17-氧代雄甾烷-3-基]磺酰胺（PDD4091；1.5 mg kg⁻¹ day⁻¹）（Hamilton等，2012），持续3周。为了确定PDD4091是否以剂量依赖的方式降低肺动脉高压（PH），将小鼠随机分为三组，分别接受低剂量（0.15 mg kg⁻¹ day⁻¹）、中剂量（1.5 mg kg⁻¹ day⁻¹）或高剂量（15 mg kg⁻¹ day⁻¹）的PDD4091注射。Hx和Hx+SU小鼠是肺动脉高压的临床前模型（Stenmark等，2009）。治疗结束后，进行血流动力学测量，采集组织（肺和动脉），并收集血液样本。数据分析采用盲法进行。 简化代表性亚硫酸氢盐测序。[1] 为了确定Nx、Hx、Hx + SU和Hx + PDD4091小鼠肺组织中的DNA甲基化状态，使用Qiagen All Prep DNA/RNA/miRNA通用试剂盒，按照制造商的说明从肺组织中分离基因组DNA。使用NanoDrop和Qubit荧光计对DNA进行定量。使用Agilent TapeStation评估基因组DNA的质量。使用Premium简化代表性亚硫酸氢盐测序试剂盒，按照制造商的说明构建简化代表性亚硫酸氢盐测序文库。在HiSeq2500测序仪上进行测序，采用125 nt的双端测序。使用 bcl2fastq 2.19.0 版本对 Illumina HiSeq2500 测序仪生成的原始 reads 进行解复用。使用 Trim Galore 0.4.4_dev 版本进行质量过滤和接头去除，参数如下：“–paired–clip_R1 3–clip_R2 3–three_prime_clip_R1 2–three_prime_clip_R2 2”（http://www.bioinformatics.babraham.ac.uk/projects/trim_galore/）。然后使用 Bismark 0.19.0 版本将处理和清洗后的 reads 比对到小鼠参考基因组 (mg38)，参数如下：“–bowtie2–maxins 1000”。使用 R 3.4.1 版本环境下的 methylKit 1.4.0 版本进行差异甲基化分析。使用methylKit在CpG背景下处理Bismark比对结果，最低质量阈值为10。筛选出覆盖度至少为5个reads且覆盖度值不超过99.9%分位数的位点后，对覆盖度进行标准化。然后，对样本间的覆盖度进行标准化，并将覆盖整个基因组的500 nt窗口内的甲基化计数进行聚合。最终得到一个统一的样本窗口集，其中仅保留每个组至少有一个样本覆盖的窗口。使用χ²检验，并应用q值（SLIM）阈值0.05和甲基化差异阈值25%，对条件组间进行差异甲基化分析。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
肺动脉高压（PH）是一种肺血管细胞增生性疾病。磷酸戊糖途径（PPP）是葡萄糖代谢的重要途径，对细胞生长至关重要。由于目前对PH的治疗效果不佳，我们的目标是确定抑制PPP的限速酶——葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）是否能够阻止促进平滑肌细胞（SMC）增殖的异常基因表达，减少肺动脉重塑，并使PH实验模型中的血流动力学恢复正常。我们通过小鼠暴露于10%氧气（Hx）或在低氧暴露期间每周注射血管内皮生长因子受体阻滞剂[Sugen5416 (SU)；20 mg kg−1]（Hx + SU）来诱导小鼠发生PH。在暴露于缺氧（Hx）期间，每日注射一种新型G6PD抑制剂（N-[(3β,5α)-17-氧代雄甾烷-3-基]磺酰胺；1.5 mg kg−1）。我们测量了正常氧合、缺氧（Hx）、缺氧联合磺酰胺（Hx + SU）以及G6PD抑制剂治疗小鼠的右心室（RV）压力、左心室压力-容积关系以及肺组织基因表达。与正常氧合对照组小鼠相比，缺氧（Hx）和缺氧联合磺酰胺（Hx + SU）小鼠的右心室收缩压和舒张末期压均升高。缺氧（Hx）和缺氧联合磺酰胺（Hx + SU）降低了表观遗传修饰因子（写入因子和擦除因子）的表达，增加了DNA的低甲基化，并诱导了肺组织中异常的基因表达。与未治疗的肺动脉高压（PH）组相比，G6PD抑制剂降低了基因的异常表达和平滑肌细胞（SMC）的增殖，减少了肺血管重塑，并降低了右心室压力。通过调节表观遗传修饰因子和DNA甲基化的活性，药理学抑制G6PD活性可有效降低Hx和Hx+SU小鼠以及肺动脉高压临床前模型中的右心室压力负荷，并且似乎是一种安全的药物治疗策略。[1]
除了抑制肺动脉壁血管细胞中的不良基因表达和减少闭塞性肺动脉疾病中的细胞生长外，PDD4091（一种新型选择性G6PD活性抑制剂（Hamilton等人，2012））还能剂量依赖性地舒张预收缩的肺动脉。我们此前已证实，使用非特异性抑制剂（例如17-酮类固醇[脱氢表雄酮 (DHEA) 及其代谢产物表雄酮]）抑制G6PD活性，以及通过siRNA介导的G6PD基因敲低，均可使预收缩的肺动脉舒张（Gupte等，2002），并降低高血压大鼠的右心室压力（Chettimada等，2012，2015）。因此，这些研究以及我们目前的研究结果共同表明，G6PD抑制可通过扩张肺动脉和减少肺动脉重塑，降低Hx和Hx+SU小鼠升高的右心室压力和肺动脉高压。总之，我们的研究结果共同表明，G6PD活性是Hx和Hx+SU小鼠肺动脉DNA甲基化差异、基因表达异常和重塑的重要因素。通过药物干预抑制 G6PD 活性可消除肺血管重塑，并改善肺动脉高压小鼠模型的血流动力学。因此，G6PD 抑制剂 N-[(3β,5α)-17-氧代雄甾烷-3-基]磺酰胺未来可能被用作治疗不同类型肺动脉高压的药物。[1] |
| 分子式 |
C19H32N2O3S
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|---|---|
| 分子量 |
368.533984184265
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| 精确质量 |
368.21
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| 元素分析 |
C, 61.92; H, 8.75; N, 7.60; O, 13.02; S, 8.70
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| CAS号 |
1373651-41-2
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| 相关CAS号 |
1373651-41-2;
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| SMILES |
C[C@@]12[C@@]3([C@]([C@]4([C@](C)(CC3)C(=O)CC4)[H])(CC[C@]1(C[C@@H](NS(N)(=O)=O)CC2)[H])[H])[H]
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| InChi Key |
QLIJDTTVUNSTPX-LUJOEAJASA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H32N2O3S/c1-18-9-7-13(21-25(20,23)24)11-12(18)3-4-14-15-5-6-17(22)19(15,2)10-8-16(14)18/h12-16,21H,3-11H2,1-2H3,(H2,20,23,24)/t12-,13-,14-,15-,16-,18-,19-/m0/s1
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| 化学名 |
N-[(3beta,5alpha)-17-Oxoandrostan-3-yl]sulfamide
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| 别名 |
PDD4091; PDD 4091; PDD-4091
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7135 mL | 13.5674 mL | 27.1348 mL | |
| 5 mM | 0.5427 mL | 2.7135 mL | 5.4270 mL | |
| 10 mM | 0.2713 mL | 1.3567 mL | 2.7135 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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