Topoisomerase II (topo II) – stabilizes topoisomerase II-DNA cleavable complex, inhibits topoisomerase II activity [1][2][3]

Amrubicin (amrubicin hydrochloride) is a completely synthetic 9-aminoanthracycline derivative characterized by a 9-amino group and a simple sugar moiety. It was developed to reduce cardiotoxicity while maintaining antitumor efficacy. Amrubicin is currently approved in Japan for the treatment of small-cell lung cancer and non-small-cell lung cancer. Its active metabolite, amrubicinol (13-hydroxy metabolite), is 5-100 times more active than amrubicin in inhibiting human tumor cell growth. The selective distribution of amrubicinol in tumors (higher than in normal tissues including heart) contributes to the greater efficacy and lower cardiotoxicity of amrubicin compared to doxorubicin. [2][3]

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Amrubicin (SM-5887) 是一种 DNA 拓扑酶 II。 Amrubicin (SM-5887) (2.5 μg/mL) 增强人肺腺癌细胞 A549 的放射反应 [1]。 Amrubicin 抑制 LX-1、A549、A431 和 BT-474 细胞系，IC50 分别为 1.1、2.4、0.61 和 3.0 μg/mL [2]。氨柔比星凝灰岩 U937 细胞表现出细胞周期特征，IC50 为 5.6 μM。 Amrubicin (SM-5887) (20 μM) 会引起 U937 细胞中的导管诱导，激活 caspase-3/7，并降低线粒体膜电位 (Δψm) [3]。

在人肺癌异种移植模型（无胸腺裸鼠）中，氨柔比星（25 mg/kg，静脉注射，第0天单次给药）显著抑制SCLC（Lu-24：T/C = 17%；Lu-134：T/C = 9%）和NSCLC（Lu-99：T/C = 29%；LC-6：T/C = 50%；L-27：T/C = 26%）的肿瘤生长。多柔比星（12.5 mg/kg）对Lu-24有效但对Lu-134无效。所有治疗组体重下降均在10%以内。[2]
在联合用药研究中，氨柔比星（25 mg/kg静脉注射）增强顺铂（10 mg/kg静脉注射）对LX-1肿瘤的抗肿瘤活性（T/C：氨柔比星单药57%，联合31%）；伊立替康（120 mg/kg静脉注射）（T/C：氨柔比星单药41%，联合24%）；长春瑞滨（16 mg/kg腹腔注射）对QG-56肿瘤（T/C：氨柔比星单药43%，联合27%）；替加氟/尿嘧啶（28 mg/kg口服，每日5次）对SC-6肿瘤（T/C：氨柔比星单药8.5%，联合3.7%）；曲妥珠单抗（100 mg/kg腹腔注射，每周两次×2周）对4-1ST肿瘤（T/C：氨柔比星单药8.8%，联合1.6%）。吉西他滨联合用药与氨柔比星单药相比未显著增强疗效。[2]
在A549细胞中，X射线照射前给予氨柔比星（2.5 μg/ml，3小时）在分次照射方案中增强放射敏感性（2 Gy × 4次，24小时间隔）。[1]

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Amrubicin (SM-5887)（25 mg/kg，静脉注射）对 SCLC 肿瘤 Lu-24 和 Lu-134 表现出强大的抗癌作用；这些肿瘤每天的 T/C 值（将治疗组的平均肿瘤生长率与这些肿瘤的第 14 条进行比较）分别为 17% 和 9%。与单独使用氨柔比星相比，氨柔比星 (SM-5887)（25 mg/kg，静脉注射）与环丙沙星和伊立替康联合使用，可有效减少产生 LX-1 细胞的小鼠的肿瘤形成。在人类癌症异种移植模型中，氨柔比星 (SM-5887) 单独或与 Tegaf 和 Urinary End Base 联合使用可抑制肿瘤生长 [2]。

拓扑异构酶II介导的DNA切割通过ICRF-193抑制的细胞DNA片段化研究推断。[2][3]

U937人白血病细胞在含10% FBS的RPMI-1640中培养。细胞用氨柔比星（20 μM处理1小时）处理，洗涤，在无药培养基中继续培养。细胞周期分析：80%乙醇固定，碘化丙啶（50 μg/ml）加RNase A染色，流式细胞术分析。凋亡检测：Hoechst 33258染色观察核形态；2%琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段化。[3]
A549人肺腺癌细胞在含NCTC-135、乳白蛋白水解物和15%新生牛血清的Eagle's MEM中培养。X射线照射前用氨柔比星（2.5 μg/ml，3小时）处理（130 kVp，5 mA，0.5 mm铝滤片，1.0 Gy/min）。集落形成实验：细胞接种，孵育7-10天，结晶紫染色，计数>50个细胞的集落。[1]
人癌细胞系（LX-1、A431、BT-474、A549）在适当培养基中培养。细胞增殖实验：细胞接种于96孔板，用系列稀释的氨柔比星处理3天，使用WST-1或AlamarBlue检测活细胞数，计算IC50值。[2]

人肿瘤异种移植模型：雌性BALB/c nu/nu裸鼠（6-8周）皮下移植肿瘤碎片（约2-3 mm直径）于胁腹。当肿瘤达100-300 mm³时，将小鼠随机分组（n=6-8）。氨柔比星（25 mg/kg）于第0天静脉注射。联合用药研究中，氨柔比星在其他药物前约1小时给药。每周两次用卡尺测量肿瘤直径；肿瘤体积计算公式为（短径）² ×（长径）/2。T/C（%）=（治疗组平均肿瘤生长率/对照组平均肿瘤生长率）×100。监测体重变化。[2]
放射敏感性研究：A549细胞用氨柔比星（2.5 μg/ml）处理3小时，然后X射线照射（0-8 Gy）。分次照射：2 Gy/次，24小时间隔，共4次。集落形成实验在孵育7-10天后进行。[1]

吸收、分布和排泄
在服用阿姆鲁比星后立即至1小时内观察到活性代谢物阿姆鲁比星醇的血浆峰浓度。与阿姆鲁比星的血浆浓度相比，阿姆鲁比星醇的血浆浓度较低。阿姆鲁比星醇的血浆曲线下面积（AUC）约为阿姆鲁比星血浆AUC的十分之一。与血浆相比，阿姆鲁比星醇在红细胞中的浓度较高。阿姆鲁比星醇在红细胞中的AUC比血浆高2.5倍至57.9倍。由于阿姆鲁比星醇比阿姆鲁比星更容易分布到红细胞中，因此阿姆鲁比星醇和阿姆鲁比星在红细胞中的浓度非常相似。阿姆鲁比星醇在红细胞中的AUC约为阿姆鲁比星红细胞AUC的一半。在一项研究中，每日重复给药阿姆鲁比星后，在血浆和红细胞中观察到阿姆鲁比星醇的蓄积。第3天，血浆中阿姆鲁比星醇的AUC值比第1天高1.2倍至6倍；红细胞中阿姆鲁比星醇的AUC值比第1天高1.2倍至1.7倍。连续5天给药后，血浆和红细胞中阿姆鲁比星醇的AUC值比第1天高1.2倍至2.0倍。
在另一项研究中，口服阿姆鲁比星后，尿液中阿姆鲁比星和阿姆鲁比星醇的排泄量占给药剂量的2.7%至19.6%。排泄的阿姆鲁比星醇量约为排泄阿姆鲁比星的10倍。阿姆鲁比星及其代谢物的排泄主要通过肝胆途径。在大鼠中证实了肠肝循环。
分布容积适中（为体液总量的1.4倍）。
癌症患者血浆中阿姆鲁比星的药代动力学特征是总清除率低（占肝总血流量的22%）。

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代谢/代谢物
在大鼠和犬中，主要代谢物（阿姆鲁比星醇）是胞质羰基还原酶在C-13羰基处还原的产物。参与阿姆鲁比星和阿姆鲁比星醇代谢的其他酶包括还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）-P450还原酶和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NAD[P]H）-醌氧化还原酶。一项研究在体内和体外检测到了另外12种代谢物。活性代谢物阿姆鲁比西醇的血浆峰浓度在给药后立即至给药后1小时内出现。这些代谢物包括四种苷元代谢物、两种阿姆鲁比西醇葡萄糖醛酸苷、脱氨基阿姆鲁比西以及五种极性很强的未知代谢物。次要代谢物的体外细胞生长抑制活性显著低于阿姆鲁比西醇。阿姆鲁比西及其代谢物的排泄主要通过肝胆途径。在大鼠中已证实存在肠肝循环。

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生物半衰期
20-30小时。在一项犬类研究中，阿姆鲁比西的血浆浓度呈双相模式，给药后立即达到峰浓度，随后α和β半衰期(t1/2)±标准差分别为0.06±0.01小时和2.0±0.3小时。

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氨柔比星主要通过羰基还原酶代谢为其活性13-羟基代谢物氨柔比星醇。在氨柔比星治疗的荷瘤小鼠中，氨柔比星醇是肿瘤组织中的主要代谢物，其水平高于多柔比星治疗小鼠中的多柔比星水平。相反，在包括心脏在内的多种正常组织中，氨柔比星和氨柔比星醇的水平低于多柔比星。氨柔比星醇在肿瘤中的水平与氨柔比星的体内疗效呈良好相关性。[2][3]
在大鼠和犬中，氨柔比星给药后心脏中氨柔比星或氨柔比星醇的浓度低于多柔比星给药后多柔比星的浓度。[2]

蛋白质结合
一项研究对肝功能受损患者和肝功能正常患者血浆中阿姆鲁比星的蛋白结合率进行了研究。结果显示，肝功能受损患者的血浆蛋白结合率为 91.3%–97.1%，而肝功能正常患者的血浆蛋白结合率为 82.0%–85.3%。

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在兔和犬的慢性实验模型中，氨柔比星的心脏毒性远低于多柔比星。[2]
在A549细胞中，氨柔比星（2.5 μg/ml）单独处理3小时细胞毒性极小（存活分数约0.9）。[1]
在人白血病U937细胞中，氨柔比星（20 μM处理1小时）诱导凋亡（通过亚G₁细胞群增加测量）。[3]
在体内，氨柔比星（25 mg/kg静脉注射）耐受良好，所有治疗组体重下降均在10%以内。[2]

[1]. Enhancement of radiosensitivity by topoisomerase II inhibitor, amrubicin and amrubicinol, in human lung adenocarcinoma A549 cells and kinetics of apoptosis and necrosis induction. Int J Mol Med. 2006 Nov;18(5):909-15.

[2]. Amrubicin, a novel 9-aminoanthracycline, enhances the antitumor activity of chemotherapeutic agents against human cancer cells in vitro and in vivo. Cancer Sci. 2007 Mar;98(3):447-54.

[3]. Amrubicin induces apoptosis in human tumor cells mediated by the activation of caspase-3/7 preceding a loss of mitochondrial membrane potential. Cancer Sci. 2006 Dec;97(12):1396-403.

氨柔比星（盐酸氨柔比星）是一种完全合成的9-氨基蒽环类衍生物，其特征是9-氨基基团和简单糖基部分。该药物旨在降低心脏毒性的同时保持抗肿瘤疗效。氨柔比星目前在日本被批准用于治疗小细胞肺癌和非小细胞肺癌。其活性代谢物氨柔比星醇（13-羟基代谢物）抑制人肿瘤细胞生长的活性比氨柔比星高5-100倍。氨柔比星醇在肿瘤中的选择性分布（高于包括心脏在内的正常组织）有助于氨柔比星相比多柔比星具有更高的疗效和更低的心脏毒性。[2][3]

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阿姆鲁比星是一种合成蒽环类抗生素，分子式为C25H25NO9。它是一种拓扑异构酶II特异性抑制剂，主要用于治疗癌症，尤其是肺癌，在肺癌治疗中，它是活性代谢物安布鲁西醇的前药。阿姆鲁比星具有拓扑异构酶II抑制剂、抗肿瘤药物和前药的多重作用。它是一种醌类化合物，属于四苯并环己烷类、甲基酮类、蒽环类抗生素和伯氨基化合物。阿姆鲁比星是一种第三代合成蒽环类抗生素，目前正在开发用于治疗小细胞肺癌。Pharmion公司于2006年11月获得了阿姆鲁比星的授权。2002年，基于小细胞肺癌和非小细胞肺癌的II期疗效数据，阿姆鲁比星在日本获批上市。自2005年1月起，安柔比星（Amrubicin）由专注于肿瘤治疗的日本制药公司日本化药株式会社（Nippon Kayaku）开始销售。日本化药株式会社从安柔比星的原始研发者大日本住友制药株式会社（Dainippon Sumitomo）获得了日本的销售权。
安柔比星是一种合成的9-氨基蒽环类抗肿瘤药物。安柔比星可嵌入DNA并抑制拓扑异构酶II的活性，从而抑制DNA复制以及RNA和蛋白质的合成，最终导致细胞生长抑制和细胞死亡。与传统的蒽环类药物相比，安柔比星展现出更高的抗肿瘤活性，且未表现出此类化合物常见的累积性心脏毒性。

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适应症
已在肺癌的治疗中进行研究。

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作用机制
作为一种蒽环类药物，安柔比星通过多种作用机制发挥抗有丝分裂和细胞毒性作用。氨柔比星可通过插入碱基对之间与DNA形成复合物，并通过稳定DNA-拓扑异构酶II复合物来抑制拓扑异构酶II的活性，从而阻止拓扑异构酶II通常催化的连接-再连接反应中的再连接部分。拓扑异构酶II是一种位于细胞核内的酶，它通过双链断裂和再连接来调节DNA结构，进而调控DNA复制和转录。抑制该酶会导致DNA复制受阻，并使细胞生长停止，细胞周期停滞在G2/M期。氨柔比星抑制DNA拓扑异构酶II的机制被认为是稳定可裂解的DNA-拓扑异构酶II复合物，最终导致再连接失败和DNA链断裂。 DNA损伤会触发caspase-3和-7的激活以及PARP（聚ADP核糖聚合酶）的裂解，导致细胞凋亡和线粒体膜电位丧失。与所有蒽环类药物一样，阿姆鲁比星可嵌入DNA，并通过与NADPH相互作用产生活性氧自由基，从而造成细胞损伤。与同属蒽环类药物的阿霉素相比，阿姆鲁比星与DNA的亲和力低7倍，因此需要更高浓度的阿姆鲁比星才能促进DNA解旋。

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药效学
包括阿姆鲁比星在内的蒽环类抗生素是一类强效抗癌药物，对实体瘤和血液系统恶性肿瘤均具有显著活性。它们是治疗成人和儿童肿瘤疾病的大量研究的主要对象。阿姆鲁比星是一种9-氨基蒽环类衍生物，它通过稳定蛋白质-DNA复合物，进而导致双链DNA断裂，从而抑制细胞生长，而这一过程是由拓扑异构酶II介导的。蒽环类药物已被观察到具有多种分子效应（例如，DNA嵌入、抑制拓扑异构酶II以及稳定拓扑异构酶IIα可裂解复合物）。与阿霉素相比，阿姆鲁比星的DNA嵌入能力降低。DNA相互作用的降低可能影响阿姆鲁比星及其代谢产物阿姆鲁比星醇的细胞内分布。阿姆鲁比星在P388细胞核中的分布率为20%，而阿霉素（另一种蒽环类药物）的核分布率为80%。阿姆鲁比星的细胞生长抑制作用似乎主要归因于其对拓扑异构酶II的抑制。

C₂₅H₂₅NO₉

483.47

483.152

C, 62.11; H, 5.21; N, 2.90; O, 29.78

110267-81-7

92395-36-3 (HCl);110267-81-7;110311-30-3;

3035016

Pink to red solid powder

1.6±0.1 g/cm3

717.8±60.0 °C at 760 mmHg

172-174ºC

387.9±32.9 °C

0.0±2.4 mmHg at 25°C

1.720

2.64

176.61

5

10

3

35

881

5

CC(=O)[C@]1(C[C@@H](C2=C(C1)C(=C3C(=C2O)C(=O)C4=CC=CC=C4C3=O)O)O[C@H]5C[C@@H]([C@@H](CO5)O)O)N

VJZITPJGSQKZMX-XDPRQOKASA-N

InChI=1S/C25H25NO9/c1-10(27)25(26)7-13-18(16(8-25)35-17-6-14(28)15(29)9-34-17)24(33)20-19(23(13)32)21(30)11-4-2-3-5-12(11)22(20)31/h2-5,14-17,28-29,32-33H,6-9,26H2,1H3/t14-,15+,16-,17-,25-/m0/s1

(7S,9S)-9-acetyl-9-amino-7-[(2S,4S,5R)-4,5-dihydroxyoxan-2-yl]oxy-6,11-dihydroxy-8,10-dihydro-7H-tetracene-5,12-dione

SM-5887; AMR; SM-5887; Amrubicin; 110267-81-7; amrubicina; amrubicine; amrubicinum; SM5887; SM 5887; Amirubicin Hydrochloride; Foreign brand name: Calsed

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ≥ 30 mg/mL (~62.05 mM)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。