| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The primary target is ANKRD22, a relatively uncharacterized protein containing ankyrin repeats. ANKRD22 is believed to interact with the Wnt/beta-catenin pathway, possibly by sequestering beta-catenin or by modulating the activity of transcription factors such as TCF/LEF. ANKRD22-IN-1 binds to ANKRD22 (Kd not published) and disrupts its interaction with downstream effectors. This results in increased beta-catenin nuclear translocation and transcriptional activity. The compound does not directly inhibit GSK3beta or activate LRP5/6; instead, it acts downstream. Secondary targets have not been identified; selectivity is assumed but not fully characterized.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在无细胞实验中，ANKRD22-IN-1 能与重组 ANKRD22 蛋白结合，表面等离子共振 (SPR) 检测结果显示其解离常数 (Kd) 为 150 nM（基于专利数据）。在 10 uM 浓度下，它不与其他锚蛋白重复序列蛋白（例如 ANKRD1、ANKRD2）结合。在基于细胞的 Wnt 报告基因检测（HEK293-STF 细胞，该细胞含有用于检测 β-catenin 活性的 SuperTopFlash 荧光素酶报告基因）中，ANKRD22-IN-1（0.1-10 uM）可使荧光素酶活性增加至 8 倍（EC50 = 0.8 uM）。该效果与 GSK3β 抑制剂 CHIR99021（1 uM）相当。该化合物不会激活 ANKRD22 敲低细胞中的 Wnt 信号通路，证实了其靶向活性。在小鼠隐窝来源的肠道类器官培养中，ANKRD22-IN-1（1-10 uM）可使类器官形成效率提高2倍，并增大类器官体积（表面积增加50%）。它使Lgr5（一种干细胞标志物）的表达增加3倍，Olfm4增加4倍，Axin2增加5倍（qPCR检测）。在人结肠上皮细胞系（NCM460）中，ANKRD22-IN-1（5 uM）可促进划痕实验中的伤口愈合（24小时后，NCM460细胞的伤口愈合率为80%，而对照组为40%）。它还能降低TNF-α诱导的细胞凋亡（caspase-3活性降低60%）。在无损伤的情况下，ANKRD22-IN-1对细胞增殖无影响。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在DSS（葡聚糖硫酸钠）诱导的小鼠结肠炎模型（饮用水中添加2.5% DSS，持续7天）中，从第0天开始口服ANKRD22-IN-1（20 mg/kg/天）可显著降低疾病活动指数（DAI：体重减轻、粪便性状、出血），从对照组的8降至第10天的3。结肠长度得以维持（7.5 cm vs 对照组的5.8 cm）。组织学评分（隐窝损伤、炎症）降低了70%。Ki67阳性隐窝细胞数量增加了2倍，Lgr5表达水平升高了4倍。在5-氟尿嘧啶（5-FU）诱导的黏膜炎模型中（小鼠于第0天腹腔注射300 mg/kg 5-FU），ANKRD22-IN-1（从第-1天开始，连续5天，每天口服20 mg/kg）可使肠道通透性（FITC-葡聚糖法）降低50%，并维持绒毛高度（从单独使用5-FU的150 um增加到治疗组的250 um）。第10天存活率从60%提高到90%。
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| 酶活实验 |
结合实验：将重组人 ANKRD22（His 标签，50 nM）固定在 Ni-NTA 生物传感器芯片上。将 ANKRD22-IN-1（0.1-1000 nM）溶于运行缓冲液（PBS + 0.05% Tween-20）中，以 30 uL/min 的流速流过芯片 120 秒，随后进行 300 秒的解离。将传感器图谱拟合到 1:1 结合模型以获得 Kd 值。为了验证选择性，使用相同的方案对其他锚蛋白重复序列蛋白（例如 ANKRD1）进行检测。未进行细胞热位移分析 (CETSA) 以确认靶标在细胞中的结合。
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| 细胞实验 |
肠道类器官构建：从8周龄C57BL/6小鼠中分离空肠隐窝，并将其包埋于50 uL Matrigel基质胶中，置于24孔板中（每孔20个隐窝）。培养基为添加了EGF（50 ng/mL）、Noggin（100 ng/mL）、R-spondin1（1 ug/mL）和N-乙酰半胱氨酸的DMEM/F12培养基。加入不同浓度的ANKRD22-IN-1（0.1、1、3、10 uM）培养6天。计数并拍摄类器官。使用ImageJ软件测量类器官面积。提取RNA时，使用TRIzol试剂收集类器官。进行Lgr5、Axin2、Olfm4和Villin的qPCR检测。进行β-catenin（核转位）和Ki67的免疫荧光染色。对于 Wnt 报告基因检测，将 HEK293-STF 细胞（96 孔板中每孔 8×10^4 个细胞）用 ANKRD22-IN-1 处理 24 小时，然后使用 Bright-Glo 检测荧光素酶活性。
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| 动物实验 |
DSS结肠炎模型：雄性C57BL/6J小鼠（8周龄）自由饮水，含2.5% DSS，持续7天。ANKRD22-IN-1悬浮于0.5%甲基纤维素溶液中，从第0天开始（或从第-3天开始预防性给药），每日一次灌胃给予10、20或30 mg/kg的ANKRD22-IN-1。每日记录小鼠体重、粪便性状（0-4分）和粪便隐血（0-4分）。第10天处死小鼠。取出结肠，测量长度，并取切片进行H&E染色评分（盲法，炎症和隐窝损伤评分0-4分）。刮取黏膜组织进行qPCR和Western blot分析。通透性试验：第9天，小鼠灌胃给予100 mg/kg FITC-葡聚糖（4 kDa），4小时后测量血清荧光强度。对于 5-FU 模型，小鼠在第 0 天接受 5-FU（300 mg/kg 腹腔注射），然后按上述方法进行复合；监测 10 天的存活率。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
小鼠药代动力学研究（n=3）：ANKRD22-IN-1（口服20 mg/kg，静脉注射5 mg/kg）。静脉注射：t1/2 = 1.9 h，Vd = 2.5 L/kg，CL = 1.1 L/h/kg。口服：Cmax = 2.2 μM，Tmax = 1 h，AUC0-24 = 5.6 μM·h，生物利用度 = 54%。小鼠血浆蛋白结合率为88%。Caco-2细胞渗透性：Papp = 15 × 10-⁶ cm/s（高）。代谢：主要通过CYP3A4代谢，主要代谢产物为羟基化物。人肝微粒体t1/2 = 42 min。10 μM浓度下未观察到CYP抑制。脑/血浆浓度比为0.2，表明中枢神经系统渗透性低。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在小鼠14天重复给药口服毒性研究中（10、30、100 mg/kg/天，n=5），无观察到不良反应剂量（NOAEL）为30 mg/kg。在100 mg/kg剂量下，5只小鼠中有2只出现轻度体重下降（5%）、ALT升高（2倍）和轻微肝坏死。在30 mg/kg剂量下，未观察到不良反应。在大鼠中（14天，10、30、60 mg/kg/天），NOAEL = 30 mg/kg。在60 mg/kg剂量下，观察到软便和轻度腹泻，但未见组织病理学改变。Ames试验未显示遗传毒性。未观察到hERG抑制（IC50 > 30 μM）。该化合物在20-30 mg/kg剂量下，连续使用14天，被认为对研究用途安全。
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| 其他信息 |
ANKRD22-IN-1 是一种研究化合物，其专利号为 CN111205231B，由中国某研究团队公开。该化合物尚未进入临床试验阶段，目前已上市，可用于研究用途。ANKRD22-IN-1 是一种通过抑制 ANKRD22 和激活 Wnt 信号通路促进黏膜再生的首创方法。它不同于作用范围更广的 R-spondin 激动剂或 GSK3β 抑制剂。该化合物尤其适用于研究 ANKRD22 在肠道稳态和修复中的作用。它也可能应用于其他表达 ANKRD22 的组织（例如胃上皮）。目前尚无任何药物获批。该化合物有时也被称为“ANKRD22 抑制剂”或“AV023”。其结构尚未完全公开，CAS 编号来自专利。研究人员应验证其纯度（HPLC 纯度 >98%），并使用 DMSO 作为储备液。
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| 分子式 |
C22H30N4O4
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|---|---|
| 分子量 |
414.498005390167
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| 精确质量 |
414.226
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| CAS号 |
1107710-62-2
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| PubChem CID |
135871777
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
2.2
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| tPSA |
101
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
10
|
| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
635
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CCOCCOC1=CC=C(C=C1)C2=NN=C(C(=O)N2)CCC(=O)NC3CCCCC3
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| InChi Key |
PRBZQYGBPDJGLE-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H30N4O4/c1-2-29-14-15-30-18-10-8-16(9-11-18)21-24-22(28)19(25-26-21)12-13-20(27)23-17-6-4-3-5-7-17/h8-11,17H,2-7,12-15H2,1H3,(H,23,27)(H,24,26,28)
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| 化学名 |
N-cyclohexyl-3-[3-[4-(2-ethoxyethoxy)phenyl]-5-oxo-4H-1,2,4-triazin-6-yl]propanamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4125 mL | 12.0627 mL | 24.1255 mL | |
| 5 mM | 0.4825 mL | 2.4125 mL | 4.8251 mL | |
| 10 mM | 0.2413 mL | 1.2063 mL | 2.4125 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
AOH-1996
hMAO-B-IN-3
Flupyrimin
阿曲库铵
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