RAGE (receptor for advanced glycation end products)

体外活性：Azeliragon（也称为 TTP488 和 PF-04494700）是一种有效的口服生物活性 RAGE（高级糖基化终产物受体）抑制剂，具有治疗轻度至中度阿尔茨海默病和脑淀粉样血管病的潜力。 RAGE 是一种模式识别受体，会影响淀粉样蛋白（阿尔茨海默病的生物标志物）进入大脑的运动。在临床前研究中，azeliragon 减少了小鼠的大脑淀粉样蛋白，并提高了它们在行为测试中的表现。 Azeliragon 已被证明参与适应性免疫反应。目前正处于3期临床试验。细胞分析：Azeliragon 是一种口服活性、中枢作用的 RAGE-RAGE 配体相互作用拮抗剂。 AD转基因小鼠长期口服Azeliragon可减少大脑中淀粉样蛋白的负荷，提高行为测试的表现以及海马切片电生理记录的正常化。

Azeliragon 每天以 100 mcg/d 的剂量腹膜内给药。 RAGE 抑制剂 Azeliragon 在 II 期试验中的成功使用导致了针对 AD 患者的 III 期临床试验。

使用患有慢性肾功能不全的尿毒症猪的血清，我们的结果表明，KLF2的表达在体外受到尿毒症环境和个体尿毒症溶质的抑制。具体而言，在用尿毒症猪血清或羧甲基赖氨酸修饰的白蛋白（一种已知可诱导内皮功能障碍的晚期糖基化终产物（AGE））治疗后，人脐静脉内皮细胞中KLF2的表达显著降低。AGE介导的对KLF2的抑制依赖于AGE受体的激活，如通过小干扰RNA敲低AGE受体所测量的。此外，KLF2抑制促进内皮功能障碍，因为腺病毒过表达KLF2抑制人脐静脉内皮细胞中活性氧的产生和白细胞的粘附。此外，应用血液动力学剪切应力、延长血清透析或用AGE拮抗剂阿泽利拉贡（TTP488）受体治疗足以在体外防止KLF2抑制。[4]

细胞活力测定[3]
细胞类型：来自 RAGE-/- 或 WT B6 小鼠的纯化 T 细胞。
测试浓度： 4 nM
孵育持续时间： 16 小时
实验结果： 抑制 WT，但不是 RAGE-/- T 细胞，并且 IFN-γ 水平显着降低。

动物/疾病模型：糖尿病前期 NOD/LtJ（6-7 周龄）小鼠、自发性糖尿病 NOD 小鼠、WT balb/c（Bagg ALBino）小鼠（8-10 周龄）和糖尿病 B6 小鼠 [3]。
剂量：100 mcg/d
给药途径：腹腔注射；每日一次
实验结果：延长胰岛自体移植和同种异体移植的存活时间。

[1]. Targeting the Receptor for Advanced Glycation Endproducts (RAGE): A Medicinal Chemistry Perspective. J Med Chem. 2017 Sep 14;60(17):7213-7232.

[2]. Assessment of Azeliragon QTc Liability Through Integrated, Model-Based Concentration QTc Analysis. Clin Pharmacol Drug Dev. 2019 May;8(4):426-435.

[3]. RAGE ligation affects T cell activation and controls T cell differentiation. J Immunol. 2008 Sep 15;181(6):4272-8.

阿泽利拉贡是一种口服生物利用度高的晚期糖基化终产物受体（RAGE）抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。口服后，阿泽利拉贡靶向并结合RAGE，从而阻止RAGE配体与RAGE结合，并阻断RAGE介导的信号传导。这可能抑制RAGE通路过度激活的肿瘤细胞的增殖并诱导其凋亡。RAGE是一种属于免疫球蛋白超家族的受体，在炎症中发挥关键作用，并在多种癌症中过度表达。它在肿瘤细胞的增殖、存活和转移中起着关键作用。阿泽利拉贡是一种晚期糖基化终产物受体抑制剂，目前正在开发用于治疗阿尔茨海默病。本研究旨在评估血浆阿泽利拉贡浓度与QT间期之间的关系。本研究汇总了来自711名受试者（6236条记录）的QT间期和血浆浓度数据，这些受试者来自5项健康志愿者研究、2项轻度至中度阿尔茨海默病患者研究以及1项2型糖尿病合并持续性蛋白尿患者研究。采用非线性混合效应模型，在校正心率后，利用Fridericia标准（QTcF）和基线QTcF的性别差异，描述了阿泽利拉贡浓度相关的QT间期变化。采用两种方法预测阿泽利拉贡相关的QTcF变化：模拟法和偏差校正的90%置信区间法。结果显示，阿泽利拉贡血浆浓度与QTcF之间存在微弱的正相关关系，斜率为0.059 ms/ng/mL。模拟预测，在3期剂量（每日一次，5 mg，稳态）下，QTcF的平均变化（90%预测区间）为0.733毫秒（0.32-1.66毫秒）；在超治疗剂量（每日一次，20 mg，稳态或每日一次，60 mg，连续6天）下，QTcF的平均变化为4.32毫秒（1.7-8.74毫秒）。经偏差校正后，治疗剂量和超治疗剂量的90%置信区间上限分别为0.88毫秒和5.01毫秒。基于模型的分析显示，阿泽利拉贡血浆浓度与QTcF之间存在微弱的、无临床意义的正相关关系，斜率接近于零。预测区间和90%置信区间的上限均未达到10毫秒，表明在预期治疗剂量和超治疗剂量的阿泽利拉贡下，QTcF间期未见具有临床意义的药物相关效应。[1]晚期糖基化终产物受体（RAGE）是一种普遍存在的跨膜免疫球蛋白样受体，以多种亚型存在，并能与多种内源性细胞外配体和细胞内效应分子结合。RAGE胞外结构域与配体结合后，会启动复杂的细胞内信号级联反应，导致活性氧（ROS）的产生、免疫炎症反应、细胞增殖或凋亡，并伴随RAGE自身表达上调。迄今为止，研究主要集中在RAGE活性与癌症、糖尿病、心血管疾病和神经退行性疾病等病理状况之间的相关性上。由于 RAGE 在多种病理过程中发挥作用，因此它已成为开发胞外和胞内抑制剂的理想靶点。本综述描述了内源性 RAGE 配体/效应分子在正常和病理生理过程中的作用，总结了目前外源性小分子 RAGE 抑制剂的研究现状，并总结了未来治疗干预的关键策略。[2]

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模式识别受体 RAGE 已被证实参与适应性免疫反应，但其在这些反应各组成部分中的作用尚不完全清楚。我们研究了 RAGE 小分子抑制剂和受体缺失（RAGE-/- 小鼠）对自身免疫和同种异体移植排斥反应中 T 细胞反应的影响。在用小分子 RAGE 抑制剂 TTP488 治疗的 NOD 和 B6 小鼠中，同基因胰岛移植和胰岛异体移植排斥反应均显著降低（p < 0.001）。与野生型 (WT) 小鼠相比，链脲佐菌素诱导糖尿病的 RAGE-/- 小鼠表现出胰岛移植排斥反应延迟 (p < 0.02)。这种体内反应与 RAGE-/- T 细胞在混合淋巴细胞反应 (MLR) 中以及与 TTP488 共培养的 WT T 细胞的增殖反应降低相关。RAGE-/- 和 WT 细胞在抗 CD3 和抗 CD28 单克隆抗体激活后的总体 T 细胞增殖情况相似，但 RAGE-/- T 细胞对抗 CD28 单克隆抗体的共刺激无反应。此外，与 WT T 细胞相比，RAGE-/- T 细胞在抗 CD3 和抗 CD28 单克隆抗体共培养的培养上清液中 IL-10、IL-5 和 TNF-α 水平更高，而 WT T 细胞在 TTP488 存在下 IFN-γ 的产生减少，提示 RAGE 可能在 T 细胞分化中发挥重要作用。事实上，通过实时PCR，我们发现，在Th1分化条件下激活的克隆T细胞上RAGE mRNA的表达水平更高。我们得出结论，T细胞上RAGE的激活参与了导致Th1(+) T细胞分化的早期事件。[3]

C32H40CL3N3O2

605.14

603.218

C, 63.52; H, 6.66; Cl, 17.58; N, 6.95; O, 5.29

1284150-65-7

1284150-65-7 (2HCl);603148-36-3;

67202797

Typically exists as solid at room temperature

39.5Ų

2

4

14

40

626

0

ClC1C=CC(=CC=1)OC1C=CC(=CC=1)N1C=C(C2C=CC(=CC=2)OCCCN(CC)CC)N=C1CCCC.Cl.Cl

CQAGJWKITXAOAM-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C32H38ClN3O2.2ClH/c1-4-7-9-32-34-31(25-10-16-28(17-11-25)37-23-8-22-35(5-2)6-3)24-36(32)27-14-20-30(21-15-27)38-29-18-12-26(33)13-19-29;;/h10-21,24H,4-9,22-23H2,1-3H3;2*1H

3-[4-[2-butyl-1-[4-(4-chlorophenoxy)phenyl]imidazol-4-yl]phenoxy]-N,N-diethylpropan-1-amine;dihydrochloride

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。