| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
Syk (Ki = 7.5 nM); Syk (IC50 = 10 nM)
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|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：BAY 61-3606 是一种高度选择性的 Syk 激酶抑制剂。其他选定的酪氨酸激酶，Lyn、Fyn、Src、Itk 和 Btk，浓度高达 4.7 μM 时不会被 BAY 61-3606 抑制。 BAY 61-3606 还被发现可以抑制 B 细胞受体 (BCR) 介导的信号传导。 Bay 61-3606 是 TRAIL 诱导的细胞凋亡的敏化剂。在 MCF-7 细胞中，Bay 61-3606 下调 Mcl-1 具有浓度和时间依赖性。在 MCF-7 和 T47D 细胞中，Bay 61-3606 会降低 Syk 的磷酸化。 Bay 61-3606 对 Mcl-1 的下调与乳腺癌细胞中的 Syk 无关。 Bay 61-3606 促进 MCF-7 细胞中 Mcl-1 蛋白的泛素/蛋白酶体依赖性降解。 Bay 61-3606 抑制 MCF-7 细胞中 CDK9、RNA 聚合酶 II 和 Mcl-1 表达的磷酸化。 Bay 61-3606 抑制 CDK9 激酶活性，体外 IC50 为 37 nM 激酶测定：BAY 61-3606 不仅抑制脱颗粒（IC50 值在 5 到 46 nM 之间），而且还抑制肥大细胞中的脂质介质和细胞因子合成。 BAY 61-3606 对从健康人类受试者获得的嗜碱性粒细胞非常有效 (IC50 = 10 nM)，并且对于从特应性（高血清 IgE）受试者获得的嗜碱性粒细胞似乎至少同样有效 (IC50 = 8.1 nM)。 BAY 61-3606 还可有效抑制嗜酸性粒细胞和单核细胞中 B 细胞受体的激活以及 IgG 信号传导 Fc 部分的受体。我们确定 BAY61-3606 是表达 K-RAS 突变形式的结直肠癌细胞的增殖抑制剂，但在表达野生型 K-RAS 的同基因细胞中则不然。除了在突变细胞中的抗增殖作用外，BAY61-3606 在野生型细胞中还表现出独特的生物学特性，因为它赋予对 RAF 抑制的敏感性。在这种情况下，BAY61-3606 通过抑制 MAP4K2 (GCK) 发挥作用，MAP4K2 (GCK) 通常会响应 RAF 的抑制而激活野生型细胞中的 NFκβ 信号传导。细胞测定：MCF-7细胞暴露于含有或不含Bay 61-3606 (2.5 μM)的TRAIL（指定浓度：0、12.5、25、37.5 ng/ml）中24小时；暴露于试剂 12 小时后，使用活性 Bak 抗体对 MCF-7 细胞进行免疫细胞化学分析；在暴露于 Bay 61-3606 (5 μM) 且有或没有 TRAIL (50 ng/ml) 的 MCF-7 细胞中测量 Caspase 活性 24 小时。
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| 体内研究 (In Vivo) |
体内：大鼠口服 3 mg/kg BAY 61-3606 可显着抑制抗原诱导的被动皮肤过敏反应、支气管收缩和支气管水肿。此外，BAY 61-3606 减轻了大鼠中抗原诱导的气道炎症。
脾酪氨酸激酶（Syk）酪氨酸激酶在多种炎症细胞中免疫球蛋白Fc部分受体和B细胞受体复合物信号传导中起重要作用；因此，Syk激酶抑制剂可能显示出作为平喘/过敏治疗药物的潜力。我们鉴定了2-[7-（3,4-二甲氧基苯基）-咪唑[1,2-c]嘧啶-5-氨基]-烟酰胺二盐酸（BAY 61-3606），一种有效的（Ki = 7.5 nM）选择性Syk激酶抑制剂。BAY 61-3606不仅能抑制肥大细胞的脱颗粒（IC50值在5 ~ 46 nM之间），还能抑制脂质介质和细胞因子的合成。BAY 61-3606对健康人的嗜碱性细胞非常有效（IC50 = 10 nM），对特应性（高血清IgE）患者的嗜碱性细胞也同样有效（IC50 = 8.1 nM）。在嗜酸性粒细胞和单核细胞中，B细胞受体的激活和IgG信号Fc部分的受体也被BAY 61-3606有效地抑制。大鼠口服BAY 61-3606 （3 mg/kg）可显著抑制抗原诱导的被动皮肤过敏反应、支气管收缩和支气管水肿。此外，BAY 61-3606还能减轻抗原诱导的大鼠气道炎症。基于BAY 61-3606的体内外抗炎作用，表明Syk可能在过敏反应的发病机制中起着非常关键的作用。[1] |
| 酶活实验 |
在肥大细胞中，除了脱颗粒之外，BAY 61-3606 还能抑制脂质介质和细胞因子的合成（IC50 值范围为 5 至 46 nM）。在取自健康人类受试者的嗜碱性粒细胞中，BAY 61-3606 非常有效（IC50 = 10 nM），并且它似乎对取自特应性（高血清 IgE）受试者的嗜碱性粒细胞至少同样有效（IC50 = 8.1 nM）。 BAY 61-3606 还被发现能有效抑制 B 细胞受体激活以及嗜酸性粒细胞和单核细胞中 IgG 信号传导 Fc 部分的受体。在表达突变型 K-RAS 的结直肠癌细胞中，但在表达野生型 K-RAS 的同基因细胞中则不然，我们发现 BAY61-3606 抑制这些细胞的增殖。除了在突变模型中抑制细胞分裂的能力外，BAY61-3606 在野生型细胞中还表现出独特的生物学特性：它赋予 RAF 抑制的敏感性。在这种情况下，BAY61-3606 通过阻断 MAP4K2 (GCK) 发挥作用，在野生型细胞中，MAP4K2 通常会触发 NFκβ 信号传导以响应 RAF 抑制。
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| 细胞实验 |
24 小时后，将 MCF-7 细胞暴露于含有或不含 Bay 61-3606 (2.5 μM) 的 TRAIL（指定浓度：0、12.5、25 和 37.5 ng/ml）。暴露后，细胞使用活性 Bak 抗体进行免疫细胞化学处理。将 MCF-7 细胞暴露于含有或不含 TRAIL (50 ng/ml) 的 Bay 61-3606 (5 μM) 24 小时后，测试 caspase 活性。
细胞活力测定[1] 为了评估市售SYK抑制剂BAY61-3606、R406、GS-9973（托普替尼）和PRT062607单独使用以及BAY61-3606与紫杉醇、顺铂、阿霉素和替莫唑胺联合使用对SH-SY5Y和SK-N-BE(2)神经母细胞瘤细胞活力的影响，采用比色MTT（3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基溴化四钠）测定法。细胞在全生长培养基中接种于96孔板。作为例外，用GS-9973和PRT062607处理的细胞在Opti-MEM中接种，以减少残留血清引起的细胞活力变化。24 h后，将细胞用Opti-MEM洗涤一次，然后单独与SYK抑制剂孵育24和48 h，或与BAY61-3606联合化疗药物孵育48和72 h。对照细胞以药物处理细胞中最高的浓度接受相应的药物载体。将BAY 61-3606和阿霉素溶于水，R406、GS-9973、PRT062607溶于DMSO，替莫唑胺溶于乙醇，顺铂溶于0.9%生理盐水。24、48或72 h后，每孔加入MTT溶液（5 mg MTT，每ml磷酸盐缓冲盐水10 μL），再孵育3 h。为促进甲酰胺晶体的溶解，每孔小心地取出70 μL溶液，加入100 μL含0.04 M HCl的异丙醇，充分混合。此外，在室温下将板置于轨道激振器上1小时。用CLARIOstar平板阅读器在590nm处测量吸光度。实验至少进行了三次，每次治疗至少有三次平行。细胞活力计算为处理细胞的平均OD值与对照细胞（100%活细胞）的比值。siRNA和SYK质粒的细胞活力测定在24孔板上进行。相应调整MTT溶液和酸性异丙醇的用量。 细胞信号传导研究[1] 为了研究市售SYK抑制剂对MAPK和Akt介导的信号通路的影响，将SH-SY5Y细胞接种于全生长培养基的6孔板中。第二天，在Opti-MEM中洗涤细胞，并用BAY61-3606、R406、GS-9973（托替尼）、PRT062607或相应的对照（BAY 61-3606为水，R406、GS-9973和PRT062607为DMSO）处理4或24小时。孵育后，用PBS洗涤细胞，在含有Halt™蛋白酶和磷酸酶抑制剂鸡尾酒的RIPA裂解和提取缓冲液中收获细胞，并进行western blot分析。采用Fiji软件进行密度测定。磷酸化蛋白和总蛋白归一化到各自的GAPDH负载对照（pERK/GAPDH、ERK/GAPDH、pAkt/GAPDH、Akt/GAPDH）。使用归一化值计算pERK/ERK和pAkt/Akt的比值。将各车辆控制设为1，并计算比值。 |
| 动物实验 |
Female BALB/c nude mice (5 weeks old) bearing MCF-7 tumor xenograft
50 mg/kg TRAIL (10 mg/kg), Bay 61-3606 (50 mg/kg), or a combination of both (50 mg/kg) was intraperitoneally injected twice a week; TRAIL was administered two hours following the injection of Bay 61-3606 for a duration of two weeks. |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
神经母细胞瘤是一种起源于发育中的交感神经系统的恶性肿瘤，也是婴幼儿最常见且最致命的癌症。亟需新的治疗方法来改善高危患者的预后，并降低毒性和远期效应。脾酪氨酸激酶（SYK）此前已被确定为多种炎症性疾病和癌症的潜在药物靶点，但迄今为止，其作为神经母细胞瘤潜在治疗靶点的研究尚不充分。本研究观察到，与神经嵴和良性神经纤维瘤相比，神经母细胞瘤中SYK基因表达升高。虽然在大多数检测的神经母细胞瘤组织中均检测到了SYK蛋白，但在神经母细胞瘤细胞系中则较少检测到。使用siRNA敲低SYK以及使用小分子SYK抑制剂均显著降低了表达SYK蛋白的神经母细胞瘤细胞系的细胞活力。此外，SYK抑制还降低了ERK1/2和Akt的磷酸化水平。 SYK抑制剂BAY 613606增强了多种化疗药物的疗效。组成型活性SYK变体的瞬时表达提高了神经母细胞瘤细胞的存活率，且该作用独立于内源性SYK水平。综上所述，我们的研究结果表明，应进一步评估靶向SYK联合传统化疗作为神经母细胞瘤治疗方案的可能性。[2]
在本研究中，我们利用细胞培养中氨基酸稳定同位素标记的定量磷酸化蛋白质组学方法，探讨了Lyn激酶信号通路如何介导尼洛替尼耐药性。我们发现，在尼洛替尼耐药细胞中，另外两种酪氨酸激酶的酪氨酸磷酸化水平升高：脾酪氨酸激酶Syk和UFO家族受体酪氨酸激酶Axl。这种酪氨酸磷酸化的增加涉及这些酪氨酸激酶与Lyn的相互作用。使用抑制剂R406或BAY 61-3606抑制Syk，或通过RNA干扰抑制Syk，可以恢复尼洛替尼抑制细胞增殖的能力。相反，在药物敏感细胞中，Lyn和Syk的共表达是完全诱导尼洛替尼耐药性的必要条件。令人惊讶的是，敲低Syk也显著降低了Lyn和Axl的酪氨酸磷酸化水平，从而揭示了Syk和Lyn之间的相互作用。我们已证实接头蛋白CDCP-1参与了尼洛替尼耐药性的产生。有趣的是，在尼洛替尼耐药细胞系和尼洛替尼耐药的慢性粒细胞白血病（CML）患者中，Axl和CDCP-1的表达均升高。我们得出结论，由Lyn和Syk介导的致癌信号通路可以绕过CML细胞对Bcr-Abl的需求。因此，靶向这些激酶可能具有治疗价值，可以克服CML的伊马替尼或尼洛替尼耐药性。 [3] 乳腺癌细胞通常会对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）产生耐药性，因此需要增敏剂的辅助。在本研究中，我们证实脾酪氨酸激酶（Syk）抑制剂Bay 61-3606是一种TRAIL增敏剂。Bay 61-3606增强TRAIL诱导的细胞凋亡的同时，还伴随着Bak、caspase的强烈激活和DNA片段化。在作用机制上，Bay 61-3606通过两种调节髓系细胞白血病序列-1（Mcl-1）的机制增强细胞对TRAIL的敏感性。首先，Bay 61-3606通过调节Mcl-1的磷酸化，触发Mcl-1的泛素依赖性降解。其次，Bay 61-3606在转录水平下调Mcl-1的表达。在此背景下，Bay 61-3606 抑制的是细胞周期蛋白依赖性激酶 (CDK) 9，而不是 Syk。总之，Bay 61-3606 可下调乳腺癌细胞中 Mcl-1 的表达，并使癌细胞对 TRAIL 介导的细胞凋亡更加敏感。[4] |
| 分子式 |
C20H19CLN6O3
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|---|---|
| 分子量 |
426.85626244545
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| 精确质量 |
426.12
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| 元素分析 |
C, 56.28; H, 4.49; Cl, 8.30; N, 19.69; O, 11.24
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| CAS号 |
1615197-10-8
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| 相关CAS号 |
BAY 61-3606;732983-37-8; 1615197-10-8; 648903-57-5
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| PubChem CID |
52949496
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| tPSA |
117
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
30
|
| 分子复杂度/Complexity |
566
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O=C(C1=CC=CN=C1NC2=NC(C3=CC=C(OC)C(OC)=C3)=CC4=NC=CN24)N.[H]Cl
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| InChi Key |
HLYFDKZWVIBYKL-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H18N6O3.ClH/c1-28-15-6-5-12(10-16(15)29-2)14-11-17-22-8-9-26(17)20(24-14)25-19-13(18(21)27)4-3-7-23-19;/h3-11H,1-2H3,(H2,21,27)(H,23,24,25);1H
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| 化学名 |
2-[[7-(3,4-dimethoxyphenyl)imidazo[1,2-c]pyrimidin-5-yl]amino]pyridine-3-carboxamide;hydrochloride
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| 别名 |
Syk Inhibitor IV, BAY 61-3606; 1615197-10-8; BAY 61-3606 (hydrochloride); BAY 61-3606 HCl; 2-[[7-(3,4-dimethoxyphenyl)imidazo[1,2-c]pyrimidin-5-yl]amino]pyridine-3-carboxamide;hydrochloride; CHEMBL1242100; 2-[[7-(3,4-dimethoxyphenyl)imidazo[1,2-c]pyrimidin-5-yl]amino]-3-pyridinecarboxamide, monohydrochloride; BAY 61-3606 hydrochloride;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3427 mL | 11.7134 mL | 23.4269 mL | |
| 5 mM | 0.4685 mL | 2.3427 mL | 4.6854 mL | |
| 10 mM | 0.2343 mL | 1.1713 mL | 2.3427 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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