Tubulin; microtubule (IC50 = 18-40 nM)
Cevipabulin fumarate targets microtubules and tubulin. It binds to the tubulin vinblastine binding site, a site typically associated with microtubule-destabilizing agents. The compound inhibits the binding of [3H]vinblastine to tubulin. Through its interaction with tubulin, cevipabulin disrupts microtubule dynamics and inhibits cancer cell proliferation. The compound's mechanism involves microtubule stabilization or destabilization, leading to cell cycle arrest and apoptosis in cancer cells. Its activity is in the microtubule/tubulin pathway involved in Cell Cycle/DNA Damage and Cytoskeleton.

Cevipabulin（0-50 nM，72 小时）对卵巢、乳腺、前列腺和宫颈肿瘤细胞系表现出良好的活性（IC50 值介于 18 和 40 nM 之间）[1]。
根据流式细胞术实验，Cevipabulin (TTI-237) 在低浓度 (20-40 nM) 下可诱导亚 G1 期细胞核，并在较高浓度 (>50 nM) 下强烈抑制 G2-M 期细胞核形成[1]。

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TTI-237 可导致微管蛋白和纯化微管蛋白的显色反应出现明显的浑浊。TTI-237 可抑制长春碱与微管蛋白的结合。TTI-237 可诱导多极纺锤体和多核细胞的形成。TTI-237 诱导亚 G1 期细胞核的浓度低于阻滞有丝分裂所需的浓度。 TTI-237 是 P-糖蛋白的弱底物。[1]

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塞维帕布林（0-50 nM，72 小时）对卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌和宫颈癌细胞系均表现出良好的活性（IC50 值介于 18 和 40 nM 之间）[1]。塞维帕布林（TTI-237）在浓度高于 50 nM 时表现出显著的 G2/M 期阻滞，而低浓度（20-40 nM）则会导致亚 G1 期细胞核[1]。

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在 TTI-237 与微管蛋白异二聚体摩尔比较低（约 1:30）时，TTI-237 可增强低温下的解聚动力学，但在较高比例（约 1:4）时则会稳定聚集体。同样，在低TTI-237与微管蛋白异二聚体摩尔比下，过量的Ca²⁺可使TTI-237诱导的微管蛋白聚集体解聚，但在较高比例下则保持稳定。TTI-237抑制微管蛋白异二聚体可交换核苷酸位点上[³H]GTP的交换，并且其对HeLa细胞中八种细胞内蛋白磷酸化的影响与长春新碱相似。结论：TTI-237具有区别于典型的长春花碱位点和紫杉烷碱位点配体的特性，因此它可能代表一类新型的微管活性化合物[2]。

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体外研究表明，富马酸塞维帕布林是一种微管活性抗肿瘤化合物。它能抑制[3H]长春碱与微管蛋白的结合，在人肿瘤细胞系中IC50值为18-40 nM。该化合物（0-50 nM，72小时）对卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌和宫颈癌的细胞系均表现出良好的活性，IC50值介于18和40 nM之间。塞维帕布林的细胞毒性是通过其对微管动力学的影响介导的，从而抑制癌细胞增殖。该化合物在体外对多种癌症类型均显示出活性。

以静脉注射和口服方式给小鼠（每4天给予5、10、15和20 mg/kg，共4个疗程）给予Cevipabulin (TTI-2370) 后，小鼠对人肿瘤异种移植模型表现出剂量依赖性疗效，且在20和15 mg/kg剂量下具有良好的抗肿瘤活性[1]。

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TTI-237可通过静脉注射和口服给药对人肿瘤异种移植模型有效。[1]
由于长春花生物碱和紫杉烷类药物在癌症治疗中已成功应用于临床，因此在两种小鼠异种移植模型中测试了TTI-237的抗肿瘤疗效。在第一种模型中，该化合物具有优异的水溶性，被配制成0.9%生理盐水，并静脉注射给携带LoVo人结肠腺癌分期肿瘤的无胸腺小鼠。该化合物每4天给药一次，共给药4个周期，剂量分别为5、10、15和20 mg/kg/次。该化合物表现出剂量依赖性效应，在20和15 mg/kg剂量下具有良好的抗肿瘤活性（图6A）[1]。在第二个模型（U87-MG人胶质母细胞瘤）中，TTI-237以25 mg/kg的单次剂量通过静脉注射和口服途径给予荷瘤小鼠。两种给药途径的疗效基本相同（图6B）。

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体内研究表明，cevipabulin 在多种人类癌症小鼠异种移植模型中具有活性。该化合物具有口服生物活性，支持其作为口服抗肿瘤药物的应用。在异种移植模型中，cevipabulin 通过其微管靶向机制抑制肿瘤生长。该化合物的体内疗效已在多种癌症模型中得到评估，包括卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌和宫颈癌异种移植模型。已开展详细的剂量反应研究，以确定疗效研究的最佳给药方案。该化合物的口服生物利用度支持其作为治疗药物的潜力。

微管蛋白聚合实验。[1]
\n使用前，将微管蛋白或纯化的微管蛋白溶解于冰冷的PEM缓冲液中。使用时，PEM缓冲液中含有1 mmol/L的GTP。对于未添加GTP的纯化微管蛋白，PEM缓冲液中含有10% (w/v)的甘油。将微管蛋白溶液在Eppendorf 5415C型微型离心机中以最高转速在4°C下离心10分钟，以去除任何颗粒或聚集体。将离心后的上清液以每孔100 μL的量分装到已含有10 μL目标化合物的半面积96孔板中。化合物在加入孔中之前，用与微管蛋白溶解相同的缓冲液进行稀释。最终的化合物浓度和微管蛋白浓度在图例中给出。在每个实验中，每种化合物的每个浓度均进行重复测试。聚合反应板在室温下制备，最后加入冷的微管蛋白溶液。加入微管蛋白后，尽快将反应板放入SpectraMax Plus酶标仪中，恒温设置为24°C或35°C，使用仪器的混合功能混合15秒，并在60分钟内每分钟测定每个孔在340 nm处的吸光度。反应过程中340 nm处表观吸光度的增加表明出现了浊度，这种浊度被认为是由于形成了形态未知的微管蛋白聚合物所致。每个孔在0时刻的吸光度值均从该孔的后续吸光度读数中减去，然后对重复测定的结果取平均值。为了清晰起见，图2和补充图S1至S3中显示了每隔一个数据点。\n

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\n\n竞争性结合实验。 [1]
\n为了研究Vinca结构域和秋水仙碱结合位点上可能存在的竞争，孵育在不利于聚合的条件下进行，因为长春碱和秋水仙碱优先结合未聚合的异二聚体。将高纯度微管蛋白溶解于不含GTP的PEM缓冲液中，最终浓度为1.0至1.3 mg/mL（10–13 μmol/L）。将竞争剂储备液分装至微管蛋白溶液中，使其最终浓度达到100 μmol/L，然后分别加入[3H]长春碱或[3H]秋水仙碱，使其最终浓度分别为100 nmol/L或50 nmol/L。每个反应均进行四次重复。将这些溶液在 24°C 下孵育 1 小时，然后上样至 MicroSpin G-50 柱，并在 Eppendorf 5415C 微型离心机中以 3,000 rpm 的转速离心 2 分钟。取各柱流出液（含有微管蛋白和结合的放射性配体）的一部分与闪烁液混合，并在液体闪烁计数仪中计数。对照组包括不含竞争剂的样品以及含有未标记的长春新碱、秋水仙碱或紫杉醇的样品。竞争剂抑制放射性配体结合的能力以不含任何竞争剂的对照组结合百分比表示。\n

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\n\n微管蛋白聚合：板式实验方案 [2]
\n使用前，将微管蛋白或纯化的微管蛋白溶解于冰冷的 PEM 缓冲液中。使用时，PEM 缓冲液中含有 1 mM 的 GTP。将微管蛋白溶液置于冰上10-15分钟后，在Eppendorf 5415C型微型离心机中以最高转速在4°C下离心10分钟，以去除任何颗粒或聚集体。将离心后的上清液分装至1/2面积96孔板中，方法如前所述，并作如下修改。在30°C下记录340 nm处的吸光度增加值60分钟后，将孔板从SpectraMax Plus酶标仪中取出，立即放入预冷至4°C的大水盘中漂浮30分钟。对照实验表明，此时间是完全解聚对照微管所需时间的2-3倍。在4°C孵育期间，无法进行吸光度读数。在 4°C 孵育结束后，将培养板迅速干燥，并放回 SpectraMax Plus 分光光度计，在 30°C 下继续记录 60 分钟。低温孵育引起的浊度变化在 2 小时的记录过程中表现为吸光度曲线的急剧不连续。每个样品在每次实验中均进行重复测定。微管蛋白、化合物和 DMSO 的最终浓度见图 2 的图例。在整个测定过程中，每分钟进行一次吸光度测量。\n

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\n\n微管蛋白聚合：分光光度计实验方案 [2]
\n反应在配备六位自动进样器和帕尔帖温度控制器的 Beckmann DU7400 型分光光度计中进行，使用 1 cm 光程的石英比色皿。每个比色皿包含 270 μl 微管蛋白和化合物；图 2 的图例中给出了蛋白质、化合物和 DMSO 的最终浓度。聚合反应在 24°C 下记录 60 分钟，然后将温度降至 12°C，并继续记录 60 分钟的解聚反应。每分钟记录每个样品在 340 nm 处的吸光度。\n

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\n\n微管蛋白聚合：Ca++ 诱导的解聚 [2]
\n除以下情况外，其余均按照上述分光光度计操作步骤进行：在 25°C 下记录 60 分钟后，所有样品均加入 10 μl 100 mM CaCl2 溶液，使其 Ca++ 浓度达到 3.6 mM。溶液快速混匀后，继续在 25°C 下记录 60 分钟。数据点以 1 分钟为间隔采集。\n

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\n\n[3H]GTP 与纯化微管蛋白的结合 [2]
\n反应在标准的 96 孔平底板中进行。使用高纯度微管蛋白，最终浓度为 11–14 μM 异二聚体，化合物的最终浓度为 100 μM。在一组实验中，先将微管蛋白与化合物在室温下孵育 30 分钟（每个样品重复四次），然后再加入 [3H]GTP（最终浓度为 96.7 μM，比活度为 0.04 Ci/mmol）。继续孵育 30 分钟后，将每个样品的等分试样上样至 MicroSpin G-50 柱，并在 Eppendorf 5415C 微型离心机中以 3,000 rpm 的转速离心 2 分钟。将每根柱流出液（含有微管蛋白和结合的[3H]GTP）的等分试样与闪烁液混合，并在液体闪烁光谱仪中进行计数。

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体外检测富马酸塞维帕布林的方法包括使用[3H]长春碱作为放射性标记探针进行微管蛋白结合研究。将纯化的微管蛋白与不同浓度的塞维帕布林和[3H]长春碱孵育。过滤或沉淀后测量结合的放射性，以确定长春碱结合的抑制程度。根据剂量-反应曲线确定抑制长春碱结合的IC50值。或者，也可以使用微管蛋白聚合测定来评估该化合物对微管动力学的影响。使用非线性回归进行数据分析可得到抑制常数。

细胞毒性试验[1]
细胞类型： 人类癌细胞系（SK-OV-3、MDA-MB-435、MDA-MB-468、LnCaP 和 HeLa 细胞）。
测试浓度： 0-50 nM
孵育时间： 72 小时
实验结果： SK-OV-3、MDA-MB-435、MDA-MB-468、LnCaP 和 HeLa 细胞的 IC50 值分别为 24±8 nM、21±4 nM、18±6 nM、22±7 nM 和 40 nM。\n

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\n\n细胞毒性试验。 [1]
\n细胞经胰蛋白酶消化收集，洗涤、计数后，以每孔1000个细胞、200 μL培养基的密度分装至96孔平底微孔板中。所有微孔板均在37℃、5% CO₂的湿润空气中培养约24小时。\n\n第2天，将待测化合物稀释后加入孔中。化合物溶于DMSO，浓度为10至20 mmol/L。每种化合物均用DMSO进行九次2倍系列稀释。取每种稀释液10 μL加入100 μL培养基中混匀，然后取5 μL该稀释液以三复孔或四复孔的形式加入含有细胞的孔中。每种化合物的最终浓度通常为5 μmol/L。所有培养物（包括不含化合物的对照组）的DMSO最终浓度均为0.27%。在与测试化合物培养3天后（总共第5天），对所有孔进行MTS检测（Promega；CellTiter 96水性非放射性细胞增殖检测）。将每种化合物在每个浓度水平下的平均重复结果绘制成图，并将产生介于最大值（无化合物）和最小值（所有细胞死亡）之间的相对颜色强度的浓度作为IC50值。\n

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\n免疫荧光显微镜。[1]
\nHeLa细胞培养于含10%热灭活胎牛血清、100单位/mL青霉素和100 μg/mL链霉素的DMEM培养基中。实验中，将细胞以2.5 × 10⁴个/0.5 mL的密度接种于Biocoat聚赖氨酸包被的八孔培养玻片上。次日，将化合物以 5 μL DMSO 的体积加入反应室，使 DMSO 的最终浓度为 1%。20 小时后，移除孔中的培养基，取下反应室侧壁，用冰冷的甲醇固定细胞至少 10 分钟。将载玻片从甲醇中取出，风干。所有后续步骤均在室温下进行。用 PBS 洗涤细胞两次（每次 10 分钟，在 Copland 染色缸中），然后在含有 1% 牛血清白蛋白 (BSA)（不含 IgG 和蛋白酶）的 PBS 溶液中，加入抗 α-微管蛋白单克隆抗体（1:500 稀释），孵育 1 小时。细胞用PBS洗涤两次，每次10分钟，然后在1% BSA的PBS溶液中与二抗（FITC标记的羊抗鼠IgG，F(ab′)2特异性，1:100稀释）于黑暗中孵育1小时。用PBS洗涤两次，每次5分钟后，细胞用6 μg/mL的Hoechst 33258（溶于PBS）染色10分钟，随后用PBS洗涤两次。最后，将细胞用SlowFade Light封片剂封片，并使用配备40× UPlanApo空气物镜的Olympus BX61显微镜进行观察。图像采集使用Cooke SensiCam CCD成像相机和Sliderule软件。\n

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\n流式细胞术。[1]
\n将HeLa细胞以1.25 × 10⁵个/孔的密度接种于12孔板中，每孔2 mL，并培养过夜。然后，按照图中所示浓度加入不同化合物，继续培养18小时。之后收集细胞，注意从每个孔中回收所有非贴壁细胞和贴壁细胞。该试剂盒包含用于溶解细胞膜脂质（使用非离子去污剂）、降解结构蛋白（使用胰蛋白酶）、去除RNA（使用RNase）以及稳定核染色质（使用亚精胺）的试剂。将纯化分离的细胞核用碘化丙啶染色，并使用贝克顿·迪金森公司的FACSCalibur流式细胞仪进行分析。之所以分析细胞核而不是细胞，是因为这种方法可以更准确地估算DNA含量，而且我们希望检测多核细胞的细胞核，尽管有丝分裂细胞由于缺乏核膜，可能无法被准确测量。每种化合物均在三个独立的实验中进行分析，并将数据取平均值以绘制此处所示的图表。通过在群体直方图上目测设置标记来估计每个细胞周期区室中总细胞核的比例，如图 5B 所示。

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体外细胞实验采用卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌和宫颈癌的人类癌细胞系进行，以评估富马酸塞维帕布林的作用。将细胞接种于多孔板中，并用不同浓度的塞维帕布林（0-50 nM）处理72小时。采用MTT、MTS或CellTiter-Glo等标准方法评估细胞活力。IC50值由剂量反应曲线确定。可通过流式细胞术进行细胞周期分析和细胞凋亡实验，以阐明细胞死亡机制。对照实验包括使用已知的微管靶向药物进行处理。

动物/疾病模型：将1 × 10⁷个LoVo人结肠腺癌细胞皮下植入无胸腺nu/nu雌性小鼠侧腹部[1]。
剂量：5、10、15和20 mg/kg
给药途径：每4天静脉注射一次，共4个疗程。
实验结果：该化合物表现出剂量依赖性效应，在20和15 mg/kg剂量下具有良好的抗肿瘤活性。

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动物/疾病模型：将1 × 10⁶个U87-MG人胶质母细胞瘤细胞皮下植入无胸腺nu/nu雌性小鼠侧腹部[1]。
剂量： 25 mg/kg。
给药途径： 口服或静脉注射（iv），分别于第0、7和14天给药。
实验结果： 该化合物对口服或静脉注射（iv）的人类肿瘤异种移植模型均有活性。

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肿瘤异种移植实验。[1]
将1 × 10⁷个LoVo人结肠腺癌细胞或1 × 10⁶个U87-MG人胶质母细胞瘤细胞皮下植入无胸腺nu/nu雌性小鼠的侧腹部。细胞悬浮于培养基中进行注射。当肿瘤质量达到80至120 mg之间（第0天）时，将动物随机分为治疗组，每组5至10只动物。分期后，动物分别接受静脉注射或口服塞维帕布林（TTI-237）（溶于0.9%生理盐水或Klucel溶液中），具体给药方案见图例，或仅接受赋形剂治疗。定期测定肿瘤体积[(长×宽²)/2]。结果以相对肿瘤生长率（测量当日平均肿瘤体积除以第0天平均肿瘤体积）表示，并以分期后时间点为横坐标。数据采用单侧Student's t检验进行分析。P值≤0.05表示治疗组肿瘤生长率较赋形剂对照组有统计学意义上的显著降低。

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在小鼠异种移植人癌模型中开展了富马酸塞维帕布林的体内动物研究。荷瘤小鼠经口灌胃给予不同剂量的塞维帕布林。通过游标卡尺测量监测肿瘤生长，并在终点收集肿瘤组织进行组织病理学分析和生物标志物评估。检测肿瘤组织中的微管动力学和细胞凋亡标志物以确认靶点结合情况。采用标准异种移植研究设计，并设置适当的对照组。采集血样进行药代动力学分析。该化合物的口服生物利用度支持在这些研究中采用口服给药。

富马酸塞维帕布林的药代动力学数据表明，该化合物具有口服生物活性。其分子式为C22H22ClF5N6O5，分子量为580.89 g/mol。该化合物已配制成口服制剂用于动物研究。储存建议：粉末应在4℃下密封防潮保存；溶剂保存可在-80℃下保存6个月，或在-20℃下保存1个月。现有文献中关于半衰期、Cmax和生物利用度等具体药代动力学参数的报道较少。

关于富马酸塞维帕布林（Cevipabulin fumarate）的毒理学数据报道并不广泛。作为一种微管靶向药物，该化合物的主要毒性可能与其对快速分裂细胞（包括骨髓、胃肠道上皮细胞和毛囊细胞）的影响有关。微管靶向药物常见的毒性包括骨髓抑制、神经病变和胃肠道反应。然而，包括半数致死量（LD50）和器官毒性谱在内的具体毒性数据尚不明确。治疗开发需要进行标准的临床前安全性评估。

[1]. TTI-237: a novel microtubule-active compound with in vivo antitumor activity. Cancer Res. 2008 Apr 1;68(7):2292-300.

[2]. The microtubule-active antitumor compound TTI-237 has both DB01229-like and Leurocristine-like properties. Cancer Chemother Pharmacol. 2009 Sep;64(4):681-9.

Cevipabulin 已用于研究肿瘤和赘生物治疗的临床试验，以及教育/咨询/培训。Cevipabulin 是一种合成的水溶性微管蛋白结合剂，具有潜在的抗肿瘤活性。Cevipabulin 似乎能与微管蛋白上的长春碱结合位点结合，但其作用更类似于紫杉烷类药物，因为它能增强微管蛋白聚合而不诱导微管蛋白解聚。微管动力学的破坏最终可能抑制细胞分裂并减少细胞生长。5-氯-6-[2,6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-7-氨基琥珀酸酯 (TTI-237) 是一种具有新颖结构和功能的微管活性化合物。从结构上看，TTI-237属于三唑并[1,5a]嘧啶类化合物，已知该类化合物不与微管蛋白结合。从功能上看，TTI-237抑制[(3)H]长春新碱与微管蛋白的结合，但会导致浊度显著增加，其作用更类似于多西他赛而非长春新碱。目前尚不清楚这种假想聚合物的形态特征。在接近其细胞毒性IC50值（34 nmol/L）的浓度下，TTI-237可诱导培养的人类肿瘤细胞形成多个纺锤体极和多核细胞，其作用类似于紫杉醇，但不同于长春新碱或秋水仙碱。流式细胞术实验表明，低浓度（20-40 nmol/L）的TTI-237可诱导亚G1期细胞成核，而浓度高于50 nmol/L则可导致强烈的G2/M期阻滞。该化合物是多药耐药蛋白1（多药耐药转运蛋白或P-糖蛋白）的弱底物。在P-糖蛋白高表达的细胞系中，TTI-237的IC50值增加了25倍，而紫杉醇和长春新碱的IC50值分别增加了806倍和925倍。TTI-237不被MRP或MXR转运蛋白识别。TTI-237在多种裸鼠异种移植人源肿瘤模型中显示出体内活性，包括LoVo人结肠癌和U87-MG人胶质母细胞瘤，且无论静脉注射还是口服给药均有效。因此，TTI-237 具有一系列区别于其他微管活性化合物的特性。[1] 目的：比较 TTI-237（5-氯-6-[2,6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]-[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-7-氨基琥珀酸酯）与紫杉醇和长春新碱，以更好地了解这种新型抗微管药物的特性。方法：采用浊度法测定微管蛋白的聚合和解聚。通过竞争性结合实验研究该化合物对[(3)H]鸟苷三磷酸([(3)H]GTP)与微管蛋白结合的影响。采用磷酸化蛋白特异性抗体，通过流式细胞术测定该化合物对一系列细胞内蛋白磷酸化的影响。结果：在TTI-237与微管蛋白异二聚体摩尔比较低（约1:30）时，TTI-237增强了低温诱导的微管蛋白解聚动力学，但在较高比例（约1:4）下则稳定了聚集体。类似地，在TTI-237与微管蛋白异二聚体摩尔比较低时，过量的Ca²⁺可导致TTI-237诱导的微管蛋白聚集体解聚，但在较高比例下则保持稳定。TTI-237抑制了微管蛋白异二聚体可交换核苷酸位点上[³H]GTP的交换，其对HeLa细胞中八种细胞内蛋白磷酸化的影响与长春新碱相似。结论：TTI-237具有区别于典型长春新碱和紫杉烷类配体位点的特性，因此可能代表一类新型的微管活性化合物。 [2]

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富马酸塞维帕布林（TTI-237富马酸盐）是一种具有微管活性的口服抗肿瘤化合物，它能抑制[3H]长春碱与微管蛋白的结合，对人类癌细胞的IC50值为18-40 nM。该化合物对卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌和宫颈癌的细胞系均显示出良好的活性。其分子式为C22H22ClF5N6O5，分子量为580.89 g/mol。塞维帕布林在多种人类癌症小鼠异种移植模型中均显示出活性。它是一种用于抗肿瘤研究的候选化合物。

C22H22CLF5N6O5

580.892301082611

580.126

C, 42.83; H, 4.25; Cl, 5.75; F, 15.40; N, 13.62; O, 18.15

849550-67-0

Cevipabulin;849550-05-6; 852954-81-5 (succinate); 849550-69-2 (fumarate)

71587814

White to off-white solid powder

4.249

150.97

4

15

10

39

685

1

C[C@@H](C(F)(F)F)NC1=C(C(=NC2=NC=NN12)Cl)C3=C(C=C(C=C3F)OCCCNC)F.C(=C/C(=O)O)\C(=O)O

TUXZQBYIZLWUKK-AFIAKLHKSA-N

InChI=1S/C18H18ClF5N6O.C4H4O4/c1-9(18(22,23)24)28-16-14(15(19)29-17-26-8-27-30(16)17)13-11(20)6-10(7-12(13)21)31-5-3-4-25-2;5-3(6)1-2-4(7)8/h6-9,25,28H,3-5H2,1-2H3;1-2H,(H,5,6)(H,7,8)/b;2-1+/t9-;/m0./s1

(E)-but-2-enedioic acid;5-chloro-6-[2,6-difluoro-4-[3-(methylamino)propoxy]phenyl]-N-[(2S)-1,1,1-trifluoropropan-2-yl]-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin-7-amine

Cevipabulin fumarate; Cevipabulin fumarate [USAN]; 849550-69-2; UNII-Q380BYV049; Q380BYV049; Cevipabulin fumarate dihydrate; TTI-237; Cevipabulin fumarate (USAN);

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~50 mg/mL (~86.07 mM)
H2O : ~1.43 mg/mL (~2.46 mM)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。