| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
- Protein Tyrosine Phosphatase epsilon (cyt-PTPε):cyt-PTPε Inhibitor-1 exhibited potent inhibitory activity against recombinant human cyt-PTPε, with an IC₅₀ value of 0.85 μM. It showed high selectivity for cyt-PTPε, with no significant inhibition (IC₅₀ > 50 μM) against other related protein tyrosine phosphatases (PTPs) including PTP1B, TCPTP, SHP-1, and SHP-2[1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
cyt-PTPε Inhibitor-1(化合物 62)是一种强效细胞质蛋白酪氨酸磷酸酶 epsilon 抑制剂,具有抗破骨特性 [1]。
- cyt-PTPε酶抑制活性:cyt-PTPε Inhibitor-1以剂量依赖性方式抑制重组cyt-PTPε。在0.1、0.5、1和5 μM浓度下,cyt-PTPε活性的抑制率分别为12.3%、45.6%、82.1%和96.8%(相对于DMSO对照组)[1] - 抑制RANKL诱导的RAW264.7细胞向破骨细胞分化:在核因子κB受体激活剂配体(RANKL,50 ng/mL)刺激的RAW264.7细胞中,cyt-PTPε Inhibitor-1(0.5、1、2 μM)呈剂量依赖性减少抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)阳性破骨细胞数量。2 μM浓度下,TRAP阳性细胞数从RANKL对照组的85±7个降至23±4个,抑制率达72.9%[1] - 抑制破骨细胞功能(骨吸收):在磷酸钙包被板的骨吸收实验中,cyt-PTPε Inhibitor-1(2 μM)较RANKL对照组减少68.3%的骨吸收陷窝面积;每个破骨细胞的平均吸收陷窝面积从1250±110 μm²降至398±45 μm²[1] - 调节RANKL介导的信号通路:Western blot分析显示,cyt-PTPε Inhibitor-1(2 μM)抑制RAW264.7细胞中RANKL诱导的细胞外信号调节激酶(ERK)和p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化;同时减少破骨细胞分化关键转录因子——活化T细胞核因子c1(NFATc1)的核转位[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
- 抑制去卵巢(OVX)诱导的小鼠骨丢失:8周龄雌性C57BL/6小鼠行OVX手术建立骨质疏松模型,口服cyt-PTPε Inhibitor-1(10、20 mg/kg/天)8周后,腰椎骨密度(BMD)显著升高。20 mg/kg剂量下,腰椎BMD为0.185±0.006 g/cm²,较OVX对照组(0.150±0.005 g/cm²)升高23.3%,接近假手术组(0.192±0.007 g/cm²)[1]
- 改善OVX小鼠骨微结构:显微计算机断层扫描(μCT)分析显示,cyt-PTPε Inhibitor-1(20 mg/kg)使骨小梁数量(Tb.N)从OVX对照组的2.1±0.2 mm⁻¹增至3.8±0.3 mm⁻¹,骨小梁厚度(Tb.Th)从0.065±0.004 mm增至0.092±0.005 mm,同时减少骨小梁分离度(Tb.Sp)从0.45±0.03 mm降至0.28±0.02 mm[1] - 体内减少破骨细胞数量:OVX小鼠股骨切片的TRAP染色显示,cyt-PTPε Inhibitor-1(20 mg/kg)较OVX对照组减少56.7%的骨表面TRAP阳性破骨细胞数量(从12.5±1.3个/mm降至5.4±0.8个/mm)[1] |
| 酶活实验 |
- cyt-PTPε抑制活性实验:将重组人cyt-PTPε(50 nM)与不同浓度的cyt-PTPε Inhibitor-1(0.01-50 μM)在含50 mM HEPES(pH 7.4)、100 mM NaCl、5 mM二硫苏糖醇(DTT)和0.1%牛血清白蛋白(BSA)的反应缓冲液中,于37°C孵育30分钟。加入4-硝基苯磷酸酯(pNPP,5 mM)作为底物启动反应,37°C继续孵育60分钟后,在405 nm处测定吸光度以计算酶活性,通过剂量-反应曲线确定IC₅₀值[1]
- 其他PTPs选择性实验:采用与cyt-PTPε实验相同的反应体系,检测cyt-PTPε Inhibitor-1(50 μM)对PTP1B、TCPTP、SHP-1和SHP-2的抑制活性。测定各PTP的酶活性并计算抑制率,评估化合物的选择性[1] |
| 细胞实验 |
- RAW264.7细胞破骨细胞分化实验:将RAW264.7细胞以5×10³个/孔的密度接种于24孔板,用含10%胎牛血清(FBS)的α-MEM培养基培养。24小时后,更换为含RANKL(50 ng/mL)和不同浓度cyt-PTPε Inhibitor-1(0.5、1、2 μM)的新鲜培养基,每2天换液一次,共培养5天。第5天用4%多聚甲醛固定细胞15分钟,经TRAP染色试剂盒染色后,在光学显微镜下计数TRAP阳性多核细胞(≥3个核)[1]
- 骨吸收实验:在磷酸钙包被的24孔板中接种RAW264.7细胞(1×10⁴个/孔),加入RANKL(50 ng/mL)和cyt-PTPε Inhibitor-1(2 μM)培养7天,每2天换液一次。7天后用5%次氯酸钠处理5分钟去除细胞,蒸馏水清洗平板后,显微镜下观察骨吸收陷窝,通过图像分析软件计算吸收面积[1] - 信号通路Western blot实验:将RAW264.7细胞接种于6孔板(2×10⁵个/孔),用cyt-PTPε Inhibitor-1(2 μM)处理1小时后,加入RANKL(50 ng/mL)分别刺激0、15、30和60分钟。用含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞,蛋白裂解液经SDS-PAGE分离后转移至PVDF膜,加入抗p-ERK、ERK、p-p38、p38和NFATc1的一抗孵育,再加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗,通过增强化学发光(ECL)系统显影,图像分析软件定量条带强度[1] |
| 动物实验 |
卵巢切除(OVX)诱导骨质疏松小鼠模型的建立:8周龄雌性C57BL/6小鼠用异氟烷麻醉。沿腹部正中线切开,切除双侧卵巢(OVX组)。假手术组进行相同的手术操作,但不切除卵巢。小鼠术后恢复1周后进行药物治疗[1]
- 给药方案:将细胞色素PTPε抑制剂-1溶解于二甲基亚砜(DMSO)、聚乙二醇400(PEG400)和生理盐水(体积比1:4:5)的混合溶液中。OVX+药物组的小鼠每日一次灌胃给予该化合物,剂量分别为10 mg/kg或20 mg/kg,持续8周。卵巢切除(OVX)对照组和假手术组均灌胃给予等体积的溶剂(DMSO/PEG400/生理盐水)[1] - 样本采集和分析方案:治疗8周后,将小鼠麻醉并处死。采集腰椎,采用双能X射线吸收法(DXA)测量骨密度(BMD)。取右侧股骨,用4%多聚甲醛固定48小时,然后进行μCT分析以评估骨微结构。取左侧股骨,用10%乙二胺四乙酸(EDTA)脱钙2周,石蜡包埋,切片,并用抗坏血酸酸性磷酸酶(TRAP)染色以计数破骨细胞[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外细胞毒性:浓度高达 5 μM 时,cyt-PTPε 抑制剂-1 对 RAW264.7 细胞未显示出明显的细胞毒性。与 DMSO 对照组相比,细胞活力(MTT 法测定)>90%。即使在 10 μM 浓度下,细胞活力仍保持在 82.5%[1]
- 体内毒性:在接受 cyt-PTPε 抑制剂-1(20 mg/kg/天,持续 8 周)治疗的卵巢切除 (OVX) 小鼠中,未观察到明显的毒性迹象,包括体重无显著变化(药物组:24.5 ± 1.2 g;OVX 对照组:23.8 ± 1.1 g),以及血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、天冬氨酸氨基转移酶 (AST) 和肌酐水平正常。肝脏、肾脏和脾脏的组织学检查也未发现异常病理变化[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
cyt-PTPε抑制剂-1是一种新型的N-(5-(苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺衍生物,被设计为胞质蛋白酪氨酸磷酸酶ε (cyt-PTPε) 的选择性抑制剂[1]
- cyt-PTPε抑制剂-1的抗破骨细胞机制涉及抑制cyt-PTPε的活性,进而抑制RANKL介导的ERK/p38 MAPK信号通路的激活,并减少NFATc1的核转位,从而抑制破骨细胞分化和骨吸收功能[1] - cyt-PTPε抑制剂-1显示出作为骨质疏松症治疗药物的潜力,因为它能有效逆转卵巢切除术(OVX)小鼠的骨丢失,且无明显毒性,凸显了其临床转化应用前景。潜力[1] |
| 分子式 |
C19H20N4O2S
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|---|---|
| 分子量 |
368.452702522278
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| 精确质量 |
368.13
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| CAS号 |
428478-94-8
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| PubChem CID |
1418650
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
3.9
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| tPSA |
104
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
26
|
| 分子复杂度/Complexity |
459
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
S1C(=NN=C1COC1C=CC(C)=CC=1C)NC(NC1C=CC(C)=CC=1)=O
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| InChi Key |
QUSAMXSWOZSTRQ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H20N4O2S/c1-12-4-7-15(8-5-12)20-18(24)21-19-23-22-17(26-19)11-25-16-9-6-13(2)10-14(16)3/h4-10H,11H2,1-3H3,(H2,20,21,23,24)
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| 化学名 |
1-[5-[(2,4-dimethylphenoxy)methyl]-1,3,4-thiadiazol-2-yl]-3-(4-methylphenyl)urea
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7141 mL | 13.5704 mL | 27.1407 mL | |
| 5 mM | 0.5428 mL | 2.7141 mL | 5.4281 mL | |
| 10 mM | 0.2714 mL | 1.3570 mL | 2.7141 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。