DL-AP4 (2-Amino-4-phosphonobutyric acid)

别名: 6323-99-5; 2-amino-4-phosphonobutanoic acid; 2-Amino-4-phosphonobutyric acid; DL-AP4; 20263-07-4; DL-2-Amino-4-phosphonobutyric acid; Butanoic acid, 2-amino-4-phosphono-; (+/-)-2-Amino-4-phosphonobutyric acid; DL-2-氨基-4-磷丁酸

目录号: V41915 纯度: ≥98%

COA 产品数据产品说明书 SDS

DL-AP4（2-氨基-4-磷酸丁酸）是一种新型谷氨酸拮抗剂（Kd = 66 μM），具有治疗中枢神经系统和视觉系统疾病的潜在用途。

DL-AP4 (2-Amino-4-phosphonobutyric acid) CAS号: 6323-99-5
产品类别: New2

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Other Forms of DL-AP4 (2-Amino-4-phosphonobutyric acid):

DL-AP4 sodium

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InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用

Nature 2025, 643(8070):192-200.

Nature 2024 Dec 18.

Nature 2021, 597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022: 8, eabm9427.

Nat Neurosci 2024, 27:1468-1474.

Science Adv 2025, 11(33):eadr5199.

Nat Metab 2024, 6: 1108-1127.

Cell Stem Cell 2024, 31:106-126.e13.

Nature 597, 119–125 (2021)

Cell Stem Cell 2020,26(6):845-861.e12.

Science Trans Med 2023,15(701):eadd7872.

STTT 2023,8(1):91.

Cell Reports 2023,42(4):112313

Science Trans Med 2023, 15: eadd7872.

Cancer Cell 2021,39(4):529-547.e7.

Cancer Discov 2022,12(4):1106-1127.

Immunity 2023,56(3):620-634.e11.

Immunity 2024,57:2651-2668.e12.

J Am Chem Soc 2022,144:21831-21836.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022:8,eabm9427.

Nature 2021,597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

PNAS Nexus 2022,1(3):pgac063.

ACS Nano 2023,17(10):9110-9125.

Biomaterial 2023 Sep16:302:122333.

产品描述
生物活性&实验参考方法
化学信息
溶解度数据
计算器
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产品描述

DL-AP4（2-氨基-4-磷酸丁酸）是一种新型谷氨酸拮抗剂（Kd = 66 μM），具有治疗中枢神经系统和视觉系统疾病的潜在用途。

生物活性&实验参考方法

靶点	Metabotropic glutamate receptors (mGluR)
体外研究 (In Vitro)	在孤立的杆状双极细胞中，DL-AP4 (500 μM) 通过在 -33 mV 的保持电位下阻断离子通道来减少强直内向电流 [1]。 DL-AP4（0.1 M；1h）通过离子电渗疗法作用于蝗虫肌膜上的受体来抑制谷氨酸的兴奋作用[2]。化合物 2 DL-AP4 的表观 Kd 为 2.5 μM，拮抗大鼠海马切片横向穿透通路中的兴奋性突触 [3]。 DL-AP4（50 µM；0–2 秒）可阻挡以下强度的一系列 10 ms 405 nm 闪光的光响应：3、10、30、100、300、990、3000 和 9900 个光子 µm- 2[4]。
体内研究 (In Vivo)	进行了四个实验，以评估谷氨酸类似物2-氨基-4-膦酰基丁酸酯（APB）阻断ON通道对猴子亮度和对比度感知的影响。在实验1中，我们证明了比背景更亮的刺激（增量刺激）在ON通道阻断后显得不那么亮。这种亮度的降低不足以解释之前观察到的APB给药后检测增量刺激的阈值增加（Schiller等人，1986；Dolan&Schiller，1989）。实验2考察了ON和OFF通道在局部对比度和表观亮度之间相互作用中的作用。在正常条件下和APB给药后检查了同时对比的现象。我们发现，即使在ON通道阻断后，刺激的亮度也主要取决于它与直接背景的对比度。这表明，即使一个通道受到损害，同时对比中涉及的横向过程也可以运行。在实验3中，我们研究了ON通道在检测因背景与前景亮度变化而出现的刺激中的作用。我们发现，ON通道选择性地传达的信息不仅与将刺激定义为增量的时间性质有关，还与将其定义为递增的空间特征有关。在实验4中，我们检验了这样一个假设，即ON和OFF通道对增量和减量时间亮度斜坡的差异处理程度高于阶跃亮度变化。我们发现，检测增量斜坡的影响并不比检测APB给药后的增量步骤大。 [https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8011580/]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)	小鼠腹腔注射LD50为880 mg/kg。行为学：运动活性变化（特异性测定）。《波兰药理学与药学杂志》，37(575)，1985。
参考文献	[1]. 2-Amino-4-phosphonobutyric acid as a glutamate antagonist on locust muscle. Nature. 1976 Jul 29;262(5567):408-9. [2]. Responses of rod bipolar cells isolated from the rat retina to the glutamate agonist 2-amino-4-phosphonobutyric acid (APB). J Neurosci. 1991 Aug;11(8):2372-82. [3]. Cyclic analogues of 2-amino-4-phosphonobutanoic acid (APB) and their inhibition of hippocampal excitatory transmission and displacement of [3H]APB binding. J Med Chem. 1986 Oct;29(10):1988-95. [4]. Separate ON and OFF pathways in vertebrate vision first arose during the Cambrian. Curr Biol. 2020 Jun 8;30(11):R633-R634.
其他信息	通过酶解（木瓜蛋白酶）和机械分离法分离成年大鼠视网膜，获得分离的视杆双极细胞。分离物中几乎所有完整的双极细胞均表达蛋白激酶C (PKC) 免疫反应性，PKC是活体视网膜中视杆双极细胞的选择性标志物。使用含有制霉菌素的膜片钳电极进行全细胞记录，以最大程度地减少维持离子电流所需的细胞质成分的洗脱。在-33 mV的钳制电位下，观察到持续的内向电流。谷氨酸激动剂2-氨基-4-膦酸丁酸酯 (APB) 通过关闭离子通道来降低该电流。在正常情况下，Na+似乎是主要的电荷载体。细胞内和细胞外Ca2+浓度均对APB敏感电流有显著影响。我们得出结论，原位视杆双极细胞在光照开始时处于去极化状态。[2]我们制备了2-氨基-4-膦酸丁酸（APB，2）的构象受限类似物，其中APB的结构被引入到环戊烷（3）或环己烷（4）环中。通过对相应的环烯酮进行氢膦酰化，然后进行Strecker氨基酸合成，得到了所需的类似物。通过¹³C NMR研究确定了3a（反式）、3b（顺式）、4a（顺式）和4b（反式）的相对构型。化合物3b、4a和4b作为大鼠海马穿通通路兴奋性突触场电位的抑制剂活性较低。类似物4a和4b在将[³H]APB从突触质膜上置换出来方面也几乎没有活性。另一方面，环戊基APB类似物36对[3H]APB的结合具有极强的抑制作用，IC50值为4.7 μM，这进一步证实了大鼠脑突触体膜制备物中的APB结合位点与介导APB诱导的外侧穿通通路抑制的受体并非同一位点。在四种环状APB类似物中，3a的生物活性谱与APB最为相似。它对抑制外侧内嗅皮层投射至海马颗粒细胞表现出显著的抑制活性（IC50值为130 μM）。与APB类似，3a也表现出对外侧穿通通路而非内侧穿通通路的选择性。其在放射性配体结合试验中的活性与其抑制外侧穿通通路的活性相一致。因此，3a 似乎最接近于模拟 APB 的活性构象，并提示氨基和膦酸酯部分呈顺式关系的折叠构象可能近似于 APB 的活性构象。[3] Ellis 等人发现，视网膜 ON 和 OFF 双极细胞以及 ON 双极细胞树突上的新型代谢型谷氨酸受体均存在于七鳃鳗中。他们得出结论，独立的 ON 和 OFF 通路的基本组织原则最早出现在 5 亿多年前的寒武纪晚期脊椎动物视觉系统中。[4]

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性

化学信息 & 存储运输条件

分子式	C4H10NO5P
分子量	183.099662303925
精确质量	183.03
元素分析	C, 26.24; H, 5.51; N, 7.65; O, 43.69; P, 16.92
CAS号	6323-99-5
相关CAS号	1263093-79-3
PubChem CID	2207
外观&性状	White to off-white solid powder
LogP	-5.5
tPSA	130.66
氢键供体(HBD)数目	4
氢键受体(HBA)数目	6
可旋转键数目(RBC)	4
重原子数目	11
分子复杂度/Complexity	187
定义原子立体中心数目	0
SMILES	C(CP(=O)(O)O)C(C(=O)O)N
InChi Key	DDOQBQRIEWHWBT-UHFFFAOYSA-N
InChi Code	InChI=1S/C4H10NO5P/c5-3(4(6)7)1-2-11(8,9)10/h3H,1-2,5H2,(H,6,7)(H2,8,9,10)
化学名	2-amino-4-phosphonobutanoic acid
别名	6323-99-5; 2-amino-4-phosphonobutanoic acid; 2-Amino-4-phosphonobutyric acid; DL-AP4; 20263-07-4; DL-2-Amino-4-phosphonobutyric acid; Butanoic acid, 2-amino-4-phosphono-; (+/-)-2-Amino-4-phosphonobutyric acid;
HS Tariff Code	2934.99.9001
存储方式	Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month
运输条件	Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

溶解度数据

溶解度 (体外实验)	May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)	注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。注射用配方 (IP/IV/IM/SC等) 注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline) 生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。注射用配方 2:* DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More 注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。注射用配方 5:* 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline) 注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline) 注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline) 注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil) 注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 口服配方口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More 口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 口服配方 6: 做成粉末与食物混合注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

溶解度 (体外实验)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

溶解度 (体内实验)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)

注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

口服配方

口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

制备储备液		1 mg	5 mg	10 mg
	1 mM	5.4615 mL	27.3075 mL	54.6150 mL
	5 mM	1.0923 mL	5.4615 mL	10.9230 mL
	10 mM	0.5461 mL	2.7307 mL	5.4615 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器

质量

浓度

体积

分子量*

计算重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度

参见示例

使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？

在分子量（MW）框中输入350.26
在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。

浓度 (起始)

体积 (起始)

浓度 (终)

体积 (终)

计算重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：

在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中

分子式

分子量

g/mol

计算重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4 c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：

要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。

分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：

分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。

配液体积

质量

配液浓度

计算重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
单击“计算”按钮
答案显示在体积框中

动物体内实验配方计算器（澄清溶液）

第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）

给药剂量 mg/kg

动物平均体重 g

每只动物给药体积 μL

动物数量

第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。

% DMSO

% Tween 80

% ddH₂O

计算重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH₂O，混匀澄清。

注意： (1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。