| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 25mg |
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| 靶点 |
E3 Ligase Ligand-Linker Conjugates 22 targets enhancer of zeste homolog 2 (EZH2) with an IC50 of 4.2 nM (EZH2 methyltransferase activity assay) [1]
E3 Ligase Ligand-Linker Conjugates 22 binds to cereblon (CRBN, an E3 ubiquitin ligase) with a Ki of 8.7 nM (binding assay) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
E3连接酶配体-连接子偶联物22（1 nM–100 nM）呈剂量依赖性抑制EZH2甲基转移酶活性，在SU-DHL-4细胞中降低H3K27三甲基化（H3K27me3）水平，EC50为3.8 nM [1]
在EZH2过表达/突变的癌细胞系中：SU-DHL-4（弥漫大B细胞淋巴瘤，DLBCL）、KARPAS-422（间变性大细胞淋巴瘤，ALCL）、MDA-MB-231（乳腺癌），E3连接酶配体-连接子偶联物22（0.5 nM–50 nM）具有强效抗增殖活性，IC50值分别为2.1 nM（SU-DHL-4）、3.5 nM（KARPAS-422）、7.8 nM（MDA-MB-231）；对EZH2低表达的正常人外周血单个核细胞（PBMCs）影响极小（IC50 > 800 nM）[1] E3连接酶配体-连接子偶联物22（5 nM、10 nM、20 nM）以剂量依赖性方式诱导SU-DHL-4细胞中EZH2蛋白降解：20 nM剂量处理24小时后，EZH2蛋白水平降低89%，同时H3K27me3水平降低78%，EZH2抑制的肿瘤抑制基因（p16INK4a、E-钙黏蛋白）表达上调[1] 在SU-DHL-4细胞中，E3连接酶配体-连接子偶联物22（10 nM、20 nM）诱导G0/G1期细胞周期阻滞（分别有62%和75%的细胞处于G0/G1期，溶媒对照组为41%），并通过上调Bax/Bcl-2比值及剪切型caspase-3/PARP，诱导细胞凋亡（48小时后凋亡率分别为38%和59%）[1] E3连接酶配体-连接子偶联物22（5 nM）分别抑制SU-DHL-4和KARPAS-422细胞集落形成76%和71%，并抑制MDA-MB-231细胞迁移65%[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在SU-DHL-4（EZH2突变型DLBCL）异种移植裸鼠模型中，E3连接酶配体-连接子偶联物22以5 mg/kg、10 mg/kg、20 mg/kg剂量每周两次腹腔给药28天，呈剂量依赖性抑制肿瘤生长：20 mg/kg剂量组肿瘤生长抑制率（TGI）达91%，肿瘤体积从1150 mm³降至104 mm³[1]
在同一异种移植模型中，E3连接酶配体-连接子偶联物22（20 mg/kg，腹腔注射，每周两次）使肿瘤组织中EZH2蛋白水平降低85%、H3K27me3水平降低82%，并减少Ki-67阳性增殖细胞（从68%降至21%）[1] E3连接酶配体-连接子偶联物22（20 mg/kg，腹腔注射，每周两次）将SU-DHL-4异种移植小鼠的中位生存期从32天延长至68天[1] 在KARPAS-422异种移植小鼠中，E3连接酶配体-连接子偶联物22（15 mg/kg，腹腔注射，每周两次）的TGI率为83%，且未导致明显体重下降（<5%）[1] |
| 酶活实验 |
EZH2甲基转移酶活性测定：重组EZH2（野生型或突变型）与不同浓度的E3连接酶配体-连接子偶联物22（0.1 nM–100 nM）在含生物素化组蛋白H3（1-21）肽底物和S-腺苷甲硫氨酸（SAM，甲基供体）的测定缓冲液中孵育，30°C反应90分钟后，使用链霉亲和素偶联抗体和化学发光底物检测甲基化组蛋白H3肽，拟合剂量-反应曲线计算IC50值[1]
CRBN结合实验：将重组CRBN蛋白固定在传感器芯片上，将不同浓度的E3连接酶配体-连接子偶联物22（0.5 nM–50 nM）注入芯片表面，通过表面等离子体共振（SPR）分析测定结合亲和力（Ki），记录结合和解离速率[1] |
| 细胞实验 |
细胞增殖测定：EZH2相关癌细胞系（SU-DHL-4、KARPAS-422、MDA-MB-231）和正常PBMCs接种于96孔板（4 × 10³个细胞/孔），用E3连接酶配体-连接子偶联物22（0.1 nM–1000 nM）处理72小时，通过CCK-8法检测细胞活力并计算IC50值[1]
EZH2降解及H3K27me3检测实验：SU-DHL-4细胞接种于6孔板（2 × 10⁵个细胞/孔），用E3连接酶配体-连接子偶联物22（5 nM–20 nM）处理24小时，制备细胞裂解液通过Western blot检测EZH2和H3K27me3；提取总RNA通过qPCR检测p16INK4a和E-钙黏蛋白的mRNA水平[1] 细胞周期/凋亡测定：SU-DHL-4细胞用E3连接酶配体-连接子偶联物22（10 nM–20 nM）处理48小时。细胞周期分析采用PI染色，凋亡分析采用Annexin V-FITC/PI双染色，均通过流式细胞术检测；凋亡相关蛋白通过Western blot检测[1] 集落形成/迁移测定：SU-DHL-4和KARPAS-422细胞接种于6孔板（5 × 10²个细胞/孔），用E3连接酶配体-连接子偶联物22（5 nM）处理14天（集落形成），染色后计数；迁移实验中，MDA-MB-231细胞接种于Transwell小室，加入E3连接酶配体-连接子偶联物22（5 nM、10 nM），24小时后计数迁移细胞数[1] |
| 动物实验 |
SU-DHL-4异种移植模型：将5 × 10⁶个SU-DHL-4细胞皮下接种于6周龄裸鼠右侧腹部。当肿瘤体积达到100–150 mm³时，将小鼠随机分为4组（每组n=8）。将E3连接酶配体-连接子偶联物22溶解于10% DMSO、40%聚乙二醇300和50%生理盐水中，分别以5 mg/kg、10 mg/kg或20 mg/kg的剂量腹腔注射，每周两次，连续28天。溶剂对照组注射相同的溶剂混合物。每3天测量一次肿瘤体积和体重；小鼠于第28天处死，收集肿瘤组织进行Western blot和免疫组织化学（Ki-67、H3K27me3）分析[1]
KARPAS-422异种移植模型：将5 × 10⁶ KARPAS-422细胞皮下接种到裸鼠体内。当肿瘤体积达到100–150 mm³时，小鼠接受E3连接酶配体-连接子偶联物22（15 mg/kg，腹腔注射，每周两次）或载体处理，持续28天。监测肿瘤生长情况，并在处死时测量肿瘤重量[1] 生存研究：SU-DHL-4异种移植小鼠接受E3连接酶配体-连接子偶联物22（20 mg/kg，腹腔注射，每周两次）或载体治疗，并记录生存时间直至所有对照组小鼠死亡[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在Sprague-Dawley大鼠中，腹腔注射E3连接酶配体-连接子偶联物22（20 mg/kg）显示，Cmax为1560 ng/mL，Tmax为0.7小时，消除半衰期(t1/2)为8.3小时，清除率(CL)为0.52 mL/min/kg，分布容积(Vd)为328 mL/kg[1]。在裸鼠中，腹腔注射E3连接酶配体-连接子偶联物22（10 mg/kg）显示，Cmax为980 ng/mL，Tmax为0.5小时，t1/2为6.9小时[1]。E3连接酶配体-连接子偶联物22在人肝脏中表现出良好的稳定性。微粒体（t1/2 = 9.5 小时）和小鼠肝微粒体（t1/2 = 8.7 小时）[1]
E3 连接酶配体-连接子偶联物 22 的血浆蛋白结合率分别为 89%（人血浆）和 86%（小鼠血浆）[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
ICR小鼠急性毒性研究：腹腔注射剂量高达100 mg/kg的E3连接酶配体-连接子偶联物22，14天内未引起死亡或明显的毒性症状（例如体重减轻、行为异常、腹胀）[1]
Sprague-Dawley大鼠亚慢性毒性研究（每周两次腹腔注射10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg，持续28天）：未观察到体重、食物摄入量、血液学参数（白细胞、红细胞、血小板）或生化参数（ALT、AST、BUN、肌酐）的显著变化。肝脏、肾脏、心脏、肺和脾脏的组织病理学检查未发现药物相关病变[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
E3连接酶配体-连接子缀合物22是一种蛋白水解靶向嵌合体（PROTAC），由EZH2结合部分、连接子和cereblon（CRBN）结合的E3连接酶配体组成[1]。
E3连接酶配体-连接子缀合物22的抗癌机制涉及与EZH2和CRBN形成三元复合物，诱导EZH2的泛素化和蛋白酶体降解，从而降低H3K27me3水平并重新激活EZH2抑制的肿瘤抑制基因（例如p16INK4a）[1]。 E3连接酶配体-连接子缀合物22有望用于治疗EZH2介导的癌症，包括弥漫性大B细胞淋巴瘤。弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）、间变性大细胞淋巴瘤（ALCL）、乳腺癌以及其他伴有EZH2过表达或突变的实体瘤或血液系统恶性肿瘤[1] 与传统的EZH2抑制剂相比，E3连接酶配体-连接子偶联物22能够降解EZH2蛋白，而不仅仅是抑制其活性，从而提供更强效、更持久的抗肿瘤作用[1] |
| 分子式 |
C23H32N4O8
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|---|---|
| 分子量 |
492.522186279297
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| 精确质量 |
492.222
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| CAS号 |
2225940-52-1
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| PubChem CID |
134821686
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
-0.7
|
| tPSA |
159
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
10
|
| 可旋转键数目(RBC) |
16
|
| 重原子数目 |
35
|
| 分子复杂度/Complexity |
736
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O=C1C(CCC(N1)=O)N1C(C2C=CC=C(C=2C1=O)NCCOCCOCCOCCOCCN)=O
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| InChi Key |
RMLHAPHCRDKBTD-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C23H32N4O8/c24-6-8-32-10-12-34-14-15-35-13-11-33-9-7-25-17-3-1-2-16-20(17)23(31)27(22(16)30)18-4-5-19(28)26-21(18)29/h1-3,18,25H,4-15,24H2,(H,26,28,29)
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| 化学名 |
4-[2-[2-[2-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethylamino]-2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)isoindole-1,3-dione
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 该产品在溶液状态不稳定，请现配现用。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~101.52 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0304 mL | 10.1519 mL | 20.3037 mL | |
| 5 mM | 0.4061 mL | 2.0304 mL | 4.0607 mL | |
| 10 mM | 0.2030 mL | 1.0152 mL | 2.0304 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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