Endoxifen Z-isomer

别名: Endoxifen, (Z)-Endoxifen; N-Desmethyl-4-hydroxytamoxifen; 4-Hydroxy-N-desmethyltamoxifen (Z)-N-去甲基-4-羟基三苯氧胺; (Z)-4-羟基N-脱甲基他莫昔芬(endoxifen);4-[(1E)-1-{4-[2-(甲基氨基)乙氧基]苯基}-2-苯基-1-丁烯-1-基]苯酚; 内昔芬; Z-因多昔芬
目录号: V5719 纯度: ≥98%
Endoxifen Z-异构体是他莫昔芬代谢物的活性代谢物,负责在表达雌激素受体-α (ERα) 的乳腺癌细胞中引发该药物的抗雌激素作用。
Endoxifen Z-isomer CAS号: 112093-28-4
产品类别: ERR
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
10mg
25mg
50mg
100mg
250mg
500mg
1g
Other Sizes

Other Forms of Endoxifen Z-isomer:

  • 因多昔芬盐酸盐
  • 盐酸因多昔芬
  • E-因多昔芬
  • Endoxifen-d5 (Z-isomer)
  • Endoxifen-d5
  • Norendoxifen
  • 恩多昔芬
  • E-因多昔芬盐酸盐
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纯度/质量控制文件

纯度: ≥98%

产品描述
Endoxifen Z-异构体是活性他莫昔芬代谢物,使该药物对表达雌激素受体-α (ERα) 的乳腺癌细胞产生抗雌激素作用。
生物活性&实验参考方法
靶点
Estrogen Receptor Beta (ERβ) and Estrogen Receptor Alpha (ERα) (the drug stabilizes ERβ and induces ERα/β heterodimer formation)[2]
体外研究 (In Vitro)
在稳定表达ERβ的MCF7乳腺癌细胞中,用浓度为20 nM、40 nM、100 nM和1000 nM的Endoxifen(特指(Z)-异构体)处理24小时,能以浓度依赖的方式稳定ERβ蛋白水平。该稳定效应也在表达ERβ的Hs578T乳腺癌细胞和U2OS骨肉瘤细胞中得到证实。[2]
在MCF7-ERβ和共表达两种ER亚型的U2OS细胞中进行免疫共沉淀实验表明,Endoxifen诱导了ERα/β异源二聚体的形成。这种相互作用导致ERα和ERβ蛋白的稳定和积累。[2]
实时荧光定量PCR分析表明,低浓度Endoxifen(20 nM)能显著抑制雌激素(1 nM)诱导的靶基因(CCND1、PS2、PGR)表达,但此效应仅发生在表达ERβ的MCF7细胞中,而在不表达ERβ的亲本MCF7细胞中则未观察到。更高浓度(100-1000 nM)的Endoxifen在两种细胞系中产生类似的抑制效应。[2]
为期八天的细胞增殖实验显示,低浓度Endoxifen(20-40 nM)能显著抑制MCF7-ERβ细胞中雌激素诱导的增殖,而亲本MCF7细胞则需要更高的浓度(100-1000 nM)才能达到完全抑制。[2]
微阵列基因表达谱分析显示,用雌激素加40 nM Endoxifen处理MCF7-ERβ细胞,与单独使用雌激素处理相比,改变了78个独特基因的表达。通路分析表明,与ERα介导的细胞周期调控和细胞迁移相关的通路,仅在表达ERβ的细胞中被Endoxifen特异性影响。[2]
细胞实验
用于评估蛋白稳定性的Western blot实验:用指定浓度的Endoxifen或溶剂对照处理细胞(MCF7-ERβ, Hs578T-ERβ, U2OS-ERβ)24小时。随后用NETN缓冲液(150 mM NaCl,1 mM EDTA,20 mM Tris pH 8.0,0.5% Nonidet P-40)裂解细胞。测定蛋白浓度后,等量裂解液进行SDS-PAGE分离。蛋白转移至PVDF膜上,用一抗和二抗孵育,并通过增强化学发光法显影。[2]
用于检测蛋白质相互作用的免疫共沉淀实验:用Endoxifen处理MCF7-ERβ或U2OS-ERα/β细胞24小时,洗涤后用NETN缓冲液裂解。等量裂解液与ERβ特异性抗体在4°C孵育过夜。使用蛋白G磁珠捕获蛋白复合物,经SDS-PAGE分离后,用ERα特异性抗体进行Western blot分析。[2]
用于测量基因表达的实时荧光定量逆转录PCR(RT-PCR)实验:按指示处理MCF7和MCF7-ERβ细胞(三次重复)24小时。使用Trizol试剂提取总RNA。将500 ng RNA逆转录为cDNA。使用SYBR Green化学法进行三重实时荧光定量PCR。基于阈值循环(Ct)值进行定量,并以TATA结合蛋白(TBP)作为内参进行标准化。[2]
细胞增殖实验:MCF7和MCF7-ERβ细胞在含有活性炭剥离血清的培养基中预培养三天。随后以每孔2000个细胞的密度接种于96孔板中。细胞用溶剂对照、1 nM雌激素或1 nM雌激素加递增浓度的Endoxifen(20至1000 nM)处理。培养基和处理物每隔一天更换一次,持续八天。使用发光法细胞活力检测试剂盒测定增殖率。[2]
药代性质 (ADME/PK)
代谢/代谢物
内多昔芬已知的代谢物包括内多昔芬O-葡萄糖醛酸苷和内多昔芬O-硫酸盐。
内多昔芬是4-羟基他莫昔芬和N-去甲基他莫昔芬的已知代谢物。
文献报道,接受标准他莫昔芬治疗(20 mg/天)的患者,血浆中内多昔芬的浓度差异很大,范围从5到180 nM,这主要是由于遗传多态性和药物相互作用影响了负责由N-去甲基他莫昔芬生成内多昔芬的CYP2D6酶。[2]
据报道,这些患者体内他莫昔芬、4-羟基他莫昔芬(4HT)和N-去甲基他莫昔芬(NDT)的稳态血浆浓度约为300 nM,7分别为 nM 和 700 nM。[2]
参考文献

[1]. Endoxifen, the active metabolite of tamoxifen, inhibits cloned hERG potassium channels. Eur J Pharmacol. 2015 Apr 5;752:1-7.

[2]. Estrogen receptor-beta sensitizes breast cancer cells to the anti-estrogenic actions of endoxifen. Breast Cancer Res. 2011 Mar 10;13(2):R27.

其他信息
4-羟基-N-去甲基他莫昔芬是一种芪类化合物。
内多昔芬 被认为是他莫昔芬最有效的抗雌激素代谢物,在临床相关浓度下,它能使他莫昔芬对ERα阳性乳腺癌细胞产生治疗作用。[2]
该研究表明,乳腺癌细胞中ERβ的存在会增强其对内多昔芬抗雌激素作用的敏感性。这被认为是通过ERβ的稳定、ERα/β异二聚体的诱导以及随后基因表达谱的改变来实现的,尤其是在低浓度内多昔芬(20-40 nM)下。该研究结果表明,即使由于CYP2D6缺乏导致内多昔芬代谢不良(内多昔芬水平低),ERβ阳性肿瘤患者仍可能从他莫昔芬治疗中获益。[2]
本研究使用了专门为本研究合成的(Z)-内多昔芬异构体。[2]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C25H27NO2
分子量
373.49
精确质量
373.204
元素分析
C, 80.40; H, 7.29; N, 3.75; O, 8.57
CAS号
112093-28-4
相关CAS号
Endoxifen Z-isomer hydrochloride;1032008-74-4;Endoxifen hydrochloride;1197194-41-4;Endoxifen (E-isomer);114828-90-9;Endoxifen;110025-28-0;Endoxifen E-isomer hydrochloride;1197194-61-8
PubChem CID
10090750
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.099g/cm3
沸点
519.327ºC at 760 mmHg
熔点
127-129°C
闪点
267.88ºC
蒸汽压
0mmHg at 25°C
折射率
1.599
LogP
5.75
tPSA
41.49
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
3
可旋转键数目(RBC)
8
重原子数目
28
分子复杂度/Complexity
467
定义原子立体中心数目
0
SMILES
O(C([H])([H])C([H])([H])N([H])C([H])([H])[H])C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])/C(/C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])O[H])=C(\C1C([H])=C([H])C([H])=C([H])C=1[H])/C([H])([H])C([H])([H])[H]
InChi Key
MHJBZVSGOZTKRH-IZHYLOQSSA-N
InChi Code
InChI=1S/C25H27NO2/c1-3-24(19-7-5-4-6-8-19)25(20-9-13-22(27)14-10-20)21-11-15-23(16-12-21)28-18-17-26-2/h4-16,26-27H,3,17-18H2,1-2H3/b25-24-
化学名
4-[(Z)-1-[4-[2-(methylamino)ethoxy]phenyl]-2-phenylbut-1-enyl]phenol
别名
Endoxifen, (Z)-Endoxifen; N-Desmethyl-4-hydroxytamoxifen; 4-Hydroxy-N-desmethyltamoxifen
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.6774 mL 13.3872 mL 26.7745 mL
5 mM 0.5355 mL 2.6774 mL 5.3549 mL
10 mM 0.2677 mL 1.3387 mL 2.6774 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

生物数据图片
  • Stabilization of ERβ protein levels by endoxifen. Breast Cancer Res . 2011 Mar 10;13(2):R27.
  • Endoxifen induces ERα/β heterodimer formation. Breast Cancer Res . 2011 Mar 10;13(2):R27.
  • Repression of known ER target genes by endoxifen is enhanced in ERβ expressing cells. Breast Cancer Res . 2011 Mar 10;13(2):R27.
  • Low concentrations of endoxifen inhibit estrogen induced proliferation of MCF7-ERβ cells. Breast Cancer Res . 2011 Mar 10;13(2):R27.
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