| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Fluorescent dye for binding to and staining of cell membranes
FM-1-43 targets cell membranes and mechanosensitive ion channels. It reversibly binds to cell membranes without permeating them, making it useful for studying membrane dynamics. The compound is a cationic styryl pyridinium dye that is widely used to study synaptic vesicle recycling in neurons. It is particularly useful for tracking endocytosis and exocytosis in neuronal cells, making it valuable in neuroscience research. FM-1-43 has minimal toxicity to cells, making it suitable for live cell imaging. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
1. FM 工作液的配制
1.1 储备液的配制 用 DMSO 配制 5 mM 储备液。 1.2 工作液的配制 用预热的 HBSS 溶液配制 5-20 μM FM 1-43 工作液。 注意：请根据您的具体需求调整 FM 1-43 工作液的浓度，并使用新鲜配制的溶液。 2. 细胞染色（悬浮细胞） 2.1 离心并收集细胞，用 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度为 1 × 10~6/mL 2.2 加入 1 mL FM 工作液，室温孵育 5-30 分钟。 2.3 400 g 离心 3-4 分钟，弃上清液。 2.4 用 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。 将细胞重悬于 1 mL 无血清培养基或 PBS 中，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。 3.细胞染色（贴壁细胞） 3.1 将贴壁细胞培养在无菌盖玻片上。 3.2 将盖玻片从培养基中取出，吸除多余的培养基。 3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻摇晃使染料完全覆盖细胞，孵育 5-30 分钟。 3.4 移除染料工作液，用培养基洗涤 2-3 次，每次 5 分钟，然后使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。 FM-1-43 是一种用于研究膜动力学和内吞作用的荧光染料。它可逆地与细胞膜结合，并在内吞作用过程中被内化，从而可以追踪囊泡运输。该化合物是一种苯乙烯基染料，对细胞毒性极低。它已被用于体外监测突触形成、神经再生、内吞作用和液泡形成。 FM-1-43 特别适用于追踪神经元中的突触小泡回收，因此在神经科学研究中具有重要价值。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
由于FM-1-43主要用作体外和离体研究的荧光探针，因此其体内活性数据有限。该化合物对细胞的毒性极低，适用于活细胞成像。然而，由于该化合物被用作研究工具而非治疗药物，因此无法进行具体的体内疗效研究。FM-1-43已被用于研究神经元标本中的突触小泡循环。
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| 酶活实验 |
FM-1-43 的体外检测通常包括用该化合物对细胞或膜制备物进行染色。细胞与浓度通常为 1 至 10 μM 的染料在 37°C 下孵育 5 至 30 分钟，然后洗涤以去除未结合的染料。染色后的细胞随后通过荧光显微镜或流式细胞仪进行分析。通过测量与细胞膜和囊泡相关的荧光强度，可以评估该化合物的膜结合和内吞特性。该化合物溶于水或缓冲液中。
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| 细胞实验 |
小鼠耳蜗培养物中的毛细胞可通过短暂暴露于FM1-43（一种用于研究胞吞和胞吐的苯乙烯基染料）而被选择性标记。实时共聚焦显微镜显示，染料进入细胞的速度很快，且主要通过细胞顶端表面进入。冷却至4℃和高细胞外钙浓度均可降低染料的负载量。用EGTA预处理（该处理可破坏顶端连接并阻止机械转导通道的门控）可消除后续在钙存在下的染料负载。钙螯合后，染料负载恢复，其时间进程与顶端连接再生过程相似。Myo7a突变体毛细胞虽然能够进行机械转导，但其所有机械转导通道在静息状态下均处于正常关闭状态，除非受到强烈的兴奋性刺激，否则不会被FM1-43标记。细胞外灌注FM1-43可逆地阻断机械转导，半阻断浓度在低微摩尔范围内。高细胞外钙离子浓度可降低阻滞作用，且该阻滞作用具有电压依赖性，在极高的正负电位下均会减弱，表明FM1-43是一种机械转导通道的渗透性阻滞剂。电压阶跃至极高电位后阻滞作用解除的时间进程进一步表明，FM1-43与其他阳离子竞争通道孔内的结合位点。在细胞内浓度下，FM1-43不会阻断转导通道，而该浓度在细胞外应用时会导致完全阻滞。钙螯合和FM1-43均能降低氨基糖苷类抗生素硫酸新霉素的耳毒性，提示FM1-43和氨基糖苷类抗生素通过同一途径进入毛细胞[1]。
FM1-43的体外细胞实验通常包括用浓度为1至10 μM的化合物处理培养细胞（例如神经元、海马切片或其他细胞类型）。将该化合物加入细胞培养基中，孵育5-30分钟。然后洗涤细胞，并使用荧光显微镜进行成像。通过追踪染料的内化和分布来监测内吞作用和囊泡运输。该化合物对细胞的毒性极低，因此适用于活细胞成像。 |
| 动物实验 |
FM-1-43 通常不进行体内动物实验，因为该化合物主要用作体外和离体研究的荧光探针。对于潜在的体内应用，可通过注射方式将该化合物给药于动物，并采集组织样本进行荧光显微镜观察。然而，目前尚无公开的 FM-1-43 体内研究的具体方案。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
FM-1-43 的分子量为 611.54 g/mol，分子式为 C30H49Br2N3。该化合物是一种水溶性苯乙烯染料，通常储存于室温或 4°C。它可溶于水和其他水性缓冲液。由于该荧光探针主要用于体外应用而非治疗，因此无需进行详细的药代动力学参数测定。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
FM-1-43的毒性数据显示其对细胞的毒性极低，因此适用于活细胞成像。该化合物仅供研究使用，未获准用于人体治疗。与所有化学化合物一样，操作时应采取适当的安全预防措施。该化合物的阳离子性和亲脂性在高浓度下可能对细胞膜产生影响。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
FM 1-43 染料是一种有机溴化物盐、季铵盐、叔胺和吡啶盐。它是一种含有 FM 1-43(2+) 离子的荧光染料。
荧光染料：指在光激发下会发光的化学物质。发射光的波长通常比入射光的波长长。荧光染料是能够使其他物质发出荧光的物质，例如，用于标记其他化合物的荧光染料。 FM1-43 染料的载药特性与氨基糖苷类抗生素在小鼠耳蜗培养物中的积累或毒性机制有许多显著的相似之处。在低温（4°C）下，[3H]-庆大霉素在耳蜗毛细胞中的积累以及新霉素的形态学效应显著降低，并在 Myo7a 突变体中消失（Richardson 等，1997）。新霉素的形态学效应也迅速显现。细胞外钙离子浓度升高可以阻断这些效应（Richardson和Russell，1991），正如本研究所示，钙螯合剂预处理可以预防这些效应。此外，在耳蜗培养物中观察到耳蜗底部至顶部对新霉素的敏感性存在梯度变化，这与FM1-43染料加载观察到的梯度相似（Richardson和Russell，1991）。最后，FM1-43能够降低新霉素的耳毒性作用，表明这两种化合物竞争相同的进入机制。这些观察结果结合上述证据提示，FM1-43和氨基糖苷类抗生素可能通过信号转导通道进入毛细胞。后一种可能性此前已有研究提出（Kroese等，1989）。研究发现，FM1-43在细胞内浓度下不会阻断细胞外通道，但在细胞内浓度下则会强烈阻断这些通道，这表明FM1-43优先单向通过。如果氨基糖苷类抗生素也具有相同的特性，则可以解释为什么FM1-43和氨基糖苷类抗生素会在毛细胞中积累，并且在暴露后无法释放。已知不同类型毛细胞对氨基糖苷类抗生素的敏感性差异也可能与静息状态下通道开放概率的差异有关。哺乳动物耳蜗基底螺旋外毛细胞对氨基糖苷类抗生素的损伤最为敏感（Hawkins，1976），并且有证据表明，在体内，这些细胞的毛簇在静息状态下维持50%的通道开放率，而不是通常的5-10%（Russell和Kössl，1992）。总之，本研究结果提供了强有力的证据，表明FM1-43通过机械转导通道进入哺乳动物耳蜗感觉毛细胞的顶端，并提示耳毒性氨基糖苷类抗生素可能具有相同的进入途径。[1] FM-1-43（CAS 149838-22-2）是一种阳离子苯乙烯基吡啶染料，也是机械敏感性离子通道的抑制剂。其分子量为611.54 g/mol，分子式为C30H49Br2N3。该化合物是一种高度亲脂性、水溶性的苯乙烯染料，可逆地与细胞膜结合。FM-1-43用于监测突触生成、神经再生、内吞作用和液泡形成。它在神经生物学中被广泛用于追踪突触小泡的循环。该化合物尚未获准用于临床。 |
| 分子式 |
C30H49N3+2.2[BR-]
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|---|---|
| 分子量 |
611.53816
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| 精确质量 |
609.229
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| 元素分析 |
C, 58.92; H, 8.08; Br, 26.13; N, 6.87
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| CAS号 |
149838-22-2
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| PubChem CID |
6508724
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| 外观&性状 |
Orange to red solid powder
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| LogP |
0.825
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| tPSA |
7.12
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
16
|
| 重原子数目 |
35
|
| 分子复杂度/Complexity |
480
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
CCCCN(CCCC)C1=CC=C(C=C1)/C=C/C2=CC=[N+](C=C2)CCC[N+](CC)(CC)CC.[Br-].[Br-]
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| InChi Key |
VZUVCAGXYLMFEC-UHFFFAOYSA-L
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| InChi Code |
InChI=1S/C30H49N3.2BrH/c1-6-11-23-32(24-12-7-2)30-18-16-28(17-19-30)14-15-29-20-25-31(26-21-29)22-13-27-33(8-3,9-4)10-5;;/h14-21,25-26H,6-13,22-24,27H2,1-5H3;2*1H/q+2;;/p-2
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| 化学名 |
3-[4-[(E)-2-[4-(dibutylamino)phenyl]ethenyl]pyridin-1-ium-1-yl]propyl-triethylazanium;dibromide
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| 别名 |
FM1-43; 149838-22-2; Fm1 43; NerveGreen C1; N-(3-(triethylammonium)propyl)-4-(4-(dibutylamino)styryl)pyridinium; UNII-83IGZ86I9D; FM 1-43; 83IGZ86I9D;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~81.76 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6352 mL | 8.1761 mL | 16.3522 mL | |
| 5 mM | 0.3270 mL | 1.6352 mL | 3.2704 mL | |
| 10 mM | 0.1635 mL | 0.8176 mL | 1.6352 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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