| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Fluorescent dye for binding to and staining of cell membranes
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| 体外研究 (In Vitro) |
1. FM工作溶液的制备
1.1 储备液的制备 用DMSO制备5mM储备液 1.2 工作溶液的制备 使用预热的HBSS溶液制备5-20μM FM1-43工作溶液 注意:请根据您的具体需要调整FM1-43工作溶液的浓度,并现配现用(使用新制备的溶液) 2. 细胞染色(悬浮细胞) 2.1 离心收集细胞,用PBS洗涤两次,每次5分钟。细胞密度为1×10~6/mL 2.2 加入1 mL FM工作溶液,在室温下孵育5-30分钟 2.3 在400g下离心3-4分钟,丢弃上清液 2.4 用PBS洗涤细胞两次,每次5分钟 将细胞重新悬浮在1 mL无血清培养基或PBS中后,使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察 3. 细胞染色(贴壁细胞) 3.1 在无菌盖玻片上培养贴壁细胞 3.2 从培养基上取下盖玻片,吸出多余的培养基 3.3 加入100μL染料工作液,轻轻摇晃至完全覆盖细胞,孵育5-30分钟 3.4 吸出染料工作液,用培养基洗涤2-3次,每次5分钟,用荧光显微镜或流式细胞仪观察。 |
| 细胞实验 |
小鼠耳蜗培养物中的毛细胞通过短暂接触FM1-43进行选择性标记,FM1-43是一种用于研究内吞作用和外排作用的苯乙烯染料。实时共聚焦显微镜显示,染料通过根尖表面快速进入。冷却到4摄氏度和高细胞外钙都会减少染料负载。用EGTA进行预处理,这种情况会破坏尖端连接并防止机械传感器通道门控,从而消除了钙存在下的后续染料负载。钙螯合后,染料负载恢复,其时间过程与尖端连接再生相似。Myo7a突变毛细胞可以转导,但在静止时所有机械转导通道通常都是关闭的,除非受到大的兴奋性刺激,否则它们不会标记FM1-43。FM1-43的细胞外灌注以低微摩尔范围内的半阻断浓度可逆地阻断机械传导。该阻断被高细胞外钙减少,并且是电压依赖性的,在极端的正负电位下减少,表明FM1-43表现为机械转导通道的渗透性阻断剂。电压阶跃到极端电位后块释放的时间过程进一步表明,FM1-43与其他阳离子竞争通道孔内的结合位点。当FM1-43在细胞外应用时,其浓度不会从细胞内侧阻断换能器通道,从而导致完全阻断。钙螯合和FM1-43都能降低氨基糖苷类抗生素硫酸新霉素的耳毒性作用,表明FM1-43和氨基糖苷类药物通过相同的途径进入毛细胞[1]。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
FM 1-43 染料是一种有机溴化物盐、季铵盐、叔胺和吡啶盐。它是一种荧光染料,含有 FM 1-43(2+) 离子。
荧光染料:指在光激发后能发光的化学物质。发射光的波长通常比入射光的波长长。荧光染料是指能使其他物质产生荧光的物质,例如,用于标记其他化合物的荧光染料。 FM1-43 染料的加载特性与氨基糖苷类抗生素在小鼠耳蜗培养物中的积累或毒性机制之间存在许多显著的相似之处。在低温 (4°C) 下,[3H]-庆大霉素在耳蜗毛细胞中的积累以及新霉素的形态学效应显著降低,并且在 Myo7a 突变体中消失(Richardson 等,1997)。新霉素的形态学效应也迅速显现。细胞外钙离子浓度升高可阻断这些效应(Richardson和Russell,1991),并且如本研究所示,钙螯合剂预处理可以预防这些效应。此外,在耳蜗培养物中也观察到了从耳蜗底部到顶部对新霉素敏感性的梯度变化,类似于FM1-43染料加载所观察到的梯度变化(Richardson和Russell,1991)。最后,FM1-43能够降低新霉素的耳毒性作用,表明这两种化合物竞争相同的进入机制。这些观察结果,结合上述证据,提示FM1-43和氨基糖苷类抗生素可能都通过转导通道进入毛细胞。后一种可能性此前已有研究提出(Kroese等,1989)。研究发现,FM1-43在细胞内浓度下不会阻断细胞外通道,而从细胞内浓度下却能强烈阻断细胞外通道,这表明FM1-43优先单向通过。如果氨基糖苷类抗生素也具有同样的特性,就能解释为什么FM1-43和氨基糖苷类抗生素都会在毛细胞中积累,并且在暴露后无法释放。已知不同类型毛细胞对氨基糖苷类抗生素的敏感性差异,也可能与静息状态下通道开放概率的差异有关。哺乳动物耳蜗的基底螺旋外毛细胞对氨基糖苷类抗生素的损伤最为敏感(Hawkins,1976),并且有证据表明,在体内,这些细胞的毛束在静息状态下保持着50%的通道开放,而不是通常的5-10%(Russell和Kössl,1992)。总之,本研究结果提供了强有力的证据,表明 FM1-43 通过机械转导通道进入哺乳动物耳蜗感觉毛细胞的顶端,并提示耳毒性氨基糖苷类抗生素可能具有相同的进入途径。[1] |
| 分子式 |
C30H49N3+2.2[BR-]
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|---|---|
| 分子量 |
611.53816
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| 精确质量 |
609.229
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| 元素分析 |
C, 58.92; H, 8.08; Br, 26.13; N, 6.87
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| CAS号 |
149838-22-2
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| PubChem CID |
6508724
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| 外观&性状 |
Orange to red solid powder
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| LogP |
0.825
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| tPSA |
7.12
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
16
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| 重原子数目 |
35
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| 分子复杂度/Complexity |
480
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CCCCN(CCCC)C1=CC=C(C=C1)/C=C/C2=CC=[N+](C=C2)CCC[N+](CC)(CC)CC.[Br-].[Br-]
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| InChi Key |
VZUVCAGXYLMFEC-UHFFFAOYSA-L
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| InChi Code |
InChI=1S/C30H49N3.2BrH/c1-6-11-23-32(24-12-7-2)30-18-16-28(17-19-30)14-15-29-20-25-31(26-21-29)22-13-27-33(8-3,9-4)10-5;;/h14-21,25-26H,6-13,22-24,27H2,1-5H3;2*1H/q+2;;/p-2
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| 化学名 |
3-[4-[(E)-2-[4-(dibutylamino)phenyl]ethenyl]pyridin-1-ium-1-yl]propyl-triethylazanium;dibromide
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| 别名 |
FM1-43; 149838-22-2; Fm1 43; NerveGreen C1; N-(3-(triethylammonium)propyl)-4-(4-(dibutylamino)styryl)pyridinium; UNII-83IGZ86I9D; FM 1-43; 83IGZ86I9D;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~81.76 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6352 mL | 8.1761 mL | 16.3522 mL | |
| 5 mM | 0.3270 mL | 1.6352 mL | 3.2704 mL | |
| 10 mM | 0.1635 mL | 0.8176 mL | 1.6352 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。