Quinolone;Gyrase (IC50 = 1.25 μg/mL); TOPO IV (IC50 = 1.5-2.5 μg/mL)

通过将金黄色葡萄球菌 ISP794 过夜培养物的适当稀释液接种在不含任何抗生素或含有加雷沙星或环丙沙星的脑心浸液琼脂上来选择突变体，加雷沙星或环丙沙星的浓度为每种药物 MIC 的 1 倍、2 倍、4 倍和 8 倍。对于使用加雷沙星进行选择，使用大型 (150 x 15 毫米) 培养皿来接种 1011 至 1012 CFU。每次接种重复两次。选择板在 37°C 下孵育。抗性突变体的选择频率计算为 48 小时时抗性菌落数与接种细胞数的比率。将选定的菌落于含有选择浓度加雷沙星的脑心浸液琼脂平板上传代培养一次，如有必要，再于不含任何抗生素的脑心浸液琼脂上传代培养一次，然后储存在 −70°C 的脑心浸液肉汤中的 10% 甘油中。[2]
金黄色葡萄球菌 ISP794 在含有两倍浓度的加雷沙星的脑心浸液琼脂上连续传代，以确定可达到的最高抗性水平。从加雷沙星对 ISP794 的 MIC 开始选择。在每个步骤中，将几个突变菌落传代培养在含有选择浓度加雷沙星的脑心浸液琼脂平板上，然后储存在 −70°C 下，并在两倍高的抗生素浓度下传代。[2]
对缺乏 C-6 氟的新型喹诺酮加雷沙星 (BMS-284756) 进行了阻断金黄色葡萄球菌生长的能力检测。对 MIC 和突变预防浓度 (MPC) 的测量表明，对于多种对环丙沙星敏感的分离株，加雷沙星的效力是环丙沙星的 20 倍，其中一些分离株对甲氧西林有耐药性。90% 分离株的 MPC (MPC90) 低于使用推荐剂量加雷沙星达到的已公布血清药物浓度。这些体外观察结果表明，在对环丙沙星敏感的金黄色葡萄球菌分离株中，加雷沙星选择性富集氟喹诺酮类抗性突变体的能力较低。对于对环丙沙星有抗性的分离株，90% 的测试分离株被抑制时的 MIC 低于血清药物浓度，而 MPC90 则不低于血清药物浓度。因此，对于这些菌株，加雷沙星浓度预计会在大部分治疗时间内落在突变体选择窗口内（MIC 和 MPC 之间）。因此，加雷沙星有望选择性富集敏感性更低的突变体。[3]

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针对测试菌株，加雷沙星 (BMS284756)（0-8 天）可抑制支原体和解脲支原体，MIC90 ≤0.25 μg/mL [1]。
根诺沙星（48 小时）可抑制金黄色葡萄球菌野生型和突变体，MIC 范围为0.0128 至 4.0 μg/mL[2]。
加雷诺沙星对拓扑异构酶 IV 的 IC50 为 1.25 至 2.5 μg/mL，对金黄色葡萄球菌促旋酶的 IC50 分别为 1.25 μg/mL[2]。
Garenoxacin 具有从对环丙沙星敏感的金黄色葡萄球菌分离株中选择性富集氟喹诺酮类耐药突变体的趋势较低[3]。

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对63株肺炎支原体、45株人型支原体、15株发酵支原体和68株脲原体进行了加雷沙星（BMS-284756）、去氟喹诺酮类药物及其他8种药物的体外敏感性测定。加兰诺沙星是活性最强的喹诺酮类药物，在<或=1 μ g/ml时抑制所有分离株。加列诺克星的MIC， 90%的分离株被抑制（MIC(90)s）；<或=0.008 μ g/ml)比莫西沙星和克林霉素低至少4倍，比斯帕沙星低8倍，比左氧氟沙星和环丙沙星低64倍。加诺沙星MIC(90) <或=0.008 μ g/ml，比克林霉素和莫西沙星低4倍，比斯帕沙星低8倍，比左氧氟沙星和环丙沙星低64倍。所有15株发酵分枝杆菌分离株均被浓度<或=0.008微克/毫升的加林诺沙星抑制，使其成为对该菌最有效的药物。对于脲原体，加诺沙星MIC(90) （0.25 μ g/ml）与莫西沙星、多西环素相当，比左氧氟沙星、斯帕沙星低4倍，比阿奇霉素低8倍，比环丙沙星低32倍。加诺沙星和其他氟喹诺酮类药物通过最小杀菌活性测量和时间杀伤研究证明对肺炎支原体和人支原体具有杀菌活性。加兰诺沙星在治疗支原体和脲原体感染方面有很大的潜力，因此需要进一步的研究。[1]

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研究人员通过遗传和生化研究确定了新型地氟喹诺酮类药物加雷沙星（BMS-284756, T-3811ME）在金黄色葡萄球菌中的靶酶相互作用。我们发现加诺沙星比环丙沙星对野生型金黄色葡萄球菌的活性高4到8倍。单个拓扑异构酶IV或回转酶突变仅导致加雷沙星MIC增加2- 4倍，而两个位点的突变组合导致MIC大幅增加（128倍）。诺拉外排泵的过表达对加诺沙星耐药的影响很小。加诺沙星为MIC的两倍时，耐药突变体（<7.4 × 10（-12）至4.0 × 10(-11)）的选择比环丙沙星少5至6个对数单位。在单步突变中，拓扑异构酶IV或gyrase的喹诺酮耐药决定区（QRDR）内外的突变被选中，表明拓扑异构酶IV和gyrase具有双重靶向性。基因实验表明，其中三种新突变是产生耐药性的原因。对金黄色葡萄球菌中纯化的拓扑异构酶IV和gyrase的研究也表明，加兰诺沙星对拓扑异构酶IV和gyrase具有相似的活性（50%的抑制浓度，分别为1.25 ~ 2.5和1.25微g/ml），虽然其对拓扑异构酶IV的活性是环丙沙星的2倍，但对gyrase的活性是环丙沙星的10倍。本研究提供了第一个支持喹诺酮类药物双重靶向金黄色葡萄球菌拓扑异构酶IV和gyrase的遗传学和生化数据，并为qrdr扩展到grlB的5‘端和gyrA的3’端提供了遗传学证据。[2]

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新的喹诺酮加雷沙星（BMS-284756）缺乏C-6氟，对其阻断金黄色葡萄球菌生长的能力进行了检测。MIC和突变体预防浓度（MPC）的测定显示，加诺沙星对多种环丙沙星敏感的分离株的效力是环丙沙星的20倍，其中一些对甲氧西林耐药。90%分离株的MPC（MPC(90)）低于使用推荐剂量的加诺沙星所达到的公布的血清药物浓度。这些体外观察表明，在环丙沙星敏感的金黄色葡萄球菌分离株中，加诺沙星选择性富集氟喹诺酮耐药突变体的倾向较低。对于环丙沙星耐药菌株，90%的测试菌株被抑制的MIC低于血清药物浓度，而MPC（90）则没有。因此，对于这些菌株，加诺沙星浓度预计在大部分治疗时间内落在突变体选择窗口内（在MIC和MPC之间）。因此，加诺克星有望选择性地富集易感性更低的突变体。[3]

在肺炎链球菌感染的小鼠肺炎模型中，针对野生型菌株和携带单一突变的突变体，格尔德诺辛（12.5-50mg/kg；皮下注射；一次）表现出显着的疗效[4]。
当BALB/c雌性小鼠暴露于由肺炎链球菌 D-979 引起的实验性继发性肺炎球菌肺炎，给予加雷沙星（10 和 30 mg/kg；口服；一次）时，肺部活细胞计数减少，存活时间显着延长。

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在流感病毒感染后的肺炎球菌肺炎小鼠模型中，加诺沙星比其他氟喹诺酮类药物更有效，并表现出高水平的肺部细菌根除，低死亡率和有效的组织病理学改善。加诺沙星可能用于治疗继发性肺炎球菌性肺炎后流感。[5]

拓扑异构酶IV测定。[2]
十癸烯化试验的反应混合物（20 μl）含有50 mM Tris-HCl （pH 7.7）、5 mM MgCl2、5 mM二硫索糖醇、50 μg牛血清白蛋白/ ml 250 mM谷氨酸钾、1 mM ATP、100 ng动质体DNA和不同量的GrlA和GrlB。37℃孵育1 h后，加入EDTA至终浓度50 mM终止反应，产物在1%琼脂糖中电泳分析。凝胶电泳后用溴化乙锭染色。

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DNA回转酶测定。[2]
在含有75 mM Tris-HCl （pH 7.5）、7.5 mM MgCl2、7.5 mM二硫苏糖醇、2mM ATP、75 μg牛血清白蛋白/ ml、30 mM KCl、250 mM谷氨酸钾和2 μg tRNA（以0.5 μg松弛的pBR322为底物）的缓冲液中测定DNA超卷活性，缓冲液的总容积为20 μl。反应在30°C下进行1 h，加入EDTA至终浓度为50 mM停止反应，产物在1%琼脂糖中进行电泳分析，用于拓扑异构酶IV检测。

对所得菌落进行四环素敏感性 (MIC, ≤3 μg/ml) 和对加雷沙星 (MIC, >0.064 μg/ml) 或环丙沙星 (MIC, >0.25 μg/ml) 敏感性变化的筛选。对对四环素敏感且对加雷沙星或环丙沙星敏感性发生变化的菌落测定环丙沙星和加雷沙星的 MIC。对从染色体 DNA 扩增的相应区域的 PCR 产物进行直接 DNA 测序，以确认预期突变的存在。[2]
将环丙沙星溶解在无菌水中，使最终浓度为 10 mg/ml。左氧氟沙星和加替沙星储备溶液的制备方法类似，但加入了约 1/10 体积的 1 M NaOH 来帮助溶解这两种化合物。将加雷沙星溶于 0.001 M 乙酸中，得到浓度为 5 mg/ml 的储备溶液。将储备溶液分成 1 ml 的等分试样，并储存在 −80°C 下。用高压灭菌水制备稀释系列。有时将溶液储存在 −20°C 下数周。[3]
为了评估加雷沙星对环丙沙星耐药分离株的效力，我们测量了由 18 种 MRSA 和 4 种 MSSA 分离株组成的不同分离株组的 MIC 和 MPC。MIC 范围在 0.04 至 4.8 μg/ml 之间，众数 MIC 在 0.8 至 1.2 μg/ml 之间，MIC90 为 3.2 μg/ml，与一份报告 (15) 中的数据相似，略高于另一份报告 (21) 中的数据。 MPC 的范围为 3.2 至 >29 μg/ml，MPC90 为 >19.6 μg/ml，模态 MPC 的范围为 9.6 至 12.8 μg/ml。这些值列于表 2，比对环丙沙星敏感的分离株的观察值高出 30 至 100 倍[3]。

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细胞系：解脲支原体、肺炎支原体、发酵支原体和人支原体。
培养时间：人支原体 48 小时，解脲支原体 24 小时，肺炎支原体 4-8 天< br> 结果：对肺炎支原体、发酵支原体、人型支原体和解脲支原体菌株具有抑制作用。 MIC90 分别为 0.031 μg/mL、≤0.008 μg/mL、≤0.008 μg/mL 和 0.25 μg/mL。

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药物敏感性测定。[2]
在含有连续两倍稀释抗生素的Trypticase大豆琼脂上至少重复两次测定mic，并在37°C孵育24和48 h后进行生长评分。用钠啶酸的mic筛选gyrA突变，用新生物素的mic筛选grlB突变，用溴化乙啶的mic筛选NorA过表达。在基因测试中，当遇到双重差异时，它们通过重复测试来证实。

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突变体选择的频率。[2]
通过将适当稀释的金黄色葡萄球菌ISP794隔夜培养物在不加抗生素或加加诺克星或环丙沙星的情况下，以每种药物MIC的1倍、2倍、4倍和8倍的浓度，在脑心脏输注琼脂上镀上突变体。为了选择加诺克星，使用大的（150 × 15毫米）培养皿对1011 ~ 1012 CFU进行培养皿。每次电镀一式两份，至少重复两次。选择板37℃孵育。抗性突变体的选择频率以48 h时抗性菌落数与接种细胞数之比计算。选择的菌落在含有选定浓度的加诺沙星的脑心灌注琼脂板上传代一次，如有必要，在不含任何抗生素的脑心灌注琼脂上传代一次，然后在- 70°C的10%甘油中保存于脑心灌注肉汤中。

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逐步选择抗药突变体。[2]
将金黄色葡萄球菌ISP794连续传代于含有加诺沙星浓度增加两倍的脑心灌注琼脂上，以确定可达到的最高耐药水平。从加诺克星治疗ISP794的MIC开始选择。在每一步中，将几个突变菌落传代于含有加诺克星选择浓度的脑心输注琼脂板上，然后在- 70°C保存并在高两倍抗生素浓度下传代。[2]

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抗生素治疗[4]
使用野生型强毒青霉素敏感菌株（P-4241）和喹诺酮耐药突变体（parC、gyrA和外排单突变体以及parC和gyrA双突变体）攻击18小时后开始治疗。用parE和parC gyrA parE临床菌株攻毒后3小时开始治疗。加诺沙星和TVA分别以12.5、25和50 mg/kg的剂量皮下注射6次。TVA以50、100和200 mg/kg的剂量给具有双重突变的突变小鼠。感染的、未治疗的对照组小鼠接受相同体积的等渗盐水。每个治疗组15只动物。观察期为10 d。每天记录死亡率，并比较累积存活率。

Animal Model: Swiss mice with S. pneumonia infection[4].
Dosage: 12.5, 25 and 50 mg/kg
Administration: Subcutaneous injection, once
Result: Significantly improved the survival rate.

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Bactericidal activity in vivo [4]
The protocol used to study bactericidal activity in vivo was the same as that used for the mouse survival studies. The total CFU counts recovered from whole-lung homogenates were determined 6 h after the first treatment, which was initiated 18 h after bacterial challenge, and 12 h after the second, fourth, and sixth treatments at doses of 12.5 and 25 mg of garenoxacin per kg. Three mice were used for each dose and time point. Mice were killed by intraperitoneal injection of sodium pentobarbital and were exsanguinated by cardiac puncture; blood was used for culture. The lungs were removed and homogenized in 1 ml of normal saline. Serial 10-fold dilutions of the homogenates were plated on Columbia agar. Blood was cultured in brain heart infusion broth. After overnight culture, colonies were counted on agar plates seeded with lung samples, and blood cultures were examined for turbidity. Results are expressed as the mean ± standard deviation log10 CFU per lung and as the number of positive or negative blood cultures for groups of three mice each.

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Determination of garenoxacin concentrations in serum and lungs and PK analysis [4]
Antibiotics were administered as a single s.c. dose of 25 mg of garenoxacin or TVA per kg to both infected and uninfected mice. Infected mice were treated at 18 h postinfection. Serum and lung samples were collected from groups of six mice at 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 6, 8, 12, and 24 h after drug administration. All samples were stored at −20°C and protected from light to avoid garenoxacin degradation during analysis. Lung samples were crushed in liquid nitrogen with a magnetic crusher. Serum samples (100 μl) and lung tissue samples (20 to 50 mg of lung powder, as measured precisely) were prepared by mixing an internal standard with methanolic acid (100 and 500 μl, respectively). After precipitation or diffusion, vortexing or ultrasonic mixing, and centrifugation, 50 μl of the upper phase was injected into a high-performance liquid chromatographic system. The total drug concentration was determined by use of an octadecyl silyl column (Novapak C18; 4.6 by 150 mm) coupled to a spectrofluorometric detector operating at excitation and emission wavelengths of 280 and 415 nm, respectively. The mobile phase was a mixture of acetonitrile, sodium citrate buffer solution (pH 3.5), and water (22/15/63; vol/vol) with 0.2% triethylamine, adjusted to pH 4. The flow rate was 1.0 ml/min. The limits of quantification were 0.02 μg/ml and 0.05 μg/g for serum and lung tissue samples, respectively, and measurements were linear over the ranges of 0.2 to 10.0 μg/ml and 0.5 to 50.0 μg/g for serum and lung tissue samples, respectively. The coefficients of variation for quality control were below 10% for both serum and lung tissue samples. The pharmacokinetic (PK) parameters for TVA were evaluated as described elsewhere.

24小时内游离血清浓度-时间曲线下面积除以最小抑菌浓度（fAUC0–24/MIC）是氟喹诺酮类药物临床疗效最重要的预测指标之一（Craig，1998）。在本研究建立的流感病毒感染后继发性肺炎球菌肺炎模型中，口服加雷诺沙星（10和30 mg/kg）在血清中的fAUC0–24/MIC比值分别为71.7和288，在肺部的fAUC0–24/MIC比值分别为106和381，表明其能有效清除细菌并具有优异的疗效（表1）。尽管目前尚不清楚这三种喹诺酮类药物在继发性肺炎球菌肺炎模型中是否具有相似的fAUC0-24/MIC疗效，但加雷诺沙星在临床剂量下对肺炎链球菌的fAUC/MIC90比值≥352，高于左氧氟沙星（15.5）和莫西沙星（107）（Chein等，1997；Takagi等，2008；Watanabe等，2012；Zeitlinger等，2003）。加雷诺沙星强大的抗菌活性和良好的药代动力学特征被认为反映了其对流感病毒感染后继发性肺炎球菌肺炎的优异治疗效果。尽管莫西沙星（30 mg/kg）与加雷沙星在降低肺部活细胞方面效果相似，且其 fAUC0-24/MIC 值低于加雷沙星，但其死亡率（40%）却高于加雷沙星（表 1）。需要进一步研究来阐明喹诺酮类药物 fAUC/MIC 目标值的差异。[5]

[1]. In vitro susceptibilities to and bactericidal activities of garenoxacin (BMS-284756) and other antimicrobial agents against human mycoplasmas and ureaplasmas. Antimicrob Agents Chemother. 2003 Jan;47(1):161-5.

[2]. Dual targeting of DNA gyrase and topoisomerase IV: target interactions of garenoxacin (BMS-284756, T-3811ME), a new desfluoroquinolone. Antimicrob Agents Chemother. 2002 Nov;46(11):3370-80.

[3]. Mutant prevention concentration of garenoxacin (BMS-284756) for ciprofloxacin-susceptible or -resistant Staphylococcus aureus. Antimicrob Agents Chemother. 2003 Mar;47(3):1023-7.

[4]. Activities of garenoxacin against quinolone-resistant Streptococcus pneumoniae strains in vitro and in a mouse pneumonia model. Antimicrob Agents Chemother. 2004 Mar;48(3):765-73.

[5]. Therapeutic effects of garenoxacin in murine experimental secondary pneumonia by Streptococcus pneumoniae after influenza virus infection. Diagn Microbiol Infect Dis. 2014 Feb;78(2):168-71.

加雷诺沙星是一种喹啉单羧酸，即1,4-二氢喹啉-3-羧酸，其1位被环丙基取代，4位被氧代基取代，7位被(1R)-1-甲基-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基取代，8位被二氟甲氧基取代。它是一种抗菌药物和非甾体类抗炎药。它是一种喹诺酮类抗生素、喹啉单羧酸、有机氟化合物、环丙烷类化合物、芳香醚类化合物和异吲哚类化合物。
加雷诺沙星是一种喹诺酮类抗生素，目前正在研究其治疗革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌感染的疗效。

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药物适应症
已研究用于治疗细菌感染。

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除了测定部分微生物的最低杀菌浓度 (MBC) 外，我们还试图评估加雷诺沙星对肺炎支原体和人型支原体各代表性分离株的杀菌动力学，因为 MBC 已表明加雷诺沙星对这些微生物具有杀菌作用。由于支原体（尤其是肺炎支原体）生长速度较慢，其世代时间为 6 小时，因此通常 24 小时的时间-杀菌曲线研究必须延长才能证实其疗效。我们证实，加雷诺沙星在24至96小时的孵育后对肺炎支原体具有浓度依赖性的杀菌活性。加雷诺沙星在4至8倍MIC浓度下孵育24小时后，以及在2倍MIC浓度下孵育48小时后，也对人型支原体表现出杀菌活性。在某些较低浓度的加雷诺沙星存在下观察到≤2 log10 CFU的再生长，可能是由于极少量存活的微生物得以存活并随时间增殖所致，而对于肺炎支原体而言，在长时间孵育数日后，加雷诺沙星的降解和失活可能促进了这些微生物的增殖。这是首次通过改进自常用抗菌药物对其他细菌作用评估方法的时效杀菌实验，证实抗菌药物对肺炎支原体的杀菌作用。本研究表明，加雷诺沙星是一种有前景的治疗支原体和脲原体感染的药物。应进行进一步的临床评估。[1]

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总之，加雷诺沙星与DNA促旋酶和拓扑异构酶IV的相互作用相似，并产生了新的突变，将喹诺酮耐药决定区（QRDR）的范围扩展到GrlB的氨基末端结构域和GyrA的羧基末端结构域。这种新型去氟喹诺酮类药物具有高效力和低耐药突变体选择频率，因此在临床应用中可能具有优势，降低新耐药突变体出现的可能性。然而，对于先前已选择出多种喹诺酮类耐药突变的菌株（例如目前常见的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌临床分离株），加雷诺沙星存在交叉耐药性，这可能会限制该抗生素在治疗已对早期喹诺酮类药物产生耐药性的菌株方面的应用。 [2]

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对于已对环丙沙星耐药的分离株，加雷诺沙星的MIC90为3.2 μg/ml，约为敏感分离株MPC90的8倍。这一观察结果表明，部分耐药菌株存在多种突变，这与其他研究的报道一致。由于耐药分离株的MIC低于可达到的血清药物浓度（图2C），因此可以推测，使用加雷诺沙星治疗环丙沙星耐药的金黄色葡萄球菌有时可能治愈感染。然而，已对环丙沙星耐药分离株的MPC90>19.6 μg/ml，即使将每日剂量提高至600 mg，也远高于加雷诺沙星所能达到的血清药物浓度（图2C）。事实上，基于MPC的加雷诺沙星及其突变株的药效学（图2C）与环丙沙星及其完全敏感菌株的药效学（图2A）相似。由于环丙沙星能迅速筛选出耐药突变株，我们预测，如果将加雷诺沙星用于治疗环丙沙星耐药菌株，金黄色葡萄球菌中将会固定出更多的突变。这些突变将使加雷诺沙星无法用于联合治疗。[3]

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体内实验表明，在感染野生型菌株和单突变耐药菌株的小鼠中，加雷诺沙星的存活率与TVA相当，并且对携带parC和gyrA双突变的突变株的疗效略优于TVA：每公斤体重50毫克加雷诺沙星可延长小鼠的存活时间，而每公斤体重200毫克TVA则无效。将加雷诺沙星的活性与环丙沙星（一种特性明确且广泛使用的喹诺酮类药物）进行比较，结果表明加雷诺沙星的疗效远优于环丙沙星。考虑到环丙沙星体外活性较差，这一结果符合预期。加雷诺沙星的体内活性源于其对野生型和氟喹诺酮类耐药肺炎链球菌菌株的体外活性优于环丙沙星，以及其对双突变和三突变菌株的活性优于维甲酸（TVA）。然而，喹诺酮类药物的体内疗效还受到其他因素的影响，特别是药代动力学/药效学（PK-PD）参数。Forrest等人和Hyatt等人报道，AUC/MIC比值是与医院获得性肺炎患者的细菌清除和临床治愈相关的主要参数，其最低临床有效比值为125。因此，加雷诺沙星良好的PK-PD参数有助于其发挥疗效。与环丙沙星（CIP）相比，加雷沙星（garenoxacin）具有更长的半衰期、更大的AUC值和更优异的体外活性，尤其对肺炎链球菌（S. pneumoniae）的活性更强；在小鼠血清和肺组织样本中，加雷沙星的AUC/MIC比值最高。这些药代动力学（PK）和药效学（PD）参数对维甲酸（TVA）也非常有利，这解释了为什么这种喹诺酮类药物与加雷沙星一样有效。我们获得的加雷沙星药代动力学数据与小鼠生存数据高度吻合，表明血清蛋白结合对治疗结果的影响很小，即使在小鼠体内血清蛋白结合率高达约80%（DR Andes和WA Craig，第43届抗菌药物和化疗跨学科会议摘要，摘要A-309，第10页，2003年）。这可能是由于加雷沙星与血清蛋白的结合较弱所致。此外，肺部炎症细胞可能作为药物储存库，将加雷沙星释放到血清中。 TVA 也表现出较高的血清蛋白结合率，其疗效与其良好的药代动力学行为相关。TVA 在本肺炎球菌肺炎小鼠模型中是一个有趣的对照药物，但由于其已从市场上撤回，因此其临床相关性不如加雷诺沙星。总之，加雷诺沙星在由喹诺酮类敏感和耐药肺炎链球菌菌株引起的肺炎小鼠模型中均表现出高效性。因此，加雷诺沙星可能成为社区获得性呼吸道感染经验性治疗的有效选择。[4]

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既往研究表明，尽管β-内酰胺类药物能有效清除细菌，但并未提高继发性细菌性肺炎的生存率（McCullers，2004），而大环内酯类药物治疗提高生存率是通过减轻炎症实现的（Karlström 等，2009）。Hara 等。 (2011)年的一项研究报告指出，加雷诺沙星具有抗炎活性，其作用机制是通过改变人肺上皮细胞系和人单核细胞系（尽管是在脂多糖刺激的细胞中）分泌白细胞介素8。加雷诺沙星疗效的改善可能不仅与其更高的fAUC0-24/MIC值带来的细菌清除作用有关，还可能与其抑制炎症反应有关。因此，这些数据提示加雷诺沙星可能在治疗流感后继发性肺炎球菌性肺炎方面具有潜在作用。需要进一步的研究来更好地了解加雷诺沙星对继发性肺炎球菌性肺炎患者炎症反应和临床疗效的影响。[5]

C23H20N2O4F2

426.4127

522.127

C, 55.17; H, 4.63; F, 7.27; N, 5.36; O, 21.43; S, 6.14

223652-82-2

Garenoxacin;194804-75-6; Garenoxacin Mesylate hydrate;223652-90-2; Garenoxacin mesylate; 223652-82-2

124094

Typically exists as solid at room temperature

1.421g/cm3

581.5ºC at 760mmHg

305.5ºC

5.38

143.31

3

11

5

36

863

1

C[C@@H]1C2=C(C=C(C=C2)C3=C(C4=C(C=C3)C(=O)C(=CN4C5CC5)C(=O)O)OC(F)F)CN1.CS(=O)(=O)O

UPHLDCUEQOTSAD-RFVHGSKJSA-N

InChI=1S/C23H20F2N2O4.CH4O3S/c1-11-15-5-2-12(8-13(15)9-26-11)16-6-7-17-19(21(16)31-23(24)25)27(14-3-4-14)10-18(20(17)28)22(29)30;1-5(2,3)4/h2,5-8,10-11,14,23,26H,3-4,9H2,1H3,(H,29,30);1H3,(H,2,3,4)/t11-;/m1./s1

3-Quinolinecarboxylic acid, 1-cyclopropyl-8-(difluoromethoxy)-7-((1R)-2,3-dihydro-1-methyl-1H-isoindol-5-yl)-1,4-dihydro-4-oxo-, monomethanesulfonate

BMS-284756 mesylate; BM-284756; Garenoxacin mesylate; 223652-82-2; Bms 284756; BMS-284756; 3-Quinolinecarboxylic acid, 1-cyclopropyl-8-(difluoromethoxy)-7-((1R)-2,3-dihydro-1-methyl-1H-isoindol-5-yl)-1,4-dihydro-4-oxo-, monomethanesulfonate; BMS284756; Garenoxacin; Garenoxacin mesilate.

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。