| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 50mg | ||
| 100mg |
| 靶点 |
DNMT/DNA methyltransferases
DNA methyltransferases (DNMTs). Guadecitabine is a DNMT inhibitor that incorporates into DNA and forms covalent adducts with DNMT enzymes, leading to their degradation and global DNA hypomethylation. It is an antimetabolite. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在CTA阴性癌细胞中，guadecitabine处理可增加所检测的癌/睾丸抗原（CTA）的表达。研究结果表明，在所有检测的组织类型的肿瘤细胞中，guadecitabine可引起和/或显著上调MAGE-A3和NY-ESO-1特异性mRNA的组成型表达水平。在Mel 275黑色素瘤细胞中，guadecitabine处理可显著增加HLA I类抗原、HLA-A2同种异体特异性抗原以及共刺激分子ICAM-1的组成型表达水平（p<0.05）。研究结果还表明，guadecitabine处理可显著降低所研究癌细胞中CTA启动子的组成型甲基化水平（p<0.01）。在Mel 195和MZ-1257肾细胞癌(RCC)细胞中，guadecitabine诱导的MAGE-A1和NY-ESO-1启动子去甲基化的平均百分比分别为57%和30%[2]。
Guadecitabine抑制DNMT活性，导致DNA低甲基化和肿瘤抑制基因的重新激活。它对癌细胞具有细胞毒性，并已显示出抗肿瘤活性。现有文献中未提供DNMT抑制的具体IC50值，但其活性在癌症研究中已得到充分证实。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
启动子区域CpG岛的甲基化通常与基因沉默相关，大多数癌症中都存在异常的DNA甲基化，导致一些抑癌基因的沉默。DNA甲基化抑制剂能够逆转这种异常的高甲基化，从而在体外和体内有效激活甲基化沉默的抑癌基因。目前已对多种DNA甲基化抑制剂进行了深入研究；其中效力最强的是5-氮杂-2'-脱氧胞苷（5-Aza-CdR），但它可导致患者出现骨髓抑制。guadecitabine (S110)是一种由5-Aza-CdR和脱氧鸟苷组成的二核苷酸，我们之前的研究表明，它在体外可有效抑制DNA甲基化，且不易被胞苷脱氨酶脱氨，因此有望成为5-Aza-CdR的替代药物。本文证明，在小鼠体内，guadecitabine (S110)的耐受性优于5-Aza-CdR，并且在体内诱导p16表达、降低p16启动子区域的DNA甲基化以及抑制人源异种移植瘤生长方面与5-Aza-CdR同样有效。我们还证明，guadecitabine (S110)可通过腹腔注射和皮下注射两种给药途径有效。因此，guadecitabine (S110)是一种很有前景的新型药物，其作用机制与5-Aza-CdR类似，但稳定性更好，毒性更低[2]。
肿瘤生长可被guadecitabine (S110)有效延缓。仅用PBS处理的肿瘤表现出明显的生长，而用guadecitabine (S110)处理的肿瘤体积没有缩小，仅缓慢生长。此外，小鼠体重变化表明，皮下注射（SQ）的瓜地西他滨比腹腔注射的毒性要小得多[3]。瓜地西他滨在急性髓系白血病（AML）和骨髓增生异常综合征（MDS）的临床前模型中显示出体内活性。目前正在进行临床试验，研究其治疗这些及其他恶性肿瘤的疗效。与地西他滨相比，其二核苷酸结构使其半衰期更长。 |
| 酶活实验 |
利用甲基化特异性单核苷酸延伸法 (Ms-SNuPE) 进行定量 DNA 甲基化分析[2]
按照先前描述的方法，用亚硫酸氢钠处理 2 µg 基因组 DNA 样品，并通过 PCR 扩增每个目标区域。p16 的 PCR 条件如下：95°C 预变性 3 分钟，然后进行 40 个循环，每个循环包括 95°C 变性 1 分钟、62°C 退火 1 分钟和 72°C 延伸 1 分钟，最后 72°C 延伸 10 分钟。亚硫酸氢钠特异性 PCR 引物序列如下：p16 正义链，5'- GTA GGT GGG GAG GAG TTT AGT T-3'，p16 反义链，5'- TCT AAT AAC CAA CCA ACC CCT CCT-3'。 p16 的 Ms-SNuPE 反应条件如下：95°C 2 分钟，50°C 2 分钟，72°C 1 分钟。p16 SNuPE 引物序列如下：5'-TTT TAG GGG TGT TAT ATT-3'、5'-TTT TTT TGT TTG GAA AGA TAT-3' 和 5'-TTT GAG GGA TAG GGT-3'。PCR 扩增产物使用 Qiagen 凝胶提取试剂盒提取，并按照先前描述的方法进行 Ms-SNuPE 分析以检测甲基化水平的变化。 Guadecitabine 的体外 DNMT 抑制试验通常包括测量化合物存在下 DNMT 酶的活性。将酶与 DNA 底物和甲基供体（S-腺苷甲硫氨酸）孵育，并定量 DNA 中甲基的掺入量。 IC50 值由剂量反应曲线确定。 |
| 细胞实验 |
用guadecitabine (S110)体外治疗肿瘤细胞[3]
将细胞（3–4 × 105）接种于T75组织培养瓶中，24小时后用guadecitabine (S110)、5-AZA-CdR或3′-3′-DpG进行处理，方法是每12小时更换一次培养基，加入含有1 μM或10 μM guadecitabine (S110)、1 μM 5-AZA-CdR或3′-3′-DpG的新鲜培养基，持续2天（4次脉冲），然后用不含药物的新鲜培养基再培养2天。对照组细胞在相似的实验条件下进行处理，但不添加药物。[3] 细胞毒性试验[3] 使用比色法细胞毒性试验试剂盒定量检测LDH释放，以检测HLA-A2限制性gp100特异性CTL对未经处理或经1 μM愈创甘油醚（S110）处理的Mel 275黑色素瘤细胞的细胞溶解活性。细胞的效应细胞/靶细胞（E/T）比例分别为25/1、12/1、6/1和3/1。特异性裂解百分比的测定按照制造商的说明进行。[3] 在用愈创甘油醚 (S110) 处理的 Mel 275 黑色素瘤细胞中，研究了 HLA I 类抗原和 ICAM-1 的阻断作用。细胞预先与 20 μg/ml 的抗 HLA I 类单克隆抗体 W6/32 或抗 ICAM-1 单克隆抗体 84H10 在 37 °C 下孵育 30 分钟。然后，洗涤细胞，并将其作为 HLA-A2 限制性 gp100 特异性 CTL 的靶细胞，在 LDH 释放试验中以 25/1 的效应细胞/靶细胞 (E/T) 比进行检测。 愈创甘油醚的具体体外细胞检测方案尚未详细说明。细胞活性通过测量处理后的癌细胞的整体 DNA 甲基化水平来评估，例如使用 ELISA 或亚硫酸氢盐测序等技术。细胞活力和增殖试验（例如 MTT 试验）也被用于评估其细胞毒性作用。 |
| 动物实验 |
体内药物耐受性研究[2]
将无肿瘤的裸鼠（nu/nu）分为六个治疗组，每组六只动物。S110 和 5-氮杂胞苷（5-Aza-CdR）均用 PBS 配制，并通过尾静脉注射给药。剂量和给药方案的设计使得每组在七天后均接受等摩尔量的 S110 或 5-Aza-CdR。动物按以下方案治疗三周：第 1 组每周一接受 36.6 mg/kg S110 给药；第 2 组每周一次接受 15 mg/kg 5-Aza-CdR 给药；第 3 组每周二和周四接受 18.3 mg/kg S110 给药；第 4 组每周两次接受 7.5 mg/kg 5-Aza-CdR 给药。最后，第5组和第6组分别接受了12.2 mg/kg和5.0 mg/kg的S110和5-Aza-CdR，每周三次（周一、周三和周五）给药。通过体重测量和发病率对耐受性进行粗略评估。每周记录两次体重测量。[2] 腹腔注射给药的体内异种移植药物疗效研究[2] 本研究使用EJ6人膀胱癌细胞，实验方法与之前描述的类似。将悬浮于PBS中的EJ6细胞（5 × 10⁵/注射）皮下注射（SQ）到4至6周龄雌性BALB/c无胸腺裸鼠（Foxn1nu）的左右背部（沿腋中线）。小鼠随机分为3组。 2-3周后，当肉眼可见的肿瘤（50-200 mm³）形成后，开始治疗。使用游标卡尺测量肿瘤大小，并使用以下公式计算肿瘤体积（TV）：TV = LD²/2（其中L为最长直径，D为最短直径）。使用相对肿瘤体积（RTV）计算各组小鼠肿瘤生长倍数差异，RTV的计算公式如下：RTV = TVₙ/TV₀，其中TVₙ为第n天的肿瘤体积（mm³），TV₀为第0天（初始治疗）的肿瘤体积（mm³）。在治疗开始和结束时称量小鼠体重以确定毒性。每只小鼠的体重变化百分比使用以下公式计算：[(W₆−W₀)/W₀] × 100%（其中Wₙ为第n天小鼠的体重）。 5-氮杂胞苷（5-Aza-CdR）用作阳性对照，0.45% PBS用作阴性对照。 PBS、5-Aza-CdR（PBS 中剂量为 5 mg/kg）和 S110（PBS 中剂量为 10 mg/kg）每日腹腔注射给药，持续 6 天。 所有小鼠在末次给药后 24 小时处死。此时，取出肿瘤，并将每个肿瘤分成两份。一份立即用 TRIzol 试剂匀浆用于 RNA 提取，另一份立即置于液氮中冷冻，用于后续 DNA 提取。基因组 DNA 和 RNA 将分别用于通过 Ms-SNuPE 分析 p16 启动子的甲基化状态和通过实时 RT-PCR 分析基因表达。[2] 体内异种移植药物疗效研究（皮下给药）[2] 将 10⁷ EJ6 膀胱癌细胞皮下接种到无胸腺裸鼠（nu/nu）的右后侧腹部。当肿瘤直径达到 0.5 cm 时，将动物随机分为三组，每组八只，开始治疗。剂量和给药方案的设计使得每组均接受等摩尔量的 S110 或 5-Aza-CdR。药物每周皮下注射一次，S110 的剂量为 12.2 mg/kg，5-Aza-CdR 的剂量为 5.0 mg/kg，持续三周。该研究包含一个适当的 PBS 对照组。每周两次使用游标卡尺测量肿瘤大小并测量体重，以监测肿瘤生长抑制情况和耐受性。 Guadecitabine 已在 AML 和 MDS 的动物模型中进行评估，通常使用小鼠的异种移植或患者来源的异种移植 (PDX) 模型。该化合物通过皮下注射给药，并评估肿瘤生长抑制、生存率和 DNA 甲基化变化。这些研究支持其进入临床试验阶段。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
与地西他滨相比，愈创西他滨旨在具有更优的药代动力学特性。其与脱氧鸟苷形成的磷酸二酯键可保护其免受胞苷脱氨酶的降解，从而延长半衰期并实现更持久的药物暴露。详细的药代动力学参数可从临床研究中获得，但此处不再赘述。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在无肿瘤裸鼠中，guadecitabine (S110) 的耐受性优于 5-Aza-CdR[2]。尽管 5-Aza-CdR 在体外和体内均是一种有效的 DNA 甲基化抑制剂，但其缺点是可能引起患者骨髓抑制等毒性反应。Guadecitabine (S110) 是一种由 5-Aza-CdR 和脱氧鸟苷组成的二核苷酸（图 1）。Yoo 等人此前已证实，guadecitabine (S110) 在体外能有效抑制 DNA 甲基化，其在降低 DNA 甲基化、激活 p16 表达、耗竭 DNA 甲基转移酶以及抑制癌细胞生长方面的作用与 5-Aza-CdR 相当。此外，它不易被胞苷脱氨酶脱氨，使其成为 5-氮杂胞苷 (5-Aza-CdR) 的一种很有前景的替代品。为了比较 guadecitabine (S110) 和 5-Aza-CdR 的体内耐受性，我们根据表 1 将 6 只无肿瘤的雌性裸鼠（每组 n=6）随机分配到不同的给药方案中。各组配对，使得第 1 组和第 2 组、第 3 组和第 4 组以及第 5 组和第 6 组中 S-110 的给药频率与 5-Aza-CdR 的摩尔当量相同。首先通过观察整个研究期间的相对体重来比较耐受性（图 2A）。第 1 组和第 2 组动物在整个研究期间体重保持稳定或持续增加，并在 36 天后处死。在第 3 组和第 4 组中，接受 guadecitabine (S110) 治疗的动物体重保持稳定或持续增加，而接受 5-Aza-CdR 治疗的动物在给药第一周后平均开始体重下降。第5组和第6组动物的平均体重在给药第一周后迅速下降，最终导致死亡。接受S-110治疗的动物维持健康体重的时间略长于接受5-Aza-CdR治疗的动物。值得注意的是，尽管5-Aza-CdR和S-110的每周总剂量相同，但两种药物在低剂量高频率给药时均表现出更高的毒性。在所有三组配对比较中，就体重变化而言，S-110的耐受性均优于5-Aza-CdR。
Guadecitabine的毒性特征与其他DNMT抑制剂相似，包括骨髓抑制、胃肠道反应和疲劳。由于它是一种研究性药物，其安全性特征正在正在进行的临床试验中进行评估。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
瓜地西他滨（Guadicitabine）正被研究用于治疗既往接受过治疗的转移性结直肠癌。瓜地西他滨是一种二核苷酸抗代谢物，由地西他滨通过磷酸二酯键与脱氧鸟苷连接而成，具有潜在的抗肿瘤活性。磷酸二酯键断裂和代谢活化后，地西他滨部分掺入DNA，瓜地西他滨抑制DNA甲基转移酶，导致非特异性的全基因组低甲基化，并诱导细胞周期停滞于S期。该药物对胞苷脱氨酶具有耐药性，这可能导致地西他滨在细胞内和细胞外缓慢释放，从而延长其暴露时间。
药物适应症 治疗急性髓系白血病 Guadecitabine 是一种在研药物，已在临床试验中评估其用于治疗 AML、MDS 和其他癌症。其二核苷酸结构使其在药代动力学方面优于地西他滨，使其成为一种有前景的 DNMT 抑制剂疗法候选药物。该药尚未获得 FDA 批准。 |
| 分子式 |
C18H24N9O10P
|
|---|---|
| 分子量 |
557.41122
|
| 精确质量 |
557.138
|
| 元素分析 |
C, 38.79; H, 4.34; N, 22.62; O, 28.70; P, 5.56
|
| CAS号 |
929901-49-5
|
| 相关CAS号 |
Guadecitabine sodium;929904-85-8
|
| PubChem CID |
135564655
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 密度 |
2.2±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
956.4±75.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
532.2±37.1 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±0.3 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.922
|
| LogP |
-4.38
|
| tPSA |
287.88
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
6
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
12
|
| 可旋转键数目(RBC) |
8
|
| 重原子数目 |
38
|
| 分子复杂度/Complexity |
1110
|
| 定义原子立体中心数目 |
6
|
| SMILES |
C1[C@@H]([C@H](O[C@H]1N2C=NC3=C2N=C(NC3=O)N)COP(=O)(O)O[C@H]4C[C@@H](O[C@@H]4CO)N5C=NC(=NC5=O)N)O
|
| InChi Key |
GUWXKKAWLCENJA-ZNSALQAWSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C18H24N9O10P/c19-16-22-6-27(18(31)25-16)12-2-8(9(3-28)35-12)37-38(32,33)34-4-10-7(29)1-11(36-10)26-5-21-13-14(26)23-17(20)24-15(13)30/h5-12,28-29H,1-4H2,(H,32,33)(H2,19,25,31)(H3,20,23,24,30)/t7-,8+,9-,10+,11-,12-/m1/s1
|
| 化学名 |
(2R,3S,5R)-5-(4-amino-2-oxo-1,3,5-triazin-1(2H)-yl)-2-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3-yl
(((2S,3R,5R)-5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9(6H)-yl)-3-hydroxytetrahydrofuran-2-yl)methyl)
hydrogen phosphate
|
| 别名 |
SGI 110; S110; SGI-110; S-110; SGI-110 free acid; 2KT4YN1DP7; SGI 110; [(2R,3S,5R)-5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methyl [(2R,3S,5R)-5-(4-amino-2-oxo-1,3,5-triazin-1-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate; Guanosine, 2'-deoxy-5-azacytidylyl-(3'-5')-2'-deoxy-; SGI110
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 该产品在溶液状态不稳定，请现配现用。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7940 mL | 8.9701 mL | 17.9401 mL | |
| 5 mM | 0.3588 mL | 1.7940 mL | 3.5880 mL | |
| 10 mM | 0.1794 mL | 0.8970 mL | 1.7940 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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