| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 靶点 |
DNMT/DNA methyltransferases
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| 体外研究 (In Vitro) |
在 CTA 阴性癌细胞中，接触瓜地他滨会增加所检查的癌症/睾丸抗原 (CTA) 的表达。研究结果表明，在所有检查组织类型的肿瘤细胞中，瓜地他滨会导致和/或显着上调 MAGE-A3 和 NY-ESO-1 特异性 mRNA 表达的组成型水平。在 Mel 275 黑色素瘤细胞中，暴露于瓜地西他滨可显着增加 HLA I 类抗原、HLA-A2 同种异体和共刺激分子 ICAM-1 的组成型表达水平 (p<0.05)。研究结果表明，由于瓜地西他滨治疗，所研究的癌细胞中 CTA 启动子的组成型甲基化显着降低 (p<0.01)。在 Mel 195 和 MZ-1257 RCC 细胞中，瓜地他滨诱导的 MAGE-A1 和 NY-ESO-1 启动子去甲基化的平均百分比分别为 57% 和 30%[2]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
瓜地西他滨（S110）可有效延缓肿瘤生长。用PBS处理的肿瘤仅表现出显着的生长，而用瓜地他滨处理的肿瘤尺寸并未缩小，仅扩张得极其缓慢。此外，正如小鼠体重变化所证明的那样，皮下给予瓜地西他滨 (SQ) 产生的毒性比腹膜内注射时要低得多 [3]。
启动子区域CpG岛的甲基化通常与基因沉默有关，大多数癌症中都会发生异常的DNA甲基化，导致一些肿瘤抑制基因沉默。通过DNA甲基化抑制剂逆转这种异常的高甲基化，在体外和体内都能有效地重新激活甲基化沉默的肿瘤抑制基因。几种DNA甲基化抑制剂已经得到了很好的研究；其中最有效的是5-氮杂-2'-脱氧胞苷（5-aza-CdR），它可以诱导患者的骨髓抑制瓜地西他滨（S110）是一种由5-Aza-CdR和脱氧鸟苷组成的二核苷酸，我们之前已经证明，脱氧鸟苷在体外作为DNA甲基化抑制剂是有效的，同时不易被胞苷脱氨酶脱氨基，使其成为5-Aza-CdR的有前景的替代品。在这里，我们表明，在小鼠中，瓜地西他滨（S110）的耐受性优于5-Aza-CdR，并且在体内诱导p16表达、减少p16启动子区域的DNA甲基化和延缓人类异种移植物中的肿瘤生长方面同样有效。我们还表明，瓜地西他滨（S110）通过腹腔和皮下注射都是有效的瓜地西他滨（S110）因此是一种有前景的新药，其作用类似于5-Aza-CdR，具有更好的稳定性和更低的毒性[2]。 瓜地西他滨（S110）可有效延缓肿瘤生长。用PBS治疗的肿瘤仅显示出显著的生长，而用瓜地西他滨（S110）治疗的肿瘤没有缩小，只是极其缓慢地扩张。此外，正如小鼠体重的变化所证明的那样，皮下注射（SQ）的瓜地西他滨产生的毒性比腹腔注射时小得多[3]。 |
| 酶活实验 |
通过甲基化特异性单核苷酸延伸（Ms SNuPE）进行定量DNA甲基化分析[2]
如前所述，用亚硫酸氢钠转化每个基因组DNA样品2µg，并通过PCR扩增每个感兴趣的区域。p16的PCR条件如下：95°C 3分钟，然后在95°C下变性1分钟40个循环，在62°C下退火1分钟，在72°C下延伸1分钟，最后在72°℃下延伸10分钟。亚硫酸氢盐特异性PCR引物序列如下：p16正义、5'-GTA-GGT-GGGG-GAG-GAG-TTT-AGT-3'、p16反义、5'-TCT-AAT AAC-CAA CCA ACC CCT-CCT-3'。p16的Ms-SNuPE条件如下：95°C 2分钟，50°C 2 min，72°C 1分钟。p16 SNuPE引物如下：5'-TTTT-TAG-GGGG-TGT-TAT ATT-3'，5'-TTT-TTTT-TGT-TTG-GAA-AGA-TAT-3'和5'-TTT GAG-GGA-TAG-GGT-3'。用Qiagen凝胶提取试剂盒提取PCR扩增子，并进行Ms SNuPE分析，以检查甲基化水平的变化，如前所述。 |
| 细胞实验 |
瓜地西他滨对肿瘤细胞的体外治疗（S110）[3]
将细胞（3-4×105）接种在T75组织培养瓶中，24小时后用瓜地西他滨（S110）、5-AZA-CdR或3′-3′-DpG处理，每12小时用含有1μM或10μM瓜地西他滨、1μM 5-AZA-CdR或3′-3'-DpG的新鲜培养基替换培养基，持续2天（4次脉冲），然后用不含药物的新鲜培养基再处理2天。对照培养物在没有药物的情况下在类似的实验条件下进行处理。[3] 细胞毒性试验[3] 使用定量测量LDH释放的比色细胞毒性测定试剂盒对未经处理或用1μM瓜地西他滨（S110）处理的Mel 275黑色素瘤细胞测试HLA-A2限制的gp100特异性CTL的细胞溶解活性。细胞以25/1、12/1、6/1和3/1的效应/靶（E/T）比使用。根据制造商的说明确定特定裂解的百分比。[3] 在37°C下，用20μg/ml的抗HLA I类单克隆抗体W6/32或抗ICAM-1单克隆抗体84H10预孵育30分钟，研究了HLA I类抗原和ICAM-1对瓜地西他滨（S110）处理的Mel 275黑色素瘤细胞的阻断作用。然后，洗涤细胞，并在E/T比为25/1的LDH释放试验中将其用作HLA-A2限制性gp100特异性CTL的靶标。 |
| 动物实验 |
体内药物耐受性研究[2]
将无肿瘤的裸鼠（nu/nu）分为六个治疗组，每组六只动物。S110 和 5-氮杂胞苷（5-Aza-CdR）均用 PBS 配制，并通过尾静脉注射给药。剂量和给药方案的设计使得每组在七天后均接受等摩尔量的 S110 或 5-Aza-CdR。动物按以下方案治疗三周：第 1 组每周一接受 36.6 mg/kg S110 给药；第 2 组每周一次接受 15 mg/kg 5-Aza-CdR 给药；第 3 组每周二和周四接受 18.3 mg/kg S110 给药；第 4 组每周两次接受 7.5 mg/kg 5-Aza-CdR 给药。最后，第5组和第6组分别接受了12.2 mg/kg和5.0 mg/kg的S110和5-Aza-CdR，每周三次（周一、周三和周五）给药。通过体重测量和发病率对耐受性进行粗略评估。每周记录两次体重测量。[2] 腹腔注射给药的体内异种移植药物疗效研究[2] 本研究使用EJ6人膀胱癌细胞，实验方法与之前描述的类似。将悬浮于PBS中的EJ6细胞（5 × 10⁵/注射）皮下注射（SQ）到4至6周龄雌性BALB/c无胸腺裸鼠（Foxn1nu）的左右背部（沿腋中线）。小鼠随机分为3组。 2-3周后，当肉眼可见的肿瘤（50-200 mm³）形成后，开始治疗。使用游标卡尺测量肿瘤大小，并使用以下公式计算肿瘤体积（TV）：TV = LD²/2（其中L为最长直径，D为最短直径）。使用相对肿瘤体积（RTV）计算各组小鼠肿瘤生长倍数差异，RTV的计算公式如下：RTV = TVₙ/TV₀，其中TVₙ为第n天的肿瘤体积（mm³），TV₀为第0天（初始治疗）的肿瘤体积（mm³）。在治疗开始和结束时称量小鼠体重，以确定毒性。每只小鼠的体重变化百分比采用以下公式计算：[(W6−W0)/W0] × 100%（其中 Wn 为第 n 天小鼠的体重）。 5-氮杂胞苷 (5-Aza-CdR) 用作阳性对照，0.45% PBS 用作阴性对照。PBS、5-Aza-CdR（PBS 中剂量为 5 mg/kg）和 S110（PBS 中剂量为 10 mg/kg）均通过腹腔注射 (IP) 给药，连续 6 天。 所有小鼠在最后一次给药后 24 小时处死。此时，取出肿瘤，并将每个肿瘤分成两份。一份立即用 TRIzol 试剂匀浆用于 RNA 提取，另一份立即置于液氮中冷冻，用于后续 DNA 提取。基因组DNA和RNA将分别用于通过Ms-SNuPE分析p16启动子的甲基化状态和通过实时RT-PCR分析基因表达。[2] 体内异种移植药物疗效研究（皮下给药）[2] 将107 EJ6膀胱癌细胞皮下接种于无胸腺nu/nu小鼠右后侧。待肿瘤直径达到0.5 cm后，将动物随机分为三组，每组8只，开始治疗。剂量和给药方案的设计使得每组均接受等摩尔量的S110或5-Aza-CdR。药物每周皮下注射一次，S110剂量为12.2 mg/kg，5-Aza-CdR剂量为5.0 mg/kg，持续三周。该研究包含一个适当的PBS对照组。每周两次通过卡尺测量肿瘤大小和体重来监测肿瘤生长抑制和耐受性。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在无肿瘤裸鼠体内，Guadecitabine (S110) 的耐受性优于 5-Aza-CdR[2]。
虽然 5-Aza-CdR 在体外和体内均是一种有效的 DNA 甲基化抑制剂，但其缺点是会引起患者骨髓抑制等毒性反应。Guadecitabine (S110) 是一种二核苷酸，由 5-Aza-CdR 和脱氧鸟苷组成（图 1）。Yoo 等人先前已证明，Guadecitabine (S110) 在体外可有效抑制 DNA 甲基化，其在降低 DNA 甲基化、重新激活 p16 表达、消耗 DNA 甲基转移酶和抑制癌细胞生长方面与 5-Aza-CdR 的效果相当。此外，它不易被胞苷脱氨酶脱氨，使其成为5-氮杂胞苷（5-Aza-CdR）的一种很有前景的替代品。 为了比较guadecitabine (S110)与5-Aza-CdR的体内耐受性，我们根据表1将6组（每组6只）无肿瘤的雌性裸鼠随机分配到不同的给药方案中。各组之间两两配对，使得第1组和第2组、第3组和第4组以及第5组和第6组中S-110的给药频率与5-Aza-CdR的摩尔当量相同。我们首先通过观察整个研究期间的相对体重来比较耐受性（图2A）。第1组和第2组动物在整个研究过程中体重保持稳定或持续增加，并在36天后处死。在第3组和第4组中，接受guadecitabine (S110)治疗的动物体重维持稳定或持续增加，而接受5-Aza-CdR治疗的动物平均体重在给药第一周后开始下降。第5组和第6组的平均体重在给药第一周后迅速下降，最终导致死亡，而接受S-110治疗的动物维持健康体重的时间略长于接受5-Aza-CdR治疗的动物。值得注意的是，尽管5-Aza-CdR和S110的每周总剂量相同，但两种药物在小剂量高频率给药时毒性更大。在所有三组配对比较中，就体重变化而言，S110的耐受性均优于5-Aza-CdR。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
瓜地西他滨正在研究用于治疗既往接受过治疗的转移性结直肠癌。
瓜地西他滨是一种二核苷酸抗代谢物，由地西他滨通过磷酸二酯键与脱氧鸟苷连接而成，具有潜在的抗肿瘤活性。经磷酸二酯键断裂代谢活化并将地西他滨部分掺入DNA后，瓜地西他滨抑制DNA甲基转移酶，从而导致非特异性的全基因组低甲基化，并诱导细胞周期停滞于S期。该药物对胞苷脱氨酶具有抵抗性，这可能导致地西他滨在细胞内外逐渐释放，从而延长地西他滨的暴露时间。 药物适应症 治疗急性髓系白血病 |
| 分子式 |
C18H24N9O10P
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|---|---|
| 分子量 |
557.41122
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| 精确质量 |
557.138
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| 元素分析 |
C, 38.79; H, 4.34; N, 22.62; O, 28.70; P, 5.56
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| CAS号 |
929901-49-5
|
| 相关CAS号 |
Guadecitabine sodium;929904-85-8
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| PubChem CID |
135564655
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
2.2±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
956.4±75.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
532.2±37.1 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±0.3 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.922
|
| LogP |
-4.38
|
| tPSA |
287.88
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
6
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| 氢键受体(HBA)数目 |
12
|
| 可旋转键数目(RBC) |
8
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| 重原子数目 |
38
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| 分子复杂度/Complexity |
1110
|
| 定义原子立体中心数目 |
6
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| SMILES |
C1[C@@H]([C@H](O[C@H]1N2C=NC3=C2N=C(NC3=O)N)COP(=O)(O)O[C@H]4C[C@@H](O[C@@H]4CO)N5C=NC(=NC5=O)N)O
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| InChi Key |
GUWXKKAWLCENJA-ZNSALQAWSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C18H24N9O10P/c19-16-22-6-27(18(31)25-16)12-2-8(9(3-28)35-12)37-38(32,33)34-4-10-7(29)1-11(36-10)26-5-21-13-14(26)23-17(20)24-15(13)30/h5-12,28-29H,1-4H2,(H,32,33)(H2,19,25,31)(H3,20,23,24,30)/t7-,8+,9-,10+,11-,12-/m1/s1
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| 化学名 |
(2R,3S,5R)-5-(4-amino-2-oxo-1,3,5-triazin-1(2H)-yl)-2-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3-yl
(((2S,3R,5R)-5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9(6H)-yl)-3-hydroxytetrahydrofuran-2-yl)methyl)
hydrogen phosphate
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| 别名 |
SGI 110; S110; SGI-110; S-110; SGI-110 free acid; 2KT4YN1DP7; SGI 110; [(2R,3S,5R)-5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methyl [(2R,3S,5R)-5-(4-amino-2-oxo-1,3,5-triazin-1-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate; Guanosine, 2'-deoxy-5-azacytidylyl-(3'-5')-2'-deoxy-; SGI110
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 该产品在溶液状态不稳定，请现配现用。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7940 mL | 8.9701 mL | 17.9401 mL | |
| 5 mM | 0.3588 mL | 1.7940 mL | 3.5880 mL | |
| 10 mM | 0.1794 mL | 0.8970 mL | 1.7940 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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