Histatin 5   中文名称: 组胺素 5

组蛋白 5 属于低分子量唾液蛋白家族，由舌下腺、腮腺和颌下腺释放。使用生物素化明胶作为底物，Histatin 5 抑制宿主基质金属蛋白酶 MMP-2 和 MMP-9，IC50 分别为 0.57 和 0.25 μM。创建了三种具有不同 Histatin 5 部分的肽，并将其作为 MMP-9 抑制剂进行测试，以鉴定引起这种抑制的结构域。包含组氨酸 5 残基 1 至 14 和 4 至 15 的肽的抑制活性显着较低（IC50 分别为 21.4 和 20.5 μM），而包含残基 9 至 22 的肽对 MMP-9 具有与组氨酸 5 相同的活性。根据 Arg-gingipain 抑制的动力学研究，Histatin 5 是一种竞争性抑制剂，仅影响 Km，Ki 为 15 μM [1]。线粒体呼吸过程受组蛋白 5 抑制。白色念珠菌细胞吸收人唾液抗真菌肽组蛋白 5 并在细胞内与线粒体结合。以剂量和时间依赖性方式，histatin 5 5 抑制整个囊生孢子的呼吸和分离的白色念珠菌线粒体的呼吸。状态 2 呼吸被 33 μM 的组蛋白 5 抑制 [2]。

MMP-2 和 MMP-9 使用生物素化明胶包被的微量滴定板作为底物进行测试。在此测定中，酶活性的估计是基于针对吸附在微量滴定板孔中的明胶-生物素复合物的蛋白水解活性所导致的结合生物素的损失。将 5.4 μM MMP-9 储备液在酶缓冲液中稀释至 10.8 nM，该酶缓冲液由含有 0.5 M NaCl 和 5 mM CaCl2 的 50 mM Tris-HCl (pH 7.5) 组成。通过添加 1 mM 乙酸 4-氨基苯汞来激活稀释的酶，并在室温下进一步孵育 30 分钟。将浓度范围为 0.005 至 100 μM 的组蛋白 5 与活化酶一起孵育 10 分钟，然后添加到微量滴定板中。对肽 1、肽 2 和肽 3 进行相同的操作。使用 25 mM 的 EDTA 作为阳性对照。将适当的抑制剂与酶一起孵育后，向微量滴定板的孔中加入 50 μL 该混合物，并将板在 37°C 下孵育 2 小时。含有不含抑制剂的酶的孔用于确定最大活性（100%）。仅含有底物和缓冲液的孔用作对照，代表没有活性（0%）。为了终止反应，用 200 μL 含有 1% Tween 20 的 PBS 清洗板 3 次。随后，向每孔中添加 50 μL 链霉亲和素-碱性磷酸酶（1:2，500 倍水稀释），然后将板加入在 37°C 下孵育 15 分钟。然后用 200 μL PBS-Tween 洗涤板四次，并添加溶解在二乙醇胺缓冲液中的 200 μL pNPP（每 mL 缓冲液 1 mg pNPP），在 37°C 下持续 20 分钟。使用微量滴定板读数器在 405 nm 处记录吸光度[1]。

[1]. Gusman H, et al. Salivary histatin 5 is an inhibitor of both host and bacterial enzymes implicated in periodontaldisease. Infect Immun. 2001 Mar;69(3):1402-8.
[2]. Helmerhorst EJ, et al. The human salivary peptide histatin 5 exerts its antifungal activity through the formation ofreactive oxygen species. Proc Natl Acad Sci U S A. 2001 Dec 4;98(25):14637-42.

C135H196F3N51O35

3150.3167

115966-68-2

Histatin 5 TFA

FC(C(=O)O[H])(F)F.O=C([C@]([H])(C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])/C(=N\[H])/N([H])[H])N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])[H])N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])O[H])N([H])C(C([H])([H])N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1)N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1)N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])/C(=N/[H])/N([H])[H])N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])[H])N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])[H])N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1)N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])O[H])N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])C(=O)O[H])N([H])[H])=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@@]([H])(C([H])([H])O[H])C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])C([H])([H])C(N([H])[C@]([H])(C(=O)O[H])C([H])([H])C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])O[H])=O)=O)C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])/C(=N/[H])/N([H])[H])=O)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1)=O)=O)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1)=O)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1)=O)C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])[H])=O)C([H])([H])C([H])([H])C(=O)O[H])=O)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1)=O)C([H])([H])C1C([H])=C([H])C([H])=C([H])C=1[H])=O)C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])[H]

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。