| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 15mg |
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| 25mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Matrix metalloproteinase-2 (MMP-2), IC50 = 0.57 ± 0.02 µM
Matrix metalloproteinase-9 (MMP-9), IC50 = 0.25 ± 0.01 µM Arginine-specific gingipain from Porphyromonas gingivalis (Arg-gingipain, RgpB), IC50 = 22.0 ± 2.2 µM, Ki = 15 µM Lysine-specific gingipain from Porphyromonas gingivalis (Lys-gingipain, Kgp), IC50 = 13.8 ± 1.5 µM Histatin 5 did not inhibit the serine proteases trypsin or chymotrypsin (IC50 > 50 µM for both). [1] Histatin 5 targets the mitochondrial respiratory chain in Candida albicans, leading to inhibition of cellular respiration and induction of reactive oxygen species (ROS) formation. [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
组蛋白 5 属于低分子量唾液蛋白家族，由舌下腺、腮腺和颌下腺释放。使用生物素化明胶作为底物，Histatin 5 抑制宿主基质金属蛋白酶 MMP-2 和 MMP-9，IC50 分别为 0.57 和 0.25 μM。创建了三种具有不同 Histatin 5 部分的肽，并将其作为 MMP-9 抑制剂进行测试，以鉴定引起这种抑制的结构域。包含组氨酸 5 残基 1 至 14 和 4 至 15 的肽的抑制活性显着较低（IC50 分别为 21.4 和 20.5 μM），而包含残基 9 至 22 的肽对 MMP-9 具有与组氨酸 5 相同的活性。根据 Arg-gingipain 抑制的动力学研究，Histatin 5 是一种竞争性抑制剂，仅影响 Km，Ki 为 15 μM [1]。线粒体呼吸过程受组蛋白 5 抑制。白色念珠菌细胞吸收人唾液抗真菌肽组蛋白 5 并在细胞内与线粒体结合。以剂量和时间依赖性方式，histatin 5 5 抑制整个囊生孢子的呼吸和分离的白色念珠菌线粒体的呼吸。状态 2 呼吸被 33 μM 的组蛋白 5 抑制 [2]。
Histatin 5 以浓度依赖的方式抑制MMP-2和MMP-9的明胶水解活性，使用生物素化明胶作为底物。浓度大于1 µM时观察到完全抑制。对MMP-2的IC50为0.57 µM，对MMP-9的IC50为0.25 µM。 [1] Histatin 5 中对MMP-9的抑制域定位于其C端区域。包含残基9-22的合成肽（肽2）显示出与全长histatin 5相同的抑制活性（IC50 = 0.25 µM）。包含残基1-14（肽1，IC50 = 21.4 µM）和残基4-15（肽3，IC50 = 20.5 µM）的肽则效力显著降低。 [1] Histatin 5 以浓度依赖的方式抑制纯化的牙龈卟啉单胞菌Arg-gingipain (RgpB)和Lys-gingipain的蛋白水解活性，IC50值分别为22.0 µM和13.8 µM。 [1] 使用Lineweaver-Burk图进行的动力学分析表明，histatin 5 是Arg-gingipain (RgpB)的竞争性抑制剂，仅影响Km（随抑制剂浓度增加而增加），而Vmax保持不变。通过Dixon图分析确定的抑制常数（Ki）为15 µM。 [1] Histatin 5 对Lys-gingipain的抑制更为复杂。在10 µM时，histatin 5 表现为非竞争性抑制剂（Km不变，Vmax降低）。在20 µM时，它表现出混合型抑制，同时影响Km（增加）和Vmax（降低）。 [1] Histatin 5 抑制分离的白色念珠菌线粒体呼吸。在33 µM浓度下，其对状态2、状态3和CCCP解偶联呼吸的抑制率分别为60.3%、86.0%和83.0%。[2] Histatin 5 以浓度和时间依赖的方式抑制完整白色念珠菌芽生孢子的细胞呼吸。33 µM浓度在5分钟内可完全抑制呼吸。[2] Histatin 5 诱导白色念珠菌芽生孢子和萌发细胞中活性氧（ROS）的形成，通过荧光探针二氢乙啶检测。ROS形成具有浓度依赖性和细胞密度依赖性。[2] Histatin 5 诱导分离的白色念珠菌线粒体中ROS的形成，该效应可被氧清除剂L-半胱氨酸（5 mM）或膜渗透性超氧化物歧化酶模拟物TEMPO（1.5 mM）阻断。[2] Histatin 5 的杀白色念珠菌活性与ROS形成高度相关。在用不同浓度histatin 5处理细胞的实验中，产生的ROS量（荧光法测定）与细胞杀灭百分比（菌落计数法测定）紧密相关。在L-半胱氨酸存在下，ROS形成和细胞杀灭均被阻止。[2] 相比之下，传统的呼吸链抑制剂氰化钠和叠氮化钠不诱导ROS形成，也不杀死酵母细胞。成孔抗真菌肽PGLa同样不诱导ROS形成。[2] 通过菌落计数实验评估，Histatin 5 对对数生长期白色念珠菌细胞的杀灭活性强于稳定期细胞。稳定期细胞的内在呼吸速率低于对数期细胞。[2] |
| 酶活实验 |
MMP-2 和 MMP-9 使用生物素化明胶包被的微量滴定板作为底物进行测试。在此测定中，酶活性的估计是基于针对吸附在微量滴定板孔中的明胶-生物素复合物的蛋白水解活性所导致的结合生物素的损失。将 5.4 μM MMP-9 储备液在酶缓冲液中稀释至 10.8 nM，该酶缓冲液由含有 0.5 M NaCl 和 5 mM CaCl2 的 50 mM Tris-HCl (pH 7.5) 组成。通过添加 1 mM 乙酸 4-氨基苯汞来激活稀释的酶，并在室温下进一步孵育 30 分钟。将浓度范围为 0.005 至 100 μM 的组蛋白 5 与活化酶一起孵育 10 分钟，然后添加到微量滴定板中。对肽 1、肽 2 和肽 3 进行相同的操作。使用 25 mM 的 EDTA 作为阳性对照。将适当的抑制剂与酶一起孵育后，向微量滴定板的孔中加入 50 μL 该混合物，并将板在 37°C 下孵育 2 小时。含有不含抑制剂的酶的孔用于确定最大活性（100%）。仅含有底物和缓冲液的孔用作对照，代表没有活性（0%）。为了终止反应，用 200 μL 含有 1% Tween 20 的 PBS 清洗板 3 次。随后，向每孔中添加 50 μL 链霉亲和素-碱性磷酸酶（1:2，500 倍水稀释），然后将板加入在 37°C 下孵育 15 分钟。然后用 200 μL PBS-Tween 洗涤板四次，并添加溶解在二乙醇胺缓冲液中的 200 μL pNPP（每 mL 缓冲液 1 mg pNPP），在 37°C 下持续 20 分钟。使用微量滴定板读数器在 405 nm 处记录吸光度[1]。
MMP-2/MMP-9抑制实验: 将生物素化明胶（来源于猪皮）包被在96孔微孔板上。使用1 mM APMA在酶缓冲液（50 mM Tris-HCl, pH 7.5，含0.5 M NaCl和5 mM CaCl2）中激活pro-MMP-2或pro-MMP-9。将激活的酶（41 nM MMP-2或10.8 nM MMP-9）与不同浓度的histatin 5或衍生肽在室温下预孵育10分钟。然后将此混合物加入明胶包被的孔中，在37°C孵育2小时。通过洗涤停止结合明胶-生物素的蛋白水解降解。剩余的生物素通过添加链霉亲和素-碱性磷酸酶偶联物，随后与对硝基苯磷酸酯（pNPP）底物孵育来检测。在405 nm读取吸光度。不加抑制剂的酶活性定义为100%。 [1] Arg-/Lys-Gingipain抑制实验: 通过分光光度法测量纯化的Arg-gingipain (RgpB, 3.3 nM)或Lys-gingipain (Kgp, 4.0 nM)的活性。酶溶解于测定缓冲液中（0.2 M Tris-HCl, 0.1 M NaCl, 5 mM CaCl2, 10 mM L-半胱氨酸, pH 7.6）。在加入含有显色底物（Arg-gingipain用80 µM BAPNA，Lys-gingipain用80 µM Lys-pNA）的缓冲液之前，将酶与histatin 5预孵育5分钟。反应在25°C于比色皿中进行，通过监测410 nm处吸光度的增加来跟踪对硝基苯胺的形成。从斜率计算初始反应速度。 [1] 抑制类型的动力学分析: 为确定抑制机制，在不存在或存在两个固定浓度的histatin 5的情况下，在六种不同底物浓度（范围30至160 µM）下测量酶活性。将初始速度绘制在Lineweaver-Burk图（1/v 对 1/[S]）中，以分析Km和Vmax的变化。 [1] 抑制常数（Ki）的测定: 对于Arg-gingipain，使用Dixon图。在两个不同的固定底物浓度（60和106 µM BAPNA）下，将反应速度的倒数（1/v）对histatin 5浓度作图。Ki值从两条线的交点获得。 [1] |
| 细胞实验 |
ROS形成实验: 将白色念珠菌芽生孢子或萌发细胞加载ROS敏感荧光探针二氢乙啶。然后将细胞暴露于一系列浓度梯度的histatin 5中（溶于1 mM磷酸钾缓冲液，pH 7.4）。通过荧光测定法监测探针氧化的动力学（例如15分钟），以指示细胞内ROS的形成。测定荧光强度并与histatin 5浓度和细胞密度相关联。[2]
细胞活力/杀灭实验: 通过菌落计数法测定杀真菌活性。细胞暴露于histatin 5特定时间（例如1小时）后，进行适当稀释并涂布于琼脂平板。孵育后计数菌落形成单位，并计算相对于未处理对照的杀灭百分比。[2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
组氨酸蛋白酶5 (Histatin 5) 是一种由24个氨基酸残基组成的富含组氨酸的唾液抗菌肽（序列：DSHAKRHHGYKRKFEHIKHHSHRGY，分子量3037）。[1] 它是人类唾液的天然成分，由腮腺、颌下腺和舌下腺分泌。据报道，其在唾液中的浓度比本研究中发现的MMP抑制剂的IC50值高出近两个数量级。[1] 该研究提示组氨酸蛋白酶5在口腔中具有一种新的生物学功能：抑制宿主来源的基质金属蛋白酶（MMP-2和MMP-9）以及与牙周病组织破坏相关的细菌蛋白酶（牙龈卟啉单胞菌的牙龈蛋白酶）。 [1]
MMPs的抑制可能与组蛋白5的金属螯合特性有关，因为它包含一个潜在的锌结合基序（位于15-19位残基的HEXXH），该基序对MMP活性至关重要。缺失该C端区域的肽段丧失了强效抑制活性，这支持了上述推测。[1] 这些发现表明，组蛋白5是口腔固有宿主防御系统的一部分，可能保护口腔组织免受结缔组织破坏。此外，组蛋白5可作为设计类似物的模板，用于治疗涉及这些酶的疾病。 [1] 组氨酸蛋白酶5是一种由24个氨基酸残基组成的富含组氨酸的阳离子唾液抗菌肽（序列：DSHAKRHHGYKRKHFHEKHHSHRGY），分子量约为3037 Da。[2] 组氨酸蛋白酶5的抗真菌机制包括：细胞摄取（可能通过受体介导或电位驱动的过程）、细胞内转运并靶向线粒体、抑制线粒体呼吸、由于异常电子传递而诱导活性氧（ROS）的形成，最终导致氧化损伤引起的细胞死亡。 [2] 本研究表明，组蛋白5的杀菌活性不同于传统的呼吸抑制剂（抑制但不杀死真菌）和成孔肽，因为它特异性地依赖于靶细胞内活性氧（ROS）的产生。[2] 组蛋白5是人类唾液中的天然成分，被认为是口腔固有宿主防御系统的一部分。[2] |
| 分子式 |
C135H196F3N51O35
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|---|---|
| 分子量 |
3150.3167
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| 精确质量 |
3034.514
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| CAS号 |
115966-68-2
|
| 相关CAS号 |
Histatin 5 TFA
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| PubChem CID |
16132417
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
|
| 密度 |
1.6±0.1 g/cm3
|
| 折射率 |
1.720
|
| LogP |
-13.36
|
| tPSA |
1380
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
51
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
48
|
| 可旋转键数目(RBC) |
105
|
| 重原子数目 |
217
|
| 分子复杂度/Complexity |
6770
|
| 定义原子立体中心数目 |
22
|
| SMILES |
FC(C(=O)O[H])(F)F.O=C([C@]([H])(C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])/C(=N\[H])/N([H])[H])N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])[H])N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])O[H])N([H])C(C([H])([H])N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1)N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1)N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])/C(=N/[H])/N([H])[H])N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])[H])N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])[H])N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1)N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])O[H])N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])C(=O)O[H])N([H])[H])=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@@]([H])(C([H])([H])O[H])C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])C([H])([H])C(N([H])[C@]([H])(C(=O)O[H])C([H])([H])C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])O[H])=O)=O)C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])/C(=N/[H])/N([H])[H])=O)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1)=O)=O)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1)=O)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1)=O)C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])[H])=O)C([H])([H])C([H])([H])C(=O)O[H])=O)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1)=O)C([H])([H])C1C([H])=C([H])C([H])=C([H])C=1[H])=O)C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])[H]
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| InChi Key |
KSXBMTJGDUPBBN-VPKNIDFUSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C133H195N51O33/c1-71(164-120(206)96(46-76-54-146-65-158-76)181-128(214)103(62-185)183-110(196)84(138)52-108(193)194)109(195)167-86(18-5-9-35-134)113(199)172-91(24-15-41-154-133(143)144)118(204)178-99(49-79-57-149-68-161-79)125(211)176-95(45-75-53-145-64-157-75)112(198)156-60-105(189)165-93(43-73-25-29-82(187)30-26-73)121(207)173-87(19-6-10-36-135)114(200)171-90(23-14-40-153-132(141)142)115(201)169-88(20-7-11-37-136)116(202)175-94(42-72-16-3-2-4-17-72)122(208)179-97(47-77-55-147-66-159-77)124(210)174-92(33-34-107(191)192)119(205)170-89(21-8-12-38-137)117(203)177-100(50-80-58-150-69-162-80)126(212)180-101(51-81-59-151-70-163-81)127(213)184-104(63-186)129(215)182-98(48-78-56-148-67-160-78)123(209)168-85(22-13-39-152-131(139)140)111(197)155-61-106(190)166-102(130(216)217)44-74-27-31-83(188)32-28-74/h2-4,16-17,25-32,53-59,64-71,84-104,185-188H,5-15,18-24,33-52,60-63,134-138H2,1H3,(H,145,157)(H,146,158)(H,147,159)(H,148,160)(H,149,161)(H,150,162)(H,151,163)(H,155,197)(H,156,198)(H,164,206)(H,165,189)(H,166,190)(H,167,195)(H,168,209)(H,169,201)(H,170,205)(H,171,200)(H,172,199)(H,173,207)(H,174,210)(H,175,202)(H,176,211)(H,177,203)(H,178,204)(H,179,208)(H,180,212)(H,181,214)(H,182,215)(H,183,196)(H,184,213)(H,191,192)(H,193,194)(H,216,217)(H4,139,140,152)(H4,141,142,153)(H4,143,144,154)/t71-,84-,85-,86-,87-,88-,89-,90-,91-,92-,93-,94-,95-,96-,97-,98-,99-,100-,101-,102-,103-,104-/m0/s1
|
| 化学名 |
(4S)-4-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-carboxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]propanoyl]amino]hexanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]acetyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]hexanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]hexanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-5-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-5-carbamimidamido-1-[[2-[[(1S)-1-carboxy-2-(4-hydroxyphenyl)ethyl]amino]-2-oxoethyl]amino]-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.3174 mL | 1.5871 mL | 3.1743 mL | |
| 5 mM | 0.0635 mL | 0.3174 mL | 0.6349 mL | |
| 10 mM | 0.0317 mL | 0.1587 mL | 0.3174 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
C-telopeptide TFA
MMP-9-IN-12
Berkeleyamide B
ADAM17-IN-1
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