| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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Compound 6j (7-((5-(methyl(prop-2-yn-1-yl)amino)pentyl)oxy)chroman-4-one) is a novel rasagiline-clorgyline hybrid designed and synthesized as a dual inhibitor targeting monoamine oxidase-B (MAO-B) and amyloid-β (Aβ) aggregation for the treatment of Alzheimer‘s disease. It features a chromanone moiety, a five-carbon flexible linker, and a propargylamine group. Among all synthesized hybrids, compound 6j demonstrated the most potent and selective inhibition of hMAO-B with an IC₅₀ of 4 nM and a selectivity index (SI) greater than 25,000, outperforming the reference drug rasagiline. It also exhibited moderate inhibition of Aβ₁₋₄₂ aggregation (40.78% at 25 μM). The compound was identified as a competitive and reversible MAO-B inhibitor with low cytotoxicity, good neuroprotective effects, and favorable pharmacokinetic properties, including good oral bioavailability (36.1%) and the ability to penetrate the blood-brain barrier. [1]
Target: human monoamine oxidase B (hMAO-B, IC50=4 nM). It also shows some inhibition against hMAO-A (IC50=6.04 nM). The compound acts as a competitive reversible inhibitor of MAO-B, preventing the breakdown of neurotransmitters and reducing oxidative stress in neurons. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
hMAO-B-IN-2（化合物 6j）在 15 分钟内表现出强烈的抑制作用，对 hMAO-B 的 IC50 值为 4 nM，对 hMAO-A 的 IC50 值为 6.04 nM [1]。hMAO-B-IN-2（30 分钟）是一种可逆的 MAO-B 抑制剂。化合物 6j 在稀释至 0.1 × IC50 和 1 × IC50 后，分别将 MAO-B 酶活性恢复至约 82% 和 45% [1]。hMAO-B-IN-2（25 μM，48 小时）对 MAO-B 具有显著的抑制活性，并且对 Aβ 自诱导聚集具有良好的抑制作用（40.78 ± 6.27%）[1]。在 25 μM 的剂量下，hMAO-B-IN-2（0-100 μM，24 小时）似乎无害 [1]。 hMAO-B-IN-2（0-25 μM，24 小时）以剂量依赖的方式增强细胞存活率，并具有对抗神经退行性疾病的神经保护作用。化合物 6j 表现出强效的 hMAO-B 抑制活性，IC₅₀ 为 4.0 ± 0.6 nM，显著强于参考化合物雷沙吉兰（IC₅₀ = 141.7 ± 6.3 nM）和异丙肼（IC₅₀ = 7,410 ± 340 nM）。该化合物对 hMAO-A 无显著抑制作用（IC₅₀ > 100 μM），因此其选择性指数 (SI) 大于 25,000。 [1]化合物 6j 对 Aβ₁₋₄₂ 自诱导聚集表现出中等程度的抑制作用，在 25 μM 浓度下抑制率为 40.78 ± 6.27%，与参考化合物姜黄素（46.1 ± 6.71%）相比。硫黄素 T 荧光测定证实了其抗聚集活性，透射电镜 (TEM) 分析表明，当向样品中添加化合物 6j 时，观察到的 Aβ₁₋₄₂ 聚集体数量减少。 [1]化合物6j在平行人工膜渗透性测定（PAMPA-BBB）中表现出良好的血脑屏障渗透性，其Pe值为10.25 ± 0.68 × 10⁻⁶ cm/s，高于高血脑屏障渗透性的阈值（3.78 × 10⁻⁶ cm/s），预示其具有中枢神经系统活性。[1]使用Lineweaver-Burk倒数作图法进行的动力学研究表明，化合物6j是hMAO-B的竞争性抑制剂，因为所有曲线均相交于Y轴。可逆性实验表明，将酶-化合物复合物稀释至0.1× IC₅₀和1× IC₅₀后，酶活性分别恢复至约82%和45%，证实了该抑制作用是可逆的。 [1]
利用人MAO-B晶体结构（PDB代码2V61）进行的分子对接研究表明，化合物6j的炔丙基胺部分朝向FAD辅因子，并与Tyr435形成“芳烃-H”相互作用，而色酮部分占据入口腔，并通过范德华力和疏水相互作用与Leu171、Cys172、Ile198、Ile199、Ile316、Tyr326、Trp119和Phe168残基相互作用。[1] 体外实验表明，hMAO-B-IN-2（0-100 uM，15 分钟）对 hMAO-B 具有强效抑制活性，IC50 值为 4 nM。在 25 uM 浓度下，其对 Aβ 自身诱导聚集具有良好的抑制作用（抑制率达 40.78%）。在 0-25 uM 浓度范围内，其以剂量依赖的方式增强细胞存活率，并具有神经保护作用。在 25 uM 浓度下，其对 SH-SY5Y 细胞无毒性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
hMAO-B-IN-2（化合物 6j）的药代动力学特性（Sprague-Dawley 大鼠；3 mg/kg 静脉注射；10 mg/kg 口服；一次）被认为是可接受的[1]。雄性 Sprague-Dawley 大鼠的 hMAO-B-IN-2 药代动力学参数[1]。 AUC0-inf (μg/L*h) 247.74 ± 11.48 268.49 ± 69.72 CL (L/h/kg) 3.33 ± 0.15 F (%) 36.10% 参数 IV (3 mg/kg) PO (10 mg/kg) T1/2 (h) 1.02 ± 0.17 1.33 ± 0.16 Tmax (h) 0.3 Cmax (μg/L) 639.29 ± 89.06 142.17 ± 72.21
化合物 6j 在 SH-SY5Y 细胞中表现出对 6-羟基多巴胺 (6-OHDA) 诱导的毒性的神经保护作用。当 SH-SY5Y 细胞用 6-OHDA (200 μM) 处理时，细胞活力显著降低。与浓度递增的化合物 6j（1.563、3.125、6.25、12.5、25 μM）共同孵育后，细胞存活率呈浓度依赖性逐渐提高，与参考化合物雷沙吉兰相当。[1] 本文未描述化合物 6j 的直接体内疗效研究（例如，在阿尔茨海默病动物模型中的研究）；该研究侧重于体外和离体（基于细胞）评估。[1] 在体内，hMAO-B-IN-2（Sprague-Dawley大鼠；3 mg/kg 静脉注射；10 mg/kg 口服；单次给药）具有可接受的药代动力学特性。它显示出中等的口服生物利用度（36.10%）和合适的半衰期，支持其在动物模型中用于阿尔茨海默病研究。 |
| 酶活实验 |
hMAO抑制活性测定（基于荧光法的Amplex Red法）：采用基于荧光法的Amplex Red法检测所有合成化合物对hMAO-A和hMAO-B的抑制活性。使用重组人MAO酶，以对酪胺为底物。将每种测试化合物溶解于DMSO中，并用PBS缓冲液稀释至不同的最终浓度（DMSO < 0.1%）。将测试化合物与hMAO-A（或hMAO-B）和底物混合，然后在96孔黑色微孔板中避光于37℃孵育15分钟。使用多功能微孔板荧光读数仪在545/590 nm的激发/发射波长下测量荧光强度。数据以三次独立实验的平均值±标准差表示。IC₅₀值由浓度-效应曲线计算得出。化合物 6j 对 hMAO-B 的 IC₅₀ 值为 4.0 ± 0.6 nM。[1]
可逆性实验：将浓度分别为 10× IC₅₀ 和 100× IC₅₀ 的化合物 6j 与 hMAO-B 酶（0.75 mg/mL）在 37°C 下预孵育 30 分钟。同时设置不添加化合物的平行对照组。然后将酶-化合物混合物稀释 100 倍，最终浓度分别为 0.1× IC₅₀ 和 1× IC₅₀。测定残余酶活性。当稀释后酶活性恢复至约 50-90% 时，证实为可逆抑制。帕吉林用作不可逆参考抑制剂。[1] 动力学研究：为确定抑制机制，进行了酶动力学研究。将 hMAO-B 与不同浓度的化合物 6j（2.5、5 和 10 nM）以及递增浓度的对酪胺底物（0.05-3.0 mM）孵育。根据初始反应速率绘制 Lineweaver-Burk 倒数图。所有直线在 Y 轴上的交点表明存在竞争性抑制。[1] 对于无细胞检测：将重组 hMAO-B 酶与不同浓度的 hMAO-B-IN-2（0-100 uM）和底物（例如，犬尿胺或苄胺）在检测缓冲液中于 37°C 孵育 15-30 分钟。通过荧光法或吸光度法测定反应产物。通过稀释酶-抑制剂复合物来测试反应的可逆性。 |
| 细胞实验 |
细胞毒性试验
细胞类型： SH-SY5Y 神经母细胞瘤细胞 [1] 测试浓度： 0、6.25、12.5、25、50、100 μM 孵育时间： 24 小时 实验结果： 25 μM 浓度下未显示毒性。 SH-SY5Y 神经母细胞瘤细胞活力试验 (MTT)：将人神经母细胞瘤 SH-SY5Y 细胞培养于添加了胎牛血清、青霉素 (100 U/mL) 和链霉素 (100 μg/mL) 的 DMEM 培养基中，置于 37°C、5% CO₂ 的培养箱中培养。将细胞以 10,000 个/孔的密度接种于 96 孔板中。将不同浓度的化合物 6j（6.25、12.5、25、50、100 μM）或雷沙吉兰加入细胞中，孵育 24 小时。然后，加入 20 μL MTT 溶液，并在 37°C 下孵育 4 小时。移除培养基，加入 200 μL DMSO 溶解甲臜晶体。在 570 nm 处测定吸光度，参考波长为 630 nm。化合物 6j 在浓度高达 25 μM 时未显示出明显的细胞毒性。[1] 神经保护实验：用 6-羟基多巴胺 (6-OHDA, 200 μM) 处理 SH-SY5Y 细胞以诱导神经毒性。将浓度分别为 1.563、3.125、6.25、12.5 和 25 μM 的化合物 6j 与 6-OHDA 共孵育 24 小时。采用 MTT 法测定细胞活力。化合物 6j 以浓度依赖的方式逐渐提高细胞存活率，表现出与雷沙吉兰相当的神经保护作用。[1] 细胞实验：将SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞接种于96孔板中，并用hMAO-B-IN-2（0-100 uM，24 h）处理。采用MTT或CCK-8法评估细胞活力。通过用神经毒性药物处理细胞并测量细胞存活率来评估神经保护作用。IC50值由剂量反应曲线计算得出。 |
| 动物实验 |
在Sprague-Dawley大鼠中进行药代动力学研究：雄性Sprague-Dawley大鼠（220 ± 20 g，每组3只）分别通过静脉注射（3 mg/kg）或灌胃（10 mg/kg）给予化合物6j。在给药后适当的时间间隔（0.083、0.17、0.5、1、1.5、2、4、6、8、12、24、36和48小时）采集血样。通过离心分离血浆，并储存于-20°C。使用两倍体积的0.5%甲酸乙腈溶液沉淀血浆蛋白。离心（14,000 rpm，14分钟）后，取上清液进行LC-MS/MS分析。使用DAS 2.0软件计算药代动力学参数。 [1]
动物/疾病模型： SD（SD（Sprague-Dawley））大鼠（雄性，220±20 g）[1] 剂量： 3 mg/kg（静脉注射），10 mg/kg（口服） 给药途径： 静脉注射，口服（药代动力学/PK/PK 分析） 实验结果： 具有可接受的药代动力学/PK/PK 特性，表现出较高的最大浓度、合适的半衰期和良好的口服生物利用度。 在体内动物研究中：雄性Sprague-Dawley大鼠（220±20 g）分别静脉注射（3 mg/kg）或口服（10 mg/kg）hMAO-B-IN-2。在多个时间点采集血样，处理血浆，并采用LC-MS/MS分析药物浓度，以确定药代动力学参数，包括Cmax、Tmax、t1/2、AUC和生物利用度（36.10%）。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
化合物 6j在雄性 Sprague-Dawley 大鼠中表现出以下药代动力学参数：[1]
静脉注射（3 mg/kg）：半衰期 (t₁/₂) = 1.02 ± 0.17 h；Cmax = 639.29 ± 89.06 μg/L；AUC₀₋ᵢₙf = 247.74 ± 11.48 μg•h/L；清除率 (Cl) = 3.33 ± 0.15 L/h/kg。[1] 口服（10 mg/kg）：半衰期 (t₁/₂) = 1.33 ± 0.16 h；Tmax = 0.3 h；Cmax = 142.17 ± 72.21 μg/L； AUC₀₋ᵢₙf = 268.49 ± 69.72 μg•h/L；口服生物利用度 (F%) = 36.10%。[1] 血脑屏障通透性：在 PAMPA-BBB 检测中，化合物 6j 的 Pe 值为 10.25 ± 0.68 × 10⁻⁶ cm/s，超过了高血脑屏障通透性的阈值 3.78 × 10⁻⁶ cm/s，表明该化合物能够穿透血脑屏障，预计具有中枢神经系统活性。[1] Sprague-Dawley 大鼠的药代动力学特性：静脉注射（3 mg/kg）后，t1/2 = 1.02 h，CL = 3.33 L/h/kg，AUC0-inf = 247.74 μg/L*h。口服（10 mg/kg）后，t1/2 = 1.33 h，Tmax = 0.3 h，Cmax = 142.17 μg/L，AUC0-inf = 268.49 μg/L*h，口服生物利用度 F = 36.10%。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
化合物 6j 在 SH-SY5Y 神经母细胞瘤细胞中显示出较低的细胞毒性。在 6.25、12.5、25、50 和 100 μM 的浓度下，浓度高达 25 μM 时细胞存活率仍保持在 80% 以上，且未观察到明显的毒性。在测试的最高浓度 (100 μM) 下，细胞存活率仍约为 75%，表明其具有良好的安全性。[1] 本文未报告急性毒性研究（例如，LD₅₀ 测定）、肝毒性、肾毒性或长期毒性数据。该化合物拟用于研究和进一步开发，作为潜在的阿尔茨海默病治疗药物。[1]
目前尚未公布详细的毒性分析报告。体外研究表明，hMAO-B-IN-2 在浓度高达 25 μM 时对 SH-SY5Y 细胞无毒性，在 50 μM 和 100 μM 浓度下也未观察到明显的毒性。尚未评估其长期毒性和器官特异性效应。本品仅供研究使用。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
化合物 6j（化学名称：7-((5-(甲基(丙-2-炔-1-基)氨基)戊基)氧基)色满-4-酮）是一种雷沙吉兰-氯吉兰杂合物，通过多步合成法制备。该合成包括用α,ω-二溴烷（1,5-二溴戊烷）对7-羟基色满-4-酮进行烷基化，然后用N-甲基丙炔胺进行亲核取代。该化合物为黄色油状物，产率为89%，并通过¹H NMR、¹³C NMR和HRMS进行了表征。[1] 分子对接研究表明，化合物 6j 与 hMAO-B 结合，其丙炔胺部分指向 FAD 辅因子，并与 Tyr435 形成“芳烃-H”相互作用。色酮部分占据入口腔并与疏水性残基（Leu171、Cys172、Ile198、Ile199、Ile316、Tyr326、Trp119、Phe168）相互作用。与雷沙吉兰相比，化合物6j在入口腔中表现出额外的相互作用，从而提高了其结合亲和力和选择性。[1]
在以猪脑脂质（PBL）为膜模型的PAMPA-BBB检测中，化合物6j显示出较高的血脑屏障渗透性（Pe = 10.25 × 10⁻⁶ cm/s），表明其为能够穿过血脑屏障的中枢神经系统阳性化合物。 [1]化合物 6j 是一种竞争性可逆 MAO-B 抑制剂，与不可逆抑制剂相比，它有利于阿尔茨海默病的长期治疗，因为它可能降低与永久性酶失活相关的副作用风险。[1] hMAO-B-IN-2 是一种尚未获准用于临床的研究化合物。它是一种有价值的化学探针，可用于研究 MAO-B 在阿尔茨海默病、神经退行性疾病和神经保护中的作用。作为一种含有炔基的点击化学试剂，它也适用于生物偶联和标记应用。目前，它正处于阿尔茨海默病研究的临床前开发阶段。 |
| 分子式 |
C18H23NO3
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|---|---|
| 分子量 |
301.380125284195
|
| 精确质量 |
301.167
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| CAS号 |
2454459-87-9
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| PubChem CID |
162671381
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| LogP |
2.6
|
| tPSA |
38.8
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
8
|
| 重原子数目 |
22
|
| 分子复杂度/Complexity |
400
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
C1OC2=CC(OCCCCCN(C)CC#C)=CC=C2C(=O)C1
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| InChi Key |
CLKPCTKGZGRHKG-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C18H23NO3/c1-3-10-19(2)11-5-4-6-12-21-15-7-8-16-17(20)9-13-22-18(16)14-15/h1,7-8,14H,4-6,9-13H2,2H3
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| 化学名 |
7-[5-[methyl(prop-2-ynyl)amino]pentoxy]-2,3-dihydrochromen-4-one
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| 别名 |
hMAO-B-IN-2; hMAO-B-IN2; CHEMBL4790537; 2454459-87-9; orb1689350; BDBM50565155;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.3181 mL | 16.5904 mL | 33.1807 mL | |
| 5 mM | 0.6636 mL | 3.3181 mL | 6.6361 mL | |
| 10 mM | 0.3318 mL | 1.6590 mL | 3.3181 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
AOH-1996
hMAO-B-IN-3
Flupyrimin
阿曲库铵
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