Deacetylated metabolite of T-2 toxin

本综述的目的是全面概述目前关于霉菌毒素（也称为掩蔽霉菌毒素）植物代谢物的知识。霉菌毒素是次生真菌代谢产物，对人类和动物有毒。有毒真菌通常生长在可食用植物上，从而污染食物和饲料。植物作为生物体，可以改变霉菌毒素的化学结构，作为其防御外源性物质的一部分。形成的可提取的共轭或不可提取的结合霉菌毒素仍然存在于植物组织中，但目前既没有在食品中进行常规筛查，也没有受到立法的监管，因此它们可能被认为是被掩盖的。镰刀菌毒素（脱氧雪腐镰刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮、伏马菌素、雪腐镰刀菌醇、镰刀菌烯-X、T-2毒素、HT-2毒素、富马酸）易于被植物代谢或结合，但也有人描述了植物对其他霉菌毒素（赭曲霉毒素A、展青霉素、去ruxins）的转化。毒理学数据很少，但几项研究强调了这些物质对消费者安全的潜在威胁。特别是，在哺乳动物消化过程中，被掩盖的霉菌毒素可能会水解回其有毒的母体，这引起了人们的担忧。本文的专门章节介绍了植物代谢以及食品中蒙面霉菌毒素的发生、其测定的分析方面、毒理学及其对利益相关者的影响。[2]

为了研究HT-2毒素（HT2）和T-2毒素（T2）在小麦（Triticum aestivum L.）中的代谢归宿，利用稳定同位素标记和液相色谱-高分辨率质谱进行了非靶向代谢组学研究。总共对11种HT2和12种T2植物内生物转化产物进行了推定注释。除了先前报道的HT2的单糖基化和二糖基化形式外，还首次获得了小麦中HT2丙二酰葡萄糖苷和阿魏酰-T2形成以及乙酰化和脱乙酰化产物的证据。为了监测代谢物形成的动力学，进行了一项时间过程实验，涉及赤霉病易感品种Remus和抗性品种CM-82036。在最早的测试时间点（处理后6小时）已经观察到生物转化反应，形成的代谢物显示出不同的动力学特征。成熟后，添加到植物中的毒素中只有不到15%被确定为未代谢[1]。

In the metabolic profiling experiment a 50:50 (v/v) mixture of 13C-labeled and nonlabeled solutions of HT-2 toxin (HT2) or T2 (in acetonitrile:water (50:50, v/v) and 1% TWEEN) was used. As controls, ears were treated with a mock solution containing only acetonitrile:water (50:50, v/v) and 1% TWEEN. At time point zero, two neighboring spikelets were treated, and 48 h later the second treatment on the same ears was performed using the next pair of adjacent spikelets located above those treated previously. At 96, 120, and 144 h after the first application, treatments on the same ear continued as described, always selecting the next pair of spikelets in acropetal direction. In total, 200 μg of the 12C/13C toxin mixture was applied per ear. Sampling was performed 24 h after the last round of toxin application by removing the ear with a surgical scissor and dividing the wheat ear into three parts, but only the middle part was later used for LC-MS analysis: lower part (upper part of the stem and nontreated spikelets in basipetal direction of the treated ones), middle part (spikelets treated with toxins), and upper part (spikelets above the treated spikelets). All samples were weighed, shock-frozen in liquid nitrogen, and stored at −80 °C until further processing. [1]
For the time course study, wheat ears were treated with nonlabeled T2 or HT-2 toxin (HT2) or with the mock solution (methanol:water (50:50, v/v) and 1% TWEEN) similar to the process described above. The only difference was that 10 pairs of neighboring spikelets were treated with 10 μL each in one treatment resulting in a single dose of 200 μg per ear. Samples were collected at eight time points (0 h, 6 h, 12 h, 1 day, 2 days, 3 days, 1 week, and at full ripening) in triplicate. Wheat ears were removed from the plants with a surgical scissor, weighed as a whole, and immediately frozen with liquid nitrogen to prevent any metabolic activity until analysis. All collected samples were stored at −80 °C until further processing. [1]

10093830 大鼠皮下注射 LD50 1 mg/kg Toxicon., 26(923), 1988 [PMID:3201481]
10093830 大鼠脑内注射 LD50 52 ug/kg 行为学：惊厥或对癫痫阈值的影响；行为学：液体摄入量；行为学：共济失调 Toxicon., 26(923), 1988 [PMID:3201481]
10093830 小鼠口服 LD50 3800 ug/kg CRC 抗生素化合物手册，第 1 卷 - ，Berdy, J.，Boca Raton, FL，CRC 出版社，1980，6(191)，1981
10093830 小鼠腹腔注射 LD50 6500 ug/kg 农业与生物化学., 46(2613), 1982
10093830 小鼠皮下注射 LD50 6700 ug/kg Toxicon., 24(985), 1986 [PMID:3824405]

[1]. Metabolism of the fusarium mycotoxins T-2 toxin and HT-2 toxin in wheat J.Agric.Food Chem 63(35), 7862-7872 (2015).

[2]. Masked mycotoxins: A review Mol.Nutr.Food Res. 57, 165-186 (2013).

本综述旨在全面概述目前关于真菌毒素植物代谢产物（也称隐蔽型真菌毒素）的知识。真菌毒素是真菌的次生代谢产物，对人类和动物均有毒性。产毒真菌常生长于可食用植物上，从而污染食品和饲料。植物作为生物体，能够改变真菌毒素的化学结构，以此作为其抵御外源物质的防御机制。形成的可提取结合型或不可提取结合型真菌毒素会残留在植物组织中，但目前既未在食品中进行常规筛查，也未受到相关法规的监管，因此可将其视为隐蔽型真菌毒素。镰刀菌毒素（脱氧雪腐镰刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮、伏马菌素、雪腐镰刀菌烯醇、镰刀菌烯醇-X、T-2毒素、HT-2毒素、镰刀菌酸）易被植物代谢或结合，但也有报道称植物也能转化其他类型的真菌毒素（赭曲霉毒素A、棒曲霉素、破坏毒素）。毒理学数据虽然匮乏，但多项研究强调了这些物质对消费者安全的潜在威胁。尤其令人担忧的是，在哺乳动物消化过程中，这些被掩蔽的真菌毒素可能水解回其有毒的母体化合物。本文的专门章节探讨了植物代谢以及食品中掩蔽真菌毒素的出现、其测定的分析方法、毒理学及其对利益相关者的影响。[2]

C22H32O8

424.48468

424.209

26934-87-2

HT-2 Toxin-13C22;1486469-92-4

10093830

White to off-white solid powder

1.3±0.1 g/cm3

537.1±50.0 °C at 760 mmHg

179.8±23.6 °C

0.0±3.2 mmHg at 25°C

1.562

2.27

114.82

2

8

7

30

777

8

CC1=C[C@@H]2[C@](C[C@@H]1OC(=O)CC(C)C)([C@]3([C@@H]([C@H]([C@H]([C@@]34CO4)O2)O)O)C)COC(=O)C

PNKLMTPXERFKEN-MLXHEQMXSA-N

InChI=1S/C22H32O8/c1-11(2)6-16(24)29-14-8-21(9-27-13(4)23)15(7-12(14)3)30-19-17(25)18(26)20(21,5)22(19)10-28-22/h7,11,14-15,17-19,25-26H,6,8-10H2,1-5H3/t14-,15+,17+,18+,19+,20+,21+,22-/m0/s1

[(1S,2R,4S,7R,9R,10R,11S,12S)-2-(acetyloxymethyl)-10,11-dihydroxy-1,5-dimethylspiro[8-oxatricyclo[7.2.1.02,7]dodec-5-ene-12,2'-oxirane]-4-yl] 3-methylbutanoate

HT-2 Toxin; Mycotoxin HT 2; 26934-87-2; Toxin HT 2; HT 2 Toxin; NC6C26RM46; UNII-NC6C26RM46; [(1S,2R,4S,7R,9R,10R,11S,12S)-2-(acetyloxymethyl)-10,11-dihydroxy-1,5-dimethylspiro[8-oxatricyclo[7.2.1.02,7]dodec-5-ene-12,2'-oxirane]-4-yl] 3-methylbutanoate;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。