| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Indolicidin acts primarily on bacterial cell membranes. Its mechanism involves high-affinity binding to lipopolysaccharide (LPS) on the outer membrane of Gram-negative bacteria, followed by permeabilization and disruption of the cytoplasmic membrane through the formation of voltage-dependent ion channels [1].
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
吲哚西啶有 13 个氨基酸,其中 5 个是色氨酸残基,羧基末端有甲酰胺化精氨酸。在所有已知的蛋白质中,indolicidin 的色氨酸含量最高。这种特殊的抗生素肽可能会根据几个色氨酸残基的存在而发挥不同的作用。十三肽酰胺 indolicidin 具有与最强的细菌素肽或防御素相似的体外杀菌活性[1]。纯化的表面脂多糖以高亲和力与 indolicidin 结合,使其能够穿透 E 的外膜。大肠杆菌将其转化为疏水性小分子 1-N-苯基萘胺 (Mr 200),这与吲哚西丁穿过外膜的自我促进摄取途径一致。当吲哚丁的羧基末端被甲基酯化时,它对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都更有效。这与革兰氏阴性细菌中较高的脂多糖结合和增加的外膜通透性有关。吲哚西丁作用于大肠杆菌的细胞质膜,膜透化暴露细胞质β-半乳糖苷酶以进行测量[2]。
Indolicidin 在体外表现出广谱抗菌活性。针对不同细菌菌株的最低抑菌浓度(MIC)值范围为4至64 μg/ml。例如,对大肠杆菌UB1005的MIC为16 μg/ml,对铜绿假单胞菌H103为64 μg/ml,对鼠伤寒沙门氏菌14028s为64 μg/ml,对金黄色葡萄球菌RN4220为8 μg/ml。其羧基末端甲基酯衍生物(Indolicidin-C)显示出更强的效力,对某些菌株的MIC低至1-4 μg/ml[1]。 通过丹磺酰-多粘菌素B置换实验测定,Indolicidin 以与多粘菌素B相当的高亲和力与纯化的铜绿假单胞菌LPS结合。置换50%结合丹磺酰-多粘菌素B所需的浓度(I50)被用作相对亲和力的衡量指标,但文中未给出indolicidin的具体I50数值[1]。 Indolicidin 能渗透大肠杆菌的外膜,使小的疏水性荧光探针1-N-苯基萘胺(NPN,分子量200)得以进入,在浓度低至3-5 μg/ml时即可观察到活性。然而,即使浓度高达70 μg/ml,它也不能促进更大的蛋白质溶菌酶(分子量14,000)的摄取[1]。 通过使用邻硝基苯-β-D-半乳糖苷(ONPG)作为底物检测胞质β-半乳糖苷酶活性的释放,证明Indolicidin 能渗透大肠杆菌ML-35的细胞质膜(内膜)。渗透发生迅速(滞后时间<1分钟),浓度低至4 μg/ml即可生效。在用解偶联剂羰基氰-间氯苯腙(CCCP, 100 μM)预处理的细胞中,此活性显著降低,表明其依赖于跨膜电位[1]。 在平面脂双层(由磷脂酰胆碱/磷脂酰丝氨酸,5:1组成)中,Indolicidin 引起电压依赖性的跨膜电流增加。激活此电流增加需要约-70至-80 mV(反侧为负)的阈值电位。宏观电流的增加归因于形成了离散的离子通道,其单通道电导范围为0.05至0.15 nS[1]。 圆二色光谱分析表明,Indolicidin 在水溶液中呈现弱的聚-L-脯氨酸II型延伸螺旋结构,当与脂质体相互作用时,该结构显著增强[1]。 |
| 细胞实验 |
外膜渗透实验(NPN摄取实验): 将大肠杆菌UB1005培养至对数生长中期,收集、洗涤并重悬于缓冲液(5 mM HEPES, pH 7.2, 5 mM KCN)中。将荧光探针NPN以10 μM的终浓度加入细胞悬液。测量基线荧光(在水性介质中较弱)。随着加入浓度递增的Indolicidin,监测荧光强度的增加,这对应于NPN进入被渗透外膜的疏水内部[1]。
细胞质膜渗透实验(β-半乳糖苷酶释放实验): 收集对数生长期的大肠杆菌ML-35(该菌株胞质β-半乳糖苷酶组成型表达但缺少乳糖通透酶),重悬于含有100 mM NaCl的10 mM磷酸钠缓冲液(pH 7.4)中。加入底物ONPG。在零时刻,将不同量的Indolicidin 加入细胞悬液。通过分光光度法在420 nm处监测随时间产生的邻硝基苯酚,来跟踪被释放的胞质β-半乳糖苷酶水解ONPG的过程[1]。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
吲哚杀菌素是一种由13个氨基酸组成的阳离子抗菌肽(ILPWKWPWWPWRR-NH2),分离自牛中性粒细胞。它具有独特的组成,含有39%的色氨酸和23%的脯氨酸,使其成为已知最小的线性天然抗菌肽,也是已知蛋白质中色氨酸含量最高的[1]。
其作用机制包括:1)与革兰氏阴性菌外膜上的脂多糖(LPS)高亲和力结合,促进自身摄取;2)穿过外膜; 3) 与细胞质膜相互作用,导致电压依赖性离子通道的形成,从而耗散跨膜电位并引起细胞死亡[1]。 羧基末端的甲基酯化(生成吲哚杀菌素-C)增加了肽的净正电荷,从而增强了对大多数受试细菌的抗菌活性,提高了LPS结合亲和力,并增强了外膜通透性[1]。 在平面脂双层中形成通道需要一定的膜电位阈值,形成的通道大小不一,但一旦形成就相对稳定。鉴于其分子量较小,该肽可能采取伸展结构并聚集形成这些通道[1]。 |
| 分子式 |
C100H132N26O13
|
|---|---|
| 分子量 |
1906.28448
|
| 精确质量 |
1905.05
|
| CAS号 |
140896-21-5
|
| 相关CAS号 |
Indolicidin acetate;Indolicidin TFA
|
| PubChem CID |
16129733
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
11.317
|
| tPSA |
620.71
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
23
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
17
|
| 可旋转键数目(RBC) |
50
|
| 重原子数目 |
139
|
| 分子复杂度/Complexity |
4190
|
| 定义原子立体中心数目 |
14
|
| InChi Key |
USSYUMHVHQSYNA-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C100H132N26O13/c1-5-57(4)85(102)95(136)123-79(45-56(2)3)96(137)124-42-20-36-82(124)92(133)118-76(46-58-51-110-68-28-11-6-23-63(58)68)89(130)116-74(33-16-17-39-101)88(129)121-80(49-61-54-113-71-31-14-9-26-66(61)71)97(138)125-43-21-38-84(125)94(135)120-78(48-60-53-112-70-30-13-8-25-65(60)70)91(132)122-81(50-62-55-114-72-32-15-10-27-67(62)72)98(139)126-44-22-37-83(126)93(134)119-77(47-59-52-111-69-29-12-7-24-64(59)69)90(131)117-75(35-19-41-109-100(106)107)87(128)115-73(86(103)127)34-18-40-108-99(104)105/h6-15,23-32,51-57,73-85,110-114H,5,16-22,33-50,101-102H2,1-4H3,(H2,103,127)(H,115,128)(H,116,130)(H,117,131)(H,118,133)(H,119,134)(H,120,135)(H,121,129)(H,122,132)(H,123,136)(H4,104,105,108)(H4,106,107,109)
|
| 化学名 |
1-[2-[[6-amino-2-[[2-[[1-[2-[(2-amino-3-methylpentanoyl)amino]-4-methylpentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]hexanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]-N-[1-[[1-[2-[[1-[[1-[(1-amino-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl)amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]pyrrolidine-2-carboxamide
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.5246 mL | 2.6229 mL | 5.2458 mL | |
| 5 mM | 0.1049 mL | 0.5246 mL | 1.0492 mL | |
| 10 mM | 0.0525 mL | 0.2623 mL | 0.5246 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。