G551D-CFTR (EC50: 100 nM), F508del-CFTR (EC50: 25 nM)
Ivacaftor targets the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) protein, acting as a potentiator to increase channel open probability.[2].

伊伐卡托 (10 µM) 可使 ABCB4-G535D 的 PC 分泌活性提高 3 倍，ABCB4-G536R 提高 13.7 倍，ABCB4-S1076C 提高 6.7 倍，ABCB4-S1176L 提高 9.4 倍，ABCB4-G1178S 提高 5.7 倍。伊伐卡托可修复 ABCB4 突变体的功能缺陷[1]。与 R1162X CFTR 细胞相比，伊伐卡托 (10 μM) 可显著增强 W1282X 表达细胞中的 CFTR 活性[2]。尽管测试了包括 GABAA 类苯二氮卓类药物在内的 160 个靶点，伊伐卡托仍未显示出明显的活性。与 F508del HBE 相比，ivacaftor 的效力提高了 10 倍，其 EC50 为 0.236 ± 0.200 μM，可增加氯离子分泌[3]。VX-770 可提高重组细胞中 CFTR 通道的开放概率 (Po)，无论该细胞携带 G551D 门控突变还是 F508del 加工突变。在 EC50 为 25 nM 时，VX-770 可使温度校正的 F508del-FRT 细胞中福斯克林刺激的 IT 增强约 6 倍[4]。在稳定表达 W1282X CFTR 的 CFBE41o- 细胞中，用 G418 (250 μg/mL，48 小时) 处理后，立即加入 Ivacaftor (10 μM)，与 DMSO 对照组相比，福斯克林刺激的短路电流 (Isc) 显著增强。相比之下，Ivacaftor对表达R1162X CFTR的细胞几乎没有影响，R1162X CFTR在截短状态下不保留功能[2]。
在表达W1282X CFTR的FRT细胞中，Ivacaftor与G418的协同作用显著，这可以通过跨上皮氯离子电导(Gt)来衡量。单独使用伊伐卡托（Ivacaftor）（不进行通读）也能增加表达W1282X的细胞中CFTR的活性，但其作用程度低于与G418联合使用时[2]。
从W1282X纯合子患者身上分离的原代人鼻上皮细胞（HNE）在气液界面培养，并用伊伐卡托（10 μM，48小时）处理后，与DMSO处理的对照组（0.08 ± 0.003 μA/cm²，P < 0.01）相比，福斯克林依赖性短路电流（Isc）略有但具有统计学意义的增加（0.4 ± 0.04 μA/cm²），表明CFTR活性增强。急性添加伊伐卡托并未进一步增强该信号。这些细胞中CFTR mRNA的水平约为野生型水平的40%，表明存在无义介导的mRNA降解[2]。

在大鼠中，伊伐卡托（100–200 mg/kg，口服）具有良好的口服生物利用度[3]。在一项大鼠剂量比例研究中，口服伊伐卡托（VX-770）悬浮液后，AUC 和 Cmax 呈线性增加，剂量范围为 1 至 200 mg/kg（中间剂量为 3、10、30 和 100 mg/kg）。在比格犬中也观察到类似的趋势，口服剂量从 3 mg/kg 增加到 80 mg/kg（中间剂量为 10、30 和 60 mg/kg），证实了较高的口服吸收率。
根据四种动物的异速生长比例，预测伊伐卡托（VX-770）的人体肝清除率为 4.7 mL min–1 kg–1，约为肝血流量的 23%。基于其效力、选择性和良好的药代动力学特征，化合物 48（VX-770，ivacaftor）被选中进行进一步的（临床前）评估，并最终获得 FDA 批准，用于治疗携带 G551D 突变的 6 岁及以上囊性纤维化 (CF) 患者。[3]

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囊性纤维化跨膜传导调节因子 (CFTR) 基因中的提前终止密码子 (PTC) 会导致 CFTR 蛋白无功能，并且是约 11% CF 致病等位基因的直接原因。已知氨基糖苷类和其他新型药物可以诱导 PTC 的翻译通读，这是一种潜在的治疗方法。在 PTC 中，W1282X CFTR 较为特殊，因为它是一种 C 端 CFTR 突变，即使在截短状态下也能表现出部分活性。增强剂伊伐卡托 (VX-770) 已获批用于治疗携带 G551D 和其他门控突变的囊性纤维化 (CF) 患者。基于既往研究证实伊伐卡托在体外通过通读作用对 PTC 突变具有有益作用，我们假设伊伐卡托可能增强表达 W1282X CFTR 的 CF 患者的 CFTR 活性，并且通读作用可进一步增强其活性。与 R1162X CFTR 细胞相比，伊伐卡托显著提高了表达 W1282X 的细胞中 CFTR 的活性，并且氨基糖苷类抗生素 G418 的通读作用进一步增强了这种活性。来自 W1282X 纯合子患者的原代鼻上皮细胞在伊伐卡托存在下显示出 CFTR 功能改善。对同一患者给予伊伐卡托治疗后，肺部急性加重频率、BMI 和胰岛素需求量均显著改善，而 FEV1 在 3 年内保持稳定。这些研究表明，伊伐卡托可能通过刺激截短蛋白的残余活性，对保留W1282X CFTR突变表达的患者具有中等程度的临床获益，提示需要进行进一步研究，包括添加有效的通读药物[2]。
一名31岁的女性CF患者，W1282X纯合子（汗液氯化物116 mEq/L），患有进行性肺部疾病、营养不良（BMI <17）、频繁的肺部急性加重（3.6次/年）和胰岛素依赖型糖尿病，接受了口服伊伐卡托150 mg，每日两次，持续3年[2]。
开始服用伊伐卡托后：FEV₁没有显著改善（稳定在预计值的约36%），汗液氯化物也没有变化（从116 mEq/L降至114 mEq/L）；然而，肺部急性加重频率显著下降，从每年3.6次降至每年0.5次（P < 0.05）。体重指数（BMI）从<17增至20.3，BMI变化率显著提高（P < 0.001）。平均每日胰岛素需求量显著下降（P < 0.05）。患者主观报告痰量减少、痰液更容易清除，且精力更加充沛[2]。

用于检测 F508del-CFTR 增强剂活性的膜电位光学检测 [3]
为了鉴定 F508del-CFTR 的增强剂，我们开发了一种利用荧光电压传感探针的高通量筛选 (HTS) 检测方法，并使用 FLIPR III 荧光酶标仪进行检测。将稳定表达 F508del-CFTR 的 NIH-3T3 细胞在 27 °C 下孵育 16-24 小时，以纠正错误折叠的 F508del-CFTR。然后用浴液（160 mM NaCl、4.5 mM KCl、2 mM CaCl₂、1 mM MgCl₂、10 mM HEPES，用 NaOH 调节 pH 至 7.4）洗涤细胞，并在室温下用荧光电压传感染料与测试化合物（或 DMSO 溶剂对照）混合处理 30 分钟。该检测在 FLIPR III 上进行，只需一次添加含有福斯克林的无氯浴液即可完成。检测到的膜电位变化是由于测试化合物对F508del-CFTR中Cl⁻阴离子通量的增强作用所致。

Ussing室记录[3]
除非另有说明，所有细胞均在Costar Snapwell细胞培养插入片上培养，并在37 °C下进行记录。将细胞培养插入片安装到Ussing室（VCC MC8）中，以电压钳模式（Vhold = 0 mV）记录ISC。ISC测量时，基底外侧浴液成分如下（单位：mM）：135 NaCl、1.2 CaCl₂、1.2 MgCl₂、2.4 K₂HPO₄、0.6 KH₂PO₄、10 HEPES和10葡萄糖（用NaOH调节pH至7.4）。顶端浴液中的NaCl被等摩尔浓度的葡萄糖酸钠（用NaOH调节pH至7.4）替代。对于HBE细胞，在基底外侧至顶端Cl⁻梯度存在的情况下测量ISC。正常Cl⁻溶液成分如下（单位：mM）：145 NaCl、0.83 K₂HPO₄、3.3 KH₂PO₄、1.2 MgCl₂、1.2 CaCl₂、10葡萄糖、10 HEPES（用NaOH调节pH至7.35）。低Cl⁻溶液成分如下（单位：mM）：145葡萄糖酸钠、1.2 MgCl₂、1.2 CaCl₂、10葡萄糖、10 HEPES（用NaOH调节pH至7.35）。使用Acquire and Analyze软件对ISC进行数字化采集。 [3]
cAMP 测定[3]

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使用 cAMP-Screen 96 孔免疫测定系统，按照制造商的说明，测定 FRT 细胞中总 cAMP 浓度（细胞内和分泌的）。简而言之，将 FRT 细胞与测试化合物孵育 15 分钟，然后裂解并转移到试剂盒提供的 96 孔测定板中。将测定板在室温下孵育 1 小时，然后进行显色，并使用 LJL Biosystems 公司的 Acquest 384.1536 测量发光值。使用每块板中提供的 cAMP 标准曲线确定 cAMP 浓度。

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用 W1282X 或 R1162X CFTR cDNA 稳定转染的 CFBE41o- 和 FRT 细胞用 G418 (250 μg/mL) 或 DMSO 溶剂预处理 48 小时。在 Ussing 室记录过程中，急性加入 Ivacaftor (10 μM)。在电压钳制条件下测量短路电流 (Isc)，并按照先前描述的方法 [2] 评估跨上皮氯离子电导 (Gt)。
从患者鼻腔刷采集原代人鼻上皮 (HNE) 细胞，利用条件性重编程进行扩增，并在气液界面培养成气道单层细胞直至充分分化。将第一代细胞与 Ivacaftor (10 μM) 或 DMSO (0.1%) 孵育 48 小时，然后在改良的 Ussing 室中，在氯离子分泌梯度下，于电压钳制条件下进行评估。用福斯克林 (20 μM) 刺激 CFTR，随后急性加入伊伐卡托 (10 μM)，最后用 CFTRinh-172 (10 μM) 抑制 CFTR [2]。
采用实时逆转录 PCR 检测 CFTR mRNA 水平。与正常野生型 HNE 供体相比，HNE W1282X/W1282X 细胞表达 CFTR mRNA 的 0.4 倍 [2]。

1-200 mg/kg，口服 大鼠


体内药代动力学实验 [3]
雄性小鼠、Sprague-Dawley 大鼠、比格犬和食蟹猴（每组 n = 3）单次静脉注射以二甲基异山梨醇/乙醇/PEG400/5% 葡萄糖水溶液 (D5W) (10%/15%/35%/40%) 配制的化合物，剂量为标称剂量，给药体积为 1 mL/kg。通过留置颈动脉导管采集血样（0.3 mL，含肝素钠抗凝剂），采集时间点如下：静脉给药前、给药后5、15、30和45分钟以及1、2、4、6、8、12、24、36和48小时；口服给药前、给药后0.25、0.50、1、1.5、2、4、8、12和24小时。采用液相色谱-串联质谱法（LC/MS/MS）测定血浆样本中化合物的浓度，该方法的定量下限（LLOQ）为1 ng/mL，线性范围为1～2500 ng/mL。使用WinNonlin Professional Edition软件4.0.1版中的非房室模型分析模块，根据平均血浆浓度-时间曲线和测得的剂量值估算药代动力学参数。小鼠（每组n=3）：静脉注射3 mg/kg（配制于二甲基异山梨醇/乙醇/PEG400/5%葡萄糖水溶液中，10/15/35/40，1 mL/kg）。分别于5、15、30、45分钟和1、2、3、4、6、8、12、24小时采集血液样本。采用LC-MS/MS分析血浆。大鼠（n=3）：静脉注射2.5 mg/kg；口服5 mg/kg。犬（n=3）：静脉注射0.9 mg/kg；口服3.8 mg/kg。猴：静脉注射0.8 mg/kg。配方和取样类似[3]。
对于ABCB4拯救研究，没有描述动物方案；只有体外细胞培养[1]。

伊伐卡托在胃肠道吸收良好。与脂肪类食物同服时，血浆峰浓度（Tmax）在4小时达到，最大浓度（Cmax）为768 ng/mL，AUC为10600 ng·hr/mL。建议与脂肪类食物同服，因为脂肪可使其吸收率提高约2.5至4倍。口服后，伊伐卡托主要经代谢并经粪便排泄，占总剂量的87.8%。代谢物M1和M6分别占排泄剂量的22%和43%。极少量的伊伐卡托以原形经尿液排泄。在健康志愿者中，餐后连续7天每12小时口服150 mg后，平均（±标准差）表观分布容积为353 (122) L。
健康受试者服用150 mg后，清除率/血浆浓度（CL/F）（标准差）为17.3 (8.4) L/hr。
伊伐卡托在人体内广泛代谢。体外和临床研究表明，伊伐卡托主要由CYP3A代谢。主要代谢产物为M1和M6。尽管M1的效力仅为母体化合物伊伐卡托的约六分之一，但仍被认为具有药理活性。另一方面，M6不被认为具有药理活性，因为它所代表的作用不到母体化合物的五十分之一。在一项临床研究中，单次给药后，伊伐卡托的表观终末半衰期约为 12 小时。其他数据表明，其半衰期范围为 12 至 14 小时。

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有关清除率、半衰期、分布容积和不同物种的口服生物利用度，请参见 ADME/药代动力学部分。除伊伐卡托在 Ricerca 光谱筛选中对 160 个靶点（包括 GABAA 苯二氮卓受体，化合物 48 在 10 μM 浓度下抑制率为 18%）[3] 未显示任何具体的毒性数据（LD50、hERG、CYP 抑制）。CYP450 IC50 >20 μM（针对 1A2、2C9、2C19、2E1、3A4、2D6）；hERG IC50 >10 μM [3]。

◉ 哺乳期用药概述
母亲服用伊伐卡汀后，母乳中的药物浓度较低，母乳喂养婴儿血清中的药物浓度极低。一项针对囊性纤维化中心的国际调查发现，服用该药的母亲所哺乳的婴儿未出现不良反应。来自欧洲、澳大利亚和新西兰的呼吸系统专家工作组也认为，该药在哺乳期使用可能是安全的。一名母乳喂养的婴儿在母亲接受治疗期间出现短暂的胆红素和肝酶升高，但无法确定这是否与母乳中的药物有关。在获得更多数据之前，建议在母亲接受伊伐卡汀治疗期间监测母乳喂养婴儿的胆红素和肝酶水平。有报道称，孕期服用该药的母亲所哺乳的婴儿出现先天性白内障；因此，建议对母乳喂养的婴儿进行白内障筛查。轶事证据表明，母乳中的药物可能对母乳喂养婴儿的囊性纤维化症状有缓解作用。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
一位患有囊性纤维化的妇女在孕期和产后接受了卢马卡托和伊伐卡托治疗。她的婴儿在产后第29天之前一直纯母乳喂养，之后观察到婴儿体内直接胆红素、间接胆红素、天冬氨酸氨基转移酶 (AST) 和碱性磷酸酶水平升高。所有指标在产后第1天和第14天均恢复正常。婴儿的母乳喂养率下降至25%，所有指标在产后第37天恢复正常。之后母乳喂养率上升至50%，然后达到100%。在产后第135天，当母亲同时服用左氧氟沙星和复方磺胺甲噁唑时，婴儿的直接胆红素水平再次升高。母乳喂养率下降至75%，直接胆红素水平在第154天恢复正常。作者指出，异常的检测结果不能明确归因于lumacaftor和ivacaftor治疗。我们向欧洲、英国、美国、澳大利亚和以色列的成人囊性纤维化（CF）中心的首席临床医生发送了一份问卷，请求提供在妊娠和哺乳期使用CFTR调节剂的女性的妊娠结局的匿名数据。我们收到了来自31个中心和1名CF患者的回复，涉及61名女性的64次妊娠，最终分娩60名婴儿。其中，13名婴儿仅接受ivacaftor母乳喂养，9名婴儿接受lumacaftor和ivacaftor母乳喂养，5名婴儿接受tezacaftor和ivacaftor母乳喂养，共计27名婴儿通过母乳接触到ivacaftor。所有婴儿均未报告并发症。然而，母乳喂养的程度并未报告。随后，同一批作者开展了一项调查，要求囊性纤维化（CF）临床医生报告孕妇在妊娠和哺乳期间接触过依来沙卡托（elexacaftor）、替扎卡托（tezacaftor）和伊伐卡托（ivacaftor）联合用药的病例。26名婴儿在母亲服用联合疗法期间接受了母乳喂养（喂养程度未具体说明）。母乳喂养的婴儿未报告任何不良反应。其中一名婴儿的母亲因囊性纤维化服用依来沙卡托、伊伐卡托和替扎卡托。该婴儿接受了母乳喂养（喂养程度未具体说明）。尽管该婴儿携带导致囊性纤维化的CFTR基因突变，但婴儿健康状况良好，新生儿筛查结果为阴性。作者担心这些药物可能通过胎盘和母乳进入婴儿体内，导致筛查结果出现假阴性。一名F508del基因杂合携带者怀孕并产下一名纯合子婴儿。妊娠32周时，母亲开始服用成人标准剂量的依来沙卡托（elexacaftor）、伊伐卡托（ivacaftor）和替扎卡托（tezacaftor）治疗胎儿胎粪性肠梗阻。婴儿于妊娠36周出生，出生后接受了胰酶替代疗法，并在母亲继续接受治疗期间进行母乳喂养。大约一个月大时，婴儿的粪便弹性蛋白酶、转氨酶和胆红素水平恢复正常。虽然婴儿的汗液氯化物水平偏低，但比预期更接近正常值。作者推测，母乳中的药物可能缓解了婴儿的病情。另有三名患有囊性纤维化的女性在妊娠期和产后哺乳期服用过依来沙卡托、伊伐卡托和替扎卡托，但未说明具体剂量。产后8天至6个月的常规视力检查显示，这些婴儿双眼均患有轻微白内障（<1.0毫米），其中一名婴儿为中心性白内障，另外两名婴儿为偏轴性白内障。在产后16天、9周和6个月确诊后，停止了母乳喂养。母乳喂养对白内障的影响尚无法确定。卑诗省囊性纤维化诊所报告了两例妊娠期和哺乳期妇女的病例。其中一名妇女服用伊伐卡托（ivacaftor）并母乳喂养了42个月（具体时长未说明）。她的婴儿身体健康，但语言发育迟缓。另一名妇女服用Tricafta（伊伐卡托、依来卡托和替扎卡托）。她母乳喂养了婴儿6个月（具体时长未说明），婴儿未出现任何并发症。一名患有囊性纤维化的女性在孕期和哺乳期（未说明哺乳持续时间）早上服用伊伐卡夫150毫克、特扎卡托100毫克和依来卡夫200毫克，晚上服用伊伐卡夫150毫克。婴儿出生10天后，体重未恢复至出生体重，大便呈油性，胰弹性蛋白酶水平低于正常胰腺功能的标准值，但高于携带该突变的纯合子新生儿的预期水平。婴儿开始服用胰酶制剂，到第20天，胰弹性蛋白酶水平恢复正常。到出生后第45天，婴儿体重增加，排便正常。6个月大时，婴儿仍在母乳喂养，健康状况良好。作者认为，停止母乳喂养后，症状可能会复发，因为婴儿无法再通过母乳摄入少量母亲的药物。一名患有囊性纤维化的女性从妊娠第12周开始每日服用100毫克依来卡多（elezacador）、50毫克替扎卡多（tezazacador）和75毫克伊伐卡多（ivacacador），并在产后继续服用150毫克伊伐卡多。在持续治疗期间，该母亲坚持纯母乳喂养，且至少在婴儿3个月大时未观察到与药物相关的明显副作用。◉ 对哺乳和母乳的影响：截至修订日期，未找到相关的已发表信息。伊伐卡多与血浆蛋白的结合率约为99%，主要与α1-酸性糖蛋白和白蛋白结合。

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伊伐卡托 (VX-770) 是通过对喹啉酮-3-甲酰胺骨架进行构效关系研究，优化先导化合物1（二苄酰胺）而发现的。关键修饰：将吲哚基团替换为4-烷基苯胺，然后再替换为2,4-二叔丁基-5-羟基苯基。该化合物是一种ATP竞争性CFTR增强剂（未直接显示，但根据结合位点推断）。它已获得FDA批准用于治疗携带G551D和其他门控突变的囊性纤维化患者。此外，它还能在体外恢复与CFTR门控突变同源的ABCB4突变（G536R、S1076C、G1178S等）的功能，提示其可能用于治疗ABCB4缺乏性肝病[1,3]。

[1]. Functional defect of variants in the adenosine triphosphate-binding sites of ABCB4 and their rescue by the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator potentiator, ivacaftor (VX-770). Hepatology. 2017 Feb;65(2):560-570.

[2]. Therapeutic benefit observed with the CFTR potentiator, ivacaftor, in a CF patient homozygous for the W1282X CFTR nonsense mutation. J Cyst Fibros. 2017 Jan;16(1):24-29.

[3]. Discovery of N-(2,4-di-tert-butyl-5-hydroxyphenyl)-4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxamide (VX-770, ivacaftor), a potent and orally bioavailable CFTR potentiator. J Med Chem. 2014 Dec 11;57(23):9776-9.

[4]. Rescue of CF airway epithelial cell function in vitro by a CFTR potentiator, VX-770. Proc Natl Acad Sci U S A. 2009 Nov 3;106(44):18825-30.

伊伐卡托（Ivacaftor）是一种芳香酰胺，由4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-羧酸的羧基与5-氨基-2,4-二叔丁基苯酚的氨基缩合而成。它用于治疗囊性纤维化。伊伐卡托是一种CFTR增强剂，也是一种孤儿药。它属于喹诺酮类、酚类、芳香酰胺类和单羧酸酰胺类化合物。伊伐卡托（也称为Kalydeco或VX-770）是一种用于治疗囊性纤维化（CF）的药物，由Vertex Pharmaceuticals公司生产和销售。该药于2012年1月31日获得美国食品药品监督管理局（FDA）批准，并于2012年底获得加拿大卫生部的批准。伊伐卡托可作为单药疗法或与其他药物联合用于治疗囊性纤维化。囊性纤维化是一种常染色体隐性遗传病，由囊性纤维化跨膜转运调节因子（CFTR）基因的多种不同突变之一引起。CFTR蛋白是一种离子通道，参与氯离子和钠离子的跨膜转运。CFTR在肺、胰腺、肝脏、消化系统和生殖道等器官的上皮细胞中活跃表达。CFTR基因的改变会导致蛋白质异常生成、错误折叠或功能障碍，从而导致细胞膜上的液体和离子转运异常。因此，囊性纤维化患者会产生粘稠的黏液，这些黏液会堵塞产生黏液的器官的导管，使他们更容易出现感染、肺损伤、胰腺功能不全和营养不良等并发症。在伊伐卡托问世之前，囊性纤维化 (CF) 的治疗主要集中于控制感染、提供营养支持、清除黏液和缓解症状，而非改善疾病本身或肺功能（FEV1）。值得注意的是，伊伐卡托是首个获批用于治疗 CF 根本病因（CFTR 蛋白功能异常）而非缓解症状的药物。伊伐卡托是一种囊性纤维化跨膜传导调节因子 (CFTR) 的增强剂。其作用机制包括作为氯离子通道激活剂、细胞色素 P450 2C9 抑制剂、P-糖蛋白抑制剂和细胞色素 P450 3A 抑制剂。另见：伊伐卡托；lumacaftor（成分）；Elexacaftor、伊伐卡托、tezacaftor；伊伐卡托（成分）；伊伐卡托；伊伐卡托（ivacaftor）、tezacaftor（成分）。当作为单药治疗（Kalydeco）时，ivacaftor适用于治疗1个月及以上、携带CFTR基因单突变且根据临床和/或体外数据证实对ivacaftor协同作用敏感的囊性纤维化（CF）患者。当与lumacaftor（Orkambi）联合使用时，ivacaftor适用于治疗1岁及以上、携带CFTR基因F508del突变纯合子的CF患者。如果患者的基因型未知，则应使用FDA批准的CF突变检测方法来检测CFTR基因两个等位基因中是否存在F508del突变。当与[tezacaftor]联合用于产品Symdeko时，适用于治疗12岁及以上且至少携带一个CFTR基因突变的患者，或12岁及以上且确诊为F508del突变纯合子的囊性纤维化患者。当与tezacaftor和[elexacaftor]联合用于产品Trikafta时，适用于治疗12岁及以上且携带至少一个CFTR基因F508del突变的囊性纤维化患者。
Kalydeco 片剂的适应症是作为单药疗法，用于治疗携带 R117H CFTR 突变或囊性纤维化跨膜传导调节因子 (CFTR) 基因中以下门控（III 类）突变之一的成人、青少年和 6 岁及以上且体重 25 公斤或以上的儿童的囊性纤维化 (CF)：G551D、G1244E、G1349D、G178R、G551S、S1251N、S1255P、S549N 或 S549R（参见第 4.4 节和第 5.1 节）。与 tezacaftor/ivacaftor 片剂联合使用，本疗法适用于治疗 6 岁及以上患有囊性纤维化 (CF) 的成人、青少年和儿童，这些患者为 F508del 突变纯合子或 F508del 突变杂合子，且 CFTR 基因中存在以下突变之一：P67L、R117C、L206W、R352Q、A455E、D579G、711+3A→G、S945L、S977F、R1070W、D1152H、2789+5G→A、327226A→G 和 3849+10kbC→T。卡利德可颗粒剂可与伊伐卡托/特扎科托/伊莱卡托片剂联合使用，用于治疗携带至少一个 CFTR 基因 F508del 突变的 6 岁及以上成人、青少年和儿童的囊性纤维化 (CF)（参见第 5.1 节）。卡利德可颗粒剂适用于治疗体重 5 公斤至不足 25 公斤的婴儿、幼儿和儿童，这些儿童患有囊性纤维化 (CF)，且携带 R117H CFTR 突变或以下 CFTR 基因门控（III 类）突变之一：G551D、G1244E、G1349D、G178R、G551S、S1251N、S1255P、S549N 或 S549R（参见第 4.4 节和第 5.1 节）。对于携带至少一个 CFTR 基因 F508del 突变的 2 至 6 岁囊性纤维化 (CF) 儿童，需要采用伊伐卡托/替扎卡托/依来卡托联合疗法进行治疗。
囊性纤维化的治疗

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多种 CFTR 突变与囊性纤维化表型相关，疾病严重程度各不相同。最常见的突变是 F508del-CFTR 或 delta-F508 (ΔF508)，影响全球约 70% 的 CF 患者。该突变导致 508 位苯丙氨酸缺失，损害 CFTR 蛋白的生成，并显著减少细胞膜上的离子转运蛋白数量。伊伐卡托单药治疗未能使携带 delta-F508 突变的患者获益，这可能是由于细胞膜上与药物相互作用并增强其疗效的蛋白质数量不足所致。第二常见的突变是G551D，影响全球4-5%的囊性纤维化（CF）患者。这种突变属于错义突变；细胞表面蛋白的数量充足，但通道的开放和关闭机制发生改变。伊伐卡托（Ivacasoto）适用于治疗携带此突变的囊性纤维化（CF）患者，因为它能与细胞膜上的CFTR蛋白结合，增强其通道的开放能力。伊伐卡托的作用机制是增强CFTR蛋白的活性，CFTR蛋白是一种离子通道，参与氯离子和钠离子跨肺、胰腺和其他器官细胞膜的转运。CFTR基因的改变会导致蛋白质异常生成、错误折叠或功能障碍，从而导致跨细胞膜的液体和离子转运受损。伊伐卡托（Ivacaftor）通过增强囊性纤维化跨膜传导调节因子（CFTR）蛋白通道的开放概率（或门控能力），改善囊性纤维化（CF）症状和潜在的病理机制，尤其对CFTR门控机制受损的患者有效。伊伐卡托介导的CFTR氯离子转运的总体水平取决于细胞表面CFTR蛋白的数量以及特定突变CFTR蛋白对伊伐卡托增强作用的反应程度。

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伊伐卡托是一种CFTR增强剂，可提高通道开放概率。本研究提供了概念验证，表明即使没有翻译通读，伊伐卡托也可能通过刺激截短蛋白的残余活性，对携带W1282X无义突变的CF患者产生中等程度的临床获益。使用来自该患者的原代人呼吸道细胞进行的体外试验预测了临床反应。该患者每日口服两次，每次150毫克，这是门控突变的标准剂量[2]。

C₂₄H₃₀N₂O₄

410.51

410.221

1134822-07-3

Ivacaftor;873054-44-5;Ivacaftor-d4;Ivacaftor benzenesulfonate;1134822-09-5;Ivacaftor-d19;1413431-22-7

78357769

Typically exists as solid at room temperature

5.089

91.42

4

5

4

30

671

0

O([H])C1C([H])=C(C(=C([H])C=1C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])N([H])C(C1=C([H])N([H])C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C2C1=O)=O.O([H])[H]

MYELKYHBCRDZNH-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C24H28N2O3.H2O/c1-23(2,3)16-11-17(24(4,5)6)20(27)12-19(16)26-22(29)15-13-25-18-10-8-7-9-14(18)21(15)28;/h7-13,27H,1-6H3,(H,25,28)(H,26,29);1H2

N-(2,4-ditert-butyl-5-hydroxyphenyl)-4-oxo-1H-quinoline-3-carboxamide;hydrate

VX770 hydrate; VX 770 hydrate; VX-770; Ivacaftor hydrate; 1134822-07-3; Ivacaftor (hydrate); VX-770 hydrate; N-(2,4-ditert-butyl-5-hydroxyphenyl)-4-oxo-1H-quinoline-3-carboxamide;hydrate; Kalydeco hydrate; SCHEMBL2100895; Ivacaftor hydrate; Trade name: KALYDECO.

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。