PPARγ LBD (Ki = 1.2 μM); PPARγ LBD (EC50 = 680 nM (PPARγ LBD)
Leriglitazone targets the peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPARγ), a nuclear receptor that regulates the expression of genes involved in glucose and lipid metabolism, inflammation, and cell differentiation. PPARγ is a transcription factor that is activated by various endogenous ligands, including fatty acids and prostaglandins, as well as by synthetic ligands such as thiazolidinediones. Leriglitazone acts as a PPARγ agonist with an EC50 of 9 μM, providing high transcriptional potency by stabilizing the PPARγ (AF-2) coactivator binding surface and enhancing coactivator binding capacity. By activating PPARγ, Leriglitazone modulates the expression of target genes involved in mitochondrial function, oxidative stress response, and inflammation. In addition to its PPARγ agonist activity, Leriglitazone has been shown to have mitochondrial function-modulating effects that are independent of PPARγ activation, contributing to its neuroprotective and antioxidant properties.

吡格列酮 (Pio) 是一种经 FDA 批准用于治疗 2 型糖尿病的药物，它能结合并激活核受体 PPARγ。然而，Pio 的体内代谢产物如何影响 PPARγ 的结构和功能尚不清楚。本研究对 Pio 及其体内含量最丰富的代谢产物——利格列酮（1-羟基吡格列酮；PioOH）进行了结构-功能比较。结果显示，PioOH 的结合亲和力较低，且在辅调节因子募集实验中效力也降低。对 PioOH 结合的 PPARγ 配体结合域 (LBD) 进行 X 射线晶体衍射和分子对接分析发现，其氢键网络发生了改变，包括形成了水介导的氢键，这可能是其生化表型改变的潜在原因。核磁共振波谱和氢/氘交换质谱 (HDX-MS) 分析结合活性测定表明，吡咯烷酮羟基化 (PioOH) 能更好地稳定 PPARγ 激活功能-2 (AF-2) 共激活因子结合表面，并更好地增强共激活因子结合，从而略微提高转录活性。这些结果表明，吡咯烷酮羟基化会影响其作为 PPARγ 激动剂的效力和功效，有助于我们理解 PPARγ 与药物代谢物的相互作用[1]。体外实验表明，利格列酮在报告基因检测中能激活 PPARγ，并表现出浓度依赖性的转录活性。该化合物的 PPARγ 激动剂活性与抗炎作用相关，因为它能减少活化巨噬细胞和小胶质细胞中促炎细胞因子（如 TNF-α、IL-6 和 IL-1β）的产生。此外，利格列酮还具有抗氧化活性，能降低暴露于氧化应激的细胞中活性氧的水平。该化合物还能在基于细胞的神经退行性疾病模型中保护神经元细胞免受氧化损伤和凋亡。在细胞线粒体功能检测中，利格列酮已被证明可以改善线粒体呼吸作用并减少线粒体功能障碍，这可能有助于其发挥神经保护作用。

在这项研究中，研究人员发现，勒格列酮能够改善YG8sR小鼠（一种FRDA小鼠模型）的运动功能障碍[https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33171227/]。体内研究表明，勒格列酮在神经退行性疾病的动物模型中具有疗效。在X连锁肾上腺脑白质营养不良症（X-ALD）模型中，勒格列酮已被证实能够减轻神经炎症、改善线粒体功能并防止轴突变性。X-ALD是一种过氧化物酶体疾病，其特征是极长链脂肪酸的积累和进行性神经退行性变。该化合物能够穿过血脑屏障，使其可以直接在中枢神经系统中发挥作用。在其他神经退行性疾病模型中，例如阿尔茨海默病、帕金森病和多发性硬化症模型，利格列酮均显示出抗炎和神经保护作用，这与PPARγ在调节神经炎症和氧化应激中的已知作用相一致。该化合物的口服生物利用度和脑渗透性使其适用于研究中的长期给药。

采用圆二色性 (CD) 光谱法[1]在 CD 缓冲液（10 mM 磷酸钾 (pH 7.4) 和 50 mM 氟化钾）中进行 CD 波长扫描和热变性实验，监测波长为 222 nm，以确定 PPARγ LBD (10 µM) 在 1 摩尔当量吡格列酮 (Pio) 或利格列酮 (1-羟基吡格列酮；PioOH) 存在下的折叠和稳定性。热变性实验在 20°C 至 80°C 的温度梯度上以 1°C 的间隔进行监测。使用 GraphPad Prism 绘制原始椭圆率图，并根据先前报道的方法，用基于 Gibbs-Helmholtz 方程的一组方程进行拟合。

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TR-FRET 竞争性配体置换和共调节因子相互作用分析[1]
在黑色低容量 384 孔板中进行时间分辨荧光共振能量转移 (TR-FRET) 分析，使用含有 20 mM 磷酸钾 (pH 7.4)、50 mM 氯化钾、0.5 mM EDTA、5 mM TCEP 和 0.01% Tween-20 的缓冲液。对于配体置换分析，每个孔（每孔 22.5 μL）包含 1 nM 6xHis-PPARγ LBD 蛋白、1 nM LanthaScreen Elite Tb-anti-His 抗体和 5 nM Fluormone Pan-PPAR Green 示踪配体，溶于 TR-FRET 缓冲液中。在TR-FRET共调节因子相互作用实验中，每个孔包含400 nM FITC标记的TRAP220或NCoR1肽段、4 nM 6xHis-PPARγ LBD蛋白、1 nM LanthaScreen Elite Tb-抗His抗体和400 nM肽段，溶于TR-FRET缓冲液中，总体积为22.5 μL。配体储备液通过DMSO系列稀释制备，每个样品重复三次加入孔中，使DMSO的最终浓度为1%。将反应板在25 °C下孵育约1小时，并使用BioTek Synergy Neo多功能酶标仪进行读数。Tb供体在340 nm处激发，其荧光发射在495 nm处监测，受体FITC的发射在520 nm处测量。TR-FRET比值计算为520 nm处的信号除以495 nm处的信号。使用 GraphPad Prism 绘制数据图，并拟合相应的方程：对于配体置换实验，使用 Fluormone™ Pan-PPAR Green 示踪配体已知的结合亲和力 (2.8 nM)，将数据拟合到竞争性单一位点 Ki 方程；对于辅调节因子相互作用实验，将数据拟合到 S 型剂量反应方程。对于竞争性结合实验，通过对吡格列酮 (Pio) 与利格列酮 (1-羟基吡格列酮；PioOH) 的 Ki 值进行 F 检验分析来确定显著性。对于 TR-FRET 共调节因子募集实验，显著性通过对 n=2 个独立实验的 EC/IC50 值进行非配对 t 检验来确定。

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荧光偏振共调节因子相互作用实验[1]
荧光偏振实验在黑色低容量 384 孔板（Greiner）中进行，使用含有 20 mM 磷酸钾（pH 7.4）、50 mM 氯化钾、0.5 mM EDTA、5 mM TCEP 和 0.01% Tween-20 的缓冲液。每个孔中含有 100 nM FITC 标记的 TRAP220 共激活肽、PPARγ LBD 的系列稀释液（1.5 nM–90 µM），以及固定浓度的溶剂对照（1% DMSO）或与最高蛋白浓度相同的配体（90 µM 吡格列酮或利格列酮（1-羟基吡格列酮；PioOH）），每个浓度设置三个复孔。将反应板在 4°C 下孵育 2 小时，并使用 BioTek Synergy Neo 多功能酶标仪读取结果。数据用 GraphPad Prism 软件绘制，并拟合 S 型剂量反应方程。通过非配对t检验分析了n=2次独立实验的肽亲和力和极化窗口。

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等温滴定量热法[1]
由Lifetein公司合成了一种源自TRAP220共激活因子（氨基酸残基638-656；NTKNHPMLMNLLKDNPAQD）的肽，并将其重悬于含有20 mM磷酸钾（pH 7.4）、50 mM氯化钾、0.5 mM EDTA和5 mM TCEP的缓冲液中，浓度为500 μM。PPARγ LBD也以50 μM的浓度配制于相同的缓冲液中。在每次实验前，向PPARγ LBD和TRAP220中加入100 μM的吡格列酮（Pio）或利格列酮（1-羟基吡格列酮；PioOH），并在冰上孵育30分钟。将TRAP220肽（注射器）滴定至PPARγ LBD（样品池）中。每个实验共进行20次注射（首次注射0.4 μL，后续每次注射2.0 μL），混合速度为1200 rpm，参考功率为5 μcal/s，样品池温度为25ºC。每种配体结合条件下均进行两次实验。实验使用MicroCal iTC200（Malvern）进行。数据使用NITPIC 45进行处理以确定结合化学计量比，并使用SEDPHAT 46对每种配体结合条件下的两次重复实验进行无偏全局拟合，然后导出至GUSSI以制作出版质量的图表。所用的SEDPHAT拟合模型为A + B到AB异质缔合，拟合参数为焓(ΔH)和亲和力(Kd)。

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核磁共振波谱[1]
使用配备QCI低温探头的Bruker 700 MHz核磁共振仪，在298 K下采集二维[1H,15N]横向弛豫优化谱(TROSY)-异核单量子相关(HSQC)数据。样品包含200 µM 15N标记的PPARγ LBD，溶于含有20 mM磷酸钾(pH 7.4)、50 mM氯化钾、0.5 mM EDTA、5 mM TCEP和10% D2O的缓冲液（核磁共振缓冲液）中，并分别加入或不加入两倍摩尔当量的吡格列酮(Pio)或利格列酮(1-羟基吡格列酮; PioOH)。数据处理和分析采用 Topspin 3.0 (Bruker) 和 NMRViewJ 软件。核磁共振分析采用先前描述的罗格列酮结合核磁共振化学位移分配方法（BMRB 条目 17975），该方法通过最小化学位移程序对具有一致核磁共振峰位置的清晰残基进行分析。

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利格列酮的非细胞检测方法包括使用配体结合或反式激活实验来测量 PPARγ 激动剂活性。在典型的反式激活实验中，将包含 PPAR 反应元件 (PPRE) 并连接到荧光素酶报告基因的报告构建体与 PPARγ 表达载体一起转染到细胞中。用不同浓度的利格列酮处理细胞，并在设定的孵育时间后测量荧光素酶活性。PPARγ 激活的 EC50 值由浓度-反应曲线确定。在配体结合实验中，将PPARγ蛋白与放射性标记的PPARγ配体（例如[³H]-罗格列酮）在不同浓度的利格列酮存在下孵育。通过竞争性结合测定结合亲和力（Ki或IC50）。在类似的实验中评估利格列酮对PPARγ相对于其他PPAR亚型（PPARα和PPARδ）的选择性。

基于细胞的转录激活分析[1]
HEK293T 细胞在添加了 10% 胎牛血清 (FBS) 和 50 单位 mL–1 青霉素、链霉素和谷氨酰胺的 DMEM 培养基中培养至 90% 汇合度，然后在 T-75 培养瓶中以每孔 400 万个细胞的密度接种于 10 cm 培养皿中。接种的细胞使用含有 27 µL X-treme Gene 9 的转染试剂（溶于无血清 Opti-mem 低血清培养基 (Gibco) 中）进行转染，转染物为：4.5 µg 含有全长人 PPARγ2 的 pCMV6-XL4 质粒和 4.5 µg 3X 多聚化 PPRE-荧光素酶报告基因，或 4.5 µg Gal4-PPARγ LBD 和 4.5 µg 5X 上游激活序列 (UAS) 荧光素酶报告基因。转染细胞在5% CO₂培养箱中37℃培养18小时后，以每孔10,000个细胞（20 µL体积）的密度接种于白色384孔板中，每个处理设置四个复孔。培养4小时后，加入20 µL溶剂对照（1% DMSO的DMEM培养基）或浓度为56 pM至10 µM的各化合物1:2系列稀释液（最终DMSO浓度为1%）。18小时后，加入20 µL Britelite Plus荧光素酶，使用BioTek Synergy Neo多功能酶标仪读取发光值。数据在GraphPad Prism中绘制，以化合物处理组与DMSO处理组对照组的发光值倍数变化为纵坐标，配体浓度为横坐标，拟合S型剂量反应方程。对全长 PPARγ 的 n=4 个独立实验和 PPARγ-Gal4 的 n=2 个独立实验的 EC50 值进行非配对 t 检验分析；对各独立实验的反应窗口进行配对 t 检验分析。

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Leriglitazone 的细胞活性测定包括用该化合物处理培养细胞（例如巨噬细胞、小胶质细胞或神经元细胞），并测量其对炎症、氧化应激和线粒体功能的影响。对于抗炎活性，在有或无 Leriglitazone 的情况下，用 LPS 或其他炎症刺激物刺激细胞。通过 ELISA 法测量培养上清液中的细胞因子水平。对于抗氧化活性，将细胞暴露于氧化应激诱导剂（例如 H₂O₂ 或鱼藤酮），并使用荧光探针测量 ROS 水平。为了评估线粒体功能，我们使用Seahorse分析仪测量细胞耗氧率（OCR）和细胞外酸化率（ECAR）。细胞活力采用标准检测方法进行评估，以确保观察到的效应并非由非特异性细胞毒性引起。化合物效应的PPARγ依赖性可通过PPARγ拮抗剂或siRNA敲低PPARγ表达来验证。

本研究评估了新型脑渗透性、口服生物利用度高的PPARγ激动剂MIN-102（INN：Leriglitazone (1-hydroxypioglitazone; PioOH)）能否改善FRDA细胞和动物模型中的表型特征。MIN-102具有改善中枢神经系统（CNS）疾病疗效的潜力。在缺乏frataxin的背根神经节（DRG）神经元中，leriglitazone可提高frataxin蛋白水平，减少神经突退化和由钙蛋白酶和caspase 3介导的α-fodrin裂解，并提高细胞存活率。此外，leriglitazone还能恢复线粒体膜电位，并部分逆转线粒体Na+/Ca2+交换器（NCLX）水平的降低，从而改善线粒体功能和钙稳态。在缺乏弗拉塔辛蛋白的原代新生儿心肌细胞中，勒格列酮可阻止脂滴积累，且不增加弗拉塔辛蛋白水平。此外，勒格列酮可改善FRDA小鼠模型YG8sR小鼠的运动功能障碍。与PPARγ在细胞线粒体生物合成中的作用一致，勒格列酮显著增加了FRDA患者细胞中线粒体生物合成的标志物。总的来说，这些结果表明，勒格列酮靶向PPARγ通路可能为FRDA提供一种有效的治疗方法，通过增强线粒体功能和生物合成，提高受损的弗拉塔辛蛋白缺乏的背根神经节（DRG）神经元中的弗拉塔辛蛋白水平。另一方面，勒格列酮可通过增加弗拉塔辛蛋白缺乏的心肌细胞中的脂肪酸β-氧化来改善能量代谢，而不升高弗拉塔辛蛋白水平。这可能与线粒体生物合成不足和心脏肥大有关。研究结果进一步证实了弗里德赖希共济失调（FRDA）中不同的组织需求，以及利格列酮的多效性，这可能使其成为FRDA的一种有前景的治疗方法。https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33171227/

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利格列酮的体内动物研究通常使用神经退行性疾病模型。在X-ALD小鼠模型中，利格列酮以不同剂量（通常为10-50 mg/kg）每日口服给药，持续数周。运动功能通过行为学测试进行评估，例如转棒测试、旷场测试和握力测试。研究结束时，收集脑和脊髓组织进行组织学检查（包括髓鞘和轴突完整性染色）、极长链脂肪酸水平测定以及炎症标志物和线粒体功能分析。在其他模型中，例如多发性硬化症的实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型或帕金森病的MPTP模型，也评估类似的终点指标。将利格列酮的疗效与其他PPARγ激动剂（例如吡格列酮）或标准神经保护剂进行比较。

代谢/代谢物
5-[(4-{2-[5-(1-羟乙基)吡啶-2-基]乙氧基}苯基)甲基]-1,3-噻唑烷-2,4-二酮是吡格列酮的已知人体代谢物。

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利格列酮的分子量为372.44 g/mol，分子式为C₁₉H₂₀N₂O₄S。该化合物是一种噻唑烷二酮衍生物，其羟基使其区别于吡格列酮。它具有口服生物利用度，并且能够穿过血脑屏障，因此适用于中枢神经系统研究。该化合物应以粉末形式储存于-20°C，避光防潮。其药代动力学特性，包括半衰期和组织分布，已在临床前研究中得到表征。

在临床前研究中，利格列酮在治疗相关剂量下通常耐受性良好。作为一种PPARγ激动剂，它可能引起与其他噻唑烷二酮类药物类似的剂量依赖性副作用，包括体液潴留、体重增加和肝毒性。然而，该化合物的安全性被认为可以接受用于研究。全面的毒理学数据仅限于临床前研究结果。利格列酮尚未获准用于临床，主要是一种研究用化合物。

[1]. Structural Basis of Altered Potency and Efficacy Displayed by a Major in Vivo Metabolite of the Antidiabetic PPARγ Drug Pioglitazone. J Med Chem. 2019 Feb 28;62(4):2008-2023.

羟基吡格列酮是一种噻唑烷二酮类药物，是吡格列酮的羟基衍生物。它是人体内的一种外源性代谢产物，属于噻唑烷二酮类、吡啶类和芳香醚类化合物。其功能与吡格列酮相关。目前，利格列酮正在临床试验NCT03917225中进行研究（该临床研究旨在评估MIN-102对弗里德赖希共济失调男性和女性患者疾病进展的影响）。利格列酮是一种高生物利用度、选择性过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）γ亚型激动剂，能够穿过血脑屏障（BBB），并具有潜在的神经保护作用。它可用于治疗某些中枢神经系统（CNS）疾病，例如肾上腺皮质神经病变、脑肾上腺脑白质营养不良（cALD）、弗里德赖希共济失调和其他中枢神经系统疾病。口服后，乐格列酮选择性地靶向、结合并激活PPARγ，从而调节参与线粒体生物合成的基因表达。该药物可调节线粒体功能恢复通路（线粒体功能障碍是由极长链脂肪酸（VLCFA）的积累引起的），并能增加能量产生、降低氧化应激、降低核因子κB（NF-κB）水平、抑制神经炎症、保护血脑屏障（BBB）的完整性、预防脱髓鞘和轴突变性、提高神经元存活率、促进髓鞘形成和少突胶质细胞存活，以及改善运动功能。编码过氧化物酶体膜肾上腺脑白质营养不良蛋白的ABCD1基因突变会导致ABCD1转运蛋白功能障碍，从而导致VLCFA积累。极长链脂肪酸（VLCFA）的积累会导致髓鞘膜不稳定、线粒体功能障碍、氧化应激、神经炎症以及血脑屏障完整性受损。

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药物适应症
肾上腺脑白质营养不良的治疗

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利格列酮（羟基吡格列酮，MIN-102）是一种可穿透血脑屏障的PPARγ激动剂，其在神经退行性疾病研究中的潜力已得到研究。其双重作用机制——PPARγ激活和线粒体功能调节——提供了一种多管齐下的神经保护方法，可靶向炎症、氧化应激和线粒体功能障碍。该化合物在X连锁肾上腺脑白质营养不良和其他神经退行性疾病的临床前模型中显示出良好的前景。其能够穿过血脑屏障，使其成为研究PPARγ在中枢神经系统中作用的宝贵工具。利格列酮的治疗潜力以及作为神经退行性疾病机制的研究工具，目前仍在进行研究。

C19H20N2O4S

372.439

372.114

C, 61.27; H, 5.41; N, 7.52; O, 17.18; S, 8.61

146062-44-4

Leriglitazone hydrochloride;146062-46-6;Leriglitazone-d4;1188263-49-1; 146062-44-4

4147757

White to light yellow solid powder

1.3±0.1 g/cm3

627.6±55.0 °C at 760 mmHg

157-158ºC

333.4±31.5 °C

0.0±1.9 mmHg at 25°C

1.628

1.11

113.82

2

6

7

26

496

0

OXVFDZYQLGRLCD-RGUGMKFQSA-N

InChI=1S/C19H20N2O4S/c1-12(22)14-4-5-15(20-11-14)8-9-25-16-6-2-13(3-7-16)10-17-18(23)21-19(24)26-17/h2-7,11-12,17,22H,8-10H2,1H3,(H,21,23,24)/t12?,17-/m1/s1

rac-(5R)-5-{[4-(2-{5-[(1RS)-1-hydroxyethyl]pyridin-2- yl}ethoxy)phenyl]methyl}-1,3-thiazolidine-2,4-dione

Leriglitazonum; Leriglitazona; MIN-102; MIN102; Hydroxypioglitazone; 146062-44-4; Leriglitazone; Hydroxy Pioglitazone (M-IV); MIN-102; Leriglitazone [USAN]; K824X25AYA; 2,4-Thiazolidinedione, 5-[[4-[2-[5-(1-hydroxyethyl)-2-pyridinyl]ethoxy]phenyl]methyl]-; Leriglitazone1-Hydroxypioglitazone; MIN 102

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。