Lucifer Yellow CH dipotassium

别名: 萤黄CH二钾盐
目录号: V44616 纯度: ≥98%
Lucifer Yellow CH 二钾是一种含有游离肼基的高强度荧光探针。
Lucifer Yellow CH dipotassium CAS号: 71206-95-6
产品类别: New3
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
5mg
10mg
50mg
100mg
250mg
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产品描述
Lucifer Yellow CH 二钾是一种含有游离肼基的高强度荧光探针。它在室温下可与脂肪醛反应。Lucifer Yellow CH 可用作生物示踪剂,用于监测神经元分支、再生、间隙连接的检测和表征,以及醛固定后细胞的选择性消融。Lucifer Yellow CH 的激发/发射最大值分别为 430 nm 和 540 nm。
Lucifer Yellow CH 二钾是一种水溶性高强度荧光探针,含有游离肼基,主要用作生物示踪剂。它在室温下可与脂肪醛反应,用于监测神经元分支、再生和间隙连接。该化合物的激发和发射最大值分别为 430 nm 和 540 nm。作为一种荧光染料/探针,它的主要应用是在细胞生物学中标记内吞囊泡和醛固定后选择性细胞消融。
生物活性&实验参考方法
靶点
Fluorescent dye/probe
Lucifer Yellow CH dipotassium functions as a fluorescent tracer without a specific biological receptor target. Its mechanism of action is based on its physical properties as a fluorescent dye rather than binding to a particular protein or enzyme. The compound is taken up by cells via endocytosis and accumulates in endocytic vesicles, including lysosomes. It does not exert a pharmacological effect through target engagement but serves as a tool for visualizing cellular structures and processes. Its utility in neuroscience stems from its ability to be transported within neurons, making it valuable for tracing neuronal pathways and assessing cellular connectivity.
体外研究 (In Vitro)
配制荧光黄CH(二锂盐)工作液
1. 配制储备液
配制1 mg/mL荧光黄CH(二锂盐)储备液:将1 mg荧光黄CH(二锂盐)溶于1 mL双蒸水中。
注意:分装后,荧光黄CH(二锂盐)储备液应避光保存于-20℃或-80℃。
2. 使用预热的无血清培养基或PBS,将储备液稀释至0.5%–1%的荧光黄CH(二锂盐)工作液。
注意:使用前,请确保荧光黄CH(二锂盐)工作液的浓度适合当前情况。
细胞染色
1. 细胞制备
悬浮细胞:离心收集细胞,然后加入PBS洗涤两次,每次5分钟。
贴壁细胞:弃去培养基后,加入胰岛消化细胞。离心,去除上清液,加入PBS洗涤两次,每次5分钟。
2. 加入1 mL工作液(荧光素黄CH,二锂盐),孵育5-30分钟。
3. 4℃下以400 g离心3-4分钟后,弃去上清液。
4. 用PBS洗涤细胞两次,每次5次。
5. 将细胞重悬于1 mL PBS或无血清水中,使用流式细胞仪或荧光显微镜观察。
注意:
1. 分装后,Lucifer Yellow CH(二锂盐)储存液应避光保存于-20°C或-80°C。避免频繁冻融。-20°C可保存1个月,-80°C可保存6个月。
2. 您可以根据具体需要调整Lucifer Yellow CH(二锂盐)工作液的浓度。
3. 本产品不应用于临床诊断或治疗,也不应用于食品或药品中。仅供研究使用。
4. 为了您的健康和安全,请佩戴一次性手套和实验服。
在体外,Lucifer Yellow CH二钾盐用于标记培养细胞中的溶酶体和内吞体。典型的实验方案是将细胞(例如硫代巨噬细胞或J774.2细胞)与浓度为1 mg/mL的染料孵育1-2小时。孵育后,洗涤细胞,然后转移至不含染料的培养基中,使染料从囊泡中排出,之后进行显微镜观察。根据实验需要,染料的工作浓度范围为0.05至1 mg/mL。可以使用配备合适滤光片组的荧光显微镜观察染料的荧光。
体内研究 (In Vivo)
Lucifer Yellow CH 二钾在体内应用主要体现在其作为神经元示踪剂,可通过直接注射入组织的方式实现。该化合物可在神经元内运输,从而绘制神经连接图谱并评估神经元再生情况。它已被用于研究间隙连接通讯以及在醛固定后选择性地消融细胞。然而,作为一种荧光探针,它通常不用于全身治疗,而是作为局部研究工具,用于研究神经系统的结构和功能。
酶活实验
现有研究结果相互矛盾,表明在植物中,荧光染料荧光素黄CH (LYCH) 既可用作内吞作用的示踪剂,也可作为位于液泡膜上的阴离子转运蛋白的底物。此外,LYCH作为一种二磺酸化物质,可能与某些黄酮类化合物等磺化或硫酸化的天然化合物类似。我们利用分离的黑麦液泡进行了LYCH的吸收实验,观察到仅在MgATP存在的情况下,LYCH才能以饱和(Km = 0.3-0.6 mM)的方式在液泡中逆浓度梯度运输和积累。GTP和少量UTP可以替代ATP,而不可水解的ATP类似物AMP-PNP则不能促进LYCH的吸收。钒酸盐和丙磺舒(后者已知可抑制肝小管膜上的有机阴离子转运)均显著降低了LYCH的液泡摄取,而液泡H+-ATPase特异性抑制剂巴弗洛霉素A1则无此作用。结合CCCP消除pH差值对LYCH积累影响甚微这一事实,我们的结果表明,该化合物是通过直接能量驱动的过程被黑麦液泡摄取的。其他硫酸化化合物,包括磺溴酞钠以及黄酮类化合物芹菜素7,4'-二硫酸酯和木犀草素7,4'-二硫酸酯,均能显著抑制LYCH的摄取,这表明液泡中存在一种转运蛋白,用于转运结构不同的磺化或硫酸化化合物。葡萄糖醛酸类化合物,例如黑麦特有的黄酮类化合物木犀草素7-O-二葡萄糖醛酸苷,也能显著降低染料的吸收,而谷胱甘肽及其结合物仅表现出微弱的影响,这表明LYCH的吸收并非通过液泡谷胱甘肽结合物泵介导。
由于Lucifer Yellow CH二钾并非酶抑制剂或受体配体,因此不适用无细胞检测方法。该化合物的活性基于其荧光特性,可通过分光光度法进行表征。可在溶液中测量其激发光谱和发射光谱,以确认其最大吸收波长分别为430 nm和540 nm。该化合物与脂肪醛的反应性也可在无细胞体系中进行评估,但这并非标准的药理学检测方法。质量控制通常采用高效液相色谱法(HPLC)来评估纯度。
细胞实验
使用 Lucifer Yellow CH 二钾进行体外细胞实验包括对培养细胞进行染色以观察内吞隔室。典型的实验步骤如下:1) 将硫代巨噬细胞或 J774.2 细胞接种于盖玻片上。2) 将细胞置于含有 1 mg/mL Lucifer Yellow CH 的培养基中,于 37°C 孵育 1-2 小时。3) 用冰冷的 PD 缓冲液(137 mM NaCl、3 mM KCl、7 mM 磷酸盐,pH 7.4)洗涤细胞。4) 将细胞转移至不含染料的 M1OF 培养基中,于 37°C 孵育 20-30 分钟,以使染料从囊泡中排出。5) 使用配备 63 倍油镜的荧光显微镜观察活细胞。工作浓度可在 0.05-1 mg/mL 范围内调节。
动物实验
典型的体内动物实验中,使用Lucifer Yellow CH二钾作为神经元示踪剂。虽然现有文献中并未详细记录具体的实验方案,但已知该化合物可用于监测动物模型中的神经元分支和再生。通常的做法是将染料直接注射到特定的脑区或周围神经中,然后进行组织学检查以追踪标记的神经通路。该染料也可用于体内间隙连接的检测和表征。对于醛固定的组织,它能够选择性地清除标记的细胞。
药代性质 (ADME/PK)
作为一种荧光探针,Lucifer Yellow CH 二钾并非治疗药物,因此不具备常规的药代动力学(PK)特性,例如全身给药时的吸收、分布、代谢和排泄(ADME)。在细胞培养中,该染料通过内吞作用被细胞吸收。为防止降解,原液应避光保存于-20°C或-80°C。该化合物可溶于水(4 mg/mL)和DMSO(60 mg/mL)。在适当的储存条件下,其荧光性质稳定。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
荧光黄CH二钾盐在其预期的研究应用中被认为毒性相对较低。虽然现有资料中没有具体的毒性数据,但作为一种用于细胞生物学的荧光示踪剂,在0.05-1 mg/mL的工作浓度下,细胞通常对其耐受性良好。操作时的安全注意事项包括佩戴一次性手套和实验服。该化合物不适用于人体、临床诊断或治疗用途。其主要危害在于其作为化学试剂的使用,而非其固有的药理毒性。
参考文献

[1]. Transport of lucifer yellow CH into plant vacuoles--evidence for direct energization of a sulphonatedsubstance and implications for the design of new molecular probes. FEBS Lett. 1997 Dec 22;420(1):86-92.

其他信息
荧光黄CH二钾盐(CAS:71206-95-6)是一种研究级荧光染料,并非药品。它可从多家化学品供应商处获得,纯度通常超过98-99%。该化合物为二钾盐,分子式为C₁₃H₉K₂N₅O₉S₂,分子量为521.57。其别名包括荧光黄CH二钾盐。该染料特别适用于氩离子激光器或其他短波长光源的激发。它未获准用于临床,仅限研究用途。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C13H9N5O9S2-2.2[K+]
分子量
521.56526
精确质量
520.912
CAS号
71206-95-6
相关CAS号
Lucifer Yellow CH dilithium salt;67769-47-5
PubChem CID
12087397
外观&性状
Yellow to orange solid
LogP
1.376
tPSA
263.4
氢键供体(HBD)数目
4
氢键受体(HBA)数目
11
可旋转键数目(RBC)
0
重原子数目
31
分子复杂度/Complexity
914
定义原子立体中心数目
0
SMILES
O=C1N(NC(NN)=O)C(=O)C=2C3=C(C(=C(C=C13)S(=O)(O)=O)N)C=C(C2)S(=O)(O)=O.[K].[K].[H].[H]
InChi Key
HCWYSCVNSCIZCN-UHFFFAOYSA-L
InChi Code
InChI=1S/C13H11N5O9S2.2K/c14-10-5-1-4(28(22,23)24)2-6-9(5)7(3-8(10)29(25,26)27)12(20)18(11(6)19)17-13(21)16-15;;/h1-3H,14-15H2,(H2,16,17,21)(H,22,23,24)(H,25,26,27);;/q;2*+1/p-2
化学名
dipotassium;6-amino-2-(hydrazinecarbonylamino)-1,3-dioxobenzo[de]isoquinoline-5,8-disulfonate
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~83.33 mg/mL (~159.77 mM)
H2O : ~5 mg/mL (~9.59 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.9173 mL 9.5864 mL 19.1729 mL
5 mM 0.3835 mL 1.9173 mL 3.8346 mL
10 mM 0.1917 mL 0.9586 mL 1.9173 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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