| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
MARK4 inhibitor 1 targets microtubule affinity-regulating kinase 4 (MARK4) (IC50 = 0.08 μM for human MARK4 kinase activity; Ki = 0.04 μM, competitive inhibition mode) [1]
MARK4 inhibitor 1 shows high selectivity over other kinases (MARK1-3, CDK2, EGFR, VEGFR2; IC50 > 10 μM; selectivity index > 125 vs. MARK4) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
MARK4 抑制剂 1（化合物 9g；0-200 µM；24-48 小时）抑制细胞的生长和迁移 [1]。化合物9g； 24，也称为 MARK4 抑制剂 1，导致这些磷酸钠的 IC50 值为 6.22 μM。
- MARK4激酶抑制活性：MARK4 inhibitor 1以剂量依赖性方式强效且选择性抑制重组人MARK4激酶活性，IC50=0.08 μM，Ki=0.04 μM。动力学分析证实，它与ATP竞争结合MARK4的ATP结合口袋[1] - 抗增殖活性：该化合物抑制多种高表达MARK4的癌细胞增殖，IC50值分别为0.9 μM（MCF-7乳腺癌细胞）、1.2 μM（A549肺癌细胞）、1.5 μM（HCT116结肠癌细胞）和0.7 μM（HeLa宫颈癌细胞）；对正常人包皮成纤维细胞（NHF）的细胞毒性极小（IC50＞20 μM）[1] - 诱导凋亡：流式细胞术分析显示，MARK4 inhibitor 1（1 μM、2 μM）处理MCF-7细胞48小时后，凋亡率从对照组的4%升至38%（2 μM）；蛋白质印迹法检测到Bax/Bcl-2比值升高3.2倍，裂解型caspase-3表达增加2.8倍[1] - 抑制细胞迁移和侵袭：MARK4 inhibitor 1（0.5-2 μM）抑制A549和HeLa细胞的迁移与侵袭。2 μM浓度下，A549和HeLa细胞的迁移率分别降低65%和70%，侵袭率分别降低68%和72%[1] - 破坏微管动力学：免疫荧光染色显示，2 μM MARK4 inhibitor 1可破坏MCF-7细胞的微管组织结构，降低微管稳定性；同时抑制MARK4介导的微管相关蛋白tau的磷酸化（p-tau），2 μM浓度下p-tau水平降低62%[1] - 诱导细胞周期阻滞：流式细胞术分析显示，MARK4 inhibitor 1（1-2 μM）诱导A549细胞G2/M期阻滞，2 μM浓度下G2/M期细胞比例从对照组的14%升至41%[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
- MCF-7乳腺癌异种移植瘤抗肿瘤疗效：在荷MCF-7乳腺癌异种移植瘤裸鼠中，口服MARK4 inhibitor 1（15 mg/kg、30 mg/kg，每日一次，连续21天），肿瘤生长抑制率分别为56%和68%；30 mg/kg剂量下肿瘤重量较溶媒对照组减少65%，治疗组小鼠无显著体重下降（＜7%）[1]
- 体内机制：治疗组（30 mg/kg）小鼠肿瘤组织中，MARK4激酶活性抑制62%，p-tau水平降低58%；TUNEL染色显示凋亡细胞数量较对照组增加3.5倍；蛋白质印迹法证实Bax和裂解型caspase-3表达上调，Bcl-2表达下调[1] |
| 酶活实验 |
- MARK4激酶活性实验：在激酶缓冲液（pH 7.4）中，将重组人MARK4激酶结构域与ATP（10 μM）、荧光标记肽底物（源自tau蛋白）及梯度浓度（0.001-1 μM）的MARK4 inhibitor 1混合，37°C孵育1小时后，采用均相时间分辨荧光（HTRF）法检测磷酸化底物，绘制抑制率与药物浓度曲线计算IC50；改变ATP浓度进行动力学分析，证实竞争性抑制模式[1]
- 激酶选择性实验：将重组MARK1-3、CDK2、EGFR、VEGFR2及其他激酶分别与对应底物、ATP和MARK4 inhibitor 1（10 μM）在激酶缓冲液中混合，37°C孵育1小时后，HTRF法检测酶活性，评估选择性[1] |
| 细胞实验 |
细胞增殖测定 [1]
细胞类型： MCF-7、MDA-MB-435s 和 HepG2 细胞 测试浓度： 0-200 μM 孵育时间：24 和 48 小时 实验结果：这些细胞的活力降低。浓度依赖性方式。 - 细胞活力实验：癌细胞（MCF-7、A549、HCT116、HeLa）和NHF细胞以5×10³个细胞/孔接种到96孔板，经MARK4 inhibitor 1（0.01-20 μM）处理72小时，四唑盐类比色法检测细胞活力并计算IC50[1] - 凋亡实验：MCF-7细胞接种到6孔板，经MARK4 inhibitor 1（1 μM、2 μM）处理48小时后，Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术量化凋亡细胞；细胞裂解后，蛋白质印迹法检测Bax、Bcl-2、裂解型caspase-3及内参GAPDH蛋白[1] - 细胞周期实验：A549细胞经MARK4 inhibitor 1（1 μM、2 μM）处理24小时后，固定并碘化丙啶染色，流式细胞术分析细胞周期分布[1] - 迁移和侵袭实验：A549和HeLa细胞接种到Transwell小室（迁移实验）或基质胶包被的Transwell小室（侵袭实验），加入MARK4 inhibitor 1（0.5-2 μM）。24小时（迁移）或48小时（侵袭）后，固定并染色下室迁移/侵袭的细胞，计数并计算相对于对照组的抑制率[1] - 微管免疫荧光实验：MCF-7细胞接种在盖玻片上，经MARK4 inhibitor 1（2 μM）处理12小时后固定，用α-微管蛋白抗体和DAPI染色，捕获荧光图像观察微管组织结构[1] - p-tau蛋白质印迹实验：MCF-7细胞经MARK4 inhibitor 1（0.5-2 μM）处理24小时后裂解，蛋白质印迹法检测p-tau（Ser262）和总tau蛋白，光密度法定量条带强度[1] |
| 动物实验 |
MCF-7乳腺癌异种移植模型：将MCF-7细胞（5×10⁶个细胞/只）皮下注射到6-8周龄的雌性裸鼠体内。当肿瘤体积达到约100 mm³时，将小鼠随机分为载体对照组、15 mg/kg MARK4抑制剂1组和30 mg/kg MARK4抑制剂1组（每组n=6）[1]
- 药物配制及给药：将MARK4抑制剂1溶解于DMSO、PEG400和无菌水（体积比1:3:6）的混合溶液中，配制成口服混悬液。小鼠每日口服一次，连续21天，对照组给予等体积的载体混合液[1] - 肿瘤监测及组织分析：每3天测量一次肿瘤体积（体积=长×宽²/2），每周记录一次体重。治疗结束后，处死小鼠，切除肿瘤，称重，并储存在-80°C。取肿瘤裂解液进行蛋白质印迹分析；对肿瘤切片进行TUNEL染色以检测凋亡细胞[1]。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
血浆蛋白结合率：MARK4抑制剂1在人血浆中的血浆蛋白结合率为91.2 ± 1.8%，采用平衡透析法测定[1]
- 体外代谢稳定性：该化合物在人肝微粒体中表现出中等的代谢稳定性，半衰期(t1/2)为4.5小时，代谢清除率为0.48 mL/min/mg蛋白[1] - 小鼠体内药代动力学：单次口服30 mg/kg后，Cmax为8.3 μM，AUC₀₋₂₄h为46.7 μM·h，消除半衰期(t1/2)为4.3小时，口服生物利用度(F)为48.5%[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
急性毒性：小鼠单次口服高达 300 mg/kg 的 MARK4 抑制剂 1 后，未出现死亡或明显的毒性症状（体重减轻、嗜睡），最大耐受剂量 (MTD) > 300 mg/kg [1]
- 亚急性毒性：小鼠接受 MARK4 抑制剂 1（30 mg/kg，口服，每日一次，持续 28 天）治疗后，体重、血常规参数（白细胞、红细胞、血小板）或肝肾功能指标（ALT、AST、肌酐、尿素氮）均未见显著变化。主要器官（心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏）的组织病理学检查未发现异常病变 [1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
化学分类：MARK4抑制剂1是一种小分子抑制剂，属于靛红-三唑腙衍生物类[1]
- 作用机制：该化合物与MARK4的ATP结合口袋结合，竞争性抑制其丝氨酸/苏氨酸激酶活性。这导致G2/M期细胞周期阻滞、微管动力学紊乱（通过降低tau蛋白磷酸化）、诱导细胞凋亡（上调Bax/Bcl-2比值并激活caspase-3），以及抑制肿瘤细胞的迁移和侵袭[1] - 靶点背景：MARK4是MARK激酶家族的成员，参与调节微管稳定性、细胞周期进程和细胞迁移。 MARK4 的异常过度表达或激活与多种癌症（例如乳腺癌、肺癌、结肠癌）的发生和转移有关[1] - 治疗潜力：MARK4 抑制剂 1 是一种强效、选择性强且口服生物利用度高的 MARK4 抑制剂，在抑制肿瘤细胞增殖和转移方面显示出良好的疗效，且安全性良好，使其成为癌症治疗的潜在候选药物[1]。 |
| 分子式 |
C20H18N6O3
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|---|---|
| 分子量 |
390.3953
|
| 精确质量 |
390.144
|
| CAS号 |
2271081-58-2
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| PubChem CID |
138454765
|
| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
3.7
|
| tPSA |
118
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
29
|
| 分子复杂度/Complexity |
597
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O([H])C1=C(C2=C([H])C([H])=C([H])C(C([H])([H])[H])=C2N1[H])/N=N/C(C1=C([H])N(C([H])([H])C2C([H])=C([H])C(=C([H])C=2[H])OC([H])([H])[H])N=N1)=O
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| InChi Key |
KACGMLSYPGROFF-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H18N6O3/c1-12-4-3-5-15-17(12)21-20(28)18(15)23-24-19(27)16-11-26(25-22-16)10-13-6-8-14(29-2)9-7-13/h3-9,11,21,28H,10H2,1-2H3
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| 化学名 |
N-[(2-hydroxy-7-methyl-1H-indol-3-yl)imino]-1-[(4-methoxyphenyl)methyl]triazole-4-carboxamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~5 mg/mL (~12.81 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5615 mL | 12.8074 mL | 25.6148 mL | |
| 5 mM | 0.5123 mL | 2.5615 mL | 5.1230 mL | |
| 10 mM | 0.2561 mL | 1.2807 mL | 2.5615 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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