NMDAR/noncompetitive N-methyl-D-aspartate receptor

美金刚胺用于预防阿尔茨海默病中谷氨酸介导的兴奋毒性和神经变性。由于谷氨酰胺是快速生长的癌症细胞合成代谢的主要来源之一，我们旨在通过使用美金刚胺干扰A549肺癌细胞中的癌症细胞代谢。通过MTT法和PI染色评估美金刚胺对A549细胞周期进程和细胞死亡的影响。用0.25 mM美金刚胺处理细胞48小时，然后通过RT-qPCR和蛋白质印迹研究细胞代谢（AMPKA1、AMPKA2、HIF1A、B-atenin、PKM）、凋亡（p53、p21、Bax、Bcl-XL、NOXA、PUMA）和自噬相关（LC3B-I、LC3B-II、SQSTM1）mRNA和蛋白质表达。美金刚胺通过诱导G0/G1细胞周期阻滞，以浓度依赖的方式显著降低细胞存活率。我们的研究结果表明，美金刚胺显著激活AMPK1/2（p=0.039和p=0.0105），通过降低癌症细胞代谢调节因子，如HIF1A、B-连环蛋白和PKM，导致细胞凋亡和自噬，作为这种能量转移的结果。美金刚是靶向癌症细胞代谢的有用工具。因此，它可能被用作癌症治疗中的一种新的再利用药物。[4]

---

美金刚胺通过诱导细胞周期阻滞在G0/G1期显著降低细胞存活率[4]
在不同浓度的美金刚胺（0.125-4mM）下，在24小时和48小时研究了美金刚胺对A549细胞存活率的影响。在MTT法中，美金刚胺以剂量依赖的方式在24小时和48小时内显著降低了细胞存活率（p=0.0094，双尾配对t检验）（图1a（图1））。在0.25mM浓度下，48小时的细胞存活率为76.58%。因此，选择这些浓度进行进一步分析，以研究这种抗癌活性的分子机制。通过流式细胞术碘化丙啶染色评估美金刚胺对细胞周期谱的影响。用0.25mM美金刚胺处理A549细胞48小时，并将细胞周期特征与未处理的对照细胞进行比较。对照细胞在G2/M期有0.1%的亚G1期、62.8%的G0/G1期、9.9%的S期和21.3%的细胞，而美金刚胺处理的细胞在G2-M期有0.6%的亚G1级、82.7%的G0/Gl期、3.6%的S期、10.8%的细胞。相应的细胞周期阶段如图1b（图1）中的饼图所示。美金刚胺在48小时后触发细胞在G0/G1期的积聚。 美金刚胺激活AMPK1/2，降低HIF1A、B-卡替宁、PKM总蛋白表达[4]
我们在A549细胞中研究了0.25mM美金刚治疗48小时后AMPK A1和AMPK A2 mRNA的表达水平，以评估美金刚对癌症细胞代谢的影响。美金刚胺在mRNA水平上显著激活AMPK A1和AMPK A2基因（p=0.039和p=0.0105）（图2a、2b（图2））。然后，我们通过观察HIF1A、B-catenin和总PKM蛋白表达水平，检查了AMPK激活的致癌途径的潜在下游靶点。美金刚胺治疗降低了HIF1A、B-catenin和PKM蛋白表达水平（图2c、2d（图2））。所有这些靶点都和癌症细胞代谢相关的细胞致癌转化变化有关。缺氧诱导因子1（HIF-1）通过激活糖酵解代谢，被认为是癌症代谢的主要调节因子。我们使用公开的数据集GEPIA，通过Kaplan-Meier生存分析比较了HIF1A高表达和低表达的总体生存率。在LUAD（癌症基因组图谱肺腺癌）样本中，发现HIF1A表达较高是总体存活率较低的指标（图2e（图2））。 美金刚胺通过p53激活诱导细胞死亡，引导细胞凋亡和自噬[4]
为了评估美金刚胺对细胞死亡的影响，我们研究了它在p53依赖性凋亡途径中的作用。用0.25 mM美金刚胺处理A549细胞48小时。通过qRT-PCR检测p53、p21、Bax、Bcl-XL、PUMA和NOXA mRNA的表达水平。美金刚显著提高了p53水平（p=0.034）。美金刚胺还增加了p21 mRNA的表达水平（图3a（图3））。此外，美金刚胺显著增加了Bcl-XL、PUMA、NOXA水平的促凋亡基因表达（图3b（图3））。我们发现，当美金刚胺激活p53介导的凋亡时，凋亡基因的下游通路也被激活（Bcl-XL、PUMA、NOXA）。PUMA被称为“p53上调的凋亡调节剂”。因此，我们的结果与P53依赖性凋亡途径的潜在激活是一致的。

在老年大鼠的海马切片中，美金刚（1、5 和 10、15 mg/kg；腹腔注射；每天一次，持续 15-20 天）可显着抑制大 LTP [2]。尾部悬吊和强迫游泳测试表明，美金刚（1-3 mg/kg；口服（po））14天可显着改善嗅球切除（OBX）小鼠的抑郁样行为[3]。

---

先前的研究已经记录了嗅球切除（OBX）小鼠的异常抑郁样行为。在这里，我们发现美金刚可以增强海马齿状回（DG）颗粒下区的成年神经发生，并通过抑制OBX小鼠的ATP敏感性钾（KATP）通道来改善抑郁样行为。使用尾悬吊和强迫游泳试验评估，美金刚胺（1-3mg/kg；口服）治疗14天显著改善了OBX小鼠的抑郁样行为。美金刚胺治疗也增加了OBX小鼠DG中BrdU阳性神经元的数量。在免疫印迹分析中，美金刚胺显著增加了OBX小鼠DG中CaMKIV（Thr-196）和Akt（Ser-473）的磷酸化，但没有增加ERK（Thr-202/Tyr-204）的磷酸性。此外，OBX小鼠DG中GSK3β（Ser-9）和CREB（Ser-133）的磷酸化以及BDNF蛋白表达水平增加，这可能是Akt激活导致成年神经发生增加的原因。相比之下，用美金刚胺治疗后，DG中抑郁样行为的改善和BrdU阳性神经元的增加在OBX治疗的Kir6.1杂合（+/-）小鼠中并不明显，但在OBX处理的Kir6.2杂合（+/-）小鼠中则没有。此外，在OBX处理的Kir6.1+/-小鼠中没有观察到CaMKIV（Thr-196）和Akt（Ser-473）磷酸化和BDNF蛋白表达水平的增加。总体而言，我们的研究表明，美金刚胺通过Kir6.1通道抑制增加DG中的成人神经发生，从而改善OBX诱导的抑郁样行为。[3]

---

美金刚胺改善OBX诱导的成人海马神经发生减少[3]
OBX或假手术后20-24天，给小鼠注射五次BrdU，7天后采集大脑以评估成年海马神经发生。为了鉴定BrdU阳性细胞，我们在海马切片中用针对BrdU和神经元标记物NeuN的抗体进行了双重染色。在假手术小鼠的海马DG中鉴定出中等数量的BrdU/NeuN双阳性细胞（图2A），但在OBX小鼠中该数量显著减少（假手术：152.5±6.4个细胞，n=6；OBX：78.5±2.6个细胞，n=6）（图2A，B）。与未经治疗的OBX对照组相比，3 mg/kg剂量的美金刚显著增加了OBX小鼠中BrdU/NeuN双阳性细胞的数量（151.0±12.1个细胞，n=6）（图2A，B）。美金刚胺（3 mg/kg）不影响假手术小鼠BrdU/NeuN双阳性细胞的数量（图2A，B）。

---

美金刚胺增加OBX小鼠DG中CaMKIV（Thr-196）、Akt（Ser-473）和下游底物的磷酸化[3]
为了确定CaMKIV、ERK和Akt活性是否对美金刚胺诱导的成年海马神经发生至关重要，我们进行了免疫印迹分析。在假手术小鼠中，美金刚胺（3 mg/kg）略微但显著地增加了CaMKIV（Thr-196）磷酸化（110.3± 4.8 %, n=5），但DG中的Akt（Ser-473）或ERK（Thr-202/Tri-204）磷酸化不存在（图3A，B）。有趣的是，与假手术小鼠相比，OBX小鼠DG中CaMKIV（Thr-196）、Akt（Ser-473）和ERK（Thr-202/Tri-204）的磷酸化显著降低（CaMKIV：57.9 ± 2.1 %, n=5；阿克特：72.9 ± 3.6 %, n=5；ERK（Thr-202/Try-204）：42.9 ± 3.3 %, n=5）（图3A、B）。美金刚胺（3 mg/kg）显著增加了OBX小鼠DG中CaMKIV（Thr-196）和Akt（Ser-473）的磷酸化，但没有增加ERK（Thr-202/Tri-204）的磷酸性（CaMKIV：96.2 ± 2.5 %, n=5；阿克特：82.2 ± 4.5 %, n=5）（图3A、B）。

---

美金刚胺不能改善OBX操作的Kir6.1杂合小鼠的抑郁样行为，但不能改善Kir6.2杂合小鼠[3]
接下来，我们询问美金刚是否通过Kir6.1或Kir6.2通道抑制来改善抑郁样行为，这是通过尾部悬吊或强迫游泳测试来评估的。我们在尾部悬吊试验中测量了不动时间，并比较了OBX操作的WT小鼠、OBX操作Kir6.1+/-小鼠和OBX操作Kir6.2+/-小鼠在重复或不重复美金刚胺治疗下的时间。与OBX操作的野生型小鼠相比，OBX操作Kir6.1+/-小鼠和OBX操作Ki6.2+/-小鼠在尾部悬吊试验（图4A）或强迫游泳试验（图4B）中的不动时间没有变化。美金刚胺（3 mg/kg）显著缩短了OBX操作的野生型小鼠的不动时间（OBX操作野生型小鼠：146.5 ± 5.5 %, n=5；美金刚胺治疗的OBX操作WT小鼠：90.7 ± 7.3 %, n=5）和Kir6.2+/-小鼠（OBX操作的Kir6.2+/−小鼠：157.5 ± 14.9 %, n=5；美金刚胺治疗的OBX操作Kir6.2+/-小鼠：84.7 ± 8.6 %, n＝5），但未能改变OBX操作的Kir6.1+/-小鼠的不动时间（图4A）。

---

美金刚胺不能改善OBX操作的Kir6.1杂合小鼠中观察到的成年海马神经发生减少，但不能改善Kir6.2杂合小鼠[3]
我们还评估了OBX操作Kir6.1+/-小鼠和OBX操作的Kir6.2+/-小鼠在反复接触和不接触美金刚胺的情况下的成年海马神经发生。与OBX操作的WT小鼠相比，OBX操作Kir6.1+/-小鼠或OBX操作Kil6.2+/-小鼠的DG中BrdU/NeuN双阳性细胞的数量没有变化（图5A，B）。反复使用美金刚胺（3 mg/kg）显著增加了OBX操作的WT小鼠和OBX操作Kir6.2+/-小鼠中BrdU/NeuN双阳性细胞的数量（OBX操作WT小鼠：146.9±6.4个细胞，n=8；OBX操作Kir6.2+/-小鼠：137.8±2.2个细胞，n=8），但未能恢复OBX操作的Kir6.1+/-小鼠中BrdU/NeuN双阳性细胞的数量（图5A，B）。

---

美金刚胺未能增加OBX操作的Kir6.1杂合小鼠DG中CaMKIV（Thr-196）和Akt（Ser-473）的磷酸化，但不能增加Kir6.2杂合小鼠的DG中的磷酸化[3]
最后，我们评估了美金刚胺是否可以增加OBX操作的Kir6.1小鼠或OBX操作Kir6.2+/-小鼠DG中CaMKIV（Thr-196）和Akt（Ser-473）的磷酸化。与OBX操作的WT小鼠相比，OBX操作Kir6.1小鼠或OBX操作Kil6.2+/-小鼠的DG中CaMKIV（Thr-196）或Akt（Ser-473）的磷酸化没有变化（图6A，B）。反复使用美金刚胺（3 mg/kg）显著增加了OBX操作的野生型小鼠或OBX操作Kir6.2+/-小鼠中CaMKIV（Thr-196）和Akt（Ser-473）的磷酸化（CaMKIV:OBX操作野生型小鼠：135.3 ± 4.2 %, n=5；OBX操作Kir6.2+/-小鼠：131.9 ± 9.6 %, n=5；Akt:OBX操作的野生型小鼠：139.9 ± 14.8 %, n=5；OBX操作Kir6.2+/-小鼠：143.5 ± 8.9 %, n＝5），但未能增加OBX操作的Kir6.1+/-小鼠DG中的CaMKIV和Akt磷酸化（图6A，B）。

细胞培养和化学品[4]
A549细胞在添加了10%胎牛血清（FBS）的DMEM培养基中生长。细胞在37°C的5%二氧化碳中生长。用0.125-4mM的美金刚胺处理细胞24和48小时。美金刚胺溶于无菌、无热原的蒸馏水中。

---

细胞毒性试验[4]
采用3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基溴化四唑（MTT）法评估美金刚胺的细胞毒性作用。将细胞接种到96孔板中并培养过夜。用美金刚胺处理A549细胞24和48小时。处理后，向每个孔中加入MTT溶液（PBS中的5mg/ml），并在37°C下孵育平板4小时。加入DMSO以溶解甲赞晶体，并将平板在37°C下进一步孵育30分钟。通过SpectraMax M3酶标仪在570 nm处测量吸光度比。

---

蛋白质印迹的蛋白质表达谱[4]
用美金刚胺处理A549细胞48小时后，用PBS洗涤细胞，刮入含有1mM PMSF的RIPA裂解缓冲液中，然后超声处理15秒。样品在4°C下以14000 rpm离心15分钟，收集上清液。使用BCA检测试剂盒对蛋白质进行定量。在LDS非还原性样品缓冲液中，将蛋白质裂解物（20μg）在95°C下加热5分钟，然后装载到10%Tris-甘氨酸凝胶中。将凝胶在300毫安下转移到PVDF膜上90分钟。在室温下用TBS-T中的5%脱脂奶粉封闭膜1小时，并在4°C下与HIF1A、B-阿替宁、总PKM、B-肌动蛋白、LC3B和SQSTM1的一抗以1:1000的稀释度孵育过夜。随后用TBS-T洗涤印迹。使用第二抗体检测蛋白质条带，并使用BioVision ECL Western Blotting Substrate Kit对印迹进行可视化。

动物/疾病模型：雄性Wistar大鼠[2]
剂量：1、5、10、15 mg/kg
给药途径：腹腔注射（ip）；每日一次，持续15-20天
实验结果：显著降低了老年动物海马切片中记录到的大型LTP水平。

---

Kir6.1^+/-和Kir6.2^+/-小鼠[3]
Kir6.1^+/-小鼠是通过靶向敲除KCNJ8基因构建的。Kir6.2^-/-小鼠是通过靶向敲除相应基因构建的，并以类似方式回交至C57BL/6J背景。小鼠已回交至C57BL/6J背景超过10代。详细的实验方案请参见 Miki 等人 (1998) 和 Miki 等人 (2002) 的文献。Kir6.2^+/- 小鼠是通过将 Kir6.2^-/- 小鼠与野生型 (WT) 小鼠杂交而获得的。

---

手术和药物治疗 [3]
OBX 小鼠的建立方法如前所述 (Moriguchi 等人，2006)。小鼠在 OBX 手术后第 14 天开始，每天一次接受 美金刚 治疗，持续 14 天。在药物治疗 12-13 天后进行行为学测试，并在药物治疗 13-15 天后进行生化实验。

吸收、分布和排泄
口服后，美金刚吸收良好。其血药浓度峰值在约3-7小时达到。在正常治疗剂量下，美金刚的药代动力学呈线性。由于食物不影响美金刚的吸收，因此服用此药不受进食影响。
该药主要经尿液排泄。约48%的给药美金刚以原形经尿液排出。其余药物代谢为三种主要代谢物。这些代谢物为N-葡萄糖醛酸苷结合物、6-羟基美金刚和1-亚硝基脱氨美金刚，它们对NMDA受体的拮抗活性极低。
美金刚的平均分布容积为9-11 L/kg。
该药通过肾脏的主动肾小管分泌清除。该药物的肾小管重吸收受pH值影响。
美金刚主要以原形（约48%）经尿液排出，末端消除半衰期约为60-80小时。其余部分主要转化为三种极性代谢物，这些代谢物对NMDA受体的拮抗活性极低：N-葡萄糖醛酸苷结合物、6-羟基美金刚和1-亚硝基脱氨美金刚。给药剂量的74%以原药和N-葡萄糖醛酸苷结合物的总和形式排出。肾清除主要通过主动肾小管分泌，并受pH依赖性肾小管重吸收的调节。
口服美金刚后吸收迅速，约3-7小时达到血药浓度峰值。在治疗剂量范围内，美金刚的药代动力学呈线性关系。食物对美金刚的吸收无影响。
口服后，盐酸美金刚吸收良好，约3-7小时达到血浆峰浓度。美金刚主要经尿液排泄，约57-82%的给药剂量以原形药物排出；剩余剂量转化为代谢物，这些代谢物几乎不具有NMDA受体拮抗活性。
美金刚是一种非竞争性N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体拮抗剂，用于治疗阿尔茨海默病。我们研究了大鼠口服、静脉注射和贴剂给药后美金刚的药代动力学，并比较了多次或单次口服和经皮给药后美金刚的药代动力学。在单次和多次给药研究中，按预设时间间隔采集静脉血。所有制剂均采用非房室模型进行药代动力学分析。口服、静脉注射和贴剂给药的美金刚剂量分别为10 mg/kg、2 mg/kg和8.21 ± 0.89 mg/kg。贴剂给药后的血浆峰浓度低于口服和静脉注射给药，半衰期则更长。口服和贴剂给药的美金刚生物利用度分别为41%和63%。口服和贴剂给药后均在约24小时达到稳态血药浓度。单次口服或多次给药后，平均AUC均有所增加。美金刚贴剂的作用持续时间更长，血浆峰浓度更低。然而，在各剂量下，其药物暴露量与口服制剂相似。此外，美金刚贴剂的个体间差异较小，蓄积量也低于口服制剂。
有关美金刚（共6种）的更多吸收、分布和排泄（完整）数据，请访问HSDB记录页面。

---

代谢/代谢物
该药物部分在肝脏代谢。肝脏CYP450酶系统对该药物的代谢贡献不大。
美金刚部分经肝脏代谢。肝微粒体CYP450酶系统在美金刚的代谢中作用不大。
肝微粒体细胞色素P-450（CYP）同工酶系统在美金刚的代谢中作用不大。
主要以原形排泄。约20%代谢为1-氨基-3-羟甲基-5-甲基金刚烷和3-氨基-1-羟基-5,7-二甲基金刚烷。
消除途径：美金刚经部分肝脏代谢。约48%的给药药物以原形经尿液排出；其余部分主要转化为三种极性代谢物，这些代谢物对NMDA受体的拮抗活性极低：N-葡萄糖醛酸苷结合物、6-羟基美金刚和1-亚硝基脱氨基美金刚。它们主要以原形经尿液排出。
半衰期：60-100小时

---

生物半衰期
美金刚在人体内的终末消除半衰期为60至80小时。大鼠单次口服10 mg/kg美金刚后，消除半衰期为2.36 ± 0.20小时。大鼠单次静脉注射2 mg/kg美金刚后，消除半衰期为2.28 ± 0.48小时。
美金刚的终末消除半衰期约为60-80小时。

毒性概述
识别和用途：美金刚是一种油剂。它用于治疗中度至重度阿尔茨海默病。美金刚通过阻断NMDA受体发挥作用。人体暴露和毒性：临床试验和全球上市经验表明，美金刚过量服用（单独服用或与其他药物和/或酒精合用）最常见的体征和症状包括：躁动、乏力、心动过缓、意识模糊、昏迷、头晕、心电图改变、血压升高、嗜睡、意识丧失、精神病、躁动不安、行动迟缓、嗜睡、昏睡、步态不稳、视幻觉、眩晕、呕吐和虚弱。曾有一例患者报告出现可能与美金刚给药相关的肾功能损害和高钾血症。有报道称，两例阿尔茨海默病患者长期服用美金刚后出现反复意识丧失，停药后症状缓解。目前对美金刚的心血管效应知之甚少，但已有报道称其使用与心动过缓和心血管生存率降低相关。在人淋巴细胞染色体畸变试验中，美金刚未显示出体外遗传毒性。动物研究：在新生小鼠中，美金刚治疗可暂时改善海马依赖性记忆的形成。在大鼠中，美金刚给药可显著减轻乙醇相关的行为改变，且呈剂量依赖性。在体外沙门氏菌或大肠杆菌回复突变试验、大鼠体内染色体损伤细胞遗传学试验以及小鼠体内微核试验中，美金刚均未显示出遗传毒性。使用中国仓鼠V79细胞进行的体外基因突变试验结果不明确。
美金刚通过非竞争性NMDA受体拮抗作用发挥作用，优先结合NMDA受体激活的阳离子通道。痴呆患者脑内谷氨酸水平长期升高足以抵消Mg²⁺离子对NMDA受体的电压依赖性阻滞，并允许Ca²⁺离子持续流入细胞，最终导致神经元退化。研究表明，美金刚与NMDA受体的结合力强于Mg²⁺离子，从而有效阻断Ca²⁺离子通过NMDA通道的持续流入，同时保留突触释放的谷氨酸对通道的瞬时生理激活作用。因此，美金刚可以保护大脑免受慢性谷氨酸浓度升高的影响。美金刚对3型5-羟色胺（5-HT₃）受体具有拮抗活性，其效力与对NMDA受体的拮抗活性相似，而对尼古丁乙酰胆碱受体的拮抗活性较低。该药物对γ-氨基丁酸（GABA）、苯二氮卓类、多巴胺、肾上腺素能、组胺或甘氨酸受体，以及电压依赖性钙、钠或钾通道均无亲和力。

---

肝毒性
在大型安慰剂对照试验中，美金刚治疗期间血清酶升高的发生率与安慰剂组相似，且未报告临床上明显的肝损伤病例。然而，自美金刚投入临床应用以来，至少有一例临床上明显的肝毒性报告与该药物有关。发病时间为 3 周，临床表现为急性胆汁淤积性肝炎，病情轻度至中度，停药后可迅速逆转（病例 1）。未发现免疫过敏和自身免疫特征。
可能性评分：D（可能是临床上明显的肝损伤的罕见病因）。

---

蛋白结合
美金刚的蛋白结合率约为45%。

---

相互作用
蛋白结合药物：由于美金刚的血浆蛋白结合率较低（45%），因此不太可能与蛋白结合率高的药物（例如，地高辛、华法林）发生药代动力学相互作用。
经肾小管阳离子转运系统分泌的药物：当美金刚与经同一肾脏阳离子转运系统分泌的药物（例如，西咪替丁、氢氯噻嗪、二甲双胍、尼古丁、奎尼丁、雷尼替丁、氨苯蝶啶）合用时，可能发生药代动力学相互作用（两种药物的血浆浓度均发生改变）。然而，美金刚与氢氯噻嗪和氨苯蝶啶的固定复方制剂合用，并未影响美金刚或氨苯蝶啶的生物利用度，氢氯噻嗪的血浆峰浓度和血浆浓度-时间曲线下面积（AUC）仅下降了20%。此外，美金刚与格列本脲和盐酸二甲双胍的固定复方制剂合用，并未影响美金刚、二甲双胍或格列本脲的药代动力学，且格列本脲-二甲双胍复方制剂的降血糖作用也未受影响。
碱化剂：当美金刚与可升高尿液pH值的药物（例如碳酸酐酶抑制剂、碳酸氢钠）合用时，可能降低美金刚的清除率，从而增加不良反应的发生率。应谨慎使用。在碱性尿液条件（即 pH 8）下，美金刚的清除率降低约 80%。
胆碱酯酶抑制剂：美金刚与乙酰胆碱酯酶抑制剂多奈哌齐合用，不影响两种药物的药代动力学，也不显著改变多奈哌齐对乙酰胆碱酯酶的抑制作用。在一项针对中重度阿尔茨海默病患者的 24 周临床研究中，美金刚与多奈哌齐联合治疗观察到的不良反应与单独使用多奈哌齐观察到的不良反应相似。体外和动物研究表明，美金刚不影响多奈哌齐、加兰他敏或他克林对乙酰胆碱酯酶的可逆性抑制作用。
有关美金刚（共 9 种药物相互作用）的更多完整数据，请访问 HSDB 记录页面。

[1]. Memantine Derivatives as Multitarget Agents in Alzheimer's Disease. Molecules. 2020;25(17):4005.

[2]. Enhanced LTP in aged rats: Detrimental or compensatory?. Neuropharmacology. 2017;114:12-19.

[3]. Memantine Improves Depressive-like Behaviors via Kir6.1 Channel Inhibition in Olfactory Bulbectomized Mice. Neuroscience. 2020;442:264-273.

[4]. Memantine shifts cancer cell metabolism via AMPK1/2 mediated energetic switch in A549 lung cancer cells. EXCLI J. 2021 Feb 4;20:223–231.

治疗用途
抗帕金森病药物；多巴胺能药物；兴奋性氨基酸拮抗剂
/临床试验/ ClinicalTrials.gov 是一个注册库和结果数据库，收录了全球范围内由公共和私人机构资助的人体临床研究。该网站由美国国家医学图书馆 (NLM) 和美国国立卫生研究院 (NIH) 维护。ClinicalTrials.gov 上的每条记录都包含研究方案的摘要信息，包括：疾病或病症；干预措施（例如，正在研究的医疗产品、行为或程序）；研究的标题、描述和设计；参与要求（资格标准）；研究开展地点；研究地点的联系方式；以及其他健康网站相关信息的链接，例如 NLM 的 MedlinePlus（用于提供患者健康信息）和 PubMed（用于提供医学领域学术文章的引文和摘要）。美金刚已收录于数据库中。
盐酸美金刚用于缓解中度至重度阿尔茨海默病（AD）痴呆的症状。/美国产品标签包含/
/治疗用途/ 除了认知障碍和脑部退化外，视力功能障碍和视网膜损伤在阿尔茨海默病（AD）患者中也十分常见。N-甲基-D-天冬氨酸受体的非竞争性拮抗剂美金刚（MEM）已被证实能够改善AD患者的认知功能。然而，关于MEM对AD患者视网膜的神经退行性变机制及其可能的神经保护机制，目前信息有限。在本研究中，我们利用APPswe/PS1deltaE9双转基因(dtg)小鼠发现，美罗培南(MEM)能够挽救视网膜神经节细胞(RGC)的丢失，并改善视觉障碍，包括提高模式视网膜电图(PEG)中的P50成分和闪光视觉诱发电位(VEP)中P2成分的潜伏期。MEM还能抑制APPswe/PS1deltaE9 dtg小鼠视网膜中活化的微胶质细胞。此外，MEM还能抑制APPswe/PS1deltaE9 dtg小鼠RGC层中Müller细胞表达的谷氨酰胺合成酶水平。同时，MEM还能减少AD小鼠RGC层中胆碱乙酰转移酶免疫反应阳性的胆碱能无长突细胞的凋亡。此外，在APPswe/PS1deltaE9 dtg小鼠中，细胞外调节蛋白激酶1和2的磷酸化水平升高，而美金刚治疗可阻断这一升高。这些发现表明，美金刚通过调节小胶质细胞的免疫反应和Müller细胞的适应性反应来保护APPswe/PS1deltaE9 dtg小鼠视网膜中的RGC，这使得美金刚成为AD患者潜在的眼科治疗替代方案。
有关美金刚（共11种）的更多治疗用途（完整）数据，请访问HSDB记录页面。

---

药物警告
FDA妊娠风险类别：B/无证据表明对人类有风险。尽管在动物中发现了不良反应，但在孕妇中进行的充分、控制良好的研究并未显示胎儿畸形风险增加；或者，在缺乏充分的人体研究的情况下，动物研究显示无胎儿风险。
对胎儿造成伤害的可能性很小，但仍存在这种可能性。/
尚不清楚美金刚是否会分泌到母乳中。然而，由于许多药物会分泌到母乳中，因此建议哺乳期妇女谨慎服用美金刚。
美金刚尚未在癫痫患者中进行系统评估。在临床研究中，服用美金刚的患者中有 0.2% 出现癫痫发作，服用安慰剂的患者中有 0.5% 出现癫痫发作。
尚未确定美金刚在儿童中的安全性和有效性。
有关美金刚（共 12 条）的更多药物警告（完整）数据，请访问 HSDB 记录页面。

---

药效学
一般作用 本药抑制通常由谷氨酸慢性激活 NMDA 受体引起的钙离子流入细胞。这可改善阿尔茨海默病痴呆症状，表现为认知能力增强和其他有益的中枢神经系统效应。 对神经可塑性的影响 与其他NMDA受体拮抗剂一样，高剂量美金刚可降低参与学习和记忆过程的神经元突触可塑性。在临床常用的较低浓度下，美金刚可增强大脑中的神经元突触可塑性，改善记忆力，并起到神经保护作用，防止兴奋性神经递质造成的神经元损伤。对多种受体的影响 美金刚对GABA、苯二氮卓类、多巴胺、肾上腺素能、组胺和甘氨酸受体以及电压依赖性Ca2+、Na+或K+通道的活性极低。该药物对5HT3受体具有拮抗活性。实验室研究表明，美金刚不影响多奈哌齐、加兰他敏或他克林通常引起的乙酰胆碱酯酶可逆性抑制作用。

---

美金刚（3,5-二甲基金刚烷-1-胺）是一种口服有效的非竞争性N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDAR）拮抗剂，获批用于治疗中重度阿尔茨海默病（AD），这是一种以进行性认知功能下降为特征的神经退行性疾病。然而，美金刚以及其他获批用于治疗AD的乙酰胆碱酯酶抑制剂（AChEI）类药物，仅能缓解症状。因此，AD药物研发的迫切需求是开发疾病修饰疗法，这可能需要同时从多个途径或多个靶点入手。事实上，越来越多的证据表明，仅调节单一神经递质系统对于应对AD的复杂性而言是一种过于简化的方法。美金刚被视为一种特殊的NMDAR靶向结构，因此，它是多种多靶点配体（MTDL）设计的核心结构。本文综述了近期设计的一些用于对抗阿尔茨海默病（AD）的MTDL小分子实例，这些小分子将美金刚的金刚烷胺核心结构与已知神经保护剂（如抗氧化剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂和Aβ聚集抑制剂）的药效团特征结合在一个实体中。[1]

C12H21N

179.31

179.167

C, 80.38; H, 11.81; N, 7.81

19982-08-2

Memantine hydrochloride;41100-52-1; 19982-08-2

4054

Off-white to yellow solid powder

1.0±0.1 g/cm3

239.8±8.0 °C at 760 mmHg

153ºC

92.3±9.7 °C

0.0±0.5 mmHg at 25°C

1.554

3.18

26.02

1

1

0

13

240

0

CC12CC3CC(C1)(CC(C3)(C2)N)C

BUGYDGFZZOZRHP-UHFFFAOYSA-N

1S/C12H21N/c1-10-3-9-4-11(2,6-10)8-12(13,5-9)7-10/h9H,3-8,13H2,1-2H3

1-Amino-3,5-dimethyladamantane

Ebixza; Memantine; Akatinol; Axura D 145; D-145; NSC 102290; SUN Y7017; 19982-08-2; 3,5-dimethyladamantan-1-amine; 1-Amino-3,5-dimethyladamantane; Memantina; 3,5-Dimethyl-1-adamantanamine; 1,3-Dimethyl-5-adamantanamine; alzantin; Ebixa

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

---

注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

View More

注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

---

口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

View More

口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

---

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。