DHFR/dihydrofolate reductase; DNA synthesis; antimetabolite; antifolate
Methotrexate disodium targets the enzyme dihydrofolate reductase (DHFR), which is essential for the conversion of folic acid to tetrahydrofolate. By inhibiting DHFR, it prevents the synthesis of purine nucleotides and thymidylate, leading to inhibition of DNA and RNA synthesis. This antiproliferative effect is the basis for its anticancer activity. Additionally, methotrexate exerts immunosuppressive effects through mechanisms involving adenosine release, inhibition of AICAR transformylase, and suppression of TNF and IFN-γ production, contributing to its efficacy in autoimmune diseases.

体外活性：甲氨蝶呤（0.1-10 mM）可诱导体外活化的人外周血T细胞凋亡。甲氨蝶呤可实现混合淋巴细胞反应中活化T细胞的克隆清除。甲氨蝶呤可通过不依赖于CD95的途径选择性清除活化的外周血T细胞。甲氨蝶呤经还原型叶酸载体被细胞摄取，并在细胞内转化为多聚谷氨酸。甲氨蝶呤可降低体外刺激的中性粒细胞产生白三烯B4的能力。甲氨蝶呤多聚谷氨酸对氨基咪唑羧酰胺腺苷核苷（AICAR）甲酰转移酶的抑制作用强于对嘌呤生物合成中其他酶的抑制作用。甲氨蝶呤还可通过抑制体外TNF诱导的核因子-κB活化来抑制TNF活性，这部分与该因子抑制剂IκBα的降解和失活减少有关，也可能与腺苷的释放有关。甲氨蝶呤可抑制健康人供体和类风湿关节炎（RA）患者体内T细胞受体激活的T淋巴细胞产生TNF和IFN-γ。甲氨蝶呤治疗与TNF-α阳性CD4+ T细胞显著减少相关，而表达抗炎细胞因子IL-10的T细胞数量增加。
体外实验表明，甲氨蝶呤（0.1-10 mM）可诱导人外周血活化T细胞凋亡。它可实现混合淋巴细胞反应中活化T细胞的克隆清除，并通过CD95非依赖性途径选择性清除活化外周血T细胞。甲氨蝶呤通过还原型叶酸载体被细胞摄取，并在细胞内转化为多聚谷氨酸。它能减少中性粒细胞白三烯B4的生成，并通过抑制TNF诱导的NF-κB活化来抑制TNF活性。此外，它还能抑制T细胞产生TNF和IFN-γ。

甲氨蝶呤（氨甲蝶呤）二钠可降低小鼠的胸腺和脾脏指数。当剂量≥5 mg/kg时，甲氨蝶呤二钠显著降低了脾脏、胸腺和白细胞的数量。然而，模型组与治疗加对照组之间存在统计学意义上的显著差异（p<0.01）。葡萄籽原花青素和西伯利亚人参刺五加苷联合应用可显著降低甲氨蝶呤对小鼠胸腺和脾脏指数的影响[2]。在弗氏完全佐剂诱导的关节炎模型中，甲氨蝶呤（MTX）二钠（2 mg/kg；腹腔注射；每周一次，持续5周）具有治疗作用。姜黄素（30 mg/kg 和 100 mg/kg；腹腔注射；每周三次，持续五周）和甲氨蝶呤二钠（1 mg/kg；腹腔注射；每周一次，持续五周）联合用药显示出显著的抗关节炎作用和血液毒性保护作用[4]。体内实验表明，甲氨蝶呤二钠可降低小鼠的胸腺和脾脏指数。当剂量≥5 mg/kg时，可显著降低脾脏、胸腺和白细胞计数。在弗氏完全佐剂诱导的关节炎模型中，甲氨蝶呤（2 mg/kg，腹腔注射，每周一次，持续五周）具有疗效。与姜黄素联合用药显示出显著的抗关节炎作用。在癌症模型中，甲氨蝶呤通过抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡，表现出显著的抗肿瘤活性。其体内疗效已在肿瘤和自身免疫性疾病模型中得到充分证实。

甲氨蝶呤进入组织后，经叶酸多聚谷氨酸转化为甲氨蝶呤多聚谷氨酸。甲氨蝶呤的作用机制在于其抑制核苷酸合成相关酶，包括二氢叶酸还原酶、胸苷酸合成酶、氨基咪唑甲酰胺核苷酸甲酰转移酶（AICART）和酰胺磷酸核糖转移酶。核苷酸合成的抑制可阻止细胞分裂。在类风湿性关节炎中，甲氨蝶呤多聚谷氨酸对AICART的抑制作用强于甲氨蝶呤本身。这种抑制作用导致AICART核糖核苷酸的积累，后者抑制腺苷脱氨酶，进而导致细胞外空间中三磷酸腺苷和腺苷的积累，刺激腺苷受体，从而发挥抗炎作用。
甲氨蝶呤二钠的体外酶/受体结合研究通常包括二氢叶酸还原酶（DHFR）抑制试验。将重组DHFR与NADPH和二氢叶酸在递增浓度的甲氨蝶呤存在下孵育，并通过分光光度法监测NADPH氧化引起的340 nm处吸光度的降低来测定酶活性。IC50值由剂量反应曲线计算得出。类似的试验也可针对其他叶酸依赖性酶（例如AICAR甲酰转移酶）进行，以评估该化合物对嘌呤生物合成的更广泛影响。

甲氨蝶呤二钠的体外细胞活性检测包括培养癌细胞系（例如白血病、乳腺癌、淋巴瘤）或免疫细胞，并加入一系列稀释度的化合物。细胞活力采用 MTT、CellTiter-Glo 或台盼蓝排除法进行评估。细胞凋亡通过 Annexin V/PI 双染流式细胞术或 caspase 活化检测进行定量。对于免疫细胞研究，T 细胞增殖通过 [3H]-胸苷掺入或 CFSE 稀释法进行检测，细胞因子生成则通过 ELISA 或多重检测进行评估。

在甲氨蝶呤暴露前一周给予生物活性植物化学物质组合。治疗组 I：小鼠连续 15 天灌胃给予绿茶多酚和西伯利亚人参刺五加苷（0.2 mL/10 g），并在第 8 天加用单剂量甲氨蝶呤（2 mg/kg，腹腔注射，每日一次）。治疗组 II：小鼠连续 15 天灌胃给予葡萄籽原花青素和西伯利亚人参刺五加苷，并在第 8 天以相同方式给予甲氨蝶呤。模型组：动物连续 15 天灌胃给予蒸馏水，并在第 8 天采用相同的甲氨蝶呤给药方案。对照组：小鼠连续15天饮用蒸馏水，并在第8天以相同方式给予生理盐水代替甲氨蝶呤。末次给药12小时后，通过颈椎脱臼处死动物。

吸收、分布和排泄
甲氨蝶呤的生物利用度为64-90%，但口服剂量超过25 mg后，由于甲氨蝶呤载体介导的转运饱和，生物利用度会降低。甲氨蝶呤的达峰时间（Tmax）为1-2小时。口服10-15 µg后，血清浓度可达0.01-0.1 µM。超过80%的甲氨蝶呤以原形排出，约3%以7-羟基化代谢物的形式排出。甲氨蝶呤主要经尿液排泄，静脉给药后有8.7-26%的药物出现在胆汁中。甲氨蝶呤的稳态分布容积约为1 L/kg。甲氨蝶呤的清除率在不同患者间差异很大，并随剂量增加而降低。目前，预测甲氨蝶呤的清除率较为困难，即使采取所有预防措施，仍可能出现极高的血清甲氨蝶呤浓度。在成人中，甲氨蝶呤的口服吸收似乎与剂量相关。血清峰浓度在1至2小时内达到。甲氨蝶呤在30 mg/m²或更低剂量下通常吸收良好，平均生物利用度约为60%。剂量超过80 mg/m²时，吸收显著下降，这可能是由于饱和效应所致。静脉给药后，初始分布容积约为0.18 L/kg（占体重的18%），稳态分布容积约为0.4至0.8 L/kg（占体重的40%至80%）。蛋白结合率：中等（约50%），主要与白蛋白结合。当血清甲氨蝶呤浓度超过 0.1 μmol/mL 时，被动扩散成为主要的细胞内转运途径。该药物广泛分布于全身，在肾脏、胆囊、脾脏、肝脏和皮肤中的浓度最高。有关甲氨蝶呤吸收、分布和排泄的更完整数据（满分 10 分），请访问 HSDB 记录页面。

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代谢/代谢物质
甲氨蝶呤在肝脏和组织中经叶酸多聚谷氨酸合成酶代谢为甲氨蝶呤多聚谷氨酸。γ-谷氨酰水解酶水解甲氨蝶呤多聚谷氨酸的谷氨酸链，将其转化回甲氨蝶呤。少量甲氨蝶呤也会转化为7-羟基甲氨蝶呤。
甲氨蝶呤吸收后，在肝脏和细胞内代谢生成甲氨蝶呤多聚谷氨酸，后者可水解回甲氨蝶呤。甲氨蝶呤多聚谷氨酸可抑制二氢叶酸还原酶和胸苷酸合成酶。少量此类多聚谷氨酸代谢物可能在组织中长期滞留；这些活性代谢物的滞留和持续作用因细胞、组织和肿瘤的不同而异。此外，少量甲氨蝶呤多聚谷氨酸可转化为7-羟基甲氨蝶呤；由于7-羟基甲氨蝶呤的水溶性比母体化合物低三到五倍，因此在大剂量甲氨蝶呤给药后，该代谢物的蓄积可能相当显著。口服甲氨蝶呤后，该药物也会部分被肠道菌群代谢。甲氨蝶呤吸收后，在肝脏和细胞内代谢生成甲氨蝶呤多聚谷氨酸，后者可水解回甲氨蝶呤。甲氨蝶呤多聚谷氨酸可抑制二氢叶酸还原酶和胸苷酸合成酶。少量此类多聚谷氨酸代谢物可能在组织中长期滞留；这些活性代谢物的滞留和持续作用因细胞、组织和肿瘤的不同而有所差异。此外，少量甲氨蝶呤多聚谷氨酸可转化为7-羟基甲氨蝶呤；由于7-羟基甲氨蝶呤的水溶性比母体化合物低3～5倍，因此在大剂量甲氨蝶呤给药后，该代谢物的蓄积可能相当显著。口服甲氨蝶呤后，该药物也会部分被肠道菌群代谢。肾脏排泄是主要清除途径，排泄量取决于剂量和给药途径 (A620)。
清除途径：肾脏排泄是主要清除途径，排泄量取决于剂量和给药途径。静脉给药后，80%～90%的给药剂量在24小时内以原形经尿液排出。胆汁排泄有限，不超过给药剂量的10%。
半衰期：低剂量（低于30 mg/m²）：3～10小时；高剂量：8～15小时。
生物半衰期
成人低剂量甲氨蝶呤的半衰期为3～10小时。高剂量甲氨蝶呤的半衰期为8～15小时。甲氨蝶呤治疗急性淋巴细胞贫血患儿的终末半衰期为0.7至5.8小时。甲氨蝶呤治疗幼年特发性关节炎患儿的终末半衰期为0.9至2.3小时。终末半衰期：低剂量：3至10小时；高剂量：8至15小时。注意：个体间清除率差异很大。少量甲氨蝶呤及其代谢物与蛋白质结合，可能在组织（肾脏、肝脏）中停留数周至数月；体液超负荷（如腹水或胸腔积液）和肾功能损害也会延缓清除。甲氨蝶呤二钠的药代动力学特性包括良好的水溶液溶解性，这归因于其二钠盐形式。给药后，甲氨蝶呤广泛分布于全身组织，除非鞘内注射，否则难以渗透到中枢神经系统。该药物在细胞内代谢为多聚谷氨酸，后者滞留在细胞内，从而延长其药效作用。药物主要通过肾脏排泄，包括原药和代谢物。与原药相比，二钠盐形式的药代动力学特征无显著改变。

肝毒性
甲氨蝶呤可导致血清转氨酶水平升高，长期治疗与脂肪肝、肝纤维化甚至肝硬化相关。尽管关于甲氨蝶呤的文献很多，但肝功能检查和活检异常的发生率因剂量、给药方案和治疗持续时间而异。大剂量静脉注射甲氨蝶呤后，血清ALT水平可在12至48小时内升高至正常值上限（ULN）的10至20倍，但随后水平会迅速下降至正常，黄疸或肝损伤症状仅在极少数情况下出现。长期低至中等剂量甲氨蝶呤治疗期间，15%至50%的患者会出现血清ALT或AST水平升高，但这些通常较轻微，并可自行消退。约5%的患者ALT水平超过正常值的两倍；这些异常通常在停药或调整剂量后迅速恢复正常，但即使继续以相同剂量使用，也可能恢复正常。据报道，治疗期间ALT水平升高的发生率差异很大，这可能是由于检测频率（每月一次与每3、6或12个月一次）和采血时间（给药前每周一次或给药后不久）的不同所致。此外，研究表明，同时服用叶酸可以降低血清酶升高的发生率，目前已广泛应用。长期使用甲氨蝶呤与脂肪肝和肝纤维化相关，少数情况下还会导致门静脉高压和症状性肝硬化。通常，在出现肝硬化之前没有症状，肝功能检查通常正常或仅显示轻微且短暂的升高。对接受甲氨蝶呤治疗的患者进行常规监测，每1至2年进行一次肝活检，或累计使用1至10克甲氨蝶呤，结果显示约30%的患者会出现轻度至中度的组织学异常（脂肪沉积、细胞紊乱、轻度炎症、核异型性），2%至20%的患者会出现不同程度的肝纤维化。尽管已有长期甲氨蝶呤治疗期间发生肝硬化的病例报告，但前瞻性研究表明，即使进行常规组织学监测，肝硬化的发生率仍然很低。长期甲氨蝶呤治疗后出现肝纤维化的患者通常存在其他脂肪肝危险因素，包括过量饮酒、肥胖、糖尿病以及同时使用其他潜在肝毒性药物。高剂量和每日服用甲氨蝶呤尤其容易导致肝纤维化，治疗5至10年后，肝硬化的发生率可超过20%。采用更现代的给药方案（每周一次，每次 5 至 15 毫克，并补充叶酸），即使长期使用，肝纤维化和具有临床意义的肝病也较为罕见。甲氨蝶呤引起的肝纤维化和肝硬化通常在治疗后 2 至 10 年出现，可能表现为腹水、食管和胃底静脉曲张出血或肝脾肿大。部分患者出现门静脉高压的体征和症状，但仅有中度肝纤维化，提示甲氨蝶呤也可能导致结节性再生。门静脉高压和肝硬化患者的血清转氨酶或碱性磷酸酶水平通常仅轻度升高或正常，因此血清酶监测似乎无法有效预测肝纤维化的发生。对于长期服用甲氨蝶呤的患者，一些非侵入性肝纤维化标志物，例如连续血小板计数、血清III型前胶原N端肽（PIIIP）、血清胆汁酸、肝脏超声、高级影像学技术和瞬时弹性成像，可能更有效地筛查肝纤维化；然而，这些方法的可靠性和准确性尚未得到前瞻性研究的证实。甲氨蝶呤诱发的肝硬化患者通常无症状，即使重新开始低剂量治疗，病情也往往不会进展。据报道，疑似甲氨蝶呤诱发的肝硬化患者中，肝细胞癌的发生率较低。低剂量、长期甲氨蝶呤治疗也与罕见的乙型肝炎病毒（HBV）再激活有关，这些患者为类风湿性关节炎或银屑病患者，且在开始甲氨蝶呤治疗前为乙肝表面抗原（HBsAg）携带者、乙肝e抗原（HBeAg）阴性、丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平正常，且HBV DNA水平极低或检测不到。甲氨蝶呤诱发HBV再激活的发生率尚不明确，但可能较低。再激活通常发生在甲氨蝶呤治疗数年后，且大多数已发表的病例均涉及同时接受糖皮质激素治疗。临床表现为隐匿性起病的疲乏、恶心和黄疸，并伴有血清ALT和HBV DNA水平显著升高。在某些病例中，急性损伤严重且呈进行性发展，最终导致肝功能衰竭。在许多病例报告中，停用甲氨蝶呤后发生了乙型肝炎病毒（HBV）再激活，这可能是由于治疗期间HBV DNA水平升高的患者免疫反应恢复所致。也有报道称，尽管接受了甲氨蝶呤和泼尼松治疗，但HBV抗体阳性且HBsAg阴性（血清逆转）的患者仍出现了乙型肝炎病毒再激活。文献报道的大多数HBV再激活病例最终导致死亡或紧急肝移植，这可能反映了重症病例的发表偏倚。这些病例促使人们建议在开始长期甲氨蝶呤治疗前进行常规HBsAg筛查，并在使用甲氨蝶呤期间进行抗病毒预防或密切监测HBV DNA水平升高。然而，目前尚不清楚单独使用甲氨蝶呤（不联合泼尼松）是否会导致HBV再激活。
概率评分：A（已知慢性、临床显著的肝损伤、门静脉高压和肝硬化的病因）。

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妊娠和哺乳的影响
◉ 哺乳期用药概述
大多数资料认为，在接受高剂量甲氨蝶呤治疗癌症期间，母乳喂养是禁忌的。一些研究表明，化疗剂量治疗结束后，应至少停用甲氨蝶呤一周。[1] 化疗可能会对母乳的正常菌群和化学成分产生不利影响。[2] 妊娠期间接受化疗的女性更容易出现母乳喂养困难。[3] 母亲服用高达 92 毫克（1.12 毫克/公斤）的甲氨蝶呤后，母乳中的甲氨蝶呤浓度较低，因此一些作者认为，低剂量单次或每周一次的甲氨蝶呤（例如，用于治疗异位妊娠或类风湿性关节炎的剂量）对母乳喂养的婴儿风险较低。[4-8] 然而，一些专家意见警告不要这样做。 [9-15] 每周一次低剂量甲氨蝶呤给药后24小时停止母乳喂养，可使婴儿的药物剂量减少40%。[16-18] 如果在长期使用低剂量甲氨蝶呤期间进行母乳喂养，可考虑监测婴儿的血常规、血细胞分类计数和肝酶水平。◉ 对母乳喂养婴儿的影响 产后第151天，开始每周皮下注射25毫克甲氨蝶呤的哺乳期母亲开始母乳喂养。估计婴儿在给药后24小时内的摄入量为3.4微克/公斤。母亲在接受每周皮下注射25毫克甲氨蝶呤期间，持续母乳喂养9个月（喂养量未具体说明）。未观察到婴儿出现不良反应。 [8]
三名产后妇女被错误地配发了每日2.5毫克甲氨蝶呤，而非麦角新碱。她们分别在哺乳期间（哺乳情况未说明）每日服用甲氨蝶呤5天、13天和15天。尽管所有妇女均出现毒性反应并需要住院治疗，但她们的婴儿均未出现临床可观察到的并发症。[19]
◉ 对母乳喂养和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。
◈ 什么是甲氨蝶呤？甲氨蝶呤是一种抑制细胞生长并干扰免疫系统（人体抵抗感染的系统）的药物。甲氨蝶呤用于治疗多种疾病，包括癌症和自身免疫性疾病，例如类风湿性关节炎（https://mothertobaby.org/fact-sheets/rheumatoid-arthritis/）、狼疮（https://mothertobaby.org/fact-sheets/lupus-pregnancy/）和银屑病（https://mothertobaby.org/fact-sheets/psoriasis-and-pregnancy/）。甲氨蝶呤曾用于引产，目前用于治疗异位妊娠（胚胎在子宫外发育）。甲氨蝶呤的一些商品名包括 Otrexup®、Trexall®、Rheumatrex® 和 Rasuvo®。甲氨蝶呤的产品信息建议，除非用于癌症治疗，否则孕妇不应使用此药。然而，使用甲氨蝶呤治疗您的病情可能带来的益处大于潜在风险。您的医疗保健提供者可以与您讨论甲氨蝶呤的使用以及最适合您的治疗方案。甲氨蝶呤会降低人体对叶酸的利用能力。叶酸对妊娠期间胎儿的发育至关重要。如果您最近停止服用甲氨蝶呤并计划怀孕，请咨询您的医疗保健提供者，了解是否需要补充叶酸以及您应该服用的剂量。
◈ 我正在服用甲氨蝶呤。服用甲氨蝶呤会影响我的受孕能力吗？
一项针对接受甲氨蝶呤治疗异位妊娠的不孕症患者的研究表明，可用于受精的卵子数量有所减少。然而，这是暂时的。其他研究并未表明使用甲氨蝶呤会增加生育问题的风险。
◈ 我正在服用甲氨蝶呤，但我想在怀孕前停止服用。这种药物会在我的体内停留多久？
每个人清除药物的速度都不同。对于健康成年人来说，平均大约一周时间，大部分甲氨蝶呤就能从体内清除。某些药物可能会影响甲氨蝶呤的清除速度。此外，肾功能受损或体液过多的人清除甲氨蝶呤的速度可能会更慢。
◈ 停用甲氨蝶呤后多久可以尝试怀孕？
一些医疗保健提供者建议停用甲氨蝶呤后等待 1 至 3 个月，以确保药物已从体内清除。药物说明书建议等待 3 至 6 个月。然而，目前尚无因女性在受孕前停用甲氨蝶呤而导致婴儿出生缺陷的报告。
◈ 服用甲氨蝶呤会增加流产的风险吗？
流产很常见，任何妊娠都可能发生，原因多种多样。一些小型研究报告称，服用甲氨蝶呤会增加流产风险。由于甲氨蝶呤用于终止妊娠或治疗宫外孕，因此在妊娠早期使用可能会增加流产风险。
◈ 服用甲氨蝶呤会增加出生缺陷的风险吗？
每次妊娠初期都有3-5%的出生缺陷风险；这被称为基线风险。妊娠早期服用甲氨蝶呤可能会增加某些类型出生缺陷的风险，包括婴儿的头部、面部、四肢和骨骼畸形。对于其他出生缺陷，例如心脏缺陷和唇腭裂，目前的证据不足以证明甲氨蝶呤是其病因。有限的证据表明，如果孕妇在受孕后6至8周（末次月经第一天后8至10周）每周服用10毫克或更多甲氨蝶呤，则可能会出现与甲氨蝶呤相关的出生缺陷。一项已发表的研究综述报告称，在101名患有类风湿性关节炎的孕妇中，孕早期每周服用5至25毫克甲氨蝶呤并未导致流产或出生缺陷发生率增加。虽然这令人欣慰，但这并不意味着孕早期使用低剂量甲氨蝶呤不会增加流产或出生缺陷的风险。
◈ 孕期服用甲氨蝶呤会增加其他妊娠相关问题的风险吗？
根据综述研究，胎儿发育不良可能与孕期使用甲氨蝶呤有关。
◈ 孕期服用甲氨蝶呤会影响孩子未来的行为或学习吗？
根据综述研究，孕期接触过甲氨蝶呤的儿童可能会出现发育迟缓、学习障碍和智力障碍。
◈ 服用甲氨蝶呤期间哺乳：
少量甲氨蝶呤会进入母乳。药品说明书和一些医疗保健提供者不建议在哺乳期间服用甲氨蝶呤，并建议在服用最后一剂甲氨蝶呤后一周内停止哺乳。对服用剂量高达 92 毫克甲氨蝶呤的患者进行的母乳检测显示，其母乳中甲氨蝶呤的含量较低。因此，一些专家认为，每周服用低剂量甲氨蝶呤不太可能对母乳喂养的婴儿造成问题。如果在哺乳期间服用低剂量甲氨蝶呤，建议监测婴儿的血细胞计数。如有任何关于母乳喂养的问题，请务必咨询您的医疗保健提供者。
◈ 如果男性服用甲氨蝶呤，是否会影响其生育能力（使伴侣怀孕的能力）或增加胎儿出生缺陷的风险？该药物的包装说明书指出，男性在服用甲氨蝶呤期间以及最后一次服药后三个月内应采取有效的避孕措施。甲氨蝶呤可能会增加不育的风险。一些服用甲氨蝶呤的男性会出现精子数量减少的情况。这些男性大多服用高剂量甲氨蝶呤，并且同时服用其他抗癌药物。停药后，精子数量会恢复正常。需要服用甲氨蝶呤治疗癌症的男性可以考虑在治疗前冷冻精子。目前尚无报告表明，男性在受孕时服用甲氨蝶呤会增加其后代出生缺陷的风险。四项研究发现，在65名在受孕前后服用过甲氨蝶呤的男性中，其子女的出生缺陷发生率并未增加。通常情况下，父亲或精子捐赠者接触甲氨蝶呤不太可能增加怀孕的风险。更多信息，请参阅 MotherToBaby 的“父亲暴露”信息表，网址为 https://mothertobaby.org/fact-sheets/paternal-exposures-pregnancy/。

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蛋白质结合
甲氨蝶呤与血浆蛋白的结合率为 46.5-54%。
甲氨蝶呤二钠的毒理学数据表明，高剂量时具有显著毒性，会影响骨髓、胃肠道和口腔黏膜中快速分裂的细胞。常见不良反应包括骨髓抑制、黏膜炎、肝毒性、肾毒性和肺毒性。在高剂量方案中，通常会给予叶酸或亚叶酸钙解救以降低毒性。长期使用需要监测肝肾功能、血细胞计数和肺部状况。甲氨蝶呤具有致畸性，妊娠期间禁用。其治疗指数窄，需要仔细调整剂量。

[1]. Understanding the mechanisms of action of methotrexate: implications for the treatment of rheumatoid arthritis. Bull NYU Hosp Jt Dis. 2007;65(3):168-73.

[2]. Methotrexate in rheumatoid arthritis. Pharmacol Rep. 2006 Jul-Aug;58(4):473-92.

[3]. The Effect of L-carnitine on Amethopterin-induced Toxicity in Rat Large Intestine.

[4]. Evaluation of the concomitant use of methotrexate and curcumin on Freund's complete adjuvant-induced arthritis and hematological indices in rats. Indian J Pharmacol. 2011;43(5):546-550.

根据州或联邦标签要求，甲氨蝶呤钠可能引起发育毒性。甲氨蝶呤二钠是一种有机钠盐，是甲氨蝶呤的二钠盐。它是一种EC 1.5.1.3（二氢叶酸还原酶）抑制剂。它含有一个甲氨蝶呤(2-)分子。甲氨蝶呤钠是甲氨蝶呤的钠盐，甲氨蝶呤是一种具有抗肿瘤和免疫调节特性的抗代谢药物。甲氨蝶呤与二氢叶酸还原酶结合并抑制其活性，从而抑制嘌呤核苷酸和胸苷的合成，进而抑制DNA和RNA的合成。甲氨蝶呤还具有强效的免疫抑制作用。(NCI04) 一种具有免疫抑制特性的抗肿瘤抗代谢药物。它是一种四氢叶酸脱氢酶抑制剂，可阻止四氢叶酸的生成，而四氢叶酸是胸苷（DNA的重要组成部分）合成所必需的。另见：甲氨蝶呤（含活性部分）。

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根据一个由科学和健康专家组成的独立委员会的说法，甲氨蝶呤可能引起发育毒性。
甲氨蝶呤是一种无臭的黄色至橙棕色结晶性粉末。(NTP, 1992) 它是一种化疗药物，可干扰DNA和RNA的合成。
甲氨蝶呤属于蝶啶类化合物，是一种单羧酸酰胺和二羧酸。它具有多种药理作用，包括抗肿瘤、抗风湿、抑制二氢叶酸还原酶（EC 1.5.1.3）、抑制DNA合成、堕胎、治疗皮肤病、抗代谢和免疫抑制作用。甲氨蝶呤的功能与L-谷氨酸相关，L-谷氨酸是甲氨蝶呤的共轭酸(1-)。甲氨蝶呤是一种叶酸衍生物，可抑制多种参与核苷酸合成的酶。这种抑制作用可抑制炎症并阻止细胞分裂。由于这些作用，甲氨蝶呤常用于治疗关节炎引起的炎症，或控制乳腺癌和非霍奇金淋巴瘤等肿瘤性疾病中的细胞分裂。由于其毒性，甲氨蝶呤仅用于治疗某些类型的关节炎和重度银屑病，且仅在初始治疗失败或患者无法耐受一线治疗时使用。甲氨蝶呤于1953年12月7日获得美国食品药品监督管理局（FDA）批准。甲氨蝶呤是一种叶酸类似物代谢抑制剂。其作用机制是抑制叶酸代谢。甲氨蝶呤是一种抗肿瘤和免疫抑制剂，广泛用于治疗白血病、淋巴瘤、实体瘤、银屑病和类风湿性关节炎。大剂量静脉注射甲氨蝶呤可导致血清酶急性升高。长期使用甲氨蝶呤会导致血清肝酶频繁但轻微升高，更重要的是，还会导致慢性肝损伤、进行性纤维化、肝硬化和门静脉高压。据报道，甲氨蝶呤存在于蓝花楹（Quambalaria cyanescens）、冈比尔楹属（Gambierdiscus）和三裂番荔枝（Asimina triloba）中，并有相关数据可供参考。甲氨蝶呤是一种具有抗肿瘤和免疫抑制活性的抗代谢和抗叶酸药物。甲氨蝶呤与二氢叶酸还原酶结合并抑制其活性，从而抑制嘌呤核苷酸和胸苷的合成，进而抑制DNA和RNA的合成。甲氨蝶呤还具有强效的免疫抑制活性，但其作用机制尚不明确。甲氨蝶呤仅存在于使用或服用过该药物的个体体内。它是一种具有免疫抑制特性的抗肿瘤抗代谢药物。它是四氢叶酸脱氢酶的抑制剂，可阻止四氢叶酸的生成，而四氢叶酸是胸苷（DNA的重要组成部分）合成所必需的。[PubChem] 甲氨蝶呤的抗肿瘤活性源于其对叶酸还原酶的抑制作用，从而抑制DNA合成和细胞复制。其治疗类风湿性关节炎的作用机制尚不明确。一种具有免疫抑制特性的抗肿瘤抗代谢药物。它是一种四氢叶酸脱氢酶抑制剂，可阻止四氢叶酸的生成，而四氢叶酸是胸苷（DNA的重要组成部分）合成所必需的。另见：甲氨蝶呤钠（生理盐水）。

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药物适应症
甲氨蝶呤口服溶液适用于急性淋巴细胞白血病和幼年特发性多关节型关节炎患儿。甲氨蝶呤皮下注射液适用于重度活动性类风湿性关节炎、幼年特发性多关节型关节炎以及重度、难治性、致残性银屑病。它也已获得欧洲药品管理局 (EMA) 批准，用于治疗需要全身治疗的中重度斑块状银屑病成人患者。其他制剂适用于治疗妊娠绒毛膜癌、破坏性绒毛膜腺瘤、葡萄胎、乳腺癌、头颈部表皮样癌、晚期蕈样肉芽肿、肺癌和晚期非霍奇金淋巴瘤。它也用于急性淋巴细胞白血病的维持治疗。在非转移性骨肉瘤中，甲氨蝶呤也用于亚叶酸钙治疗前，以延长肿瘤手术切除后的无复发生存期。
FDA标签
诺迪美特适用于治疗：成人活动性类风湿性关节炎；对非甾体抗炎药（NSAIDs）反应不足的重度活动性幼年特发性关节炎（JIA）多关节型；适合接受全身治疗的成人中度至重度斑块状银屑病；成人重度银屑病关节炎；用于治疗中度类固醇依赖性克罗恩病成人患者（与皮质类固醇联合使用）的诱导缓解；以及用于对甲氨蝶呤有反应的患者，作为单药治疗维持缓解。
用于治疗活动性类风湿关节炎成人患者，以及风湿病和皮肤病患者。适用于对非甾体抗炎药（NSAIDs）反应不佳的3岁及以上青少年和儿童的多关节型活动性重度幼年特发性关节炎（JIA）。适用于对光疗、补骨脂素和长波紫外线（PUVA）疗法以及其他疗法（如维甲酸）反应不佳的重度、难治性、致残性银屑病，以及成人重度银屑病关节炎。在肿瘤治疗中，甲氨蝶呤适用于成人、青少年和3岁及以上儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）的维持治疗。作用机制：甲氨蝶呤进入组织后，在叶酸多聚谷氨酸的作用下转化为甲氨蝶呤多聚谷氨酸。甲氨蝶呤的作用机制在于抑制核苷酸合成相关酶，包括二氢叶酸还原酶、胸苷酸合成酶、氨基咪唑甲酰胺核苷酸甲酰转移酶（AICART）和酰胺磷酸核糖转移酶。抑制核苷酸合成可阻止细胞分裂。在类风湿性关节炎中，甲氨蝶呤多聚谷氨酸对AICART的抑制作用强于甲氨蝶呤本身。这种抑制作用导致AICART核苷酸的积累，进而抑制腺苷脱氨酶，导致细胞外三磷酸腺苷和腺苷的积累，刺激腺苷受体，从而发挥抗炎作用。甲氨蝶呤及其多聚谷氨酸代谢物可逆性地抑制二氢叶酸还原酶，该酶可将叶酸还原为四氢叶酸。四氢叶酸的生成受到抑制，从而限制了嘌呤合成所需的一碳片段的可用性，并阻碍了DNA合成和细胞增殖过程中脱氧尿苷单磷酸转化为胸苷单磷酸的过程。二氢叶酸还原酶对甲氨蝶呤的亲和力远高于对叶酸或二氢叶酸的亲和力；因此，即使同时服用高剂量叶酸，也无法逆转甲氨蝶呤的作用。亚叶酸钙是四氢叶酸的衍生物，如果在服用抗肿瘤药物后不久服用，可能会阻断甲氨蝶呤的作用。一项研究表明，甲氨蝶呤还会导致细胞内脱氧腺苷三磷酸（dATP）水平升高，而dATP被认为会抑制核糖核苷酸还原酶和多核苷酸连接酶（参与DNA合成和修复的酶）的活性。细胞增殖率高的组织，例如肿瘤、银屑病表皮、骨髓、胃肠道内壁、毛囊基质和胎儿细胞，对甲氨蝶呤的作用最为敏感。甲氨蝶呤具有免疫抑制活性，这可能部分归因于其对淋巴细胞增殖的抑制作用。该药物治疗类风湿性关节炎的作用机制尚未完全阐明，但推测的机制包括免疫抑制和/或抗炎作用。目前，多种改善病情抗风湿药（DMARDs）可用于类风湿关节炎（RA）的临床治疗。甲氨蝶呤（MTX）是叶酸和氨蝶呤的类似物，是目前最常用的DMARD，全球至少有50万RA患者正在服用。低剂量甲氨蝶呤（MTX）调节类风湿关节炎（RA）炎症的机制尚不明确。监测RA患者的MTX浓度似乎对治疗效果没有显著影响。两项荟萃分析表明，MTX具有最佳的疗效/毒性比之一。目前，它应该是大多数RA患者的首选DMARD。然而，相当一部分仅接受MTX单药治疗的患者未能达到最佳的疾病控制，因此出现了许多DMARD联合治疗方案。人们希望更积极地使用传统DMARD和生物制剂能够降低致残率并提高缓解率。类风湿关节炎 (RA) 的治疗是一个动态过程，需要在获益和风险之间取得微妙的平衡。即使有了新型生物制剂，甲氨蝶呤 (MTX) 仍然是标准参考药物，并在 RA 患者的治疗中继续发挥着重要作用。[2] 甲氨蝶呤已被广泛用于治疗类风湿关节炎 (RA)。甲氨蝶呤的作用机制复杂。作为一种叶酸类似物，甲氨蝶呤通过抑制嘌呤和嘧啶的合成发挥作用，这既解释了其在癌症治疗中的疗效，也解释了其某些毒性。近年来，许多研究集中于甲氨蝶呤通过腺苷介导的抗炎作用。甲氨蝶呤的一些毒性也与腺苷的释放有关。深入了解甲氨蝶呤的作用机制和毒性将有助于临床医生制定治疗方案并监测毒性反应。为此，本文将探讨甲氨蝶呤的药代动力学、作用机制、药物遗传学和毒性方面的最新进展。[1]甲氨蝶呤二钠是一种广泛使用的抗癌和免疫抑制剂。它已获准用于多种适应症，包括急性淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤、乳腺癌、类风湿性关节炎和银屑病。二钠盐是常用的肠外给药制剂。甲氨蝶呤仍然是化疗和自身免疫性疾病治疗的基石。它作为二氢叶酸还原酶（DHFR）抑制剂和抗叶酸药物的作用机制已被广泛研究，并可作为其他抗叶酸药物的原型。它被列入世界卫生组织基本药物标准清单。

C20H20N8NA2O5

498.41

498.135

C, 48.20; H, 4.04; N, 22.48; Na, 9.23; O, 16.05

7413-34-5

Methotrexate;59-05-2;Methotrexate hydrate;133073-73-1;Methotrexate monohydrate;6745-93-3

11329481

Light yellow to yellow solid powder

823℃

216.2

3

12

7

35

693

1

CN(CC1=CN=C2C(=N1)C(=NC(=N2)N)N)C3=CC=C(C=C3)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)[O-])C(=O)[O-].[Na+].[Na+]

DASQOOZCTWOQPA-GXKRWWSZSA-L

InChI=1S/C20H22N8O5.2Na/c1-28(9-11-8-23-17-15(24-11)16(21)26-20(22)27-17)12-4-2-10(3-5-12)18(31)25-13(19(32)33)6-7-14(29)30;;/h2-5,8,13H,6-7,9H2,1H3,(H,25,31)(H,29,30)(H,32,33)(H4,21,22,23,26,27);;/q;2*+1/p-2/t13-;;/m0../s1

disodium;(2S)-2-[[4-[(2,4-diaminopteridin-6-yl)methyl-methylamino]benzoyl]amino]pentanedioate

Methotrexate disodium salt; 7413-34-5; methotrexate disodium; METHOTREXATE SODIUM; Sodium methotrexate; Disodium methotrexate; MTX disodium; Amethopterin sodium;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

H2O : ~50 mg/mL (~100.32 mM)
DMSO : ~5 mg/mL (~10.03 mM)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。