| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
mGlu7
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| 体外研究 (In Vitro) |
在共表达大鼠 mGluR7 和 Gα15 的中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞中，MMPIP 减少 L-(+)-2-amino-4-磷酸丁酸 (L-AP4；0.5 mM) 诱导的细胞内 Ca2+ 动员 (IC550=26 nM) [1 ]。在表达大鼠 mGluR7 (IC50 220 nM) 的 CHO 细胞中，MMPIP 可减少 L-AP4 诱导的毛喉素刺激的 cAMP 积聚抑制 [1]。此外，MMPIP 可以抵消 CHO-人 mGluR7/Gα15 中 L-AP4 介导的 cAMP 积累抑制，IC50 为 610 nM [1]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
MMPIP (10 mg/kg) 显着增加了前脉冲引起的对声惊吓反应的抑制（高达对照的 137%），并降低了声惊吓反应的幅度 [2]。通过提高选择准确性，MMPIP (10 mg/kg) 减轻了 MK-801 (0.1 mg/kg) 引起的认知障碍 [2]。小鼠腹腔注射10 mg/kg扎米芬那新后，消除半衰期很短（血浆中为1.16小时，脑中为1.75小时）[2]。
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| 酶活实验 |
发现了新型异恶唑吡啶酮衍生物，它们是代谢型谷氨酸受体（mGluR）7拮抗剂，并对其进行了药理学表征。通过随机筛选鉴定了5-甲基-3,6-二苯基异恶唑并[4,5-c]吡啶-4（5H）-酮（MDIP），并通过化学改性MDIP制备了6-（4-甲氧基苯基）-5-甲基-3-吡啶-4-基异恶唑并-4,5-c]嘧啶-4（5H）-酮。MDIP和MMPIP抑制了L-（+）-2-氨基-4-膦酰基丁酸（L-AP4）诱导的中国仓鼠卵巢（CHO）细胞内Ca2+动员，该细胞共表达大鼠mGluR7和Galpha（15）（IC50=20和26 nM）。MMPIP存在时，激动剂浓度-反应曲线中的最大反应降低，其拮抗作用是可逆的。MMPIP不能取代与mGluR7结合的[3H]（2S）-2-氨基-2-[（1S，2S）-2-羧基环丙-1-基]-3-（黄原-9-基）丙酸（LY341495）。这些结果表明，这些异恶唑吡啶酮衍生物是变构拮抗剂。在表达大鼠mGluR7的CHO细胞中，MDIP和MMPIP抑制了l-AP4诱导的对毛喉素刺激的cAMP积累的抑制（IC50=99和220 nM）。在与Galpha共表达人mGluR7的CHO细胞中（15），MDIP和MMPIP也抑制了l-AP4诱导的cAMP反应。在cAMP测定中，MMPIP的最大抑制程度高于MDIP。MMPIP能够拮抗变构激动剂N，N'-二苄基乙烷-1,2-二胺二盐酸盐（AMN082）诱导的cAMP积累抑制。在没有这些激动剂的情况下，MMPIP导致表达mGluR7的CHO细胞中毛喉素刺激的cAMP水平进一步升高，而竞争性拮抗剂LY341495则没有。这一结果表明MMPIP具有反向激动活性。MMPIP的内在活性对百日咳毒素敏感，依赖mGluR7。浓度至少为1微M的MMPIP对mGluR1、mGluR2、mGluR3、mGluR4、mGluR5和mGluR8没有显著影响。MMPIP是第一个变构mGluR7选择性拮抗剂，可能可用作阐明mGluR7对中枢神经系统功能作用的药理学工具[1]。
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| 细胞实验 |
cAMP[2]
如前所述（Chruścicka等人，2015），用重组细胞系进行了均匀时间分辨荧光（HTRF）cAMP动态2测定。简而言之，收集稳定表达mGlu7受体的HEK 293 T-REx细胞，并将其悬浮在Hanks HEPES缓冲液中。将细胞悬浮液加入含有5μM毛喉素（终浓度）的化合物溶液中。在37°C下孵育5分钟后，加入裂解缓冲液中的5μl cAMP-d2缀合物，并通过自动移液系统与10μl细胞悬浮液混合。接下来，加入5μl抗cAMP隐窝结合物，1小时后读取620和665nm处的荧光。结果显示为665nm与620nm的比值乘以104。检测到的信号与样品中cAMP的浓度成反比。ADX71743或MMPIP的拮抗活性以其EC80浓度下L-Glu活性抑制的百分比表示。使用Prism 7.03版分析ADX71743或MMPIP的剂量反应数据。每个实验进行三次（n=3），每个数据点一式三份。 |
| 动物实验 |
大多数行为学测试使用雄性瑞士白化小鼠（20–25 g）。空间延迟交替测试和声惊反射的PPI测试使用雄性Wistar大鼠（200–250 g）。电生理学研究使用雄性C57BL/6J野生型（WT）和mGlu7基因敲除（KO）小鼠。动物饲养于温度为21–22°C、光暗周期为12:12的房间内，自由摄取食物和水。每只动物仅使用一次，未进行多次实验。[2]
\nMMPIP配制于0.5%甲基纤维素溶液中[2] \n药代动力学研究[2] \n下述方法已成功应用于腹腔注射ADX71743和MMPIP在瑞士白化小鼠体内的药代动力学研究。将化合物 ADX71743 和 MMPIP 以 10 mg/kg 的剂量腹腔注射给小鼠。分别在 0.25、0.50、1.0、2.0、4.0 和 6.0 小时，对小鼠进行麻醉，并从门静脉采集血液至含有 5% EDTA 的试管中。随后用 0.1M PBS 灌注小鼠以清除体内残留血液，并取出脑组织进行分析。血液在 4°C 下以 2000 rpm 离心 10 分钟，收集血浆并冷冻于 -80°C 以备后续分析。\n[2] \n所有药物处理动物的血浆和组织样本在使用前均在室温下解冻。标准样本制备流程：将 200 μl 乙腈加入含有 50 μl 待测血浆样本或组织匀浆的 Eppendorf 管中。样品在25°C、1400 rpm的混合器上混合5分钟。然后将试管在4°C下以2000 × g离心15分钟。将每个上清液约180 μl转移至孔板中。最后，将每个样品注入色谱柱。 \n\nMK-801诱导的多动症[2] \n如Woźniak等人（2016b）所述，使用OPTO-M3运动活动笼单独记录每只动物的运动活动，该笼子与兼容的PC活动系统在线连接。每个笼子（13 cm × 23 cm × 15 cm）周围环绕着光电管光束阵列。这些光束的中断导致水平活动，定义为行走计数。将小鼠放入运动活动笼中适应 30 分钟。然后，腹腔注射 MMPIP（10、15 mg/kg）或 ADX71743（5、10 mg/kg）。两种药物均在注射 MK-801（0.35 mg/kg，腹腔注射）前 30 分钟给予。在给予 MK-801 后立即测量 60 分钟的运动活性。 \n\n\n\n \n \n\n查看更多\n\nDOI 诱导的头部抽搐[2] \n\n改良强迫游泳试验[2] \n改良强迫游泳试验按照Noda等人（Noda et al., 1995, 1997; Wierońska et al., 2015a; Woźniak et al., 2016a）提出的方法进行。游泳试验在一个装有11厘米深水的玻璃圆筒（高20厘米，内径15厘米）中进行，水温维持在23-24°C。适应期结束后，动物进行第一次游泳试验，测量3分钟内的不动时间（T1）。第二天，开始慢性（13天）MK-801给药（0.4毫克/千克，腹腔注射）。休息一天后，在实验的第15天，进行第二次游泳测试，并再次测量3分钟测试期间的静止时间（T2）。T2与T1的差值作为实验结果。在T2测试前30分钟，分别腹腔注射MMPIP（1、5和15 mg/kg）或ADX71743（5、10和15 mg/kg）。社交互动测试[2] 该方法参考了de Moura Linck等人（2008）和Woźniak等人（2016b）的研究。经过2天的适应性训练（每天10分钟）后，将一对小鼠放入开放场中5分钟。两只小鼠之间的社交互动程度是根据它们参与社交行为（例如生殖器探索、嗅闻、追逐和互相打斗）的总时间来确定的。同时还测量了社交事件的总数。测试过程被录像，并由训练有素的观察员观看。在测试前30分钟，分别腹腔注射MMPIP（5、10和20 mg/kg）或ADX71743（1、5和15 mg/kg），然后腹腔注射MK-801（0.3 mg/kg）。新物体识别测试[2] 该实验根据Nilsson等人（2007）的方法进行，并稍作修改（Woźniak等人，2016b）。经过2天的适应期（每天10分钟）后，进行训练试验，小鼠被允许探索两个相同的物体5分钟。约1小时后，进行测试试验，其中一个熟悉的物体被替换为一个新物体。随后，小鼠被允许探索这些物体5分钟。在MK-801（0.3 mg/kg，腹腔注射）给药前30分钟，分别腹腔注射MMPIP（5、10和15 mg/kg）和ADX71743（1、5和10 mg/kg）。MK-801在训练试验前30分钟给药。由训练有素的观察员测量小鼠探索（即嗅闻或触摸）熟悉物体（Tfamiliar）或新奇物体（Tnovel）的时间，然后计算每只小鼠的识别指数：[(Tnovel - Tfamiliar)/(Tfamiliar + Tnovel)] × 100。<小时>\n\n转棒测试[2] \n小鼠连续3天以18 rpm的速度进行训练，每天一次，每次3分钟。如果小鼠在适应期内跌落，则将其放回装置上。第二天进行正式测试。将小鼠放置在以12 rpm速度旋转的装置（小鼠转棒NG，UGO BASILE SRL）上后，启动加速模式（最大速度24 rpm）。在3分钟的测试过程中测量小鼠跌落的潜伏期。小鼠在测试前30分钟腹腔注射MMPIP（5、15和30 mg/kg）或ADX71743（5、15和30 mg/kg）。 \n\n空间延迟交替测试[2] \n空间延迟交替测试采用木制T型迷宫进行，方法参照Sławińska等人（2013）和Wierońska等人（2015b）的研究。\n\n在为期3天的适应阶段，动物被允许在迷宫中自由探索10分钟。接下来的2天，大鼠被限制在迷宫的两个末端臂之一，并被允许每天两次在该臂中饮用10%的蔗糖溶液，每次10分钟。第二天，开始为期2周的训练阶段。动物每天进行一次训练，训练包括一次强制试验（即关闭其中一个末端臂）和十次自由选择试验。在自由选择试验中，动物被放置在起始臂，当闸门升起后，动物可以选择进入其中一个末端臂。做出选择后，大鼠被放回起始臂，并在那里停留10秒。如果选择的末端臂与之前访问过的末端臂相反，则计为一次正确反应，并将动物关入隔间，允许其饮用蔗糖溶液5秒。如果选择错误，则轻轻地将动物放回起始臂。训练阶段持续进行，直到动物连续两天在训练中均获得7次正确反应为止。\n\n在测试当天，给动物注射MMPIP和/或MK-801，并重复上述10次试验。在给予 MK-801 (0.1 mg/kg) 前 30 分钟，以 5 或 10 mg/kg 的剂量给予 MMPIP。MK-801 注射后 30 分钟开始测试。 \n\n前脉冲抑制[2] \n该实验步骤参照 Czyrak 等人 (2003) 的方法进行。实验前一天，对动物进行一次惊吓反射测试，该测试包含两次试验，每次试验重复 20 次。第一次试验中，呈现一个 120 dB、40 ms 的脉冲；第二次试验中，该脉冲之前呈现一个 75 dB、20 ms 的前脉冲。实验当天，动物在 65 dB 的背景白噪声下适应 5 分钟（该噪声贯穿整个测试过程），之后按照上述方法进行惊吓反射测试。惊吓反应幅度定义为记录窗口内检测到的最大力与刺激开始前瞬间测得的力之差（阈值设定为 10 g）。对于每只动物，每种试验类型的幅度分别取平均值。PPI 的计算方法为：脉冲 (P) 的幅度与预脉冲加脉冲 (PP+P) 的幅度之差，除以单独的脉冲幅度 [([P - (PP + P)]/P)×100].\n\n在习惯化阶段开始前 30 分钟，分别给予 MMPIP（5、10 和 15 mg/kg）和 ADX71743（2.5、5 和 10 mg/kg）。MK-801（0.3 mg/kg）在习惯化阶段开始前 30 分钟给予。\n\n |
| 药代性质 (ADME/PK) |
表11显示了小鼠血浆和脑组织中MMPIP的浓度。注射ADX71743后0.25小时，以及MMPIP给药后0.5小时，脑组织和血浆中均出现Cmax。图33比较了给药后特定时间点脑组织中ADX71743和MMPIP的浓度。[2]
表22中的数据显示，ADX71743和MMPIP具有不同的细胞色素P450抑制谱。对于两种NAM mGluR7标准品，在1A2、2B6、2C9和2D6亚型中均观察到较弱的细胞色素P450抑制作用（IC50 > 10μM）。 ADX71743 标准品对 2C19 亚型表现出轻度抑制作用（3.3 < IC50 < 10），而 MMPIP 对 3A4 亚型和 2C19 亚型均表现出强抑制作用（IC50 < 1.1）。[2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
关于mGlu7受体负性变构调节剂（NAMs）/拮抗剂的抗精神病样活性数据有限。目前已知的该受体配体仅有MMPIP和ADX71743。在本研究中，我们使用了稳定表达mGlu7受体的细胞系，结果表明，这两种化合物均能剂量依赖性地增强福斯克林（forskolin）在T-REx 293细胞中升高的cAMP浓度，显示出其反向激动剂特性。随后，我们进行了药代动力学研究。两种化合物均以10 mg/kg的剂量腹腔注射（ip），给药后0.25-0.5小时达到血药浓度峰值（Cmax），随后迅速下降。ADX71743在给药2小时后几乎检测不到，而MMPIP的浓度仍可检测到，表明MMPIP的浓度更为稳定。最后，我们研究了这两种mGlu7受体NAMs在精神分裂症动物模型中的作用。本研究进行了抗精神病药物研发中常用的行为学测试。两种受试化合物均呈剂量依赖性地抑制了MK-801诱导的活动过度（MMPIP剂量为15 mg/kg；ADX剂量为5和15 mg/kg）和DOI诱导的头部抽搐（MMPIP剂量为5、10和15 mg/kg；ADX剂量为2.5、5和10 mg/kg）。此外，在新物体识别测试中也观察到了相同的效果，MMPIP（5、10和15 mg/kg）和ADX71743（1、5和15 mg/kg）均能逆转MK-801诱导的认知障碍。在社交互动测试中，仅ADX71743（5和15 mg/kg）表现出抗精神病活性。 ADX71743 以 2.5 mg/kg 的剂量逆转了 MK-801 诱导的前脉冲抑制障碍，而 MMPIP 以 10 mg/kg 的剂量逆转了 MK-801 诱导的空间延迟交替障碍。本研究表明，mGlu7 受体可能被视为抗精神病药物的潜在靶点，但由于可用的配体数量有限，仍需开展更多研究。[2]
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| 分子式 |
C19H16CLN3O3
|
|---|---|
| 分子量 |
369.80200
|
| 精确质量 |
369.088
|
| CAS号 |
479077-02-6
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| 相关CAS号 |
MMPIP hydrochloride;1215566-78-1
|
| PubChem CID |
9945530
|
| 外观&性状 |
Light yellow to green yellow solid powder
|
| LogP |
4.066
|
| tPSA |
70.15
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
25
|
| 分子复杂度/Complexity |
524
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
PDWYBOZNEVALOV-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C19H15N3O3/c1-22-15(12-3-5-14(24-2)6-4-12)11-16-17(19(22)23)18(21-25-16)13-7-9-20-10-8-13/h3-11H,1-2H3
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| 化学名 |
6-(4-methoxyphenyl)-5-methyl-3-pyridin-4-yl-[1,2]oxazolo[4,5-c]pyridin-4-one
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| 别名 |
MMPIP; CHEMBL593489; 6-(4-methoxyphenyl)-5-methyl-3-pyridin-4-yl-[1,2]oxazolo[4,5-c]pyridin-4-one; 6-(4-methoxyphenyl)-5-methyl-3-(pyridin-4-yl)isoxazolo[4,5-c]pyridin-4(5H)-one; GTPL3341; SCHEMBL3014586; MMPIP Hydrochloride
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7042 mL | 13.5208 mL | 27.0416 mL | |
| 5 mM | 0.5408 mL | 2.7042 mL | 5.4083 mL | |
| 10 mM | 0.2704 mL | 1.3521 mL | 2.7042 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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