| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
P2Y1 Receptor (IC50 = 51.6 nM)
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| 体外研究 (In Vitro) |
当添加2-MeSADP时，MRS2279抑制火鸡红细胞膜中磷酸肌醇的产生，pKb值为7.75[2]。在1321N1人星形细胞瘤细胞中，MRS2279对人P2Y1受体表现出高亲和力竞争性拮抗作用，pKb值为8.10[2]。人 P2Y2、P2Y4、P2Y6 和 P2Y11 受体同源激动剂激活不受 MRS2279 的影响，但它对 P2Y1 受体有明显的影响 [2]。尚未表明 MRS2279 可以通过血小板 Gi/腺苷酸环化酶连接的 P2Y 受体阻碍 ADP，从而防止环化 AMP 的积聚 [2]。
MRS2279以竞争动力学拮抗2MeSADP刺激的火鸡红细胞膜中肌醇磷酸的形成（pKB=7.75）。在1321N1人星形细胞瘤细胞中稳定表达的人P2Y1受体（pKB=8.10）上也观察到MRS2279的高亲和力竞争性拮抗作用。拮抗作用对P2Y1受体具有特异性，因为MRS2279对其同源激动剂激活人P2Y2、P2Y4、P2Y6或P2Y11受体没有影响。 MRS2279也没有阻断ADP通过血小板的Gi/腺苷酸环化酶连接的P2Y受体抑制环AMP积聚的能力。 相比之下，已知P2Y1受体在ADP诱导的血小板聚集过程中是必需的，MRS2279竞争性抑制ADP促进的血小板聚集，其明显的亲和力（pKB=8.05）与1321N1细胞中异源表达的人P2Y1受体相似。 综上所述，这些结果说明了非核苷酸分子对P2Y1受体的选择性高亲和力拮抗作用，这应被证明对各种组织中该受体的药理学描述有用[2]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在接受高压通气的小鼠中，MRS2279（2 μL，1 nM；脑室内注射；机械通气前 30 分钟）可以减轻机械通气带来的脑损伤[3]。
抑制P2Y1受体激活可改善机械通气诱导的小鼠脑损伤[3] 为了验证机械通气是否通过激活小鼠海马中的P2Y1受体诱导脑损伤，实验小鼠在机械通气前30分钟侧脑室注射P2Y1拮抗剂MRS2279，同时注射ACSF作为对照（图5a）。小鼠的潜伏期较短（HVT组：63.61±4.49秒；HVT+ACSF组：64.25±5.81秒，HVT+MRS2279组：37.17±3.50秒），游泳距离较短（HVT组：756.53±30.03厘米；HVT+ACSF组：762.83±38.06厘米，HVT+MRS2279组：559.0±37.63厘米），在目标象限停留的时间较长（HVT组合：10.45±0.72秒；HVT/ACSF组合：10.48±0.67秒，HVT/MRS2279组合：13.63±0.54秒）抑制P2Y1受体激活后（p<0.05，图5b）。同时，神经元数量增加（p<0.05，图5c），而海马中的dysbinding-1蛋白水平降低（p<0.05，见图5d），海马中TNF-α、IL-1β、IL-6和DA的水平均降低（p<0.05），见图5e。总的来说，我们的研究结果表明，抑制P2Y1受体的激活可以减轻机械通气引起的小鼠脑损伤。 阻断DA受体减轻了机械通气通过P2Y1受体激活介导的DA释放增加引起的小鼠脑损伤[3] 同样，为了验证P2Y1受体激活是否通过增加DA表达模式诱导脑损伤DA神经传导，实验小鼠在机械通气前30分钟腹腔注射DA受体拮抗剂氟哌啶醇（图5a）。与MRS2279的功能相似，注射氟哌啶醇的小鼠在机械通气后的认知能力有了显著改善（p<0.05，图6a），潜伏期更短（HVT组：63.61±4.49秒；HVT+盐水组：62.71±5.54秒，HVT+氟哌啶醇组：31.53±4.82秒），游泳距离更短（HVT-组：756.53±30.03厘米；HVT+saline组：753.46±34.13厘米，HVT+halopidolization组：565.85±45.98厘米），在目标象限停留的时间更长（HVT+10.45±0.72秒）；HVT+生理盐水组：10.36±0.63秒，HVT+氟哌啶醇组：12.34±0.67秒）。同时，海马神经元数量增加（p<0.05，图6b），DA和dysbinding-1蛋白水平没有显著变化（p>0.05，图6c-d），而TNF-α、IL-1β和IL-6水平降低（p<0.05，表6d）。总的来说，我们的研究结果表明，抑制DA受体可以减轻由机械通气通过P2Y1受体激活介导的DA释放增加引起的小鼠脑损伤。 |
| 酶活实验 |
洗涤血小板的制备[2]
静脉血取自健康志愿者，并与最终体积的20%的酸/柠檬酸盐/葡萄糖混合。将血液离心180×g 20分钟，取出富含血小板的血浆，在1 mM阿司匹林的存在下孵育1小时。在1000×g下离心血小板，并将其重新悬浮在含有0.2%BSA和0.05 U ml−1 apyrase的HEPES缓冲Tyrode溶液中，密度为2×108个血小板ml−l。 人血小板中环AMP积聚的测定[2] 如前所述测量环AMP积累（Meeker&Harden，1982）。简而言之，从50毫升血液中分离出的血小板在37°C下用1μCi ml−1[3H]-腺嘌呤标记1小时。然后洗涤血小板并重新悬浮在（mM）：NaCl 137中，KCl 2.7、MgCl2 1、NaH2PO4 3、葡萄糖5和HEPES 10，pH 7.4。在200μM 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤存在下孵育10分钟，用10%三氯乙酸停止反应。在Dowex和氧化铝柱上色谱后定量[3H]-环AMP。 血小板聚集[2] 使用四通道Chrono-Log聚集仪测量血小板聚集。简而言之，在37°C下搅拌500μl洗涤过的血小板，补充2 mM CaCl2和1 mg ml-1纤维蛋白原，加入指定浓度的ADP，并在8分钟的孵育过程中监测聚集情况。通过在添加ADP之前将血小板与P2Y1拮抗剂预孵育2分钟，研究了MRS2279的拮抗作用。使用500μl HEPES缓冲Tyrode溶液设定聚集反应的基线。 |
| 细胞实验 |
P2Y1受体促进火鸡红细胞膜肌醇脂质水解的检测[2]
如我们所述，在火鸡红细胞膜中研究了P2Y1受体促进的磷脂酶C激活（Boyer等人，19891996a）。简而言之，红细胞在37°C、95%空气/5%CO2的加湿气氛中，在含有0.5 mCi 2-[3H]-肌醇（20 Ci/mmol）的无肌醇培养基中孵育18-24小时。制备膜，并在25μl 3H-肌醇标记的膜（约175μg蛋白质，每次测定200-500000 c.p.m.）在含有（mM）：CaCl2 0.424、MgSO4 0.91、EGTA 2、KCl 115、KH2PO4 5和HEPES 10的培养基中，pH 7.0。测定（最终体积200μl）含有1μm GTPγS和指定浓度的核苷酸类似物。将膜在30°C下孵育5分钟，通过阴离子交换色谱法定量总[3H]-肌醇磷酸盐。肌醇磷酸盐积累的典型值约为200-300 c.p.m.（基础），2000-3000 c.p.m.（仅1μm GTPγS）和15000-20000 c.p.m。三次重复值的范围在平均值的10%以内。 表达P2Y受体的1321N1细胞中肌醇磷酸积累的测定[2] 如前所述，使用逆转录病毒载体在1321N1人星形细胞瘤细胞中稳定表达P2Y1、P2Y2、P2Y4、P2Y6或P2Y11受体（Schachter等人，1996）。用[3H]-肌醇标记细胞过夜，在10mM LiCl和每种受体的同源激动剂存在下孵育10分钟后，定量激动剂促进的[3H]--肌醇磷酸积累。使用的激动剂是2MeSADP或ADP，用于表达P2Y1受体的细胞，UTP，UTP用于表达P2Y4受体的细胞、UDP用于表达P2YH受体的细胞和ATP用于表达P2Y11受体的细胞。在每种受体存在最大有效浓度的同源激动剂的情况下，肌醇磷酸盐积累的典型值为基础500-700 c.p.m.和4000-10000 c.p.m。三次重复值的范围在平均值的10%以内。 |
| 动物实验 |
8-12周龄的C57BL6小鼠饲养于特定病原体清除级动物房内，自由摄食饮水，光照/黑暗周期为12/12小时。自主呼吸的小鼠（假手术组）接受与其他组小鼠相同的镇静：低压通气组（LVT组）[吸气峰压（PIP）12 cm H2O；呼气末正压2 cm H2O；呼吸频率100次/分钟]或高压通气组（HVT组）（PIP 20 cm H2O；呼气末正压0 cm H2O；呼吸频率50次/分钟）持续90分钟，随后进行一系列持续330分钟的高压通气长期通气实验。随机选取高压通气小鼠，在机械通气前30分钟，腹腔注射多巴胺受体拮抗剂氟哌啶醇（0.5 mg/kg，溶于0.2 mL生理盐水），对照组注射等量生理盐水；或在机械通气前30分钟，脑室内（以颅缝为参考点，坐标：前后方向0.4 mm，左右方向0.95 mm）注射2 μL P2Y1受体拮抗剂MRS2279（1 nmol，纯度96%；Tocris Bioscience，英国阿宾顿），对照组注射等量人工脑脊液（ACSF）。将动物随机分为以下几组，每组12只（共96只）：1. 假手术组，自主呼吸；2. 低潮气量通气组； 3. HVT组，采用高潮气量通气；4. 长期通气组，在高潮气量下进行330分钟机械通气；5. HVT + ACSF组，在脑室内注射ACSF 30分钟后进行高潮气量机械通气；6. HVT + MRS2279组，在侧脑室注射MRS2279 30分钟后进行高潮气量机械通气；7. HVT + 生理盐水组，在机械通气前30分钟腹腔注射生理盐水；8. HVT + 氟哌啶醇组，在机械通气前30分钟腹腔注射氟哌啶醇。所有接受机械通气的实验小鼠在完成Morris水迷宫实验后均被安乐死（腹腔注射戊巴比妥钠200 mg/kg）。采集小鼠的海马和肺组织用于后续实验。每组随机选取 6 只小鼠的组织进行病理学检查，其余小鼠的组织进行匀浆处理，用于蛋白质表达检测。[3]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
我们研究了腺苷-3',5'-二磷酸酯作为P2Y(1)受体拮抗剂的构效关系，揭示了N(6)-甲基的增强效力作用以及核糖部分取代的可能性（Nandanan等，J. Med. Chem. 1999, 42, 1625-1638）。我们引入了受限的碳环（以探究糖环褶皱的作用）、与腺嘌呤部分连接的非糖苷键以及磷酸基团的转移。通过测定每种类似物刺激火鸡红细胞膜中磷脂酶C的能力（激动剂效应）以及抑制30 nM 2-甲基硫代腺苷-5'-二磷酸酯诱导的磷脂酶C刺激的能力（拮抗剂效应），表征了其在P2Y(1)受体上的生物活性。在某些情况下，引入N(6)-甲基基团可将纯激动剂转化为拮抗剂。一种碳环N(6)-甲基-2'-脱氧腺苷二磷酸类似物是纯P2Y(1)受体拮抗剂，其效力与核糖类似物(MRS 2179)相当。在一系列环约束的甲氧基碳衍生物中，稠合的环丙烷部分将核苷的假糖环限制为假旋转循环中定义的北式(N)或南式(S)构象，其中6-NH(2) (N)-类似物是纯激动剂，EC(50)为155 nM，其效力比相应的(S)-异构体高86倍。 2-氯-N(6)-甲基-(N)-甲氧基碳类似物是IC50为51.6 nM的拮抗剂。因此，核糖环的(N)构象似乎在P2Y(1)受体的识别中更占优势。环丁基类似物是IC50为805 nM的拮抗剂，而含吗啉环的类似物几乎没有活性。脱水己糖醇环修饰的二磷酸衍生物作为激动剂(6-NH2)或拮抗剂(N(6)-甲基)表现出微摩尔级的效力。强效拮抗剂能量最小化结构的分子模型表明，两个磷酸基团可能占据共同区域。将(N)-和(S)-甲氧基卡巴激动剂类似物对接至先前报道的P2Y(1)受体模型的假定结合位点。[1]机械通气可诱发肺损伤，并因肺-脑相互作用而加重脑损伤。本研究旨在探讨机械通气诱导肺-脑相互作用的机制，并为呼吸机相关性脑损伤的治疗提供理论指导。实验小鼠分为自主呼吸组和机械通气组，并在通气前分别注射多巴胺(DA)受体拮抗剂氟哌啶醇或P2Y1受体拮抗剂MRS2279。采用肺上皮细胞MLE-12、海马神经元细胞HT-22进行体外实验。检测小鼠的识别功能和肺损伤情况，并观察海马神经元的状态和浓度。我们检测了多种炎症因子、多巴胺（DA）、三磷酸腺苷（ATP）、P2Y1受体和dysbindin-1的水平。机械通气可诱导小鼠肺和脑损伤，表现为支气管肺泡灌洗液和海马中炎症因子水平升高、逃避潜伏期延长、目标象限游泳距离和时间减少，以及海马神经元密度降低。我们的结果显示，机械通气小鼠和拉伸的MLE-12细胞中ATP和P2Y1受体的表达均升高。机械通气小鼠和经P2Y1受体激活剂MRS2365处理的HT-22细胞中DA和dysbindin-1的水平也升高。海马中P2Y1受体的失活或DA受体的阻断可减轻机械通气诱导的小鼠脑损伤。总之，本研究表明，机械通气引起的肺损伤会通过增加 ATP 生成、激活 P2Y1 受体，从而促进 DA 释放，加剧小鼠的脑损伤。[3]
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| 分子式 |
C13H20CLN5O8P2
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|---|---|
| 分子量 |
469.71132
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| 精确质量 |
469.032
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| CAS号 |
367909-40-8
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| 相关CAS号 |
MRS2279 diammonium;2387505-47-5
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| PubChem CID |
9847505
|
| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| LogP |
1.132
|
| tPSA |
208.77
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
5
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
12
|
| 可旋转键数目(RBC) |
7
|
| 重原子数目 |
29
|
| 分子复杂度/Complexity |
740
|
| 定义原子立体中心数目 |
4
|
| SMILES |
CNC1C2N=CN([C@@H]3[C@H]4C[C@@]4(COP(O)(O)=O)[C@@H](OP(O)(O)=O)C3)C=2N=C(Cl)N=1
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| InChi Key |
LPZJKPSGEADHTQ-HLTSFMKQSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C13H20ClN5O8P2/c1-15-11-10-12(18-13(14)17-11)19(6-16-10)4-7-2-8(5-26-28(20,21)22)9(3-7)27-29(23,24)25/h6-9H,2-5H2,1H3,(H,15,17,18)(H2,20,21,22)(H2,23,24,25)/t7-,8-,9+/m1/s1
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| 化学名 |
[(1S,2R,4R)-4-[(2-chloro-6-methylaminopurin-9-yl)methyl]-2-(phosphonooxymethyl)cyclopentyl] dihydrogen phosphate
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| 别名 |
MRS2279 MRS-2279 MRS 2279.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1290 mL | 10.6449 mL | 21.2897 mL | |
| 5 mM | 0.4258 mL | 2.1290 mL | 4.2579 mL | |
| 10 mM | 0.2129 mL | 1.0645 mL | 2.1290 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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