| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
SE/squalene epoxidase
Squalene epoxidase (inhibitor) |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在 MIN6 细胞中，NB598 (10 μM) 使总胆固醇水平降低 36±7%。在 PM、ER 和 SG 中，NB598 分别显着降低胆固醇 49±2%、46±7% 和 48±2%。在基础（1 mM 葡萄糖）和葡萄糖刺激（16.7 mM 葡萄糖）条件下，NB598 剂量依赖性地抑制胰岛素分泌。当浓度高达 10 μM 时，NB598 会增加电流失活，但对峰值外向 KV 电流或激活的电压依赖性没有影响 [1]。 NB-598 (10 μM) 抑制[14C]乙酸酯合成甾醇和甾醇酯，而其他脂质如磷脂 (PL)、游离脂肪酸 (FFA) 和三酰甘油 (TG) 不受影响。当不存在外源脂质体胆固醇时，NB-598 使 ACAT 活性降低 31%。即使脂质体胆固醇浓度为 600 PM，NB-598 也会导致 ACAT 活性降低 22%[2]。 NB-598 抑制 HepG2 细胞向培养基中分泌三酰甘油和胆固醇 [3]。
用 10 μM NB-598 hydrochloride 处理 MIN6 细胞、小鼠胰岛和人胰岛 48 小时，能显著降低总胆固醇水平，降幅分别为 36±7%、40±16% 和 52±1%。在 MIN6 细胞的亚细胞区室（质膜、内质网和胰岛素分泌颗粒）中也观察到类似的胆固醇含量降低（46-49%）。[1] 在小鼠胰腺胰岛中，NB-598 hydrochloride 剂量依赖性地抑制基础（1 mM 葡萄糖）和葡萄糖刺激（16.7 mM 葡萄糖）的胰岛素分泌。在 10 μM 浓度下，它使基础分泌降低 51%，葡萄糖刺激的分泌降低 75%。通过放射免疫分析和电镜观察证实，这种抑制并非由于总胰岛素含量或颗粒形态的改变。用可溶性胆固醇补充胆固醇后，受损的分泌得到部分逆转（葡萄糖刺激的分泌恢复 57%）。[1] 对小鼠胰腺β细胞的全细胞膜片钳记录显示，用 NB-598 hydrochloride（2 和 10 μM，预处理 48 小时）可引起电压门控钙离子（Cav）通道电流的剂量依赖性降低。+10 mV 时的峰值电流从对照的 -13.3 pA/pF 降至 -3.7 pA/pF（2 μM）和 -2.1 pA/pF（10 μM）。这种抑制可被胆固醇补充所逆转。[1] 在相同的β细胞中，NB-598 hydrochloride（最高 10 μM）不影响峰值 Kv 电流密度或激活电压依赖性，但显著增加了 Kv 通道失活的速率和程度。在 0 mV 时，非失活电流成分从对照的 45% 降至处理细胞的 11%（10 μM）。此效应也可被胆固醇补充逆转。KATP 通道电流密度在 -140 mV 时也降低了 57%。[1] 通过光解释放笼锁钙离子（以绕过 Cav 通道）后测量膜电容增加，发现在 NB-598 hydrochloride 处理的β细胞中，胞吐作用显著受损。与对照相比，胞吐的慢爆发成分（513 vs 158 fF）和持续成分（365 vs 192 fF）的振幅均显著降低。[1] 蛋白质印迹分析表明，NB-598 hydrochloride 处理并未改变 MIN6 细胞中 Cav1.2、Kv2.1、syntaxin 1A、SNAP-25 或 VAMP-2 的总蛋白表达。然而，蔗糖梯度离心显示，这些离子通道和 SNARE 蛋白在药物处理后从富含胆固醇的膜筏组分中重新分布出来。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
发现NB-598，（E）N-乙基-N-（6,6-二甲基-2-庚烯-4-炔基）-3-[（3,3'-联噻吩-5-基）甲氧基]苯甲胺以竞争方式抑制人微粒体角鲨烯环氧化酶（来自Hep G2细胞）。NB-598剂量依赖性地抑制Hep G2细胞中[14C]乙酸酯的胆固醇合成，并增加角鲨烯的细胞内放射性。单次口服NB-598可抑制大鼠[14C]醋酸盐合成胆固醇。此外，对狗多次口服NB-598可降低血清总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平，并提高血清角鲨烯水平。治疗终止后，血清胆固醇降低和角鲨烯水平升高恢复到对照值[4]。
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| 酶活实验 |
NB-598是角鲨烯环氧化酶的特异性抑制剂，抑制了HepG2细胞向培养基中分泌胆固醇和三酰甘油。L-654969是3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A（HMG-CoA）还原酶的抑制剂，与NB-598一样有效地抑制胆固醇的分泌，但不抑制三酰甘油的分泌。这两种化合物几乎同样降低了细胞内胆固醇含量，两种化合物都没有降低细胞内三酰甘油含量。NB-598抑制脂质分泌与载脂蛋白（apo）B分泌到培养基中的显著减少有关。因此，NB-598对脂质分泌的抑制可能是由于富含三酰甘油的脂蛋白颗粒数量的减少造成的。相比之下，L-654969对胆固醇分泌的抑制可能是由于脂蛋白脂质组成的调节，因为这种药物没有减少载脂蛋白B或三酰甘油的分泌。载脂蛋白A-I的分泌不受NB-598或L-654969的影响。使用[35S]蛋氨酸的脉冲追踪研究表明，NB-598对载脂蛋白B分泌的抑制取决于对载脂素B细胞内降解的增强。这些结果表明，HepG2细胞中载脂蛋白B的分泌不是由单独的脂质合成调节的，并表明NB-598的降血脂作用机制涉及抑制肝脏中富含三酰甘油的脂蛋白分泌以及抑制肝脏中的胆固醇合成[3]。
通过 RT-PCR 证实了角鲨烯环氧酶 mRNA 在胰腺β细胞中的表达。从 INS-1 细胞、MIN6 细胞以及大鼠、小鼠和人的胰腺胰岛中分离总 RNA。经 DNase I 处理后，将 RNA 逆转录。使用针对角鲨烯环氧酶的特异性引物进行 PCR。热循环程序包括：94°C 初始激活 5 分钟，随后进行 35 个循环（94°C 30 秒，53°C 30 秒，72°C 60 秒）。PCR 产物在琼脂糖凝胶上显示为 280 bp 的条带。[1] 通过测量细胞胆固醇含量来评估 NB-598 hydrochloride 对内源性胆固醇生物合成的抑制作用。将 MIN6 细胞、小鼠胰岛或人胰岛在补充有去脂血清的培养基中培养 48 小时，培养基中含有或不含 10 μM NB-598 hydrochloride。收集细胞/胰岛，使用氯仿-甲醇混合物提取胆固醇。按照说明书，使用基于荧光的检测试剂盒测量有机相中的胆固醇含量。[1] |
| 细胞实验 |
质膜、内质网和胰岛素分泌颗粒的亚细胞分级[1]
在添加10%脱脂FBS的培养基中，在37℃下培养MIN6细胞（4×108）48小时，不存在或存在10μMNB598。收获细胞并在分级缓冲液中均质化：50 mM 2-（N-吗啉代）乙磺酸（MES）、250 mM蔗糖（pH 7.2）用于质膜（PM）和内质网（ER）；用于胰岛素分泌颗粒（SG）的10 mM 3[N-吗啉代]丙磺酸Tris、270 mM蔗糖（pH 6.8）。PM和ER的分级是通过Ramanadham等人建立的蔗糖密度梯度超速离心进行的。胰岛素分泌颗粒用Histodenz梯度超速离心分级，然后用Brunner等人建立的Percoll纯化。分离的亚细胞组分储存在-20℃下，用于蛋白质浓度测定和胆固醇提取。 对于胰岛素分泌实验，将小鼠胰腺胰岛在含有去脂血清的培养基中培养 48 小时，培养基中含有或不含不同剂量的 NB-598 hydrochloride。实验前 3 小时，将葡萄糖浓度调整为 2.8 mM。每组 20 个胰岛在含有 1 mM 葡萄糖的 Krebs-Ringer 碳酸氢盐缓冲液中预孵育 30 分钟。然后分别在含有 1 mM 葡萄糖（基础）或 16.7 mM 葡萄糖（刺激）的新鲜缓冲液中孵育 1 小时。收集上清液，通过放射免疫分析法测量胰岛素。裂解胰岛以测定总胰岛素含量。分泌的胰岛素以总胰岛胰岛素进行标准化。[1] 对于亚细胞胆固醇测量，用 10 μM NB-598 hydrochloride 处理 MIN6 细胞 48 小时。使用蔗糖密度梯度超速离心分离质膜和内质网；使用 Histodenz/Percoll 梯度超速离心分离胰岛素分泌颗粒。使用氯仿-甲醇从每个组分中提取胆固醇，并用荧光检测试剂盒进行定量。[1] 对于电生理学实验，将来自在小鼠胰岛素启动子下表达 GFP 的转基因小鼠的分散胰岛细胞，用或不用 NB-598 hydrochloride 培养 48 小时。对单个 GFP 阳性的β细胞进行全细胞配置电压钳记录。通过从 -80 mV 保持电位给予 -70 至 +70 mV 的去极化阶跃来引发 Cav 电流。使用从 -80 mV 至 +60 mV 的 500 毫秒阶跃脉冲测量 Kv 电流。使用 5 秒条件预脉冲方案评估 Kv 通道的稳态失活。在 -140 mV 记录 KATP 电流。[1] 对于不依赖于 Cav 通道的胞吐作用测量，用含有笼锁钙化合物 NP-EGTA 和钙指示剂 fura-6F 的电极液对β细胞进行膜片钳记录。通过 UV 闪光光解 NP-EGTA 并快速提高细胞内钙离子浓度来触发胞吐作用。同时监测膜电容的增加和 [Ca2+]i 的变化。对膜电容响应进行拟合，以分析胞吐的快爆发、慢爆发和持续成分。[1] 对于膜筏关联研究，将用或不用 10 μM NB-598 hydrochloride 处理 48 小时的 MIN6 细胞在含有 Triton X-100 的冷缓冲液中裂解。裂解物进行不连续蔗糖密度梯度超速离心。从顶部收集各组分，并使用针对 Cav1.2、Kv2.1、syntaxin 1A、SNAP-25 和 VAMP-2 的抗体，通过蛋白质印迹分析每个组分中的蛋白质。[1] |
| 参考文献 |
[1]. Xia F, et al. Inhibition of cholesterol biosynthesis impairs insulin secretion and voltage-gated calcium channel function in pancreatic beta-cells. Endocrinology. 2008 Oct;149(10):5136-45.
[2]. Horie M, et al. Effects of NB-598, a potent squalene epoxidase inhibitor, on the apical membrane uptake of cholesterol and basolateral membrane secretion of lipids in Caco-2 cells. Biochem Pharmacol. 1993 Jul 20;46(2):297-305. [3]. Horie M, et al. An inhibitor of squalene epoxidase, NB-598, suppresses the secretion of cholesterol and triacylglycerol and simultaneously reduces apolipoprotein B in HepG2 cells. Biochim Biophys Acta. 1993 May 20;1168(1):45-51. [4]. NB-598: a potent competitive inhibitor of squalene epoxidase. J Biol Chem . 1990 Oct 25;265(30):18075-8. |
| 其他信息 |
盐酸NB-598是一种角鲨烯环氧化酶抑制剂，用于长期抑制内源性胆固醇的生物合成。角鲨烯环氧化酶是甾醇生物合成途径中的第二个关键酶。盐酸NB-598抑制胆固醇合成会降低电压门控Ca2+通道的活性，并破坏胞吐机制，从而损害胰岛β细胞功能。这可能是由于关键离子通道和SNARE蛋白从富含胆固醇的膜筏微区移位所致。这表明细胞胆固醇稳态失调可能导致β细胞功能障碍，而β细胞功能障碍是2型糖尿病的潜在发病机制之一。[1]
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| 分子式 |
C6H13N
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|---|---|
| 分子量 |
99.1741216182709
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| 精确质量 |
485.161
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| 元素分析 |
C, 66.71; H, 6.64; Cl, 7.29; N, 2.88; O, 3.29; S, 13.19
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| CAS号 |
136719-25-0
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| 相关CAS号 |
NB-598;131060-14-5;NB-598 Maleate;155294-62-5
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| PubChem CID |
19744556
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| LogP |
8.285
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| tPSA |
68.95
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
10
|
| 重原子数目 |
32
|
| 分子复杂度/Complexity |
628
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CCN(C/C=C/C#CC(C)(C)C)CC1=CC=CC(OCC2=CC(C3=CSC=C3)=CS2)=C1.[H]Cl
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| InChi Key |
WDXQLZXORYGXJN-WVLIHFOGSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C27H31NOS2.ClH/c1-5-28(14-8-6-7-13-27(2,3)4)18-22-10-9-11-25(16-22)29-19-26-17-24(21-31-26)23-12-15-30-20-23;/h6,8-12,15-17,20-21H,5,14,18-19H2,1-4H3;1H/b8-6+;
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| 化学名 |
(E)-N-ethyl-6,6-dimethyl-N-[[3-[(4-thiophen-3-ylthiophen-2-yl)methoxy]phenyl]methyl]hept-2-en-4-yn-1-amine;hydrochloride
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| 别名 |
NB-598 (hydrochloride); 136719-25-0; NB-598 hydrochloride; (E)-N-ethyl-6,6-dimethyl-N-[[3-[(4-thiophen-3-ylthiophen-2-yl)methoxy]phenyl]methyl]hept-2-en-4-yn-1-amine;hydrochloride; NB-598hydrochloride; SCHEMBL408927; SCHEMBL408929; DTXSID30599492;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 10.0837 mL | 50.4185 mL | 100.8369 mL | |
| 5 mM | 2.0167 mL | 10.0837 mL | 20.1674 mL | |
| 10 mM | 1.0084 mL | 5.0418 mL | 10.0837 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
奈莫雷生盐酸盐
E55888 HCL
FITC-Dextran (MW 110000)
FITC-Dextran (MW 2000000)
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