| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Secondary metabolite; microbial metabolite; secondary bile acid; endogenous metabolite
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性。[1]
单培养E.lentum R1对未结合胆汁酸的体外转化；表2中列出了菌株R1、菌株R3和菌株M67以及E.lentum与菌株R3或M67的二元培养。孵育72小时后，两种二元培养物分别将P-MCA转化为ω-MCA的比例分别为59%和71%（四次测定的平均值在50%至90%之间）。这种转化分两步进行：首先，E.lentum R1将P-MCA氧化为3a，7p-二羟基-6-氧代-5p-胆酸；通过气相色谱-质谱联用试验证实了这种代谢物的身份。这两种梭杆菌中的任何一种都可以将6-氧代基团还原为6a羟基，产生ω-MCA。后一种转化通过在菌株R3或M67与1-MCA的6-氧代衍生物混合的单一培养物中出现ω-MCA来证实。相比之下，aMCA和ω-MCA没有被分离物转化。如化合物在气液色谱上的流动性以及质谱数据与参比化合物的数据比较所示，E.lentum Rl将羟基胆酸部分转化为3a，6a-二羟基-7-氧代-5P-羟基戊酸。CA被E.lentum R1氧化为3a，12a-二羟基-7-氧代-5p-胆酸（50至60%）和少量12-氧代衍生物。菌株R3将CA氧化为12-氧代衍生物。E.lentum R1将40%的CDCA氧化为3a-羟基-7-氧代-5，B-胆酸。然而，熊去氧胆酸的7，B-羟基没有被氧化。尽管61异构体MCA被E.lentum Rl或菌株M67氧化为6-氧代衍生物，但所有分离物均未转化HDCA。E.lentum Rl将6-oxo基团还原为MCA的61-OH基团。相比之下，菌株R3和M67将6-氧代基团还原为6a-OH基团，从而产生HDCA。这导致在E.lentum R1与菌株R3或M67的二元培养物中MCA异构化为HDCA。三种分离物均未转化石胆酸。E.lentum R1对tauro和glycoCA、tauro和glucos-CDCA以及tauro-j-MCA的解偶联率为60%至90%。在与E.lentum Rl（见下文）单相关的共生大鼠粪便中发现的未鉴定化合物A是tauro1-MCA的衍生物，未在体外检测到。菌株M67对tauro-CDCA和glvco-CDCA的解偶联率均超过90%；tauro-和glyco-CA的解偶联更加不规则，在50%到75%之间变化，而tauro-1-MCA没有解偶联。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
体内活性。[1]
E.lentum Rl在无菌大鼠中很容易建立为单缔合物；相比之下，除非与梭菌属C18结合降低肠道中的氧化还原电位，否则菌株M67和R3无法在益生菌大鼠中建立。在与E.lentum Rl和Clostridium sp.C18相关的益生菌大鼠中，超过80%的粪便胆汁酸未结合，超过50%的CA转化为CA的7-酮衍生物；还形成了少量的3-酮和12-酮衍生物。这些羰基衍生物的量不受梭菌C18、菌株M67或菌株R3的显著影响。 3a，71-二羟基-6-氧代-513-胆酸，该反应独立于菌株M67或R3的存在或不存在而发生（图1）。在与E.lentum Rl和梭菌属C18加菌株M67或R3相关的动物中，26%（M67组）和27%（R3组）的BMCA转化为ω-MCA。在与四种品系相关的大鼠中，近70%的P-MCA转化为ω-MCA。与E.lentum Rl或E.lentum-Rl加梭菌属C18相关的共生大鼠粪便中也含有一种未鉴定的胆汁酸，称为化合物A。在无菌大鼠中没有发现这种化合物。此外，化合物A仅在未结合部分或样品酶解结合后检测到；在乙二醇中用20%KOH进行碱性解偶联时，它被破坏。在气液色谱中，其相对于23-去甲脱氧胆酸同一衍生物的保留时间分别为1.11和1.04，作为甲酯三甲基甲硅烷基醚在1%QF-1和3%OV-225上的保留时间，以及3.06和3.35，作为甲酯乙酸酯在3%OV-1和3%OV-17上的保留时间。三甲基甲硅烷基醚的质谱在mle 285和195处显示出强烈的峰，这是6t，713双三甲基甲硅烷氧基结构的特征。该化合物在mle 636、546和456处进一步出现峰，表明具有一个双键的三羟基胆酸盐结构。在mle 253处存在ABCD环片段离子，而在mle 115处没有明确的侧链离子峰，这表明不饱和度存在于侧链中。在室温下，使用0.5mg氧化钯在5ml 90%乙醇中催化氢化乙酸甲酯18小时后，该化合物得到1BMCA。这些结果表明，化合物A是1-MCA的共轭衍生物，侧链上有双键；双键的确切位置无法从我们的数据中得出。 从大鼠和小鼠的盲肠中分离出的三种厌氧细菌通过协同机制将无菌大鼠的主要胆汁酸β-胞里胆酸转化为ω-胞里酸。一种分离物是长株真杆菌；第二和第三分离物被初步鉴定为非典型梭杆菌属菌株。β-盐酸转化为ω-盐酸分两步进行：E.lentum将β-盐酸的6β羟基氧化为6-氧代，再由另外两种物种还原为6α羟基，得到ω-盐酸。这种转变既发生在体外，也发生在益生菌大鼠身上。无菌大鼠与E.lentum菌株的单体结合产生了一种未知的粪便胆汁酸，可能是侧链中具有双键的β-muricholic酸的衍生物[1]。 |
| 酶活实验 |
胆汁酸分析。[1]
用于测定无菌和无菌大鼠粪便和肠道内容物中胆汁酸的程序已在其他地方进行了描述。在与所研究的底物一起孵育3或4天的培养物中研究了体外转化。为了研究未结合胆汁酸的转化，将3毫升培养基与1毫升甲醇和0.5毫升含有50微克23-去甲脱氧胆酸的内标溶液混合。用HCl将该混合物酸化至pH<2，用5ml乙醚提取三次；蒸发乙醚提取物，将胆汁酸衍生为三甲基甲硅烷基醚甲酯和乙酸甲酯，用于气液色谱。通过比较生长培养物中游离胆汁酸的量与未接种对照管中结合物的量，确定结合胆汁酸的体外水解。为了分析结合胆汁酸，将3ml培养基与0.5ml内标溶液混合，蒸发，并用20%（wt/vol）KOH乙二醇进行碱性解结合；然后将水解产物酸化，并进一步处理为未结合的胆汁酸。具有tauro-p-MCA的培养物被酶水解，因为益生菌大鼠的粪便中含有一种未知的tauro-1-MCA代谢产物，只有在Nair和Garcia的胆酰甘氨酸水解酶程序进行酶解偶联后才能检测到。胆汁酸的鉴定是通过气液色谱和质谱进行的。乙酸甲酯在3%OV-1和3%OV-17柱上进行色谱分离；三甲基硅醚在1%QF-1和3%OV-225柱上进行色谱分离。当需要鉴定某些峰时，通过气相色谱-质谱组合技术运行质谱，并将其与参考化合物的质谱进行比较。 |
| 动物实验 |
分离和鉴定程序。[1]
菌株R1和R3是从常规大鼠的盲肠内容物中分离得到的。将盲肠转移至厌氧室，并将其内容物悬浮于10 ml A培养基中。取该悬浮液进行10倍系列稀释，取10 μl等分试样划线接种于A培养基琼脂平板上。在厌氧分离器中培养3至5天后，将单菌落和不同类型菌落的混合物接种于含有500 μg 13-MCA的10 ml A培养基中，继续培养5天。250株纯培养物均未能将1-MCA转化为ω-MCA。其中一株混合培养物在与P-MCA共培养时产生了ω-MCA，且该混合培养物中仅含有三到四种形态不同的微生物。菌株 R1 和 R3 是从 A 培养基琼脂平板上的简化培养物中分离得到的。菌株 M67 是从 B 培养基琼脂平板上分离得到的，该平板上接种了一环来自无菌小鼠的盲肠内容物，该小鼠的盲肠菌群完全由厌氧菌组成；该菌群来源于经抗生素处理的常规小鼠的盲肠，由 D. Van der Waaij 提供。菌株 C18 是一种非典型的 II 组梭菌（明胶液化，孢子位于末端下方），此前已从常规大鼠的盲肠内容物中分离得到。该菌株能够使苛养厌氧菌在无菌动物体内定植，因为它能显著降低盲肠的氧化还原电位。梭菌属 C18 在体内对胆汁酸没有活性。根据 Holdeman 等人描述的方法对分离株进行初步鉴定，并作如下修改：(i) 所有测试的基础培养基均为 A 培养基（菌株 R3 和 M67）；(ii) 除碳水化合物发酵外，菌株 R1 使用 C 培养基，碳水化合物发酵则使用 A 培养基；(iii) 通过在基础培养基中添加 1% KNO3 来研究硝酸盐还原；(iv) 使用添加 10% 马血的 A 或 C 培养基琼脂平板来研究菌落形态、革兰氏染色反应（Kopeloff 改良法）和溶血；(v) 使用添加脑心浸液琼脂斜面培养基来检测过氧化氢酶，使用三糖铁琼脂斜面培养基或 SIM 培养基来检测 H2S；(vi) 在添加 0.2% DL-色氨酸的 A 或 C 半固体培养基中研究运动性和吲哚产生。(iii) 动物接种。培养管经加热密封后，用2%过氧乙酸对表面进行消毒，然后放入无菌隔离器中。菌株经肛门途径接种，使用装有软塑料套管的注射器。无菌大鼠首先接种R1菌株。随后接种R3或M67菌株均未成功。这些菌株仅在预先接种梭菌属C18菌株后才能成功定植。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
ω-鼠胆酸是鼠胆酸类化合物中的一种，其6位和7位羟基分别具有α和β构型。直到最近，人们还不确定ω-鼠胆酸是否完全是一种叔胆汁酸，即由肝细胞转化而来的、不同于初级胆汁酸的次级胆汁酸。Madsen等人认为ω-鼠胆酸可能是一种叔胆汁酸，因为他们观察到大鼠肝细胞可以将次级胆汁酸HDCA的7p-羟基化为ω-鼠胆酸。Sacquet等人从大鼠肠道中分离出一种梭菌属细菌，该细菌可以将1-鼠胆酸转化为ω-鼠胆酸，这表明ω-鼠胆酸可以被认为是一种次级胆汁酸，因为其形成并不需要大鼠肝细胞。本研究中描述的细菌协同作用可将β-MCA体外转化为ω-MCA，这支持了上述观点。多项关于大鼠胆汁酸代谢的研究表明，ω-MCA和HDCA（均为1-MCA衍生的次级胆汁酸）的相对含量之间存在明显的关联。Wostmann等人发现，给常规大鼠喂食经蒸汽灭菌的含乳糖饲料会增加粪便中w-MCA与HDCA的比值；他们观察到，在接受抗生素治疗的常规大鼠中，该比值也发生了类似的改变。Sacquet等人观察到，当常规大鼠的胆汁通过手术分流至膀胱时，该比值显著升高。此外，Brydon等人报道，当常规大鼠的饲料从颗粒饲料改为低纤维饲料时，其结肠中3-MCA + ω-MCA/HDCA的比值升高。推测这些治疗方法对肠道菌群以及肠道内微生物胆汁酸转化具有显著影响。为了更清楚地理解上述观察结果，需要进一步研究以阐明HDCA的生成途径以及w-MCA在其形成过程中的潜在作用。真杆菌属包含多种甾醇转化菌种，它们具有胆汁酸脱结合酶、3α-或12α-羟基甾醇脱氢酶或两者兼有、胆汁酸7α-脱羟酶、皮质类固醇16α-脱羟酶、皮质类固醇21-脱羟酶和A5-甾醇氢化酶活性。本研究中分离的E. lentum菌株表现出胆汁酸脱结合酶和胆汁酸羟基甾醇脱氢酶活性；但未观察到胆汁酸脱羟酶活性。在本研究条件下，E. lentum Rl 在体外表现出胆汁酸 6p-、7a- 和 12-脱氢酶活性；3a-脱氢酶活性仅在体内观察到。6p-和 7a-羟基类固醇脱氢酶活性的产生是否为 E. lentum Rl 特有，或者这些特征是否也存在于其他 E. lentum 菌株中，仍有待确定。此外，3a-羟基类固醇脱氢酶活性的缺失是否可能是由于我们的研究是在严格的厌氧条件下使用活菌培养物进行的，也尚待确定。在无细胞制剂的研究中，Macdonald 等人在 32 株 E. lentum 及其相关微生物中的 15 株中观察到胆汁酸 3a-脱氢酶活性。此前尚未有关于细菌形成 P-MCA 6-氧代衍生物的报道。然而，Sacquet 等人分离的梭菌属（Clostridium sp.）…… P-MCA的6p3-羟基可能通过相同的中间体发生异构化，因为MCA的6-羟基的异构化反应也是通过相应的6-氧代中间体进行的。事实上，P-MCA的6-氧代衍生物的身份直到最近才被确定，因为喂食胆固醇饮食的无菌大鼠的粪便中含有大量的这种当时被认为是初级胆汁酸的物质。E. lentum Rl在体外生成该化合物的实验表明，这种胆汁酸也可能是次级胆汁酸。目前对33株E. lentum菌株中6p-羟基类固醇脱氢酶分布的研究表明，这种活性并非该菌种的普遍特征，因为它仅在Rl菌株中发现（Eyssen等人，未发表数据）。无菌大鼠与E. lentum分离株的共生也产生了一种单不饱和胆汁酸，其与β-鼠胆酸密切相关。质谱分析数据表明，双键位于侧链上。因此，该化合物可能与一些作者在普通大鼠胆汁中发现的未鉴定化学物质相同。在无菌大鼠或与结合型β-MCA混合的E. lentum Rl培养基中未发现该胆汁酸，这表明它可能是一种叔胆汁酸；然而，在得出确切结论之前，还需要进行更多研究。[1]
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| 分子式 |
C24H40O5
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|---|---|
| 分子量 |
408.57140827179
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| 精确质量 |
408.287
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| CAS号 |
6830-03-1
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| PubChem CID |
5283851
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
565.7±40.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
310.0±23.8 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±3.5 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.558
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| 来源 |
Rat intestinal microflora
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| LogP |
3.82
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| tPSA |
98
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
29
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| 分子复杂度/Complexity |
637
|
| 定义原子立体中心数目 |
11
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| SMILES |
C[C@H](CCC(=O)O)[C@H]1CC[C@@H]2[C@@]1(CC[C@H]3[C@H]2[C@H]([C@@H]([C@H]4[C@@]3(CC[C@H](C4)O)C)O)O)C
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| InChi Key |
DKPMWHFRUGMUKF-NTPBNISXSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H40O5/c1-13(4-7-19(26)27)15-5-6-16-20-17(9-11-23(15,16)2)24(3)10-8-14(25)12-18(24)21(28)22(20)29/h13-18,20-22,25,28-29H,4-12H2,1-3H3,(H,26,27)/t13-,14-,15-,16+,17+,18+,20+,21-,22-,23-,24-/m1/s1
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| 化学名 |
(4R)-4-[(3R,5R,6R,7R,8S,9S,10R,13R,14S,17R)-3,6,7-trihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoic acid
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| 别名 |
omega-muricholic acid; 6830-03-1; (3a,5b,6a,7b)-3,6,7-trihydroxy-Cholan-24-oic acid; omega-Muricholate; omega-MCA; 3a,6a,7b-Trihydroxy-5b-cholanoic acid; (4R)-4-[(3R,5R,6R,7R,8S,9S,10R,13R,14S,17R)-3,6,7-trihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoic acid; 3alpha,6alpha,7beta-Trihydroxy-5beta-cholan-24-oic Acid;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~20 mg/mL (~49 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4476 mL | 12.2378 mL | 24.4756 mL | |
| 5 mM | 0.4895 mL | 2.4476 mL | 4.8951 mL | |
| 10 mM | 0.2448 mL | 1.2238 mL | 2.4476 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
AOH-1996
hMAO-B-IN-3
Flupyrimin
阿曲库铵
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463611831
