| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The target of PP7 is the PB1-PB2 interface of influenza A virus polymerase. It inhibits the interaction between PB1 and PB2 subunits, with an IC50 of 2.3 μM (detected by HTRF assay for PB1-PB2 binding) and EC50 values of 0.8 μM (against H1N1 subtype), 1.1 μM (against H3N2 subtype), and 1.5 μM (against H5N1 subtype) for inhibiting influenza A virus replication [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
1. 抗甲型流感病毒活性：在感染不同甲型流感病毒亚型的MDCK细胞中，PP7呈剂量依赖性抑制病毒复制。EC50值分别为：H1N1（A/PR/8/34）0.8 μM、H3N2（A/Udorn/72）1.1 μM、H5N1（A/Vietnam/1203/04）1.5 μM。浓度为5 μM时，与未处理感染组相比，PP7使H1N1病毒滴度（TCID50/mL）降低3.2 log10、H3N2降低2.8 log10、H5N1降低2.5 log10 [1]
2. 抑制PB1-PB2相互作用：采用HTRF实验检测重组PB1（N端片段）与PB2（C端片段）的结合，PP7对二者结合的抑制呈剂量依赖性，IC50为2.3 μM。浓度为10 μM时，结合率较对照组降低80%以上 [1] 3. 抑制病毒RNA合成：在H1N1感染的A549细胞中，PP7（5 μM）处理24小时后，qPCR检测显示病毒M基因RNA水平降低75%，荧光素酶报告实验显示病毒聚合酶活性降低68% [1] 4. 细胞毒性：在MDCK和A549细胞中，PP7的CC50（50%细胞毒性浓度）>20 μM（MTT实验）。选择性指数（SI=CC50/EC50）分别为：H1N1>25、H3N2>18、H5N1>13，提示体外毒性较低 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
1. H1N1感染小鼠的抗病毒效果：6-8周龄BALB/c小鼠经鼻感染H1N1病毒（A/PR/8/34，10×LD50），PP7以5 mg/kg、10 mg/kg、20 mg/kg剂量腹腔注射，每日1次，连续5天（感染后1小时开始给药）。与病毒感染对照组相比：（1）感染后5天，肺组织病毒滴度（TCID50/g）分别降低1.8 log10（5 mg/kg）、2.5 log10（10 mg/kg）、3.0 log10（20 mg/kg）；（2）20 mg/kg组小鼠生存率从对照组的20%提升至80%；（3）肺组织病理显示，PP7处理组炎症细胞浸润和肺泡损伤减轻，20 mg/kg组肺损伤评分降低65% [1]
2. 对体重的影响：在H1N1感染小鼠模型中，病毒对照组感染后5天体重下降25%；10 mg/kg和20 mg/kg PP7处理组体重分别下降10%和5%，提示药物可缓解病毒诱导的体重降低 [1] |
| 酶活实验 |
1. PB1-PB2相互作用HTRF检测实验：制备重组His标签PB1 N端片段和生物素标记PB2 C端片段。反应体系包含50 nM PB1片段、50 nM PB2片段、不同浓度PP7（0.1 μM、0.5 μM、1 μM、2.3 μM、5 μM、10 μM）及HTRF检测试剂（链霉亲和素偶联Eu³+穴状化合物、抗His抗体偶联XL665）。室温孵育2小时后，检测620 nm（Eu³+发射光）和665 nm（XL665发射光）荧光强度，以665 nm/620 nm荧光比值计算PP7对PB1-PB2结合的抑制率，通过剂量-反应曲线确定IC50 [1]
2. 甲型流感病毒聚合酶活性检测实验：HEK293T细胞共转染甲型流感病毒PB1、PB2、PA、NP编码质粒及流感病毒RNA启动子驱动的荧光素酶报告质粒。转染24小时后，用PP7（0.5 μM、1 μM、2 μM、5 μM）或DMSO处理细胞。处理48小时后裂解细胞，采用荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性，以DMSO对照组为基准计算相对活性，评估PP7对病毒聚合酶活性的抑制作用 [1] |
| 细胞实验 |
1. 甲型流感病毒复制抑制实验（MDCK细胞）：
- MDCK细胞接种于24孔板（1×10⁵细胞/孔），培养过夜后，用PP7（0.1 μM、0.5 μM、1 μM、2 μM、5 μM）或DMSO预处理1小时，再以MOI=0.01感染甲型流感病毒（H1N1、H3N2或H5N1）。吸附1小时后去除未结合病毒，加入含相同浓度PP7的新鲜培养基。 - 感染48小时后收集上清液，通过TCID50实验（Reed-Muench法计算）测定病毒滴度；细胞用4%多聚甲醛固定，抗流感病毒核蛋白（NP）抗体染色，荧光显微镜下计数NP阳性细胞比例，评估病毒复制情况 [1] 2. 细胞毒性实验（MTT法）： - MDCK或A549细胞接种于96孔板（5×10³细胞/孔），培养过夜后，加入PP7（1 μM、5 μM、10 μM、20 μM、40 μM）或DMSO，孵育48小时。 - 每孔加入20 μL MTT溶液（5 mg/mL），37°C孵育4小时后，用DMSO溶解甲臜结晶，测定570 nm处吸光度。以DMSO对照组为基准计算细胞活力，通过剂量-反应曲线确定CC50 [1] 3. 病毒RNA检测（qPCR法）： - A549细胞以MOI=0.1感染H1N1病毒，并用PP7（5 μM）或DMSO处理。感染24小时后，用RNA提取试剂盒提取细胞总RNA。 - 逆转录合成cDNA后，用甲型流感病毒M基因和内参GAPDH的特异性引物进行qPCR，采用2^(-ΔΔCt)法计算病毒M基因RNA的相对表达量 [1] |
| 动物实验 |
H1N1感染BALB/c小鼠模型：
1. 动物选择和分组：雌性BALB/c小鼠（6-8周龄，每组n=10）分为5组：正常对照组（未感染，未用药）、病毒对照组（感染，腹腔注射DMSO-生理盐水混合液）、PP7低剂量组（感染，5 mg/kg PP7）、PP7中剂量组（感染，10 mg/kg PP7）和PP7高剂量组（感染，20 mg/kg PP7）。 2. 病毒感染：小鼠用异氟烷麻醉后，经鼻内接种H1N1病毒（A/PR/8/34），剂量为…… 10×LD50（每只小鼠 50 μL）。 3. 药物制备和给药：PP7溶于 DMSO（终浓度 5%），并用生理盐水稀释。感染后 1 小时开始给药，每日一次腹腔注射，连续 5 天。 4. 样本采集和检测：(1) 连续 14 天每日测量体重，计算存活率；(2) 感染后第 5 天，每组处死 5 只小鼠，收集肺组织，测定病毒滴度（TCID50 法）并进行组织病理学分析（H&E 染色）；(3) 收集血清，检测肝功能（ALT、AST）和肾功能（BUN、Cr）指标[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体外毒性：在MDCK和A549细胞中，PP7的CC50值均大于20 μM，对所有测试的甲型流感病毒亚型的选择性指数（SI = CC50/EC50）均大于13，表明其细胞毒性较低[1]。2. 体内毒性：在BALB/c小鼠中，用PP7（5-20 mg/kg，腹腔注射，连续5天）处理后，未观察到体重显著变化（与正常对照组相比，体重变化≤5%）。血清ALT、AST、BUN和Cr水平均在正常范围内，未观察到明显的肝肾毒性[1]。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1. PP7 是一种新型小分子化合物，旨在靶向甲型流感病毒聚合酶的 PB1-PB2 界面。其抗病毒机制是阻断 PB1 和 PB2 亚基之间的相互作用，这种相互作用对于病毒聚合酶复合物的组装和催化活性至关重要，从而抑制病毒 RNA 的合成和复制。[1]
2. PP7 对不同亚型的甲型流感病毒（H1N1、H3N2、H5N1）均表现出广谱抑制活性，且体外和体内毒性均较低，表明其具有作为抗甲型流感病毒药物候选物的潜力。[1] |
| 分子式 |
C18H14CL2N2O3
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|---|---|
| 分子量 |
377.2214
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| 精确质量 |
376.038
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| CAS号 |
433238-84-7
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| PubChem CID |
2290641
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| LogP |
4.4
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| tPSA |
58.6
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
25
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| 分子复杂度/Complexity |
546
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CCOC1=CC=C(C=C1)/C=C/2\C(=O)NN(C2=O)C3=CC(=C(C=C3)Cl)Cl
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| InChi Key |
XFGORAOOZWWQKK-NTEUORMPSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C18H14Cl2N2O3/c1-2-25-13-6-3-11(4-7-13)9-14-17(23)21-22(18(14)24)12-5-8-15(19)16(20)10-12/h3-10H,2H2,1H3,(H,21,23)/b14-9+
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| 化学名 |
(4E)-1-(3,4-dichlorophenyl)-4-[(4-ethoxyphenyl)methylidene]pyrazolidine-3,5-dione
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6510 mL | 13.2549 mL | 26.5097 mL | |
| 5 mM | 0.5302 mL | 2.6510 mL | 5.3019 mL | |
| 10 mM | 0.2651 mL | 1.3255 mL | 2.6510 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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