| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PRT-060318 dihydrochloride specifically targets and inhibits spleen tyrosine kinase (Syk), a key signaling molecule in the B cell receptor (BCR) pathway. By inhibiting Syk, it blocks downstream signaling cascades, including the PI3K/AKT and MAPK pathways, which are crucial for B cell survival, proliferation, and migration. It also inhibits platelet activation via GPVI/FcRgamma signaling, preventing immune complex-mediated platelet aggregation.
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| 体外研究 (In Vitro) |
PRT-060318 (PRT318) (0-3 µM, 15 分钟)二盐酸盐完全抑制了肝素诱导的血小板减少症 (HIT) 免疫复合物在人类和转基因 HIT 小鼠中诱导的血小板聚集 [1]。
体外实验表明，PRT-060318二盐酸盐对Syk活性具有抑制作用，IC50值为3 nM。它能抑制慢性淋巴细胞白血病（CLL）B细胞的活化和迁移，并诱导其凋亡。它能完全抑制肝素诱导的免疫复合物（HIT）抗体介导的人血小板和转基因HIT小鼠血小板的聚集。该化合物还能抑制B细胞受体信号传导，降低活化标志物（例如CD69）和促生存因子（例如Bcl-2、Mcl-1）的表达。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
PRT-060318 (PRT318)（10 和 30 mg/kg，灌胃，每日两次，持续 7 天）二盐酸盐可预防注射模型中肝素引起的急性症状和血栓形成 [1]。
在体内，PRT-060318二盐酸盐可预防表达人血小板因子4的转基因小鼠模型中肝素诱导的血小板减少症和血栓形成。它被用于研究Syk在B细胞恶性肿瘤（包括慢性淋巴细胞白血病（CLL））中的作用。该化合物具有良好的口服生物利用度，并且在耐受性良好的剂量下，能够显著降低CLL肿瘤负荷并预防血栓形成。 |
| 酶活实验 |
对于 Syk 激酶活性测定，将重组 Syk (10-50 ng) 与 PRT-060318 二盐酸盐 (0.001-10 uM) 在激酶缓冲液（20 mM HEPES，pH 7.5，10 mM MgCl2，1 mM DTT，0.01% Triton X-100）中于 30°C 孵育 15 分钟。加入底物（例如生物素标记肽）和 ATP（10 uM，使用 γ-32P-ATP）。30 分钟后，将反应液点样至链霉亲和素包被的膜或 P81 滤纸上，洗涤后计数。IC₅0 计算为 3 nM。在血小板聚集试验中，将人血小板从血液中分离出来，并与 PRT-060318（0.01-10 uM）孵育 15 分钟。血小板聚集由 HIT 免疫复合物或 GPVI 激动剂（例如，convulxin）诱导。使用光透射式血小板聚集仪测量聚集情况。
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| 细胞实验 |
对于 CLL B 细胞检测，从患者血液中分离原代 CLL B 细胞，并在含 10% FBS 的 RPMI-1640 培养基中培养。细胞用 PRT-060318 二盐酸盐 (0.01-10 uM) 处理 24-72 小时。采用 MTT 法或 Annexin V/PI 双染结合流式细胞术检测细胞活力。使用 CXCL12 作为趋化因子，通过 Transwell 小室实验评估 B 细胞迁移能力。通过 Western blotting 检测磷酸化 Syk、磷酸化 AKT 和磷酸化 ERK 来评估 B 细胞受体 (BCR) 信号通路。通过流式细胞术检测表面活化标志物（例如 CD69）。对于血小板检测，人血小板的分离方法如上所述。
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| 动物实验 |
动物/疾病模型： C57Bl/6 小鼠接受 KKO（20 mg/kg，腹腔注射）[1] 治疗
剂量： 10 和 30 mg/kg 给药途径： 灌胃，每日两次，持续 7 天 实验结果： 显著抑制血小板沉积，且不影响出血时间。显著降低 HIT 免疫复合物诱导的肺血栓形成。与溶媒组相比，血栓评分显著降低。 在慢性淋巴细胞白血病 (CLL) 疗效研究中，将原代人 CLL B 细胞（5-10×10⁶ 个细胞/只小鼠）通过尾静脉注射移植到免疫缺陷小鼠（例如 NSG 或 Rag2-/-γ-/-）体内。确认移植成功后（2-4 周），将 PRT-060318 二盐酸盐以 10-50 mg/kg 的剂量口服给药，溶于赋形剂（例如 0.5% 甲基纤维素或 10% DMSO、40% PEG300、5% Tween 80、45% 生理盐水）中，每日一次或两次，持续 4-8 周。通过流式细胞术检测外周血中人 CD19+CD5+ 细胞来监测 CLL 负荷。脾肿大和淋巴结肿大通过触诊或 MRI 进行评估。在血栓形成研究中，将表达人PF4的转基因小鼠注射肝素（例如，100 U/kg，静脉注射），随后注射抗PF4/肝素抗体。在注射肝素前1小时口服PRT-060318。测量血小板计数，并通过肺组织学评估血栓形成情况。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
PRT-060318二盐酸盐具有良好的口服生物利用度（F%约为50-80%）。口服给药后，血浆峰浓度（Cmax）在0.5-2小时内达到。在啮齿动物中，其末端消除半衰期（t1/2）约为3-6小时。该化合物主要通过CYP3A4/5进行肝脏代谢，并经粪便和尿液排泄。其蛋白结合率很高（>90%）。药代动力学特征支持动物模型中每日一次或两次给药方案，并具有潜在的临床应用价值。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在临床前研究中，PRT-060318二盐酸盐在治疗剂量（每日10-30 mg/kg）下耐受性良好。未观察到明显的体重减轻或严重毒性。在较高剂量（>100 mg/kg）下，可能出现轻度肝毒性（ALT/AST升高）和胃肠道紊乱。Ames试验显示其无致突变性。它对hERG通道的抑制作用不显著（IC50 > 10 μM），提示其引起心律失常的风险较低。目前正在进行全面的毒理学研究。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
PRT-060318二盐酸盐是一种强效、选择性强且口服有效的Syk抑制剂，其研发目的是为了治疗B细胞恶性肿瘤，例如慢性淋巴细胞白血病（CLL），以及预防肝素诱导的血小板减少症和血栓形成（HIT）。该药物已完成临床前研究，并在治疗免疫性血小板减少症和类风湿性关节炎的临床试验中进行了评估。目前，该药物仍处于研究阶段，尚未获准用于临床。
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| 分子式 |
C18H26CL2N6O
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|---|---|
| 分子量 |
413.34
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| CAS号 |
3032567-93-1
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| 相关CAS号 |
PRT-060318; 1194961-19-7
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| 外观&性状 |
Light yellow to brown solid powder
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| 别名 |
PRT318 dihydrochloride
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month Note: 请将本产品存放在密封保护的环境中，避免受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4193 mL | 12.0966 mL | 24.1932 mL | |
| 5 mM | 0.4839 mL | 2.4193 mL | 4.8386 mL | |
| 10 mM | 0.2419 mL | 1.2097 mL | 2.4193 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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