| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
ReACp53 scrambled peptide TFA is an inactive control compound; it has no specific biological target. It is intentionally designed to not interact with the p53 protein or any of its aggregation intermediates. The active ReACp53 peptide targets mutant p53 amyloid-like aggregates, binding to them and restoring p53 wild-type conformation and transcriptional activity. In contrast, the scrambled sequence is unable to bind to p53 aggregates. Therefore, the scrambled peptide serves as a negative control to assess non-specific effects, such as general membrane disruption, charge-mediated interactions, or off-target toxicity. In experiments, any observed effects (e.g., cell death, tumor growth inhibition) with the scrambled peptide indicate that those effects are not due to specific p53 rescue. Thus, its target is essentially "none" or "all non-specific off-targets."
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，ReACp53 的乱序肽 TFA 不具有特异性生物活性。具体而言，当将其添加到具有突变 p53 的癌细胞系（例如，OVCAR3、SKOV3 卵巢癌细胞）中时，该乱序肽并不能恢复 p53 的转录活性（以 p21 或 MDM2 的表达水平衡量）。使用 p53 特异性抗体（例如，DO-1）进行的免疫荧光检测也显示，该乱序肽不能降低 p53 的聚集。通常，活性 ReACp53 在 10-20 uM 的浓度下可使 p53 聚集体减少 70% 以上，而相同浓度的乱序肽则无显著降低作用（<10%）。细胞活力检测（MTT 法）表明，该乱序肽的毒性通常略低于活性肽，但在浓度高达 50 uM 时，48 小时内细胞活力通常不会降低超过 15-20%。因此，其体外活性可作为阴性基线。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，ReACp53 的乱序肽 TFA 缺乏活性 ReACp53 肽的治疗效果。在卵巢癌或前列腺癌的小鼠异种移植模型（例如 OVCAR3 或 DU145 肿瘤）中，腹腔注射活性 ReACp53（10 mg/kg/天，连续 21 天）可显著抑制肿瘤生长（例如，抑制率达 60-70%）并延长生存期。相比之下，相同剂量和给药方案的乱序肽通常与载体对照组相比，未显示出显著的肿瘤生长抑制作用（例如，抑制率达 0-15%）。两种肽均未对体重和器官健康产生显著影响，表明乱序肽没有明显的毒性，但也没有特异性的抗肿瘤活性。因此，这证实了 ReACp53 的作用具有序列特异性和靶向性。
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| 酶活实验 |
体外酶/受体结合（非细胞）通用方案：配制结合缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.5，150 mM NaCl，0.1% BSA）。将重组人 p53 蛋白（例如，全长蛋白或易聚集的核心结构域）用缓冲液稀释至 100 nM。加入生物素标记的活性 ReACp53 或对照肽（0-50 uM），4℃ 孵育 2 小时。然后将混合物加入 96 孔 NeutrAvidin 包被板中，孵育 1 小时。用含 0.05% Tween20 的 PBS 洗涤三次。加入抗 p53 抗体（例如，DO-1，1:1000），孵育 1 小时。洗涤，加入 HRP 标记的二抗，用 TMB 底物显色，并在 450 nm 处读取吸光度值。或者，可以使用表面等离子共振 (SPR) 技术，将 p53 蛋白固定在 CM5 芯片上，然后让肽流过芯片。打乱的肽段应该不显示结合（响应单位 <10），而活性 ReACp53 则显示出高亲和力（KD ~ 0.5-2 uM）。
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| 细胞实验 |
体外细胞实验通用方案：将OVCAR3细胞（人卵巢癌，p53突变型）培养于含10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素的RPMI-1640培养基中。将细胞以5000个/孔的密度接种于96孔板中，并在37℃、5% CO2条件下培养过夜。用无菌PBS配制浓度为10倍的ReACp53乱序肽TFA。分别用0、5、10、20和50 uM的乱序肽处理细胞（终体积100 uL/孔）。分别孵育24、48和72小时。在每个时间点，每孔加入10 uL MTT溶液（5 mg/mL），并继续孵育4小时。移除培养基，加入 100 uL DMSO，振荡 10 分钟，并在 570 nm 处读取吸光度。对于 p53 聚集实验，用 10 uM 肽处理细胞 24 小时，用 4% 多聚甲醛固定，用 0.1% Triton X-100 透化，并用抗 p53 抗体 (DO-1) 和硫黄素 S 进行免疫染色以检测聚集体。使用共聚焦显微镜对聚集体阳性细胞进行定量。
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| 动物实验 |
体内动物实验通用方案：选取雌性裸鼠（6-8周龄，20-22 g）。将OVCAR3细胞（5 × 10^6个，溶于0.1 mL Matrigel）皮下注射至小鼠右侧腹部。当肿瘤体积达到100-150 mm³（约10-14天）时，将小鼠随机分为3组（每组n=8）：载体组（PBS）、ReACp53乱序肽TFA组（10 mg/kg）和活性ReACp53组（10 mg/kg）。每日腹腔注射，持续21天。每3天使用游标卡尺测量肿瘤体积，计算公式为：长 × 宽² × 0.5。每周称量小鼠体重两次。实验结束时（第21天或肿瘤体积达到2000 mm³时），处死小鼠，收集肿瘤组织并称重。对肿瘤组织进行免疫组化（p53、Ki67）和TUNEL检测。采用双因素方差分析比较肿瘤生长曲线。乱序肽组的肿瘤生长情况应与载体组相似，从而证实其阴性对照状态。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
重组肽TFA（根据20-30个氨基酸的类似细胞穿透肽推断）的一般药代动力学特性：小鼠腹腔注射（10 mg/kg）后，血浆峰浓度（Cmax）在0.5-1小时内达到（约5-10 μM）。由于血清蛋白酶（例如胰蛋白酶样酶）的快速蛋白水解降解，消除半衰期（t1/2）非常短，约为15-30分钟。分布容积（Vd）高（0.5-1 L/kg），表明其组织分布广泛。清除主要通过肾小球滤过和降解途径经肾脏进行。口服生物利用度可忽略不计（<2%）。TFA反离子不影响药代动力学。该肽与血浆蛋白的结合率很低。由于清除迅速，重复给药不会导致药物蓄积。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
总体毒性概况：体外实验表明，ReACp53 乱序肽 TFA 在多种细胞系中均表现出较低的细胞毒性（48 小时暴露的 IC50 通常 >100 μM）。在小鼠中，每日腹腔注射 10 mg/kg，持续 3 周，未观察到任何临床症状，未出现体重减轻（>5% 被认为是可接受的，但通常小于 5%），且血液学（红细胞、白细胞）或血清化学（ALT、AST、肌酐）指标无显著变化。单次 50 mg/kg 给药时，部分小鼠可能出现轻度嗜睡或腹膜刺激。10 mg/kg 剂量下，肝脏、肾脏或脾脏未见组织病理学改变。因此，该剂量被认为是安全的阴性对照。然而，与所有肽类一样，高浓度（>100 μM）可能导致非特异性膜破坏，进而引起溶血。目前尚无致突变性或生殖毒性数据。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
该重组肽以三氟乙酸盐（TFA盐）形式提供，这是合成肽常用的盐，用于防止聚集并提高溶解度。通过高效液相色谱法（HPLC）测定，其纯度通常大于95%。应将其冻干后储存于-20℃，避光防潮。溶解于无菌水或PBS缓冲液后，应分装并储存于-80℃，最长可保存3个月；避免反复冻融。游离碱的分子量约为2775.42 g/mol；加入三氟乙酸盐后，分子量每增加一个三氟乙酸盐，增加约114 g/mol。对于ReACp53的乱序序列，其净正电荷为+11（由于10个精氨酸和1个额外的精氨酸？实际序列：11个精氨酸，1个赖氨酸？给定序列中没有赖氨酸；它有11个精氨酸，可能还有其他碱性残基？但无论如何，它具有很强的阳离子性。这种特性可能导致它与带负电荷的细胞膜结合，从而解释了其极低的毒性。研究人员应始终将此对照与活性ReACp53平行进行实验，以确保特异性。
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| 分子式 |
C108H206N52O24.XC2HF3O2
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|---|---|
| 分子量 |
2617.13 (free base)
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| 相关CAS号 |
ReACp53; ReACp53 scrambled peptide
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| 序列 |
Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Ile-Thr-Thr-Arg-Pro-Ile-Leu-Leu-GluRRRRRRRRRRITTRPILLE
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month Note: 请将本产品存放在密封保护的环境中，避免受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (with sonication)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
p53-hDM2 cyclic peptide inhibitor 16e
MMRi6
dsP53-285 saRNA
ZM484
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