| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 体外研究 (In Vitro) |
ψ-Bufarenogin 以剂量依赖性的方式抑制七种肝细胞癌（HCC）细胞系的增殖。HCC细胞系SMMC-7721是最敏感的细胞系之一。[1]
ψ-Bufarenogin 抑制HCC细胞的细胞周期进程，导致G1/S期转换减少和显著的G2/M期阻滞。这与细胞周期蛋白E表达减少和细胞周期蛋白B1积累相关。[1] ψ-Bufarenogin (50 nM) 处理48小时后可促进肝癌细胞凋亡。这种促凋亡作用是通过下调抗凋亡蛋白Mcl-1介导的，而Bax和Bcl-2水平保持不变。恢复Mcl-1表达可减弱ψ-Bufarenogin引发的凋亡。[1] ψ-Bufarenogin 抑制肝肿瘤起始细胞（T-ICs）的扩增。它抑制T-IC生物标志物（EpCAM、CD133、CD90）的表达，显著减少HCC细胞系和原代患者细胞中的球体形成，并通过有限稀释实验降低了T-ICs的比例。这种效应与干性相关转录因子Sox2的下调有关。[1] ψ-Bufarenogin 与顺铂在抑制球体形成和触发患者来源的原代肝癌细胞凋亡方面表现出协同作用。[1] ψ-Bufarenogin 以剂量依赖性的方式抑制EGF刺激的HCC细胞中Raf/MEK/ERK信号通路和PI3-K/Akt级联的激活。它轻微抑制JNK磷酸化但不影响p38激活。PI3-K/Akt通路的抑制参与了ψ-Bufarenogin介导的Mcl-1和Sox2的减少。[1] ψ-Bufarenogin 抑制EGF或HGF分别刺激的HCC细胞中EGFR和c-Met的自磷酸化，并随后抑制它们下游的MEK/ERK和PI3-K/Akt信号。[1] ψ-Bufarenogin 对肝癌细胞表现出强效的细胞毒性，但对正常肝细胞的活性较弱。[1] 分子对接研究预测，ψ-Bufarenogin 与EGFR和c-Met的激酶结构域结合，形成特定的氢键相互作用。[1] |
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| 体内研究 (In Vivo) |
静脉注射（i.v.）ψ-Bufarenogin（0.2 mg/kg 和 0.4 mg/kg，每日一次，连续16天）可显著抑制裸鼠中SMMC-7721细胞来源的异种移植瘤的生长，与对照组相比，肿瘤体积减少高达60%，且通过对重要器官的H&E染色评估未引起明显的副作用。[1]
瘤内注射ψ-Bufarenogin（0.5 mg/kg 和 1.0 mg/kg，每隔一天一次）也能显著抑制小鼠体内异种移植的HCC生长。[1] 瘤内注射ψ-Bufarenogin（1.0 mg/kg，每隔一天一次，持续24天）可抑制以高表达EGFR和c-Met为特征的患者来源异种移植（PDX）HCC模型的生长。[1] 与对照组相比，来自ψ-Bufarenogin治疗小鼠的肿瘤显示Ki67抗原表达较低（表明增殖减少），TUNEL阳性细胞增加（表明凋亡增加），并且MEK和Akt的磷酸化水平降低。[1] |
| 酶活实验 |
PI3-K激酶活性测定： 从经过或未经过ψ-Bufarenogin预处理的、EGF刺激的SMMC-7721细胞中免疫沉淀出PI3-K酶。根据制造商说明书，使用竞争性酶联免疫吸附测定试剂盒测量免疫沉淀物中的激酶活性。该测定表明ψ-Bufarenogin显著抑制PI3-K的激酶活性。[1]
c-MET酪氨酸磷酸化测定： 将用ψ-Bufarenogin预孵育4小时的SMMC-7721细胞用含有HGF的有丝分裂原混合物刺激。提取细胞裂解液，根据制造商方案，使用基于微球的流式细胞术检测c-MET的酪氨酸磷酸化。[1] |
| 细胞实验 |
细胞活力/增殖实验（CCK-8）： 将HCC细胞暴露于指定浓度的ψ-Bufarenogin中48小时。使用CCK-8法测量细胞活力，并计算抑制率。测定了不同细胞系的IC50值。[1]
细胞周期分析： 收集经ψ-Bufarenogin处理的肝癌细胞，固定，用碘化丙啶染色，并通过流式细胞术分析以确定细胞周期分布。[1] 细胞凋亡实验： 使用Vybrant凋亡试剂盒检测ψ-Bufarenogin引发的肝癌细胞凋亡，并通过流式细胞术分析。[1] 锚定非依赖性生长实验（软琼脂）： 在存在或不存在ψ-Bufarenogin的情况下，将肝癌细胞接种在含有Matrigel的培养基的培养皿中。2周后，在显微镜下计数多细胞集落。[1] 球体形成实验： 将来自患者的原代肝癌细胞接种在超低吸附培养皿中，并用ψ-Bufarenogin处理。一周后，在显微镜下计数形成的球体数量。[1] 有限稀释实验： 将肝癌细胞接种到96孔超低吸附板中。7天后，通过肉眼观察评估球体形成。利用泊松分布统计，根据无集落孔的频率来估算干细胞比例。[1] Western Blot印迹分析： 对来自处理的肝癌细胞或异种移植瘤组织的细胞裂解物进行SDS-PAGE，转膜，并用特异性一抗（例如抗p-EGFR、p-c-MET、p-MEK、p-ERK、p-Akt、Mcl-1、Sox2、细胞周期蛋白的抗体）进行孵育。使用IRDye标记的二抗检测信号。[1] 实时定量PCR： 从处理的细胞中提取总RNA，进行反转录，并在实时定量PCR系统上使用基因特异性引物（例如针对细胞周期蛋白E、细胞周期蛋白B1、Sox2）进行扩增，以测量相对mRNA表达水平。[1] |
| 动物实验 |
异种移植模型（细胞系来源）：将SMMC-7721异种移植瘤碎片皮下植入裸鼠侧腹。当肿瘤体积达到约300 mm³时，将小鼠随机分为治疗组和对照组。将ψ-布法罗诺金溶于DMSO，并用生理盐水稀释。静脉注射时，每日一次注射ψ-布法罗诺金（0.2或0.4 mg/kg）或溶剂，持续16天。瘤内注射时，每隔一天注射ψ-布法罗诺金（0.5或1.0 mg/kg）或溶剂。定期使用游标卡尺测量肿瘤大小以计算体积。[1]
患者来源异种移植（PDX）模型：将EGFR/c-MET高表达患者的肝细胞癌（HCC）组织移植到小鼠体内。肿瘤形成后，小鼠每隔一天接受瘤内注射ψ-布法罗诺金（1.0 mg/kg）或载体，持续24天。肿瘤生长情况按上述方法监测。[1] 组织分析：实验结束时，收集肿瘤和重要器官。部分组织用于H&E染色、免疫组织化学（例如Ki-67、p-MEK）和TUNEL检测。其余组织进行速冻，用于蛋白质提取和Western blot分析。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在异种移植小鼠模型中，每日静脉注射0.2 mg/kg和0.4 mg/kg剂量的ψ-布法罗诺金，连续16天，未引起明显的副作用。对治疗组小鼠的重要器官（心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏）进行组织病理学检查（H&E染色），结果显示与对照组相比无明显异常。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
ψ-布法雷诺金（分子式 C₂₄H₃₂O₆）是一种蟾蜍二烯内酯类化合物，通过二维反相液相色谱/亲水相互作用色谱系统从蟾蜍（Bufo bufo gargarizans Cantor）的皮肤中分离纯化得到。[1]
它是布法雷诺金在 C-12 位的差向异构体，据报道其抗癌细胞活性比布法雷诺金高近 100 倍。[1] 其作用机制被认为是双重抑制 EGFR 和 c-MET 受体酪氨酸激酶，从而抑制其下游的 Raf/MEK/ERK 和 PI3-K/Akt 信号通路。这导致细胞增殖受阻（通过细胞周期阻滞）、细胞凋亡促进（通过 Mcl-1 下调）以及癌症干细胞扩增受抑制（通过 Sox2 下调）。 [1] ψ-布法罗诺金与顺铂等传统化疗药物具有协同作用。[1] |
| 分子式 |
C24H32O6
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|---|---|
| 分子量 |
416.5073
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| 精确质量 |
416.219
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| CAS号 |
17008-69-4
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| PubChem CID |
204810
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
635.8±55.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
218.7±25.0 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±4.2 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.622
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| LogP |
0.71
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| tPSA |
107.97
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
1
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| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
847
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| 定义原子立体中心数目 |
9
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| SMILES |
C[C@]12CC[C@@H](C[C@H]1CC[C@@H]3[C@@H]2C(=O)[C@@H]([C@]4([C@@]3(CC[C@@H]4C5=COC(=O)C=C5)O)C)O)O
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| InChi Key |
SOGONHOGEFLVPE-BHZHDSHXSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H32O6/c1-22-9-7-15(25)11-14(22)4-5-17-19(22)20(27)21(28)23(2)16(8-10-24(17,23)29)13-3-6-18(26)30-12-13/h3,6,12,14-17,19,21,25,28-29H,4-5,7-11H2,1-2H3/t14-,15+,16-,17-,19-,21+,22+,23+,24+/m1/s1
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| 化学名 |
5-[(3S,5R,8R,9S,10S,12R,13S,14S,17R)-3,12,14-trihydroxy-10,13-dimethyl-11-oxo-2,3,4,5,6,7,8,9,12,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pyran-2-one
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~240.09 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4009 mL | 12.0045 mL | 24.0090 mL | |
| 5 mM | 0.4802 mL | 2.4009 mL | 4.8018 mL | |
| 10 mM | 0.2401 mL | 1.2005 mL | 2.4009 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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