Dengue virus (DENV) replication complex [1]
The antiviral mechanism involves modulation of host innate immune response genes including RIG-I, IFNα, RNase L, and PKR [1]
Not specified in the context of testicular toxicity; the mechanism is proposed to involve generation of free radicals leading to oxidative stress [2]
Not specified in the context of skin carcinogenesis; proposed mechanisms include inhibition of DMBA metabolism, down-regulation of ROS production, COX-2 inhibition, topoisomerase inhibition, and induction of interferon-α [3]

在人肝癌HepG2细胞系中，硫酸奎宁水合物（150 μM，30分钟）可抑制登革病毒的生长并产生细胞抑制作用[1]。在人肝癌HepG2细胞系中，硫酸奎宁水合物（37.5-150 μM，24小时）可剂量依赖性地显著降低登革病毒RNA和蛋白水平[1]。在感染DENV-2（MOI 1）的HepG2细胞中，用150 μM的硫酸奎宁二水合物处理后，病毒产量降低至未处理对照组的19%（通过灶形成单位（FFU）测定）。在此浓度下，细胞活力保持在80%以上。奎宁对登革病毒2型（DENV-2）的EC50值为102.7 μM，CC50值为322.2 μM，治疗指数（TI）为3.137 [1]。
硫酸奎宁二水合物不影响DENV-2在HepG2细胞表面的吸附，也不影响病毒的内化/进入细胞[1]。
硫酸奎宁二水合物处理显著降低了感染DENV-2的HepG2细胞中病毒RNA的水平，且呈剂量依赖性（37.5、75和150 μM），实时RT-PCR结果显示[1]。
硫酸奎宁二水合物显著降低了病毒蛋白（DENV NS1、E、PrM和C蛋白）的合成，且呈剂量依赖性（37.5、75和150 μM）。 Western blot分析显示，在感染DENV-2的HepG2细胞中，150 μM的硫酸奎宁处理24小时后，细胞内DENV E抗原阳性细胞的比例显著降低[1]。
流式细胞术分析显示，感染后24小时，DENV E抗原阳性HepG2细胞的比例呈剂量依赖性下降，从29.64%（感染对照组）分别降至23.28%、17.21%和12.05%[1]。
与未感染DENV的HepG2细胞相比，用150 μM硫酸奎宁处理24小时后，DENV感染的HepG2细胞中抗病毒基因（包括RIG-I、IFNα、RNase L和PKR）的mRNA表达显著增加。对照细胞[1]。
在感染了DENV-2的A549和EA.hy926细胞中，用硫酸奎宁二水合物（37.5、75和150 μM）处理可导致病毒产生呈浓度依赖性抑制[1]。
在睾丸毒性模型中，对大鼠口服硫酸奎宁二水合物（10 mg/kg/天，持续8周）可诱导氧化应激。在睾丸和附睾精子中，该处理显著增加了丙二醛（MDA）水平（脂质过氧化的标志物）（睾丸MF：64.5±16.3 vs. 对照组28.5±13.4 μmol/mg蛋白；附睾精子：50.7±8.2 vs. 对照组23.8±4.7 μmol/mg蛋白）。该处理显著降低了睾丸线粒体组分（MF）和线粒体后上清液（PMS）中的过氧化氢酶（CAT）活性（MF：0.97±0.02 vs. 对照组 1.15±0.01；PMS：1.02±0.05 vs. 对照组 1.35±0.01 μmol H2O2 消耗量/min/mg 蛋白），以及附睾精子中的过氧化氢酶活性（1.21±0.01 vs. 对照组 1.43±0.02）。超氧化物歧化酶（SOD）活性仅在睾丸线粒体组分中显著降低（1.20±0.43 vs. 对照组 2.29±0.01 单位/mg 蛋白）。睾丸MF（0.17±0.03 vs. 对照组 0.21±0.02 mg/g 组织）、睾丸PMS（0.43±0.01 vs. 对照组 0.71±0.02）和附睾精子（0.15±0.03 vs. 对照组 0.22±0.02）中的抗坏血酸（AA）水平显著降低。谷胱甘肽 (GSH) 水平略有下降，但无统计学意义 [2]。
相同剂量的治疗（10 mg/kg/天，持续 8 周）显著降低了精子数量（55.2±7.21% vs. 对照组 85.6±4.61%）、精子活力（58.0±8.41% vs. 对照组 84.0±5.52%）、活死比（75.8±9.13% vs. 对照组 92.0±2.71%）、日精子生成量 (DSP)（4.62±1.51 x 10^7/g 睾丸 vs. 对照组 8.92±1.62）和睾丸精子总数 (TSN)（29.12±3.21 x 10^6/g 睾丸 vs. 对照组 50.35±2.61），同时增加了总精子畸形率（28.13±1.32% vs. 对照组）。 17.25±1.12%)，特别是弯曲尾畸形（7.3±1.7% vs. 对照组 4.3±0.04%）[2]。
在皮肤致癌模型中，单次局部涂抹DMBA（100 μg/100 μL丙酮），随后涂抹巴豆油（1% v/v丙酮溶液，每周三次，持续14周），可诱发皮肤肿瘤。在整个促进期内口服硫酸奎宁二水合物（12 mg/kg体重）可显著降低累积肿瘤数量、肿瘤重量（0.39±0.002 g vs. 阳性对照组 1.15±0.09 g）、肿瘤产量（2.33±0.48 vs. 5.0±0.44）、肿瘤负荷（2.8±0.15 vs. 6±0.42）和肿瘤发生率（83.33% vs. 100%）。它还延长了平均潜伏期（11.7周 vs. 9.4周）。肿瘤多发性抑制率为53.33% [3]。

硫酸奎宁水合物（灌胃给药，12或15 mg/kg，每周一次，持续16周）对瑞士白化小鼠皮肤癌具有一定的抑制作用[2]。给予成年雄性白化大鼠硫酸奎宁水合物（灌胃给药，10 mg/kg，每日一次，持续8周）后，其睾丸组织中的抗氧化防御系统（包括SOD、CAT和GSH酶活性）会下降[3]。在睾丸毒性大鼠模型中，连续8周灌胃给予硫酸奎宁二水合物（10 mg/kg/天）可诱导氧化应激。这表现为睾丸和附睾精子中抗氧化酶（SOD、CAT）和非酶抗氧化剂（抗坏血酸）活性显著降低，以及脂质过氧化（MDA）水平升高。它还导致睾丸组织病理学改变，包括生精小管基底膜破坏和精子丢失。这些影响与精子数量、活力、存活率、每日精子生成量和睾丸精子总数的显著降低以及精子畸形（尤其是尾部弯曲）的增加有关。此外，还观察到血清睾酮水平轻微但无统计学意义的下降[2]。
在瑞士白化小鼠的DMBA诱导和巴豆油促进的两阶段皮肤癌变模型中，口服给予硫酸奎宁二水合物，剂量为12 mg/kg体重（从首次涂抹巴豆油开始，直至16周实验结束），显示出化学预防作用。该治疗显著降低了肿瘤发生率（83.33% vs. 阳性对照组的100%）、肿瘤数量（2.33±0.48 vs. 5.0±0.44）、肿瘤负荷（2.8±0.15 vs. 6±0.42）、肿瘤重量（0.39±0.002g vs. 1.15±0.09g）以及累积肿瘤数量。肿瘤出现的平均潜伏期也延长（11.7周 vs. 9.4周）。然而，更高的口服剂量（15 mg/kg体重）并未显示出保护作用，肿瘤参数与阳性对照组更为接近（例如，肿瘤数量4.33±0.41，肿瘤负荷5.2±0.27，肿瘤发生率100%）[3]。

细胞增殖实验[1]
细胞类型： 人肝癌细胞系 (HepG2)
测试浓度： 150 μM
孵育时间： 30 分钟
实验结果： 与未处理组相比，DENV 病毒复制受到抑制，病毒产量达到 19%。DENV 阳性细胞比例从 23.28% 呈剂量依赖性下降至 12.05%。

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将细胞（未感染或 DENV 感染）与系列稀释的药物孵育 24 小时。使用 PrestoBlue 细胞活力检测试剂盒评估细胞活力，方法是将试剂加入培养物中，在 37°C 下孵育 30 分钟，并在 570/600 nm 处测量吸光度。结果以细胞存活率百分比表示，并与未处理的对照组进行比较。
集落形成单位 (FFU) 测定：药物处理 24 小时后收集培养上清液，进行 10 倍系列稀释，并接种到 96 孔板中的 Vero 细胞中。24 小时后，加入含有 1.5% 羧甲基纤维素的覆盖培养基。将培养板置于 37°C 培养 3 天。然后洗涤细胞，用 3.7% 甲醛/PBS 固定，并用 1% Triton X-100 透化。加入抗 DENV E 抗体（4G2 克隆）作为一抗孵育 1 小时，随后加入 HRP 标记的二抗孵育 30 分钟。使用底物（3,3'-二氨基联苯胺）对病灶进行染色，然后在光学显微镜下计数。
病毒吸附实验：将HepG2细胞收集为细胞悬液，置于试管中，加入药物和登革病毒（MOI 1），于4℃孵育30分钟。用PBS洗涤细胞，用5% BSA/PBS封闭，然后用抗登革病毒E抗体（3H5克隆）在冰上孵育1小时，检测细胞表面登革病毒E抗原，再用HRP标记的二抗在冰上孵育30分钟。通过流式细胞术分析细胞表面表达。
病毒内吞实验：将HepG2细胞用登革病毒（MOI 1）于4℃感染30分钟。用PBS洗涤细胞以去除未结合的病毒，加入药物，于37℃孵育2小时。随后收集细胞并提取总RNA。将RNA反转录为cDNA，并使用DENV E mRNA引物进行实时RT-PCR以检测内吞病毒。
mRNA表达的实时RT-PCR：将HepG2细胞以MOI 1感染DENV 24小时，然后去除未结合的病毒，并加入药物继续培养24小时。提取总RNA，反转录为cDNA，并使用针对目的基因（RIG-I、IFNα、IFNAR1、OAS-3、RNase L、PKR）的特异性引物进行实时RT-PCR。GAPDH用作管家基因。分析相对表达量（2-ΔΔCt）。
DENV蛋白合成的Western Blot分析：收集感染DENV并用药物处理的HepG2细胞24小时，并用RIPA裂解缓冲液裂解细胞。将等浓度的蛋白质样品通过SDS-PAGE电泳分离，然后转移至硝酸纤维素膜上。用5%脱脂奶粉（溶于PBST缓冲液）封闭膜。使用特异性一抗（抗DENV NS1、E、PrM、C抗体）在4℃孵育过夜，随后使用HRP标记的二抗在室温下孵育1小时，检测DENV蛋白。使用化学发光底物进行检测，并使用ImageJ软件对条带强度进行定量分析。

动物/疾病模型：瑞士白化小鼠，7-8周龄（体重24克）[2]
剂量：12 mg/kg，15 mg/kg
给药途径：口服（灌胃）；每周一次；持续16周
实验结果：12 mg/kg剂量组的肿瘤体积和重量显著减小，15 mg/kg剂量组则无明显效果。

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雄性成年白化大鼠（Wistar品系，体重220-240克）。硫酸奎宁二水合物以10 mg/kg体重/天的剂量口服给药，持续8周。给药途径为口服。对照组大鼠接受生理盐水（0.7 mL/kg）。大鼠在最后一次治疗后24小时，通过颈椎脱臼处死。

在体外，硫酸奎宁二水合物的 CC50（50% 细胞毒性浓度）在 HepG2 细胞中为 322.2 μM，治疗指数 (TI) 为 3.137 [1]。
在大鼠模型中，长期给予治疗剂量的硫酸奎宁二水合物（10 mg/kg/天，持续 8 周）可诱发睾丸毒性。这表现为氧化应激（抗氧化酶减少和脂质过氧化增加）、睾丸组织病理学改变（生精小管基底膜破坏、精子丢失）以及对精液分析的不良影响（精子数量、活力、存活率和日产量降低，畸形率增加）[2]。
在小鼠皮肤致癌模型中，口服15 mg/kg体重的硫酸奎宁二水合物并未显示出保护作用，反而导致肿瘤参数（例如，肿瘤产量4.33±0.41，肿瘤负荷5.2±0.27，肿瘤发生率100%）与阳性对照组更为接近。该研究表明，该剂量可能具有毒性或促细胞分裂作用[3]。

[1]. Drug repurposing of quinine as antiviral against dengue virus infection. Virus Res. 2018 Aug 15;255:171-178. doi: 10.1016/j.virusres.2018.07.018. Epub 2018 Jul 25.

[2]. Chemoprevention of DMBA induced skin carcinogenesis in swiss albino mice by quinine sulfate.(2016): 2636-2640.

[3]. Quercetin protects against testicular toxicity induced by chronic administration of therapeutic dose of quinine sulfate in rats. J Basic Clin Physiol Pharmacol. 2012 Feb 27;23(1):39-44.

硫酸奎宁是奎宁的硫酸盐形式，奎宁是奎尼丁的生物碱分离物。奎宁具有多种作用机制，包括降低氧气摄取和碳水化合物代谢；通过DNA插入干扰DNA复制和转录；以及通过改变钙分布降低肌肉纤维兴奋性。该药物还可以抑制药物外排泵P-糖蛋白，P-糖蛋白在多药耐药肿瘤中过度表达，因此可能增强某些抗肿瘤药物的疗效。(NCI04)
奎宁是从金鸡纳树皮中提取的一种生物碱。它是一种抗疟疾药物，也是金鸡纳提取物的活性成分，金鸡纳提取物自1633年以前就被用于治疗疟疾。奎宁也是一种温和的解热镇痛药，曾用于治疗普通感冒。它曾被广泛用作苦味剂和调味剂，至今仍用于治疗巴贝虫病。奎宁对某些肌肉疾病也有效，特别是夜间腿抽筋和先天性肌强直，因为它直接作用于肌肉细胞膜和钠离子通道。其抗疟疾作用机制尚未完全阐明。另见：硫酸奎宁（注：已移至此处）。

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硫酸奎宁二水合物 是从金鸡纳树中提取的一种天然化合物，广泛用于治疗氯喹耐药的恶性疟疾[1]。
体外实验表明，它能抑制单纯疱疹病毒 (HSV) 和流感病毒的复制[1]。
在登革病毒感染方面，硫酸奎宁二水合物 被认为通过抑制病毒 RNA 和蛋白质的合成和胞吐作用，以及促进抗病毒基因（RIG-I、IFNα、RNase L、PKR）的上调，从而增强宿主的先天免疫反应，发挥其抗病毒活性[1]。
已知奎宁在疟疾治疗中的治疗指数较低。成人疟疾患者的处方口服剂量为每日 600 毫克，其血浆浓度应维持在 10-15 毫克/升。如果重新用于其他用途，应密切监测治疗剂量[1]。
硫酸奎宁的睾丸毒性被认为部分是由于睾丸抗氧化防御受损、精子发生紊乱和脂质过氧化增强所致[2]。
硫酸奎宁含有喹啉骨架，这种骨架存在于许多生物活性化合物中。其他喹啉衍生物已显示出抗肿瘤活性，其中一些（如咪喹莫特）被用作抗肿瘤药物。硫酸奎宁在小鼠皮肤癌模型中的化学预防功效表明其具有作为抗癌药物的潜在作用，其作用机制可能包括COX-2抑制、拓扑异构酶抑制或诱导干扰素-α[3]。

C20H28N2O7S

440.51

782.356

6119-70-6

Quinine hydrochloride dihydrate;6119-47-7;Quinine;130-95-0;Quinine hemisulfate;804-63-7;Quinine hydrobromide;549-49-5

16211610

White to off-white solid powder

495.9ºC at 760 mmHg

233-235ºC

253.7ºC

6.521

192.62

6

14

8

55

538

8

COC1=CC2=C(C=CN=C2C=C1)[C@H]([C@@H]3C[C@@H]4CCN3C[C@@H]4C=C)O.COC1=CC2=C(C=CN=C2C=C1)[C@H]([C@@H]3C[C@@H]4CCN3C[C@@H]4C=C)O.O.O.OS(=O)(=O)O

ZHNFLHYOFXQIOW-LPYZJUEESA-N

InChI=1S/2C20H24N2O2.H2O4S.2H2O/c2*1-3-13-12-22-9-7-14(13)10-19(22)20(23)16-6-8-21-18-5-4-15(24-2)11-17(16)18;1-5(2,3)4;;/h2*3-6,8,11,13-14,19-20,23H,1,7,9-10,12H2,2H3;(H2,1,2,3,4);2*1H2/t2*13-,14-,19-,20+;;;/m00.../s1

(1R)-(6-methoxyquinolin-4-yl)((2S,4S,5R)-5-vinylquinuclidin-2-yl)methanol hemisulfate hydrate

Chinini sulfas Quinine hemisulfate salt monohydrate Quinine sulfate dihydrate

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。  (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。