Soyasaponin Aa

别名: 大豆皂苷Aa;大豆皂甙Aa;大豆皂苷AA 植物提取物,标准品,对照品
目录号: V33708 纯度: ≥98%
Soyasaponin Aa 是一种大豆皂苷,通过下调 3T3-L1 脂肪细胞中的 PPARγ 发挥抗肥胖作用。
Soyasaponin Aa CAS号: 117230-33-8
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
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产品描述
Soyasaponin Aa 是一种大豆皂苷,通过下调 3T3-L1 脂肪细胞中的 PPARγ 发挥抗肥胖作用。
生物活性&实验参考方法
靶点
Soyasaponin Aa exerts its anti-adipogenic effect by inhibiting the transcriptional activity and expression of the key adipogenic transcription factor Peroxisome Proliferator-Activated Receptor Gamma (PPARγ). It also downregulates the expression of CCAAT-enhancer-binding protein alpha (C/EBPα). [1]
体外研究 (In Vitro)
Soyasaponin Aa 剂量依赖性地抑制分化中3T3-L1脂肪细胞的甘油三酯积累。与对照组相比,用25、50和100 µM的Soyasaponin Aa处理,脂质积累分别减少约60%、65%和75%。[1]
Soyasaponin Aa (100 µM) 显著抑制完全分化(第8天)的3T3-L1脂肪细胞中PPARγ和C/EBPα的mRNA和蛋白表达水平。[1]
在使用转染了PPARγ反应元件(PPRE)驱动荧光素酶载体的HEK 293T细胞进行的荧光素酶报告基因实验中,Soyasaponin Aa (100 µM) 显著抑制PPARγ的转录活性。[1]
Soyasaponin Aa (50 和 100 µM) 处理下调了完全分化的3T3-L1脂肪细胞中多种脂肪生成标志基因的mRNA表达,包括脂联素、ADD1/SREBP1c、脂肪细胞脂肪酸结合蛋白2(aP2)、脂肪酸合酶(Fas)和抵抗素。[1]
细胞实验
细胞活力(MTT)实验: 将3T3-L1前脂肪细胞接种于96孔板中。24小时后,用不同浓度(12.5至200 µM)的Soyasaponin Aa处理细胞24小时。然后向每孔加入MTT溶液,孵育3小时。去除培养基后,加入二甲基亚砜溶解甲臜晶体,在540 nm波长下测量吸光度以确定细胞活力。在测试浓度范围内未观察到显著的细胞毒性。[1]
脂肪细胞分化与脂质积累(油红O染色): 汇合后的3T3-L1前脂肪细胞使用标准激素混合物(胰岛素、地塞米松和3-异丁基-1-甲基黄嘌呤)在培养基中诱导分化。在整个8天的分化期间加入Soyasaponin Aa(25、50、100 µM)。第8天,细胞用甲醛固定,用油红O溶液染色30分钟并洗涤。然后将染色的脂滴溶解在含有去污剂的异丙醇中,在510 nm波长下测量吸光度以量化甘油三酯含量。[1]
基因表达分析(实时定量PCR): 使用商业RNA提取试剂盒从经或未经Soyasaponin Aa(50、100 µM)处理的完全分化(第8天)的3T3-L1脂肪细胞中提取总RNA。通过逆转录合成cDNA。使用基于SYBR Green的实时定量PCR和基因特异性引物,定量检测靶基因(PPARγ、C/EBPα、脂联素、ADD1/SREBP1c、aP2、Fas、抵抗素)和内参基因GAPDH的mRNA水平。[1]
蛋白表达分析(Western Blot): 将经或未经Soyasaponin Aa(100 µM)处理的完全分化的3T3-L1脂肪细胞用含有蛋白酶抑制剂的RIPA裂解缓冲液裂解。蛋白裂解物通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,并转移到硝酸纤维素膜上。膜与针对PPARγ、C/EBPα和肌动蛋白的一抗孵育,然后与辣根过氧化物酶偶联的二抗孵育。使用增强化学发光检测系统显影蛋白条带。[1]
荧光素酶报告基因实验(PPARγ转录活性): 将HEK 293T细胞接种于24孔板中,并使用脂质转染试剂共转染PPRE-荧光素酶报告质粒、人PPARγ表达质粒(pcDNA3-hPPARγ)和海肾荧光素酶对照质粒(pRLSV40)。转染24小时后,用Soyasaponin Aa(25、50、100 µM)处理细胞另外24小时。使用双荧光素酶报告基因检测系统测量荧光素酶活性,并将萤火虫荧光素酶活性归一化至海肾荧光素酶活性。[1]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
MTT 检测结果表明,在 3T3-L1 细胞中,浓度高达 200 µM 的药物处理 24 小时后未观察到明显的细胞毒性。[1]
参考文献

[1]. Soyasaponins Aa and Ab exert an anti-obesity effect in 3T3-L1 adipocytes through downregulation of PPARγ. Phytother Res. 2015 Feb;29(2):281-7.

其他信息
大豆皂苷Aa是一种A组大豆皂苷,是从大豆种子下胚轴中分离得到的双糖苷皂苷。其化学结构以大豆皂苷元A为苷元,糖链连接在C-3和C-22位。[1] 研究表明,大豆皂苷Aa通过下调脂肪生成关键转录因子PPARγ和C/EBPα,进而抑制下游脂肪生成基因网络的表达,从而抑制脂肪细胞分化和脂质积累。[1] 液相色谱分析表明,本研究中使用的大豆皂苷Aa纯度大于95%。[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C64H100O31
分子量
1365.46000
精确质量
1364.624
CAS号
117230-33-8
PubChem CID
14186205
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.5±0.1 g/cm3
熔点
255 - 258 °C
折射率
1.625
LogP
6.15
tPSA
471.49
氢键供体(HBD)数目
14
氢键受体(HBA)数目
31
可旋转键数目(RBC)
20
重原子数目
95
分子复杂度/Complexity
2780
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
KBGJRGWLUHSDLW-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C64H100O31/c1-25(68)85-33-23-84-56(50(87-27(3)70)46(33)86-26(2)69)91-45-30(71)22-83-54(44(45)79)95-52-51(80)59(4,5)19-29-28-11-12-35-61(7)15-14-36(62(8,24-67)34(61)13-16-64(35,10)63(28,9)18-17-60(29,52)6)90-58-49(42(77)41(76)47(92-58)53(81)82)94-57-48(40(75)38(73)32(21-66)89-57)93-55-43(78)39(74)37(72)31(20-65)88-55/h11,29-52,54-58,65-67,71-80H,12-24H2,1-10H3,(H,81,82)
化学名
5-[4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-3-[3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-6-[[9-[3,5-dihydroxy-4-(3,4,5-triacetyloxyoxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]oxy-10-hydroxy-4-(hydroxymethyl)-4,6a,6b,8a,11,11,14b-heptamethyl-1,2,3,4a,5,6,7,8,9,10,12,12a,14,14a-tetradecahydropicen-3-yl]oxy]-3,4-dihydroxyoxane-2-carboxylic acid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.7324 mL 3.6618 mL 7.3235 mL
5 mM 0.1465 mL 0.7324 mL 1.4647 mL
10 mM 0.0732 mL 0.3662 mL 0.7324 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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