| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Ku70/80 heterodimer (IC₅₀ = 3.5 μM in Ku-DNA binding assay)
DNA-PKCS kinase activity (IC₅₀ = 2.5 μM in Ku-dependent activation assay) [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
STL127705（化合物 L）可抑制 DNA-PKCS 激酶的 Ku 依赖性激活，并在浓度为 0-100 μM 时抑制 Ku70/80 与 DNA 底物的结合 [1]。在 SF-767 细胞中，STL127705（0-100 μM；6 小时）可以降低 DNA-PKCS 自磷酸化表达 [1]。 STL127705（0–40 μM；6 小时）以剂量依赖性方式表现出抗增殖作用 [1]。当吉西他滨和TL127705（1μM；48小时）一起使用时，可以大大增加细胞凋亡[2]。
STL127705（化合物 L）在电泳迁移率变动实验（EMSA）中破坏 Ku70/80 异二聚体与 DNA 的结合，IC₅₀ 为 3.5 μM。 在生化实验中，它能抑制 Ku 依赖性的 DNA-PKCS 激酶激活，IC₅₀ 为 2.5 μM。 在 SF-767 胶质母细胞瘤细胞中，用 STL127705 预处理后，再使用依托泊苷诱导 DNA 损伤，会导致 DNA-PKCS 在 Ser2056 位点的自身磷酸化呈剂量依赖性下降（Western blot 结果显示），但不影响总 DNA-PKCS 蛋白水平。 STL127705 作为单药在 SF-767 和永生化前列腺上皮（PrEC）细胞系中表现出剂量依赖性细胞毒性。 在亚细胞毒性浓度（20–35 μM）下，STL127705 能协同增敏 SF-767 和 PrEC 细胞对电离辐射（4 Gy）的敏感性，导致细胞存活率下降的幅度超过两种单药效应简单相加的总和。[1] |
| 酶活实验 |
Ku70/80-DNA 结合实验（EMSA）： 将放射性标记的双链 DNA 底物与纯化的人 Ku70/80 蛋白在含有 Tris-HCl、KCl 和 DTT 的缓冲液中孵育。化合物溶解于 DMSO 中，在加入 DNA 底物前，先与蛋白质在 37°C 预孵育 5 分钟。在 37°C 继续孵育 15 分钟后，反应混合物在非变性聚丙烯酰胺凝胶上进行分离。Ku70/80 与 DNA 结合会导致条带迁移率改变（条带移位），而化合物对该结合的抑制则表现为这种移位条带的减少或消失。
DNA-PKCS 激酶活性实验： 使用市售的激酶检测系统。反应体系包含反应缓冲液、生物素化的 p53 衍生肽底物、纯化的人 Ku70/80、γ-³²P-ATP 和纯化的人 DNA-PKCS。化合物溶解于 DMSO 中，在加入 ATP 和 DNA-PKCS 之前，先与 Ku70/80 在 37°C 预孵育 5 分钟。肽底物的磷酸化通过将生物素化肽捕获在膜上，洗去未掺入的 ATP，并用闪烁计数器定量膜上的放射性信号来测量。[1] |
| 细胞实验 |
细胞活力测定[1]
细胞类型： SF-767、PrEC 细胞 测试浓度： 0-40 µM 孵育时间：6小时 实验结果：证明了剂量依赖性细胞毒性。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型： SF-767 细胞 测试浓度： 0-100 µM <孵育持续时间：预处理 2 小时，然后总共孵育 4 小时。 实验结果：DNA-PKCS自身磷酸化减弱，但总DNA-PKCS没有增加。 STL127705 被抑制。 细胞凋亡分析 [1] 细胞类型： H1299 细胞 测试浓度： 1 µM 孵育时间： 48 h 实验结果： STL127705与吉西他滨联合诱导细胞凋亡，细胞凋亡率大幅增加至76%。 DNA-PKCS 自身磷酸化实验： SF-767 细胞用 STL127705 预处理 2 小时，然后在化合物持续存在下，用依托泊苷（25 μM）处理 4 小时以诱导 DNA 双链断裂。制备总细胞提取物，并使用针对 DNA-PKCS Ser2056 磷酸化位点的特异性抗体和针对总 DNA-PKCS 的抗体进行 Western blot 分析。使用图像分析软件对条带强度进行定量。 细胞活力/增殖实验（MTS）： 将 SF-767 或 PrEC 细胞接种于 96 孔板中过夜贴壁。细胞用一系列浓度的 STL127705（1–100 μM）预处理 2 小时，然后接受 4 Gy 的 γ 辐射或模拟处理。随后，细胞在不移除化合物的情况下培养 6 天。细胞活力通过将培养基更换为含有 MTS 试剂的无色培养基，孵育 2 小时，并在 490 nm 波长下测量吸光度来评估。吸光度值与活细胞数成正比，并归一化到未处理的对照组。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
STL127705 在人细胞系（SF-767 和 PrEC）中表现出剂量依赖性细胞毒性。在浓度高达 25 μM 时，细胞毒性保持较低水平（低于 5% 的非存活率），之后细胞死亡率呈指数级增长。其放射增敏作用的治疗窗口接近细胞毒性快速增长的起始点。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
STL127705 被鉴定为首个针对 Ku70/80 异二聚体的小分子抑制剂，Ku70/80 异二聚体是 DNA 非同源末端连接 (NHEJ) 通路中的关键 DNA 修复蛋白。
它通过基于计算机结构的药物设计方法发现，利用 Ku70/80 的晶体结构，确定了 DNA 结合通道和亚基界面附近的一个假定结合口袋。 分子对接预测 STL127705 占据该口袋，并与 Ku70 的 Ser257 和 Arg363 以及 Ku80 的 Gln269 和 Arg486 形成氢键。 通过抑制 Ku70/80 与 DNA 末端的结合，它破坏了 NHEJ 的初始步骤以及后续下游效应分子（如 DNA-PKCS）的激活。 它能够协同增强癌细胞对药物的敏感性。辐射表明该化合物具有作为肿瘤（包括胶质母细胞瘤）放射增敏剂的潜力，因为非同源末端连接（NHEJ）活性可能导致治疗耐药。 该化合物的结构被认为是药物化学优化的一个有前景的起点（“先导化合物”），可用于提高亲和力、降低细胞毒性，并开发用于癌症治疗的“先导”化合物，该化合物可能应用于合成致死策略或与放疗/化疗联合应用。[1] |
| 分子式 |
C22H20FN5O4
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|---|---|
| 分子量 |
437.423707962036
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| 精确质量 |
437.149
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| CAS号 |
1326852-06-5
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| PubChem CID |
53333307
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| LogP |
3.1
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| tPSA |
106
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
7
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| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
670
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
FC1=CC=CC(=C1)N1C(NC2C(=CN=C(N=2)NCCC2C=CC(=C(C=2)OC)OC)C1=O)=O
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| InChi Key |
FPVFCXYTLUJPQJ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H20FN5O4/c1-31-17-7-6-13(10-18(17)32-2)8-9-24-21-25-12-16-19(26-21)27-22(30)28(20(16)29)15-5-3-4-14(23)11-15/h3-7,10-12H,8-9H2,1-2H3,(H2,24,25,26,27,30)
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| 化学名 |
2-[2-(3,4-dimethoxyphenyl)ethylamino]-6-(3-fluorophenyl)-8H-pyrimido[4,5-d]pyrimidine-5,7-dione
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~2.4 mg/mL (~5.49 mM)
H2O : < 0.1 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2861 mL | 11.4307 mL | 22.8613 mL | |
| 5 mM | 0.4572 mL | 2.2861 mL | 4.5723 mL | |
| 10 mM | 0.2286 mL | 1.1431 mL | 2.2861 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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