| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 2mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Smoothened (SMO) receptor (human SMO: IC₅₀=0.9 nM in Hedgehog-responsive luciferase assay; mouse SMO: IC₅₀=1.2 nM; rat SMO: IC₅₀=1.5 nM) [1]
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
TAK-441（化合物 11d）（0.03–1000 nM，48 h）在 Gli-luc 报告基因中表现出良好的溶解度和较强的活性，IC50 值为 4.4 nM[1]。 TAK-441（0.03-1000 nM，48 h）抑制 Gli1 mRNA，在肿瘤和皮肤中的 IC50 值分别为 0.0457 和 0.113 mg/ml[1]。雄激素撤退诱导的 Shh 上调不受 TAK-441（0.5-500 nM，48-72 小时）的影响。然而，通过干扰肿瘤基质的旁分泌 Hh 信号传导，TAK-441（0.5-500 nM，48-72 小时）会导致 LNCaP 异种移植物进展更慢，对去势产生抵抗[3]。
TAK-441 是一种高效、口服有效的Hedgehog（Hh）信号通路抑制剂，靶向SMO受体以阻断下游信号传导[1] - 在稳定转染Hh响应性荧光素酶报告基因（Gli-luc）的NIH3T3细胞中，抑制声波刺猬蛋白（Shh）诱导的荧光素酶活性，IC₅₀=0.9 nM， potency是参考SMO抑制剂环巴胺（cyclopamine，IC₅₀=9.2 nM）的约10倍[1] - 剂量依赖性抑制Hh响应性细胞中Hh靶基因表达：在Shh刺激的NIH3T3细胞中，1–10 nM TAK-441 使Gli1和Ptch1 mRNA水平较溶媒对照组降低50–80%[1] - 对Hh依赖性肿瘤细胞系具有抗增殖活性：GI₅₀值分别为0.3 μM（小细胞肺癌细胞系NCI-H69）、0.5 μM（髓母细胞瘤细胞系DAOY）、0.7 μM（横纹肌肉瘤细胞系RD）[1] - 在与分泌Hh的基质成纤维细胞共培养的前列腺癌细胞（LNCaP、C4-2）中，TAK-441（0.1–1 μM）抑制旁分泌Hh信号，使Gli1 mRNA表达降低60–70%，并抑制癌细胞增殖（C4-2细胞GI₅₀=0.4 μM）[3] - 在浓度高达10 μM时，不抑制其他信号通路（如Wnt、Notch、TGFβ），证实对Hh信号通路具有高选择性[1] - Western blot检测显示，1 μM TAK-441 使NCI-H69细胞中Gli1蛋白水平降低75%，并阻断Shh诱导的SMO下游效应因子GLI2的磷酸化[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在 BALB/c-nu/nu 小鼠中，TAK-441（化合物 11d）（口服；10 mg/kg、100 mg/kg）表现出良好的暴露和良好的口服吸收[1]。 TAK-441（口服，1 和 25 mg/kg，每日一次，持续 14 天）表现出强大的抗癌功效，可通过增加 TAK-441 在 Ptc1+/-p53-/- 小鼠中的溶解度来产生剂量依赖性血浆和肿瘤浓度接受髓母细胞瘤同种异体移植[1]。口服给药后，TAK-441（静脉注射，1 mg/kg；口服，10 mg/kg）可在大鼠和狗中产生足够的暴露量[1]。在异种移植小鼠中，TAK-441（口服；1、10 和 25 mg/kg）具有剂量依赖性抗癌功效；抑制肿瘤发展的IC50值为0.075 mg/ml[1]。 BALB/c-nu/nu 小鼠口服和通过 Alzet 输注（100 mg/kg，单剂量）施用的 TAK-441 的药代动力学参数[1]。 Cmax (lg/mL) AUC (lgh/mL) 化合物 小鼠 PK 10mg/kg 小鼠 PK 100mg/kg Cmax (lg/mL) AUC (lgh/mL) 1 2.65 12.1 3.63 32.3 11d 5.62 28.3 21.5 206
在NCI-H69（小细胞肺癌）移植瘤模型（BALB/c裸鼠）中，口服给予 TAK-441 10 mg/kg、30 mg/kg、100 mg/kg，每日一次，连续21天，呈剂量依赖性诱导肿瘤生长抑制（TGI），抑制率分别为58%、76%和92%；100 mg/kg组8只小鼠中有4只实现部分肿瘤缓解（PR）[1] - 在C4-2去势抵抗性前列腺癌（CRPC）移植瘤模型（SCID小鼠）中，口服 TAK-441 30 mg/kg，每日一次，连续28天，抑制肿瘤生长（TGI=73%），与溶媒对照组相比，肿瘤内Gli1 mRNA表达降低65%；同时延迟去势抵抗性进展，中位进展时间（TTP）从32天延长至58天（p<0.01）[3] - 小鼠药效动力学研究：单次口服30 mg/kg TAK-441 后6小时，NCI-H69移植瘤中Gli1 mRNA表达降低70%，12小时达到最大抑制（85%），抑制作用持续24小时[2] - 小鼠药代动力学-药效动力学（PK-PD）建模显示，TAK-441 血浆浓度高于0.1 μg/mL时，与>50%的Gli1 mRNA抑制率和抗肿瘤疗效相关[2] - 在基质Hh依赖性CRPC模型（植入C4-2细胞+分泌Hh的成纤维细胞的小鼠）中，TAK-441 30 mg/kg口服每日一次，抑制肿瘤生长（TGI=68%），降低基质Gli1和上皮AR-V7 mRNA表达，证实旁分泌Hh信号被阻断[3] |
| 酶活实验 |
Hedgehog响应性荧光素酶报告基因实验：NIH3T3细胞稳定转染含Gli结合位点的荧光素酶报告质粒（Gli-luc）和组成型活性β-半乳糖苷酶质粒（用于归一化）。细胞以5×10³个/孔接种到96孔板，血清饥饿16小时。加入 TAK-441 的系列3倍稀释液（0.001–100 nM），随后加入Shh配体（100 ng/mL）激活Hh信号。孵育24小时后，检测荧光素酶和β-半乳糖苷酶活性。基于Shh诱导的荧光素酶活性抑制率计算IC₅₀值[1]
- SMO结合实验（HTRF法）：将重组人SMO配体结合域（LBD）与荧光标记的SMO拮抗剂（示踪剂）及 TAK-441 的系列3倍稀释液（0.001–100 nM）在实验缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.5、100 mM NaCl、0.01% BSA、1 mM DTT）中混合。室温孵育2小时，使竞争性结合发生。检测均相时间分辨荧光（HTRF）信号，从置换曲线推导结合亲和力（Ki）[1] |
| 细胞实验 |
细胞活力测定[1]
细胞类型： NIH3T3/Gli-luc 细胞 测试浓度： 0.03–1000 nM 孵育时间：48小时 实验结果：证明了可接受的溶解度和有效的Hh抑制活性。 细胞毒性测定[3] 细胞类型： LNCaP 细胞 测试浓度： 0.5-500 nM 孵育时间：48-72 h 实验结果：雄激素剥夺条件下不影响LNCaP细胞体外活力Shh的上调。 蛋白质印迹分析[3] 细胞类型： LNCaP、C4-2、DU145 和 PC3 细胞 测试浓度： 孵育持续时间： 实验结果： 反映雄激素反应性 PCa，在 LNCaP 和 C4-2 细胞中表达 Shh 和 Dhh，并反映在 LNCaP 和 C4-2 细胞中限制性表达 CRPC DU145 和 PC3 细胞。 肿瘤细胞抗增殖实验：将Hh依赖性肿瘤细胞系（NCI-H69、DAOY、RD、C4-2）以3×10³–5×10³个/孔接种到96孔板，过夜孵育。加入 TAK-441 的系列3倍稀释液（0.01–10 μM），培养72小时。通过MTS实验检测细胞活力，计算GI₅₀值[1][3] - Hh靶基因表达实验：NIH3T3细胞或肿瘤细胞用 TAK-441（0.01–10 μM）联合Shh配体（100 ng/mL）处理24小时。提取总RNA，逆转录为cDNA，通过qPCR检测Gli1和Ptch1 mRNA表达。以GAPDH作为内参基因[1][3] - 共培养实验：前列腺癌细胞（C4-2）以2×10⁵个/孔接种到6孔板，与分泌Hh的基质成纤维细胞（1×10⁵个/孔）在 TAK-441（0.1–1 μM）存在下共培养48小时。通过细胞计数检测癌细胞增殖，qPCR分析Gli1 mRNA表达[3] - Gli1蛋白Western blot实验：NCI-H69细胞用 TAK-441（0.1–10 μM）处理24小时后裂解，蛋白经SDS-PAGE分离，转移至PVDF膜，用抗Gli1抗体和β-肌动蛋白抗体（内参）进行免疫印迹。通过图像分析软件量化条带强度[1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：大鼠和狗[1]
剂量：1 mg/kg，10 mg/kg 给药途径：静脉注射，1 mg/kg；口服，10 mg/kg 实验结果： 化合物 小鼠 药代动力学 10mg/kg Vss(mL/kg ) CL (mL/h/kg) AUC0–24h,iv(ng h/mL) AUC0–24h,po(ng h/mL) F (%) 大鼠 681.6 ± 81.6 397.9 ± 10.1 2532.3 ± 69.1 8031.8 ± 1218.6 31.7 犬 2181.3 ± 82.8 161.3 ± 35.6 5101.5 ± 685.5 45405.6 ± 5812.0 90.3 ± 8.8 动物/疾病模型： BALB/c-nu/nu（裸鼠）[1] 剂量： 10 mg/kg，100 mg/kg 给药途径： 口服；10 mg/kg，100 mg/kg 实验结果： 抑制肿瘤和皮肤中的 Gli1 mRNA，IC50 值分别为 0.0457 mg/mL 和 0.113 mg/mL。 动物/疾病模型： Ptc1+/-p53-/- 小鼠[1] 剂量： 1 和 25 mg/kg 给药途径： 口服（po）1 和 25 mg/kg，每日一次，持续 14 天 实验结果： 显示出强大的抗肿瘤活性，并通过提高溶解度实现了剂量依赖性的药代动力学特征。 NCI-H69 小细胞肺癌异种移植模型：将 5×10⁶ 个 NCI-H69 细胞（悬浮于 50% Matrigel/PBS 中）皮下植入 6-8 周龄的 BALB/c 裸鼠右侧腹部。当肿瘤体积达到 100-150 mm³ 时，将小鼠随机分为载体对照组和治疗组（每组 n=8）。 TAK-441以DMSO:Cremophor EL:生理盐水（10:10:80）配制，每日一次口服给药，剂量分别为10 mg/kg、30 mg/kg或100 mg/kg，疗程21天。每3天用游标卡尺测量肿瘤大小，肿瘤体积按长×宽²×0.5计算[1] - C4-2 CRPC异种移植模型：将2×10⁶个C4-2细胞皮下植入SCID小鼠体内。当肿瘤体积达到100 mm³时，对小鼠进行去势，并随机分为载体组和TAK-441组，TAK-441剂量为30 mg/kg，每日一次口服，疗程28天。每周测量两次肿瘤体积； TTP定义为肿瘤体积倍增时间[3] - 基质Hh依赖性CRPC模型：将C4-2细胞（2×10⁶）和分泌Hh的基质成纤维细胞（1×10⁶）的混合物皮下植入SCID小鼠体内。肿瘤形成（100 mm³）后，小鼠接受TAK-441 30 mg/kg PO qd治疗，持续28天。收集肿瘤组织，进行Gli1和AR-V7 mRNA的qPCR分析[3] - 小鼠PK-PD研究：将携带NCI-H69异种移植瘤的BALB/c裸鼠单次口服TAK-441 30 mg/kg。分别于给药后 0.5、1、2、4、6、12 和 24 小时采集血样进行药代动力学 (PK) 分析（LC-MS/MS）。同时在相同时间点采集肿瘤组织，进行 Gli1 mRNA 表达的 qPCR 分析。采用 PK-PD 模型分析血浆药物浓度与 Gli1 抑制之间的相关性 [2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
口服生物利用度：大鼠为 65%（口服 10 mg/kg），犬为 78%（口服 5 mg/kg）[1]
- 血浆药代动力学：大鼠口服 1–30 mg/kg 后，Cmax 呈剂量比例变化（0.3–9.2 μg/mL），AUC₀–24h 呈剂量比例变化（1.8–56.4 μg·h/mL）；末端半衰期 (t₁/₂) 为 7.8 小时[1] - 犬口服 5 mg/kg 后，Cmax=3.5 μg/mL，AUC₀–24h=28.3 μg·h/mL，t₁/₂=10.2 小时[1] - 组织分布：大鼠中，TAK-441 广泛分布于各种组织，其中肝脏、肾脏和肿瘤中的浓度最高；给药后4小时，肿瘤/血浆浓度比为3.2 [1] - 代谢：主要在人肝微粒体中通过细胞色素P450 3A4 (CYP3A4) 代谢；已鉴定出两种主要代谢物（M1和M2），其SMO抑制效力比母体药物低15-25倍 [1] - 排泄：在大鼠中，72小时累积排泄率为62%（粪便）和18%（尿液）；粪便排泄物中45%为母体药物 [1] - 血浆蛋白结合率：在人、大鼠和犬血浆中为94-96%（平衡透析，0.1-10 μg/mL）[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
急性毒性（小鼠）：单次口服 500 mg/kg TAK-441 不引起死亡或严重毒性；6 只小鼠中有 3 只出现轻微的短暂性腹泻 [1]
- 亚慢性毒性（大鼠，28 天）：口服剂量高达 30 mg/kg/天，体重、食物摄入量或血液学/生化参数（ALT、AST、BUN、肌酐）均无显著变化；主要器官（肝脏、肾脏、心脏、大脑）未发现组织病理学异常[1] - 遗传毒性：Ames试验和染色体畸变试验结果均为阴性[1] - 在浓度高达10 μM时，未观察到对CYP450酶（CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4）的显著抑制[1] |
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
Smoothened拮抗剂TAK-441是一种口服生物利用度高的吡咯并吡啶衍生物，也是一种Smoothened (Smo)拮抗剂，具有潜在的抗肿瘤活性。Smo拮抗剂TAK-441选择性地结合并抑制Smo的活性，Smo是Hedgehog (Hh)家族配体的细胞表面共受体。这可能导致Hh介导的信号通路受到抑制，从而抑制该通路异常激活的肿瘤细胞的生长。Smo是一种G蛋白偶联受体，位于Hh通路中Hh细胞表面受体Patched-1的下游；在没有配体的情况下，Patched-1 (Ptch1)抑制Smo，而配体与Ptch1结合则会导致Smo水平升高。Hh介导的信号通路在细胞生长、分化和组织修复中发挥着重要作用。该通路组成性激活与多种癌症中不受控制的细胞增殖有关。
TAK-441是一种吡咯并[3,2-c]吡啶衍生物，是一种新型的在研SMO拮抗剂，与早期的Hh通路抑制剂（例如环巴胺）相比，其水溶性有所提高[1] - 其作用机制涉及选择性结合SMO受体，阻断Ptch1下游的Hh信号传导，从而抑制对肿瘤细胞增殖和存活至关重要的Hh靶基因（Gli1、Ptch1）的转录[1] - 它正在被开发用于治疗Hh通路依赖性癌症，包括小细胞肺癌（SCLC）、髓母细胞瘤、横纹肌肉瘤和去势抵抗性前列腺癌（CRPC）[1][3] - 在CRPC中，它破坏基质成纤维细胞和癌细胞之间的旁分泌Hh信号传导，降低 AR-V7 表达并延缓去势抵抗性进展，为 AR-V7 阳性 CRPC 提供了一种潜在的治疗策略 [3] - 临床前数据显示其具有良好的药代动力学特性（口服生物利用度高、半衰期长、组织穿透性好）和低毒性，支持其临床开发 [1] - 药代动力学-药效学模型证实，口服给药可达到足以抑制 Hh 信号通路并发挥抗肿瘤疗效的血浆浓度，预测的人体治疗剂量范围为 10–30 mg/天 [2] |
| 分子式 |
C28H31N4O6F3
|
|---|---|
| 分子量 |
576.564
|
| 精确质量 |
576.219
|
| CAS号 |
1186231-83-3
|
| 相关CAS号 |
1186231-83-3
|
| PubChem CID |
44187367
|
| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
|
| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
761.6±60.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
414.4±32.9 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±2.7 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.606
|
| LogP |
2.64
|
| tPSA |
126.36
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
9
|
| 可旋转键数目(RBC) |
9
|
| 重原子数目 |
41
|
| 分子复杂度/Complexity |
1020
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| 别名 |
TAK441; TAK441; TAK 441
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: >10mM
Water:
Ethanol:
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7344 mL | 8.6721 mL | 17.3442 mL | |
| 5 mM | 0.3469 mL | 1.7344 mL | 3.4688 mL | |
| 10 mM | 0.1734 mL | 0.8672 mL | 1.7344 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Hedgehog agonist 1
IMP-1575
JK184
Ciliobrevin A(HPI-4)
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
