FXR/farnesoid X receptor (IC50 = 40 μM)

CRC 细胞系 HT29 (EC50 ~10 μM) 中的 FXR 报告基因被 T-βMCA 钠抑制 [3]。在 HT29 和 HCT116 细胞中，T-βMCA 钠剂量依赖性地增强 WNT 信号传导 [3]。 T-βMCA 钠可诱导 DNA 损伤和 Lgr5+ 细胞生长 [3]。

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在Ntcp-HepG2细胞中，GCDCA在4小时后显著增加了凋亡。与TβMCA共同孵育可将细胞凋亡率降低至49%（与GCDCA相比，p<0.01；n=6）。GCDCA（100μmol/L）在6小时后将MMP降至34%，而TβMCA联合治疗在所有时间点将MMP恢复到对照水平（n=4）。TβMCA还恢复了棕榈酸诱导的MMP的分解。GCDCA诱导Bax从细胞质向线粒体的易位，这种易位被同等浓度的TβMCA同时处理所抑制。
结论：TβMCA通过抑制Bax向线粒体的易位和保护MMP来限制低微摩尔浓度GCDCA或棕榈酸酯诱导的肝细胞凋亡。因此，需要进一步的研究来评估TβMCA在改善胆汁淤积性肝损伤方面的潜在用途。[1]

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T-MCAs是FXR拮抗剂[2]
众所周知，CA而非MCA是FXR激动剂（Reschly等人，2008），因此在GF和CONV-R小鼠小肠中观察到的CA水平相似（图2和S2）很难与CONV-R鼠回肠中FXR依赖性基因的高表达相一致（图4A和S4）。然而，GF小鼠回肠中的MCA水平明显较高（图S2）。MCA的疏水性远低于原代人胆汁酸CDCA和CA，后者与FXR的亲和力与其疏水性直接相关（Reschly等人，2008）。将TβMCA与FXR 6E-CDCA（OCA，奥贝胆酸；INT-747）共晶结构对接到FXR的配体结合口袋中，表明与6E-CDCA的6α乙基相比，TβMCA的6β羟基不占据Tyr358、Phe363和Tyr366附近的口袋（图6A）。已知该口袋对FXR的激活至关重要（Mi等人，2003），并使我们假设TβMCA可能充当FXR拮抗剂。

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为了验证我们的假设，我们进行了辅激活子募集试验，结果表明TαMCA和TβMCA都是FXR拮抗剂，IC50值分别为28μM和40μM（图6B）。牛磺酸结合对于拮抗活性至关重要，正如预期的那样，在该试验中，TαMCA和TβMCA均未激活FXR（数据未显示）。为了排除观察到的拮抗活性是由于高胆汁酸浓度下的非特异性洗涤剂作用引起的可能性，我们发现，在100μM或400μMTβMCA的存在下，选择性FXR激动剂GW4064的浓度反应曲线向右移动（图6C）。我们接下来研究了TβMCA是否也可以在小肠中作为FXR拮抗剂发挥作用，小肠已被证明在所有组织中具有最高的Fgf15表达（Larsson等人，2012）。我们用TCA处理CONV-R小鼠的回肠外植体以诱导Fgf15表达，发现TβMCA以浓度依赖的方式阻止了这种诱导（图6D）。此外，我们通过TCA治疗在GF小鼠体内诱导回肠Fgf15和Shp表达，并表明同时用TβMCA治疗显著降低了这种诱导（图6E和6F）。我们无法在CONV-R小鼠中重复这一实验，因为肠道微生物群会迅速将TβMCA与βMCA解除结合。综上所述，这些数据表明TβMCA是配体激活的FXR的竞争性可逆拮抗剂[2]。

T-βMCA 钠（400 mg/kg；注射；每周两次；持续 6 周）可以有效复制 HFD 促进 CRC 进展的潜力 [3]。此外，T-βMCA 盐治疗后血液细胞因子水平（IFN-γ、IL-6 和 IL-17）显着升高 [3]。

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CONV-R小鼠的抗生素治疗改变胆汁酸组成和Fgf15和Cyp7a1的表达[2]
为了研究微生物群诱导的胆汁酸组成和Fgf15和Cyp7a1表达的变化在定植小鼠中是否可逆，我们用由杆菌肽、新霉素和链霉素组成的抗生素混合物治疗CONV-R小鼠，这些抗生素混合物不能从肠道吸收。我们发现，抗生素治疗增加了野生型小鼠胆囊中TCA和TβMCA的水平，降低了血清中次生胆汁酸的水平（图5A和5B）。这些结果与最近的一项研究一致，该研究显示氨苄西林治疗的小鼠肠腔内TCA和TβMCA水平升高（Kuribayashi等人，2012）。抗生素治疗还促进了Fgf15表达的显著抑制和Cyp7a1表达的相应增加（图5C）。因此，抗生素治疗导致的表型与GF小鼠中观察到的表型相似，即胆汁酸组成改变，Fgf15减少，Cyp7a1表达增加。

FXR辅激活子招募试验[2]
如前所述（Solaas等人，2004），在辅活化剂补充试验中测试了αMCA和βMCA及其各自的牛磺酸偶联物的直接FXR活性。人FXR的配体结合结构域（氨基酸222-472）在大肠杆菌中用pET28a载体表达为NH2末端His标记蛋白，并通过亲和层析纯化。重组人FXR的活性在白色384孔板上的FXR辅激活子募集试验中测定。使用Eu3+偶联的抗His抗体（抗His-Eu3+）和别藻蓝蛋白偶联的链霉抗生物素蛋白。使用衍生自类固醇受体辅活化剂1的N-末端生物素化肽（NH2-HSSLTERHKILHRLLQEGPS-COOH）作为辅活化剂。20μl反应体积包含20 mM Tris（pH 7.5）、0.125%CHAPS、2 mM二硫曲糖醇、0.05%牛血清白蛋白、0.14μg/ml抗His-Eu3+、2.9μg/ml别藻蓝蛋白偶联链霉抗生物素蛋白、75 nM人FXR配体结合结构域、150 nM生物素化类固醇受体辅活化剂1肽和适当的配体。在反应混合物中存在80μM CDCA的情况下测量拮抗剂活性。在加入所有试剂后，将平板在室温下孵育1小时，并在Pherastar平板读数器中测量时间分辨荧光。激发波长为340nm，荧光测量波长为615nm和665nm。通过将665nm信号除以615nm信号并将分数乘以10000来计算特定信号。TαMCA和TβMCA购自xxx。GW4064购自xxx，使用浓度范围为5.1 nM至100μM。XLFit用于将实验数据点拟合到曲线上并计算IC50值。

人HepG2肝母细胞瘤细胞的转染与培养[1]
与之前所述类似，将大鼠Ntcp插入pcDNA3.1载体中，并用Fugene转染试剂稳定转染入人肝癌细胞系HepG2）。细胞在添加了10%胎牛血清、2 mmol/L L-谷氨酰胺、1 mmol/L丙酮酸钠、非必需氨基酸（100×储备溶液的1%）、100 U/mL青霉素、0.1 g/L链霉素和1 g/L G418硫酸盐的PAA最低必需培养基（MEM）中培养。在培养24小时后，将Ntcp-HepG2细胞与胆汁酸GCDCA、TUDCA或单独的TβMCA，或与GCDCA+TUDCA或GCDCA+TβMCA的组合一起孵育4小时，每种浓度为25μmol/L，或与溶剂DMSO（0.1%）作为对照。此外，细胞与游离脂肪酸棕榈酸酯（200μmol/L）单独或与TβMCA联合孵育。

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线粒体膜电位[1]
Ntcp-HepG2细胞在聚赖氨酸涂覆的96孔培养皿中培养24小时（4×104个细胞/孔），并与25、50和100μmol/l GCDCA、TβMCA或GCDCA和TβMCA的等摩尔组合孵育2、4和6小时。此外，细胞用棕榈酸酯与TβMCA联合处理。细胞在细胞培养基中用来自Molecular Probes的2μmol/L 5,5′，6,6′-四氯-1,1′，3,3′-四乙基苯并咪唑碳腈（JC-1）染色30分钟，染色后用HBSS洗涤两次。用Cyto Fluor 4000平板读数器在485nm（激发）和530和580nm（发射）波长下测定荧光。绿色和红色荧光信号的比率是线粒体膜电位ΔΨm的一个参数，与线粒体质量无关。

动物/疾病模型： APCmin/+ 小鼠[3]
剂量： 400 mg/kg
给药途径： 灌胃（po）；每周两次；持续 6 周
实验结果： 肠道完整性显著下降，肠道和结肠肿瘤生长加速。

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无菌雄性 Swiss Webster 和 C57BL/6 小鼠饲养于柔性塑料薄膜隔离器中，并严格控制在 12 小时光照/黑暗循环条件下。Fxr−/− 小鼠经四代回交至 C57BL/6 背景后，通过与 Frank Gonzalez 的 MTA 从 Jackson 实验室获得，并再次回交至 C57BL/6 背景四代（总共回交八代）。通过胚胎移植将Fxr−/−小鼠重新培育为无菌小鼠（GF），并在柔性塑料薄膜隔离器中严格按照12小时光照/黑暗循环饲养。
所有小鼠均自由摄食经高压灭菌的饲料。通过培养和PCR分析粪便中16S rRNA基因的扩增，对无菌隔离器进行常规无菌检测。所有小鼠在分析时均为9-16周龄，且各实验中小鼠的年龄均匹配（±2周）。在禁食4小时后，于异氟烷深度麻醉下从下腔静脉采集血液。采集肝脏、胆囊、小肠、盲肠和结肠，并将小肠分为三个等长的肠段，按升序编号。取小肠最远端的小活检组织进行回肠RNA分析。所有用于胆汁酸和RNA分析的组织均在液氮中速冻，并储存于−80°C直至进一步处理。收集每个笼子的粪便。

通过胃灌注法，分别在小鼠处死前2小时和14小时，向GF C57BL/6小鼠灌胃给予TCA或TCA与TβMCA的混合物（每种化合物400 mg/kg体重，溶于浓度为40 mg/ml的无菌水中）或载体（无菌水）。

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离体实验[2]
通过颈椎脱臼处死CONV-R小鼠，并收集约1 cm长的远端回肠。用冷PBS冲洗去除肠内容物，并将肠段纵向均分为四等份。将各组织样本分别置于含有不同浓度胆汁酸TCA和TβMCA的生长培养基（Dulbecco改良Eagle培养基，含谷氨酰胺和丙酮酸、4.5 g/L葡萄糖、10%胎牛血清、100 U/mL青霉素和100 μg/mL链霉素）的细胞培养板中。培养板在37℃、5% CO₂条件下培养过夜。将含有组织样本的混合物转移至Eppendorf管中，并以14,000 rpm离心5分钟。去除上清液后收集组织样本，用于mRNA表达分析。

[1]. Tauro-β-muricholic acid restricts bile acid-induced hepatocellular apoptosis by preserving the mitochondrial membrane potential. Biochem Biophys Res Commun. 2012 Aug 10;424(4):758-64.

[2]. Gut microbiota regulates bile acid metabolism by reducing the levels of tauro-beta-muricholic acid, a naturally occurring FXR antagonist. Cell Metab. 2013 Feb 5;17(2):225-35.

[3]. FXR Regulates Intestinal Cancer Stem Cell Proliferation. Cell. 2019 Feb 21;176(5):1098-1112.e18.

[4]. Induction of farnesoid X receptor signaling in germ-free mice colonized with a human microbiota. J Lipid Res. 2017 Feb;58(2):412-419.

牛磺β-鼠胆酸是一种源自β-鼠胆酸的胆汁酸牛磺酸结合物。它既是人体的代谢产物，也是大鼠的代谢产物。它是一种胆汁酸牛磺酸结合物、单羧酸酰胺、3α-羟基甾醇、6β-羟基甾醇和7β-羟基甾醇。它在功能上与β-鼠胆酸相关。它是牛磺β-鼠胆酸盐的结合酸。

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用途：β-鼠胆酸（βMCA）是一种三羟基胆汁酸，是大鼠和小鼠体内的主要胆汁酸。βMCA比熊去氧胆酸更具亲水性，并已被评估用于溶解胆固醇结石。由于β-甲基胆碱（βMCA）是否对肝细胞死亡具有有益作用尚不清楚，我们研究了牛磺-β-甲基胆碱（TβMCA）对体外细胞凋亡的影响。方法：将人Ntcp转染的HepG2细胞以及大鼠和小鼠原代肝细胞与促凋亡的甘氨胆酸（GCDCA）和游离脂肪酸棕榈酸在有或无TβMCA的情况下进行孵育。采用caspase 3/7活性检测和Hoechst 33342染色定量细胞凋亡。使用JC-1（5,5',6,6'-四氯-1,1',3,3'-四乙基苯并咪唑碳菁碘化物）荧光法测定线粒体膜电位（MMP）。采用免疫印迹法检测促凋亡蛋白Bcl-2 Bax。结果：在Ntcp-HepG2细胞中，GCDCA处理4小时后显著增加细胞凋亡。与TβMCA共同孵育可将细胞凋亡降低至49%（与GCDCA组相比，p<0.01；n=6）。GCDCA（100μmol/L）处理6小时后可将线粒体膜电位（MMP）降低至34%，而与TβMCA联合处理则可在所有时间点将MMP恢复至对照水平（n=4）。TβMCA还能恢复棕榈酸酯诱导的MMP降解。 GCDCA诱导Bax从胞质溶胶转位至线粒体，而等摩尔浓度的TβMCA可抑制这一过程。结论：TβMCA通过抑制Bax转位至线粒体并维持线粒体膜电位（MMP），限制低微摩尔浓度GCDCA或棕榈酸酯诱导的肝细胞凋亡。因此，有必要进一步研究TβMCA在改善胆汁淤积性肝损伤方面的潜在应用。[1]

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已有研究表明，血清游离脂肪酸升高是非酒精性脂肪性肝病的特征之一。饱和C16游离脂肪酸棕榈酸酯可通过激活Bax，进而触发线粒体凋亡途径，以JNK依赖的方式诱导肝细胞脂质凋亡。TβMCA还能阻止棕榈酸酯诱导的线粒体膜电位破坏。因此，TβMCA的有益作用似乎并不局限于胆汁酸诱导的肝损伤。总之，我们能够证明TβMCA对来自三种不同物种的细胞模型中胆汁酸诱导的细胞凋亡具有显著的抗凋亡作用，这可能是通过抑制Bax向线粒体的转位和维持线粒体膜电位实现的。[1]胆汁酸在肝脏中由胆固醇合成，并进一步由肠道菌群代谢为次级胆汁酸。胆汁酸的合成受到负反馈调控，这种调控是通过激活回肠和肝脏中的核受体法尼醇X受体（FXR）实现的。在此，我们分析了无菌（GF）小鼠和常规饲养（CONV-R）小鼠整个肠肝系统中的胆汁酸组成。我们证实，CONV-R小鼠中鼠胆酸水平显著降低，而胆酸水平没有变化。将缺乏FXR的小鼠重新构建为无菌小鼠（GF）后发现，肠道菌群通过FXR依赖性机制调控回肠中成纤维细胞生长因子15（FGF15）和肝脏中胆固醇7α-羟化酶（CYP7A1）的表达。重要的是，我们发现牛磺酸结合的β-鼠胆酸和α-鼠胆酸是FXR拮抗剂。这些研究表明，肠道菌群不仅调控次级胆汁酸代谢，还能通过缓解回肠中FXR的抑制作用来抑制肝脏中胆汁酸的合成。[2] 总之，我们已证实肠道菌群对胆汁酸代谢具有深远的全身性影响。肠道菌群的作用不仅体现在肠道内，还体现在肠肝系统的其他部位，例如调控肝脏中胆汁酸的合成。我们证实，肝脏中生物合成基因的微生物抑制与回肠中FXR依赖性Fgf15激活增强相一致，这是由于TβMCA水平降低所致。[2]

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肠道菌群通过代谢胆汁酸（BA）和改变法尼醇X受体（FXR）信号通路，部分影响代谢性疾病的发生发展。本研究旨在确定人肠道菌群如何代谢小鼠胆汁酸并影响定植小鼠的FXR信号通路。我们用小鼠供体盲肠内容物或人供体粪便定植无菌小鼠，并在短期（2周）或长期（15周）定植后处死小鼠。我们分析了回肠和肝脏中的肠道菌群和胆汁酸组成以及FXR靶基因的表达。我们发现，定植小鼠和人肠道菌群的小鼠盲肠菌群组成存在差异，且随时间推移保持稳定。人和小鼠的肠道菌群均能以相似的方式降低总胆汁酸（BA）水平，但人源化小鼠产生的次级胆汁酸较少。长期定植后，人源肠道菌群能够降低牛磺-β-鼠胆酸的水平，并诱导回肠中FXR靶基因Fgf15和Shp的表达。我们发现，人源肠道菌群可以改变定植小鼠的胆汁酸组成并诱导FXR信号通路，但其产生的次级胆汁酸水平低于定植小鼠肠道菌群的小鼠。[3]

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肠道胆汁酸（BA）水平升高是结直肠癌（CRC）的危险因素。我们发现，饮食因素（高脂饮食）和WNT信号通路失调（APC突变）的共同作用会改变胆汁酸谱，从而驱动Lgr5表达（Lgr5+）癌干细胞的恶性转化，并促进腺瘤向腺癌的进展。从机制上讲，我们发现拮抗肠道法尼醇X受体（FXR）功能的胆汁酸，包括牛磺-β-鼠胆酸（TβMCA）和脱氧胆酸（DCA），会诱导Lgr5+细胞增殖和DNA损伤。相反，选择性激活肠道FXR可以限制Lgr5+细胞的异常生长，并抑制CRC的进展。FXR在协调肠道自我更新与胆汁酸水平方面的这种意想不到的作用，提示FXR可能是CRC的潜在治疗靶点。[4]

C26H44NNAO7S

537.684838294983

537.273

145022-92-0

25696-60-0

132285209

White to off-white solid powder

155

4

7

7

36

897

11

S(CCNC(CCC(C)C1CCC2C1(C)CCC1C3(C)CCC(CC3C(C(C21)O)O)O)=O)(=O)(=O)[O-].[Na+]

NYXROOLWUZIWRB-GPHZYVDLSA-M

InChI=1S/C26H45NO7S.Na/c1-15(4-7-21(29)27-12-13-35(32,33)34)17-5-6-18-22-19(9-11-25(17,18)2)26(3)10-8-16(28)14-20(26)23(30)24(22)31;/h15-20,22-24,28,30-31H,4-14H2,1-3H3,(H,27,29)(H,32,33,34);/q;+1/p-1/t15-,16-,17-,18+,19+,20+,22+,23+,24-,25-,26-;/m1./s1

sodium;2-[[(4R)-4-[(3R,5R,6S,7R,8S,9S,10R,13R,14S,17R)-3,6,7-trihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoyl]amino]ethanesulfonate

Tauro-β-muricholic acid sodium; 145022-92-0; Tauro-beta-muricholic Acid (sodium salt); sodium;2-[[(4R)-4-[(3R,5R,6S,7R,8S,9S,10R,13R,14S,17R)-3,6,7-trihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoyl]amino]ethanesulfonate; T-betaMCA (sodium); 2-[[(3alpha,5beta,6beta,7beta)-3,6,7-trihydroxy-24-oxocholan-24-yl]amino]-ethanesulfonicacid,monosodiumsalt; Tauro-; A-muricholic acid (sodium); Tauro-b-muricholic Acid Sodium Salt; Tauro β muricholic acid sodium

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~10 mg/mL (~18.60 mM)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。