| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Human Endogenous Metabolite; The targets of Taurolithocholic acid involve multiple signaling pathways and receptors. It is an agonist of the G protein-coupled bile acid receptor TGR5, exerting anti-inflammatory effects by activating TGR5 and downregulating the NF-κB signaling pathway. In mouse hypothalamic GT1-7 cells, TLCA activates both TGR5 and FXR receptors, subsequently upregulating STAT3 phosphorylation and SOCS3 expression. This compound is a potent inhibitor of UDP-glucuronosyltransferase (UGT) enzymes, particularly the UGT1A4 isoform, with inhibitory potency stronger than other bile acids. Additionally, TLCA acts as a Ca²⁺ agonist.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在无细胞和细胞体系中，Taurolithocholic acid显示出多种生物活性。作为UGT酶抑制剂，TLCA对UGT1A4表现出最强的抑制作用（Ki值最低），抑制效力顺序为：UGT1A4 > UGT2B7 > UGT1A3 > UGT1A1。在RAW264.7巨噬细胞中，TLCA通过TGR5受体下调NF-κB信号通路，显著降低LPS和IFN-γ诱导的炎症反应。在下丘脑GT1-7细胞中，10 μmol/L TLCA处理24小时可显著增加POMC mRNA表达和α-MSH（一种厌食性神经肽）的产生，该作用涉及p-STAT3、p-AKT和SOCS3信号蛋白。此外，TLCA对HIV-1复制具有选择性抑制作用。
在低剂量 (5 µM) 下，Taurolithocholic acid /牛磺石胆酸 (TLCA) 往往会使 PKC e 亚型的膜相关部分提高 44.1% ± 40.2%[1]。移动 PKC 同工型的激活需要 PKC 的 epsilon 同工型选择性易位至肝细胞膜，这是由 TLCA (10 µM) 诱导的[1]。 蛋白激酶C（PKC）同工酶家族在肝细胞分泌的调节中起着关键作用。疏水性和胆汁淤积性胆汁酸，牛磺酸胆酸（TLCA），在分离的肝细胞中充当强效的钙离子激动剂。然而，其对PKC亚型的影响尚未阐明。在这里，我们研究了低微摩尔浓度的TLCA对PKC亚型分布和膜相关PKC活性的影响。使用蛋白质印迹和免疫荧光技术在短期培养的分离大鼠肝细胞中确定PKC亚型的分布。放射化学法测定PKC活性。Taurolithocholic acid /TLCA（10微摩尔/升）诱导εPKC选择性易位47.9%+/-20.5%（与对照组相比，P<.02；n=7），但α-、δ-和ζPKC未选择性易位至肝细胞膜，而佛波醇酯佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯（PMA）（1微摩尔/L）导致所有可移动异构体α-、Δ-和εPKC易位，如免疫印迹所示。免疫荧光研究表明，TLCA（10微摩尔/升）选择性地将ε-PKC转运到分离的大鼠肝细胞联的小管膜，但PMA（1微摩尔/L）主要转运到细胞内和基底外侧膜。TLCA（10μmol/L）和PMA（1μmol/L）均能刺激膜结合PKC活性60.5%+/-45。分别为8%（与对照组相比P<0.05；n=5）和72.4%+/-37.2%（P<0.05；n=5）。较低浓度（5微摩尔/升）的TLCA效果较差。由于εPKC的激活与囊泡介导的分泌细胞膜蛋白靶向和插入的损伤有关，因此推测TLCA通过激活小管膜上的εPKC来降低肝细胞的胆汁分泌能力是有吸引力的。[1] 分离的大鼠肝细胞中PI3K依赖性PKB（PKB/Akt）活性[2] 磷酸化PKB（Ser-473）的量是PI3K通路激活的敏感读数（27，32），在短期培养中，肝细胞中的Taurolithocholic acid /牛磺酸/TLCA（5μmol/l）显著增强（图7），60分钟后达到对照组的194±46%（与对照组相比p<0.005；与TUDCA相比p<0.05；与TCA相比p<0.01）。相比之下，TUDCA（10μmol/升）仅短暂增加PKB活性，而TCA（10µmol/升，在所选实验条件下没有影响（图7）。因此，TLCA在体外显著影响了分离肝细胞中的PI3K活性，而TUDCA在低微摩尔浓度下给药时仅对PI3K通路产生轻微的短暂影响。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
Taurolithocholic acid的体内活性主要通过其致胆汁淤积作用进行研究。在大鼠模型中，静脉注射TLCA（3 μmol/100 g体重）可抑制58%的牛磺胆酸盐毛细胆管排泄，并增加96%的血浆回流。该化合物通过诱导毛细胆管胆汁酸转运蛋白Bsep的内化（进入胞浆囊泡区室）来损害胆汁酸盐分泌，而不影响F-actin细胞骨架组织。dibutyryl-cAMP预处理可逆转TLCA诱导的Bsep内化和胆汁淤积。在大鼠中，TLCA预处理（5 μmol/100 g体重）可增加对乙酰氨基酚的总清除率（20%）及其硫酸化（12%）和葡萄糖醛酸化（85%）的部分清除率。
大鼠肝细胞对和灌注大鼠肝脏中的Taurolithocholic acid /牛磺石胆酸 (TLCA) 通过 PI3K 依赖性机制表现出胆汁淤积作用 [2]。 Taurolithocholic acid /牛磺酸胆酸（TLCA）是一种强效的胆汁淤积剂。我们最近的工作表明，TLCA通过蛋白激酶Cepsilon（PKCepsilon）依赖性机制损害肝胆分泌、运输蛋白插入肝细胞顶膜和胆汁流动。磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）的产物刺激PKCε。我们研究了PI3K在离体灌流大鼠肝脏（IPRL）和离体大鼠肝细胞偶联物（IRHC）中对TLCA诱导的胆汁淤积的作用。在IPRL中，TLCA（10微摩尔/升）使胆汁流量受损51%，使辣根过氧化物酶（囊泡分泌的标志物）的胆汁分泌受损46%，Mrp2底物2,4-二硝基苯基-S-谷胱甘肽受损95%，并刺激PI3K依赖性蛋白激酶B（PI3K活性的标志）受损154%，使PKEpsilon膜结合受损23%。在IRHC中，TLCA（2.5微摩尔/升）使荧光胆汁酸（胆酰甘氨酰荧光素）的小管分泌受损50%。选择性PI3K抑制剂渥曼青霉素（100 nmol/升）和抗胆固醇胆汁酸牛磺脱氧胆酸（TUDCA，25微摩尔/升）独立和相加地逆转了TLCA对IPRL中胆汁流量、胞吐、有机阴离子分泌、PI3K依赖性蛋白激酶B活性和PKCε膜结合的影响。渥曼青霉素还逆转了IRHC中受损的胆汁酸分泌。这些数据强烈表明，TLCA通过PI3K和PKCε依赖的机制发挥胆汁淤积作用，这些机制被牛磺脱氧胆酸以PI3K非依赖的方式逆转[2]。 |
| 酶活实验 |
Taurolithocholic acid与UGT酶的相互作用可通过体外抑制动力学实验进行评估。典型流程：将人肝微粒体（或重组表达的单亚型UGT酶）与不同浓度的TLCA（0-200 μM）在含有UGT反应缓冲液（如Tris-HCl，pH 7.4）的体系中预孵育，加入丙甲菌素（alamethicin）以破坏微粒体膜，随后加入底物和UDPGA启动反应。通过HPLC或LC-MS/MS检测葡萄糖醛酸结合产物的生成量，计算IC₅₀和Ki值。对于TGR5受体结合实验，可采用基于细胞的cAMP测定法，通过检测受体激活后细胞内cAMP的积累量来评估TLCA的激动活性。
通过免疫印迹技术测定分离的大鼠肝细胞中PKB/Akt的活性。简而言之，在接种后4小时（见上文），细胞与Taurolithocholic acid /牛磺胆酸/TLCA（5μmol/l；浓度>5μmol/l时，TLCA在短期培养中对分离的肝细胞造成可见损伤）、TUDCA（10μmol/l）、TCA（10µmol/l）或仅使用载体Me2SO（对照，0.1%，v/v）孵育5、15、30和60分钟。然后将培养皿放在冰上，刮取细胞并立即冷冻（-80°C）。将休克冷冻细胞在冰冷的裂解缓冲液（1ml/100mg）中均质化，并如上所述进行处理[2]。 |
| 细胞实验 |
Taurolithocholic acid在细胞实验中广泛用于研究炎症调控和胆汁酸信号通路。典型流程（抗炎研究）：将RAW264.7巨噬细胞接种于培养板中，用不同浓度的TLCA（如10、50、100 μM）预处理1小时，然后用LPS和IFN-γ刺激诱导炎症反应。收集细胞上清液检测炎症因子（如TNF-α、IL-6），收集细胞裂解液通过Western blotting检测NF-κB p65磷酸化水平和TGR5表达。对于神经肽表达研究：将小鼠下丘脑GT1-7细胞用10 μmol/L TLCA处理24小时，通过实时定量PCR检测POMC mRNA表达，通过ELISA检测α-MSH产生，通过Western blotting检测p-STAT3、p-AKT和SOCS3蛋白水平。
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| 动物实验 |
Taurolithocholic acid的体内研究主要采用大鼠胆汁淤积模型。典型流程：雄性Sprague-Dawley大鼠（约250-300 g）麻醉后行颈静脉插管和胆总管插管。经静脉给予TLCA（3-5 μmol/100 g体重，溶于生理盐水或牛血清白蛋白溶液），收集胆汁样本，每5-10分钟测定胆汁流量。通过HPLC或放射性标记法检测胆汁中的胆汁酸分泌量。对于Bsep定位研究，可处死动物后取肝脏组织进行冰冻切片，使用特异性抗体进行Bsep免疫荧光染色，通过共聚焦显微镜观察Bsep的亚细胞定位变化。dibutyryl-cAMP（10 μmol/100 g体重）可提前15分钟给药以评估其对TLCA诱导胆汁淤积的预防作用。
通过测量肝细胞对浓度为 1 μmol/L 的胆酰甘氨酰胺荧光素 (CGamF) 的摄取和分泌到胆小管腔的情况来评估 IRHC 的胆汁酸分泌，方法如前所述。CGamF 的合成方法参照 Schteingart 等人的方法，由 Alan Hofmann 博士惠赠。分离 4 小时后，将肝细胞（置于盖玻片上）短暂转移至 HEPES 缓冲液中。然后，将细胞在 37 °C 下用以下溶液预处理 15 分钟：（i）0.1% (v/v) 的 Me2SO；（ii）100 nmol/L 沃特曼宁和 Me2SO；（iii）Me2SO 处理 5 分钟，然后用 2.5 μM 牛磺石胆酸/TLCA（溶于 0.1% (v/v) 的 Me2SO）处理 10 分钟；（iv）100 nmol/L 沃特曼宁和 Me2SO 处理 5 分钟，然后用 100 nmol/L 沃特曼宁和 2.5 μM 牛磺石胆酸/TLCA（溶于 0.1% (v/v) 的 Me2SO）处理 10 分钟；（v）Me2SO 处理 5 分钟，然后用 5 μmol/L 牛磺石胆酸/TLCA（溶于 0.1% (v/v) 的 Me2SO）处理 10 分钟。 (vi) 用 100 nmol/L 沃特曼宁和 Me2SO 处理 5 分钟，或用 100 nmol/L 沃特曼宁和 5 μmol/L 牛磺胆酸/TLCA 处理 10 分钟。然后将细胞转移至含有 1 μmol/L 荧光 CGamF 的 HEPES 缓冲液中，于 37 °C 孵育 5 分钟，以确保荧光胆汁酸充分加载，之后再转移回之前的培养皿中孵育 10 分钟（i-vi）。将盖玻片置于冰上的冰冷 HEPES 缓冲液中以终止肝细胞分泌，并立即使用蔡司 LSM 510 显微镜（纽约州索恩伍德）观察细胞。优化激光设置以获得合适的动态范围，避免荧光饱和。所有实验条件均使用相同的设置。由一位对实验条件不知情的实验人员（CJ Soroka）使用共聚焦激光扫描显微镜分析细胞。根据明场光学显微镜下清晰可见的管腔，选择成对细胞。然后快速扫描采集图像，以避免荧光猝灭。CGamF 的摄取（摄取量 = (F° 细胞 + F° 管腔)/μm2) 和分泌（分泌百分比 = [F° 管腔/(F° 细胞 + F° 管腔)] × 100）的定量分析方法与之前发表的方法相同，只是使用了 NIH Image 软件。[2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
Taurolithocholic acid作为牛磺酸结合型胆汁酸，其药代动力学行为遵循胆汁酸的肠肝循环规律。其分子量为483.7 g/mol，熔点为212-213°C。计算预测的pKa为1.42±0.50，在DMSO中可溶。该化合物在体内主要通过胆汁排泄，在胆汁淤积状态下其水平显著升高。TLCA可抑制多种UGT酶的活性，这种抑制作用可能干扰内源性和外源性化合物的代谢。储存条件：粉末应在-20°C干燥密封保存。该化合物仅供科研使用，不可用于人体。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Taurolithocholic acid以其强效的致胆汁淤积毒性而著称。在大鼠模型中，静脉注射TLCA（3-5 μmol/100 g体重）可剂量依赖性地诱导胆汁淤积，胆汁流量减少45%-85%。其毒性机制涉及毛细胆管胆汁酸转运蛋白Bsep的内化，导致胆汁酸盐分泌受损。在细胞水平，TLCA可诱导肝细胞凋亡和炎症反应。然而，值得注意的是，TLCA的硫酸化衍生物（如taurolithocholic acid 3-sulfate）具有抗HIV-1活性且细胞毒性较低。根据GHS分类，TLCA的危险符号包括GHS02和GHS08，信号词为“危险”。该化合物仅限科研使用，不可用于人体。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
牛磺石胆酸是石胆酸与牛磺酸结合的胆汁酸。它是一种人体代谢产物。它是一种单羧酸酰胺，也是一种胆汁酸与牛磺酸的结合物。它在功能上与石胆酸相关。它是牛磺石胆酸盐的结合酸。
据报道，在智人、牛和维罗尼气单胞菌中均发现了牛磺石胆酸，并有相关数据。 它是一种胆汁酸盐，由石胆酸与牛磺酸在肝脏中结合形成，通常以钠盐的形式存在。它能溶解脂肪以促进吸收，自身也能被吸收。它是一种利胆剂和利胆剂。牛磺石胆酸钠是一种胆汁酸。它在功能上与牛磺石胆酸相关。 另见：牛磺石胆酸钠（注释已移至）。 在本研究中，PI3K抑制剂的联合给药不仅逆转了TLCA诱导的胆汁分泌障碍，而且逆转了乳酸脱氢酶释放所反映的细胞损伤（表I）。胆汁流量的改善本身不足以解释这一效应，因为TUDCA虽然也改善了TLCA处理肝脏的胆汁分泌，但未能消除TLCA在IPRL中诱导的细胞损伤。未来需要开展更多研究来阐明PI3K在TLCA诱导的急性肝细胞损伤中的作用。 目前的数据表明，PI3K可能是未来抗胆汁淤积治疗策略的潜在靶点。然而，值得注意的是，PI3K可能激活大鼠肝细胞中由疏水性胆汁酸牛磺鹅脱氧胆酸（TCDCA）处理的存活通路，该通路在体外和体内均能保护肝细胞免受TCDCA诱导的损伤（Rust C，未发表的观察结果）。有趣的是，牛磺鹅脱氧胆酸诱导的存活通路在体外并不涉及PKB的激活。因此，不同的胆汁酸可能对肝细胞中PI3K和PKB介导的过程产生不同的影响。不同PI3K亚型的参与或在不同亚细胞区室的作用是否会导致胆汁酸对PI3K和PKB产生这些不同的影响，仍有待阐明。 总之，本研究表明，TLCA诱导的胆汁流动、肝胆胞吐、胆汁酸和其他有机阴离子的分泌以及肝细胞损伤是由PI3K依赖性机制和推测的PKCε依赖性机制介导的。TUDCA通过一种不依赖于PI3K的机制逆转了TLCA对胆汁分泌的抑制作用。[2] |
| 分子式 |
C26H45NO5S
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|---|---|
| 分子量 |
483.7
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| 精确质量 |
483.302
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| 元素分析 |
C, 64.56; H, 9.38; N, 2.90; O, 16.54; S, 6.63
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| CAS号 |
516-90-5
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| 相关CAS号 |
6042-32-6; 516-90-5
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| PubChem CID |
439763
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| 外观&性状 |
White to off-white solid at room temperature
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| 密度 |
1.169g/cm3
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| 熔点 |
81-82ºC
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| 折射率 |
1.54
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| LogP |
6.347
|
| tPSA |
115.57
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
7
|
| 重原子数目 |
33
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| 分子复杂度/Complexity |
825
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| 定义原子立体中心数目 |
9
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| SMILES |
CC(CCC(=O)NCCS(=O)(=O)O)C1CCC2C1(CCC3C2CCC4C3(CCC(C4)O)C)C
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| InChi Key |
QBYUNVOYXHFVKC-GBURMNQMSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C26H45NO5S/c1-17(4-9-24(29)27-14-15-33(30,31)32)21-7-8-22-20-6-5-18-16-19(28)10-12-25(18,2)23(20)11-13-26(21,22)3/h17-23,28H,4-16H2,1-3H3,(H,27,29)(H,30,31,32)/t17-,18-,19-,20+,21-,22+,23+,25+,26-/m1/s1
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| 化学名 |
2-[[(4R)-4-[(3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S,17R)-3-hydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoyl]amino]ethanesulfonic acid
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| 别名 |
Lithocholic acid; taurine conjugate; TAUROLITHOCHOLIC ACID; 516-90-5; 2-[[(4R)-4-[(3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S,17R)-3-hydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoyl]amino]ethanesulfonic acid; CHEBI:36259; DTXSID20965925; N-(3alpha-hydroxy-5beta-cholan-24-oyl)-taurine; ST 24:1;O2;T; Acid, Taurolithocholic; Taurolithocholic acid; Lithocholyltaurine
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 16.7 mg/mL (34.5 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0674 mL | 10.3370 mL | 20.6740 mL | |
| 5 mM | 0.4135 mL | 2.0674 mL | 4.1348 mL | |
| 10 mM | 0.2067 mL | 1.0337 mL | 2.0674 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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